全 文 :于艳杰 ,刘 岩 ,牛春梅 ,等.凤梨叶中叶绿素提取工艺的研究 [ J].江苏农业科学 , 2010(6):446-447.
凤梨叶中叶绿素提取工艺的研究
于艳杰 1 , 刘 岩 2 , 牛春梅1 , 张立新 1 , 胡文贺 1
(1.大庆技术师范学院 ,黑龙江大庆 163000;2.黑龙江省大庆市自来水公司 ,黑龙江大庆 163000)
摘要:以凤梨叶为原料 , 以无水乙醇为提取剂 , 用正交法考察了提取凤梨叶中叶绿素的影响因素:温度 、时间 、料
液比。结果表明:凤梨叶与无水乙醇的料液比为 1 g∶40 mL、提取时间为 4h、提取温度为 60 ℃时叶绿素的提取效率
最高。
关键词:凤梨叶;叶绿素;提取
中图分类号:S668.301 文献标志码:A 文章编号:1002-1302(2010)06-0446-01
收稿日期:2010-03-18
作者简介:于艳杰(1982—),女 ,内蒙古赤峰人 ,硕士 ,讲师 ,主要从事
化学成分分析的研究。 E-mail:yuyanjie0828@ 163.com。
凤梨(Ananascomsus),别称菠萝 ,著名热带果品 ,原产巴
西 , 16世纪传入中国 ,岭南四大名果之一 。凤梨中含有大量
的果糖 、葡萄糖 、维生素 A、维生素 B、维生素 C、磷 、柠檬酸和
蛋白酶等物质 。凤梨叶中含有大量的纤维和叶绿素 ,还含有
植物蛋白 、淀粉及葡萄糖 、钙、磷等 。
中国热带农业科学院农业研究所研究了凤梨叶的综合开
发利用技术与设备 ,从以往废弃的的凤梨叶中提取出优质纺
织纤维 [ 1 ] 。本研究通过正交试验探讨了从凤梨叶中提取叶
绿素的最佳工艺条件 ,以期为凤梨叶的开发利用提供参考 ,经
检索对凤梨叶中叶绿素的提取开发研究 ,至今国内外未见相
关文献报道 。
1 材料与方法
1.1 主要仪器与试剂
721型分光光度计 , JA2003电子分析天平 , HHS型电热
恒温水浴锅 ,常用的一些玻璃仪器等;无水乙醇 、丙酮 、乙酸乙
酯 、石油醚等 ,以上试剂均为分析纯 。
1.2 试验方法
挑选没有腐烂的凤梨叶 ,清洗干净并沥干水分后 ,剪碎并
保存在冰箱中 。
1.2.1 提取剂的选择 称取 1.000 g剪碎的凤梨叶 ,放入
50 mL的棕色容量瓶内 ,浸泡至颜色发白为止 。分别选择无
水乙醇 、丙酮 、乙酸乙酯 、石油醚为溶剂 ,对凤梨叶叶绿素进行
提取 。所有试验重复 3次 ,取平均值 。
1.2.2 正交试验 以提取效率最优的试剂作为正交试验的
提取剂 ,选取了 3个影响提取叶绿素效率的重要因素:料液
比 、提取时间 、提取温度 ,进行 L9 (33 )正交设计试验 。所有试
验重复 3次 ,取平均值 。
1.2.3 叶绿素含量的测定 取提取液 ,用 721型可见分光光
度计分别测定波长在 645 nm和 663 nm处的吸光度值 ,按
Arnon[ 2]公式计算叶绿素 a和叶绿素 b的含量及叶绿素总量 。
叶绿素 a含量(mg/g):Ca=(12.7D663 nm -2.69D645 nm)×V1 000 m
叶绿素 b含量(mg/g):Cb=(22.9D645 nm-4.68D663 nm)×V1 000m
叶绿素总含量(mg/g):Ca+b=Ca+Cb
式中:D663 nm为波长 663 nm下的吸光度值;D645 nm为波长
645nm下的吸光度值;V为提取液的体积(mL);m为菠萝叶
质量(g)。
2 结果与分析
2.1 提取剂的选择
从表 1可知 ,不同提取剂提取的叶绿素含量各不相同 ,而
无水乙醇对菠萝叶中叶绿素的提取效果最好 。
表 1 各种提取剂提取叶绿素含量的比较
提取剂 叶绿素含量(mg/g)
a b a+b
无水乙醇 0.588 3 0.171 3 0.759 6
丙酮 0.416 3 0.140 0 0.556 3
乙酸乙酯 0.189 7 0.062 90 0.252 6
石油醚 0.255 3 0.067 07 0.322 4
2.2 正交试验结果
以无水乙醇为提取剂 ,选取料液比 、提取温度 、提取时间
作为 3个因素 ,以叶绿素的提取总量作为考核标准进行正交
试验 。正交试验因素水平表见表 2 ,正交试验结果及极差分
析结果见表 3。
表 2 正交试验因素水平
水平
因素
料液比
(g∶mL)
提取温度
(℃)
提取时间
(h)
1 1∶20 60 2
2 1∶30 70 3
3 1∶40 80 4
由表 3可知 ,极差 R1 >R3 >R2 ,所以影响凤梨叶叶绿素
提取因素的主次关系依次为料液比 >时间 >温度 。 k值可以
看出 , A因素 3水平最大 , B因素 1水平最大 , C因素 3水平最
大 ,则得到的提取条件为 A3 B1 C3 ,即料液比为 1g∶40 mL,提
取温度为 60 ℃,提取时间为 4h。
(下转第 447页)
—446— 江苏农业科学 2010年第 6期
DOI :10.15889/j.issn.1002-1302.2010.06.177
周 萍 ,季守莲 ,张海珠.云南不同产地花生壳微量元素含量测定 [ J].江苏农业科学 , 2010(6):447-448.
云南不同产地花生壳微量元素含量测定
周 萍 1 , 季守莲2 , 张海珠 1
(1.大理学院药学院 ,云南大理 671000;2.大理学院公共卫生学院 ,云南大理 671000)
摘要:采用火焰原子吸收光谱法测定云南不同产地花生壳中微量元素的含量。结果表明:不同产地花生壳中微
量元素的含量差异较大。本结果为研究花生壳的药理 、药效提供了试验数据。
关键词:花生壳;微量元素;火焰原子吸收光谱法
中图分类号:S565.201 文献标志码:A 文章编号:1002-1302(2010)06-0447-02
(上接第 446页)
表 3 L9(33)正交试验结果及极差分析
试验号
因素
A B C
叶绿素
a+b
(mg/g)
1 1 1 1 0.488 8
2 1 2 2 0.447 5
3 1 3 3 0.364 3
4 2 1 2 0.434 4
5 2 2 3 0.555 4
6 2 3 1 0.588 2
7 3 1 3 0.688 3
8 3 2 1 0.496 0
9 3 3 2 0.515 3
k1 0.433 5 0.537 2 0.524 3
k2 0.526 0 0.499 6 0.465 9
k3 0.566 7 0.489 5 0.536 0
R 0.133 2 0.037 6 0.070 10
3 结论
凤梨叶叶绿素的最优提取条件为:以无水乙醇为提取剂 ,
凤梨叶与无水乙醇料液比为 1 g∶40mL,提取时间为 4 h,提
取温度为 60 ℃。影响菠萝叶叶绿素提取诸因素的主次关系
依次为:料液比 >时间 >温度 。
参考文献:
[ 1]张 劲 ,姚欣茂 ,李明福 ,等.菠萝叶纤维提取与工艺设备的研究
[ J] .农业工程学报 , 2000, 16(6):99-103.
[ 2] ArnonDL.Copperenzymesinisolatedchloioplastspolyphenoloxi-
daseinbetavulgaris[ J] .PlantPhysiology, 1949, 24:1-5.
花生壳是民间中草药 ,价格低廉 ,资源丰富 。花生壳已作
为中药材收载于 《云南省药品标准 》[ 1] ,以其为原料开发了降
血脂中药 “脉舒胶囊 ” [ 2] 。近年来 ,微量元素以其生物学作
用 、生理功能和临床治疗的实用价值引起了人们对中草药中
无机成分尤其是微量元素的研究兴趣 [ 3] 。本试验采用火焰
原子吸收光谱法对云南不同产地花生壳中 4种微量元素
(Cu、Zn、Fe、Mn)的含量进行测定 ,为研究花生壳的药理、药
效与微量元素的内在联系提供有用的数据 。
1 仪器与材料
1.1 仪器
AA-6200型火焰原子吸收分光光度计及 Cu、Zn、Fe、Mn
元素空心阴极灯(日本岛津公司);FA1004-53423电子天平
(上海天平仪器厂);KDF-80程序升温马弗炉 (东京理化株
式会社)。
1.2 材料
花生壳从市场购买 ,产地分别为:1.开远新营盘;2.开远
收稿日期:2010-01-19
基金项目:云南省教育厅科学研究基金(编号:07Z10589)。
作者简介:周 萍(1972—),女 ,云南大理人 ,副教授 ,主要从事药品
质量控制和体内药物分析研究。 Tel:(0872)2257417;E-mail:
zhouping725@ 126.com。
田房;3.开远马者哨;4.宾川宾居;5.宾川州城;6.宾川太和;
7.宾川炼洞;8.宾川大营;9.牟定青龙;10.牟定新甸;11.永胜
中和;12.永胜金官镇;13.下关;14.昆明;15.保山;16.东川 。
经大理学院生药教研室杨月娥副教授鉴定 ,样品均为豆科植
物落花生(ArachishypogaeaL.)的干燥成熟果壳 ,样品粉碎后
过 40目筛备用 。优级纯硝酸 , Cu、Zn、Fe、Mn标准溶液 (国家
钢铁材料测试中心 ,钢铁研究总院 , 含量为 1 000 μg/mL)。
试验用水均为去离子蒸馏水 。
2 方法与结果
2.1 仪器工作条件
本仪器根据元素设置检测条件 ,仪器工作条件见表 1。
表 1 仪器工作条件
元素 波长(nm)
光谱通带宽
(nm)
灯电流
(mA)
燃气流量
(L/min)
Cu 324.8 0.7 6 1.8
Zn 213.9 0.7 8 2.0
Fe 248.3 0.2 12 2.2
Mn 279.5 0.2 10 2.0
2.2 线性关系考察
将浓硝酸配制成质量分数为 1%的稀硝酸 ,作为标准溶
—447—江苏农业科学 2010年第 6期