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猫眼草挥发油成分的GC-MS分析



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积分值的RSD为0.79%,表明精密度良好。
2.3.6 稳定性实验 精确吸取供试品溶液10μL,每隔
3h进样1次,连续考察24h,结果牡荆素鼠李糖苷面积
的RSD为0.91%,表明牡荆素鼠李糖苷在24h内稳定。
3 讨论
山楂叶的主要活性成分为黄酮类化合物,代表成
分有金丝桃苷、牡荆素鼠李糖苷。山楂叶及山楂叶提
取物均收载于2010年版《中国药典》一部,山楂叶含
量测定项下测定总黄酮及金丝桃苷含量;山楂叶提取
物含量测量项下测定总黄酮及牡荆素鼠李糖苷含量,
笔者参考《中国药典》,分别对不同采收时间的山楂叶
中3种成分进行了测定。
《中国药典》规定山楂叶的采收季节为夏、秋两
季,对不同时间采收的山楂叶中总黄酮、金丝桃苷及
牡荆素鼠李糖苷含量的测定,实验结果发现:5月采
收的山楂叶中牡荆素鼠李糖苷的含量最高;8~11月
采集的山楂叶中金丝桃苷及总黄酮的含量较高。山
楂叶牡荆素鼠李糖苷的含量较高时宜在5月采收;山
楂叶金丝桃苷的含量及总黄酮较高时宜在8~11月
采收,实验结果与文献报道稍有差别[9-10],本实验提
示,依据成分及临床需要适时采收山楂叶较适宜。
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(收稿日期:2015-09-23)
基金项目:十二五“重大新药创制”科技重大专项项目(编号:2012ZX09103201-054)
作者简介:王欣,女,硕士研究生
*通信作者:王嗣岑,男,教授,博士生导师
猫眼草挥发油成分的GC-MS分析
王 欣1,苏洪丽2,李卫敏3,李永卫1,王嗣岑2*(1.西安市第一医院药剂科,西安 710002;2.西安交通大学医学部药学
院,西安 710061;3.西安交通大学第一附属医院,西安 710061)
摘要:目的 研究猫眼草全草的挥发油成分。方法 采用水蒸气蒸馏法提取猫眼草的挥发油,利用气相色谱/质谱联用技术
(GC-MS)对挥发油中的化学成分进行分离分析,并采用峰面积归一化法计算各成分相对百分含量。结果 对其中的43种化学
成分进行了鉴定,所鉴定的成分占总流出峰面积的75.86%。其中醛类化合物14种,占30.77%;酮类8种,占19.02%;醇类14
种,占17.08%。结论 本文首次分析了猫眼草全草挥发油成分,为了解猫眼草的化学物质基础和进一步开发研究提供了依据。
关键词:猫眼草;水蒸汽蒸馏法;气相色谱/质谱联用
doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.04.008
中图分类号:R284   文献标志码:A   文章编号:1004-2407(2016)04-0353-04
Analysis of essential oil of Euphorbia lunulata Bunge by gas chromatography-mass
spectrometry
WANG Xin1,SU Hongli 2,LI Weimin3,LI Yongwei 1,WANG Sicen2*(1.Department of Pharmacy,the First Hospital of Xi′an,
Xi′an 710002,China;2.School of Pharmacy,Health Science Center,Xi′an Jiaotong University,Xi′an 710061,China;3.The First
Affiliated Hospital of Medical Colege,Xi′an Jiaotong University,Xi′an 710061,China)
Abstract:Objective To analyze the chemical constituents of the essential oil from the whole plant of Euphorbia lunulata Bunge.
Methods The essential oil was extracted from Euphorbia lunulata Bunge by steam distilation.The constituents were separated
and identified by GC-MS and the relative content of each component was calculated by area normalization method.Results 43
compounds of the essential oil were separated and identified,representing 75.86%of the amount.The essential oil obtained shows
that aldehydes were found to be the major class (30.77%),folowed by ketones (19.02%),and alcohols (17.08%).
Conclusion It was the first time to analyze the essential oil from Euphorbia lunulata Bunge,and the results provide important
foundation for understanding the constituents and further exploitation of Euphorbia lunulata Bunge.
Key words:Euphorbia lunulata Bunge;steam distilation;gas chromatography-mass spectrometry
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  大戟属(Euphorbia)为大戟科(Euphorbiaceae)
最大的属,该属植物主要分布于西南横断山区和西北
地区。猫眼草(Euphorbia lunulata Bunge)又名烂疤
眼,为大戟科大戟属植物猫眼草的全草,为多年生草
本植物,主要分布于陕北、辽宁、吉林、新疆、河北、山
西等地,根为圆柱状,茎单生或丛生,高30~60cm,
叶线形至卵形[1];性微寒,味苦,有毒;可祛痰、镇咳、
平喘、拔毒止痒等[2]。已有的研究表明[3-6],猫眼草中
含有黄酮类、萜类、酚酸类及木脂素类等化合物。肖
宝红等[7]发现,猫眼草水提物对Lewis肺癌有明显的
抑制作用,而且该作用呈现剂量依赖关系;王钰等[8]
研究发现,猫眼草中含有大戟素 M、大戟苷A、泽泻醇
A、甘遂大戟萜酯D等,具有较强的肿瘤细胞抑制活
性,尤其对人肝癌细胞 HepG2的抑制能力较强;李荣
等[9]发现,猫眼草中的金丝桃苷、quercetin-3-O-(6″-
galoyl)-β-D-galactopyranoside、quercetin-3-O-(2″-
galoyl)-β-D-galactopyranoside和槲皮素有较强的抗
氧化活性。国内外关于猫眼草挥发油成分的研究未
见报道。为完善对猫眼草中化学成分的研究,开发猫
眼草的临床药用价值,本文首次采用水蒸汽蒸馏法提
取猫眼草全草挥发油,用GC-MS联用技术对其进行了
分离鉴定,以面积归一化方法测定各成分的相对含量,
为进一步开发利用猫眼草资源提供科学的实验依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器 GC-MS/QP2010Plus型气相色谱-质谱
联用仪(日本岛津公司);GC-MS solution色谱工作站
和NIST质谱数据库(日本Shimadzu公司);挥发油
提取器(郑州中天实验仪器有限公司);Concentra-
tor5301低温旋转蒸发仪(eppendorf);YP5102电子
天平(上海光正医疗仪器有限公司)。
1.2 试药  药材采自陕北,经西安交通大学医学院
生药教研室鉴定为大戟科植物猫眼草 Euphorbia
lunulataBunge 的全草;水为蒸馏水;其余试剂均为
分析纯。
2 方法与结果
2.1 挥发油的提取 取200g猫眼草,粉碎,加入
800mL水,按照《中国药典》附录中挥发油提取方法,
使用挥发油提取器蒸馏9h,收集馏出液浓缩后用于
气质联用分析。
2.2 GC-MS分析
2.2.1 GC条件 色谱柱为Rtx-5MS柱(30m×0.25mm
×0.25μm);载气为高纯氦气,流速为1.0mL·min
-1;
进样口温度240℃,分流比5∶1;进样量2μL;柱温
采用程序升温,初始温度为40 ℃,保持5min,以
1.5℃·min-1的速率升至80℃,保持1min,再以
10℃·min-1的速率升至260℃,保持5min。
2.2.2 MS条件 电子轰击离子源(EI),离子源温
度200℃;电子能量70eV;电子倍增电压(EMV)
0.97kV;GC-MS接口温度280 ℃;质量扫描范围
m/z:50~800;质谱检测起测时间(溶剂切断时间)
5min;质谱图计算机检索谱库:NIST147。
2.3 结果 采用GC-MS联用技术对猫眼草挥发油
检测分析,得到其总离子流谱图,见图1。经GC-MS
联用仪计算机的NIST谱图库自动检索,得出相应的
化学成分,并以峰面积归一化法测定各成分的相对含
量,结果见表1。
图1 猫眼草挥发油总离子流图
Fig.1The TIC of the essential oil of EuphorbialunulataBunge
表1 猫眼草挥发油成分的GC-MS分析结果
Tab.1GC-MS analysis of the essential oil of Euphorbia lunulata Bunge
序号 保留时间/min 化合物 分子式 相似度/% 相对含量/%
1  5.539 (cis/trans)-1,2-dimethyl-cyclohexane((顺/反)-1,2-二甲基环己烷)C8H16 91  0.26
2  5.727  2-methyl-1-penten-3-ol(2-甲基-1-戊烯-3-醇) C6H12O  96  0.21
3  5.900 (E)-2-pentenal((E)-2-戊烯醛) C5H8O  93  0.44
4  6.412 hexanal(正己醛) C6H12O  97  3.99
5  7.634  2,3-dimethyl-1-butanol(2,3-二甲基-1-丁醇) C6H14O  96  0.63
6  7.933 furfural(呋喃甲醛) C5H4O2 91  0.37
7  8.846  2-hexenal(2-己烯醛) C6H10O  97  2.46
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表1(续) 猫眼草挥发油成分的GC-MS分析结果
Tab.1(Continued)GC-MS analysis of the essential oil of Euphorbia lunulata Bunge
序号 保留时间/min 化合物 分子式 相似度/% 相对含量/%
8  9.135 (Z)-3-hexen-1-ol((Z)-3-己烯-1-醇) C6H12O  97  0.53
9  9.982  1-hexanol(正己醇) C6H14O  98  1.22
10  10.965  2-heptanone(2-庚酮) C7H14O  95  0.37
11  11.615 heptanal(庚醛) C7H14O  96  0.51
12  12.353 (E,E)-2,4-hexadiena((E,E)-2,4-己二烯醛) C6H8O  93  0.21
13  14.706 methyl-2-oxohexanoate(2-氧代己酸乙酯) C7H12O3 91  2.31
14  15.608 (E)-2-heptenal((E)-2-庚烯醛) C7H12O  96  1.20
15  15.773 benzaldehyde(苯甲醛) C7H6O  98  1.65
16  17.217  3,5,5-trimethyl-1-hexene(3,5,5-三甲基-1-己烯) C9H18 90  1.18
17  17.868  1-octen-3-ol(1-辛烯-3-醇) C8H16O  98  2.15
18  18.183  6-methyl-5-hepten-2-one(甲基庚烯酮) C8H14O  92  3.17
19  18.952 ethylidene-cyclohexane(亚乙基环己烷) C8H14 90  0.89
20  19.329 octanal(辛醛) C8H16O  90  0.36
21  20.163 trans-2-trans-4-heptadienal(反,反-2,4-庚二烯醛) C7H10O  97  3.44
22  20.738  3-(1-methylethyl)-2-cyclopenten-1-one(3-异丙基-2-环戊烯-1-酮) C8H12O  85  0.43
23  20.951  3-isopropenyl-2-methylcyclohexanol(2-甲基-3-异丙烯基环己醇) C10H18O  81  0.34
24  21.188 eucalyptol(桉油精) C10H18O  95  0.60
25  23.015 benzeneacetaldehyde(苯乙醛) C8H8O  96  12.36
26  24.191 (E)-2-octenal((E)-2-辛烯醛) C8H14O  95  1.54
27  24.843  3-methyl-benzaldehyde(3-甲基苯甲醛) C8H8O  98  1.88
28  25.226 6-methyl-2-(2-oxiranyl)-5-hepten-2-ol
(6-甲基2-(2-环氧乙基)-5-庚烯-2-醇)
C10H18O2 95  2.22
29  25.442 (E,E)-3,5-octadien-2-one((E,E)-3,5-辛二烯-2-酮) C8H12O  89  0.62
30  26.395  8-oxo-2-nonenal(8-氧代-2-壬烯醛) C9H14O2 84  0.36
31  26.644 trans-2-(2-(5-methyl-5-vinyl)tetrahydrofuran)-2-propanol
(反-2-(2-(5-甲基-5-乙烯基)四氢呋喃)-2-丙醇)
C10H18O2 94  1.09
32  27.470 (E,E)-3,5-octadien-2-one((E,E)-3,5-辛二烯-2-酮) C8H12O  92  0.56
33  28.789 3,4,4-trimethyl-2-cyclopenten-1-one
(3,4,4-三甲基-2-环戊烯-1-酮)
C8H12O  89  12.67
34  31.014 isopinocarveol(异松香芹醇) C10H16O  94  0.41
35  32.610 4-(5-methyl-2-furanyl)-2-butanone
(4-(5-甲基-2-呋喃基)-2-丁酮)
C9H12O2 90  0.94
36  33.589 borneol(龙脑) C10H18O  91  0.66
37  33.860 3-acetoxy-4-(1-hydroxy-1-methylethyl)-1-methyl-cyclohexene
(1-甲基-3-乙酰氧基-4-((1-羟基-1-甲基)乙基)-环己烯)
C12H20O3 86  0.64
38  34.231 (R)-4-methyl-1-(1-methylethyl)-3-cyclohexen-1-ol
((R)-1-异丙基-4-甲基-3-环己烯-1-醇)
C10H18O  95  1.12
39  35.083 alpha,alpha-4-trimethyl-3-cyclohexene-1-methanol
(α,α-1-甲基-4-三甲基-3-环己烯基-1-甲醇)
C10H18O  96  4.47
40  38.870  2-methoxy-4-vinylphenol(2-甲氧基-4-乙烯基苯酚) C9H10O2 90  3.11
41  40.101 (E)-1-(2,6,6-trimethyl-1,3-cyclohexadien-1-yl)-2-buten-1-one
((E)-1-(2,6,6-三甲基-1,3-环己二烯基)-2-丁烯醛-1-酮)
C13H18O  87  0.26
42  41.747 4-(2,6,6-trimethyl-1-cyclohexen-1-yl)-3-buten-2-ol
(4-(2,6,6-三甲基-1-环己烯基)-3-丁烯-2-醇)
C13H22O  92  0.60
43  43.100 spathulenol(斯巴醇) C15H24O  91  1.43
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3 讨论
实验结果表明,从猫眼草挥发油中鉴定出43种
化合物,所鉴定成分占挥发油总流出峰面积的
75.86%。其中醛类化合物14种,占30.77%;酮类8
种,占19.02%;醇类14种,占17.08%;酚类1种,占
3.11%;酯类1种,占2.31%;烯类2种,占1.82%;
烷类2种,占1.15%;萜类1种,占0.60%。相对含
量较 高 的 依 次 是 3,4,4-三 甲 基-2-环 戊 烯-1-酮
(12.67%),苯乙醛(12.36%),α,α-1-甲基-4-((1-羟
基-1-甲基)乙基)-环己烯(4.47%),正己醛(3.99%),
反-2,4-庚二烯醛(3.44%),甲基庚烯酮(3.17%)等。
醛酮类化合物是化工原料、香料的重要来源。此外,
猫眼草挥发油中的桉油精具有抗菌消炎、平喘、镇咳
祛痰等药理作用[10],龙脑具有抗炎、抗菌以及抗血栓
作用[11]。气相色谱/质谱联用(GC-MS)方法分离效
率好、灵敏度高、用量少、分析速度快[12],在挥发油化
学成分的分析中已经成为非常重要的手段[13-16]。本
实验结果为研究猫眼草的指纹图谱、建立质量标准以
及合理开发猫眼草资源奠定了一定的基础。
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(收稿日期:2015-09-09)
HPLC法同时测定贯叶金丝桃中芦丁、金丝桃苷和槲皮素的含量
传娟娟,张宝阳(陕西省延安市药品检验所,延安 716000)
摘要:目的 建立贯叶金丝桃原药中芦丁、金丝桃苷和槲皮素的含量测定方法。方法 样品经丙酮超声波辅助提取,采用Dia-
monsil? C18柱(250mm×4.6mm,5μm)分离测定;以 A相乙腈-甲醇-甲酸(89.8∶10∶0.2),B相水-甲醇-甲酸(79.8∶20∶
0.2)为流动相梯度洗脱;检测波长为270nm;流速为1.0mL·min-1。结果 芦丁的进样量在0.454~4.540μg范围内(r=
0.999 7),金丝桃苷的进样量在0.480~4.800μg范围内(r=0.999 2),槲皮素的进样量在0.794~7.940μg范围内(r=0.999 5),
都与峰面积线性关系良好。加样回收率分别为99.01%,96.04%和95.97%(n=6)。结论 该方法快捷、简便,结果准确、可靠,
可作为贯叶金丝桃原药中有效成分的质量控制方法。
关键词:贯叶金丝桃;芦丁;金丝桃苷;槲皮素;高效液相色谱法
doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.04.009
中图分类号:R927.2   文献标志码:A   文章编号:1004-2407(2016)04-0356-05
Simultaneous determination of rutin,hyperoside and quercetin in Hypericum per-
foratumby HPLC
CHUAN Juanjuan,ZHANG Baoyang(Institute of Drug Inspection of Yan′an Shaanxi,Yan′an 716000,China)
653 西北药学杂志 2016年7月 第31卷 第4期