全 文 ：— 29 —现代中药研究与实践2015年第29卷第6期Chin. Med. J. Res. Prac., 2015 Vol. 29 No.6
·药理药化·
基金项目：国家自然科学青年基金资助项目 ( 三种山胡椒属植物化学成分及抑制脂肪酸合酶活性研究 31200256) ；四川省科技支撑计划项目 ( 乌药和绒毛
山胡椒抑癌活性成分的筛选和开发 2014SZ0071) ；成都市科技局高校院所应用成果转化项目 ( 两种山胡椒属植物化学成分及抑制脂肪酸合酶活
性研究 12DXYB228JH-002) ；中央高校基本科研业务费专项资金科技创新项目（乌药和绒毛山胡椒抗肿瘤活性研究 2682014CX045）
作者简介：张嘉穗（1991-），女，硕士研究生，主要从事天然产物化学研究。E-mail: ximi501@163.com
通讯作者：蒋合众（1980-），男，博士，副教授，主要从事天然产物化学及其生物活性研究。E-mail: jianghz10@sina.com
四川山胡椒叶抗氧化作用研究
张嘉穗，孔 琳，雷洁萍，马超英，蒋合众 *
（西南交通大学生命科学与工程学院 , 四川 成都 610031）
摘 要：目的 旨在研究四川山胡椒叶体外抗氧化活性。方法 以 VC、BHA 为阳性对照，采用
DPPH ·自由基清除法和脂质过氧化值（POV值）评价法对其树叶机体提取物的抗氧化作用进行评价。结
果 四川山胡椒试样浓度为 VC 浓度的 30 倍时对自由基清除率相当于 VC 的 67.92% ；浓度为 BHA的 40 倍
时自由基清除率是其 58.60%。加入供试品 48 h 后，植物油的 POV值均有降低，供试品作用的活性顺序为
四川山胡椒粉末＞VC ＞ BHA＞四川山胡椒乙醚萃取物。结论 四川山胡椒叶具有一定的抗氧化活性。
关键词：四川山胡椒；抗氧化；清除自由基；POV
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2015)06-29-03
doi:10.13728/j.1673-6427.2015.06.009
Antioxidative Effects of Lindera setchuenensis Gamble
ZHANG Jia-sui, KONG Lin, LEI Jie-ping, MA Chao-ying, JIANG He-zhong*
( School of Life Science and Engineering Southwest Jiaotong University, Chengdu 610031, China )
Abstract: Objective To measure the antioxidative effects of Lindera setchuenensis Gamble leaves
in vitro. Methods The antioxidant activity of Lindera setchuenensis Gamble has been analyzed by DPPH
radical scavenging assay and lipid peroxide value (POV) evaluation method, with Vc, BHA for positive control.
Results When the concentration of the sample is 30 times as VC, the free radical clearance of it is 67.92%
times as VC. While when the concentration of the sample is 40 times as BHA, the free radical clearance of it
is 58.60% times as BHA. In joining test sample after 48 hours, POV value of vegetable oil are all reduced, the
activity of them are the powder of Lindera setchuenensis Gamble＞VC＞BHA＞ diethyl ether extract of Lindera
setchuenensis Gamble. Conclusion Lindera setchuenensis Gamble leaves has antioxidative effects.
Key words: Lindera setchuenensis Gamble; antioxidative effect; free radical scavenging; POV
人体在利用氧的过程中会因为多种原因产生活
性氧和自由基，当机体处于负荷状态时，体内消除活
性氧和自由基的防御体系平衡遭到破坏，多种疾病便
随之而来，机体加速衰老。自由基因失去一个电子而
行成的不对称、不稳定的原子或分子，具有非常大的
能量，它能攻击细胞组织中的其他物质，夺取一个电
子以求得重新平衡，且反应可连续。它们一旦产生，
就会引发油脂过氧化。在氧化胁迫下，人体机体内可
以产生比自身的抗氧化剂（如 SOD、GPx、过氧化
氡酶）和非酶类抗氧化剂（如 VC、VE）更多的活性
氧自由基（ROS），其作用主要是为了清除自由基。
当人体缺乏足够的能够消除这些自由基的抗氧化剂
时，便会造成体内脂质和糖类的氧化、蛋白质的变
性、酶的失活、DNA结构的切断、碱基变化等等 [1, 2]，
导致很多疾病的产生。这也是自由基理论解释衰老的
根据，而解决办法之一就是摄取足够量的抗氧化剂。
因此，不断发现或合成新的抗氧化剂对临床预防和治
疗多种疾病有重大意义。植物提取物是天然抗氧化剂
的一个重要来源，因此评价其抗氧化活性是筛选和开
发天然抗氧化剂的重要基础。
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四川山胡椒（Lindera setchuenensis Gamble）为
樟科（Lauraceae）山胡椒属（Lindera）常绿灌木，
主要产于四川、贵州，生长在海拔 1 500 m以下的山
坡路旁及疏林中 [3]。曾有学者对山胡椒属植乌药的挥
发油进行了研究，发现其乙酸乙酯萃取物具有较好的
抗氧化活性 [4]。但目前为止未见四川山胡椒药理活性
的相关研究报道。本实验采用 DPPH·自由基清除法
和脂质过氧化值（POV值）评价法对四川山胡椒树
叶提取物的抗氧化作用进行评价，以期丰富山胡椒属
植物抗氧化活性研究，为合理开发利用四川山胡椒植
物资源提供参考。
1 材料与方法
1.1 实验材料
四川山胡椒叶采集于四川峨眉山，经西南交通
大学生命科学与工程学院宋良科副教授鉴定为樟科
（Lauraceae）山胡椒属（Lindera）四川山胡椒（Lindera
setchuenensis Gamble）干燥树叶。
供试品：取四川山胡椒粉末 20 g置于烧杯中，
加入 100 ml乙醚，密封浸泡过夜，滤出乙醚层，将
乙醚减压蒸馏回收，重复上述操作，直至萃取液无
色。将乙醚挥干，得四川乙醚萃取物 0.914 g，产率
4.57%。
1.2 DPPH ·自由基清除活性测定 [5]
精确称量 DPPH ·样品粉末 0.015 2 g，溶解于
250 ml、50%乙醇中，浓度约为 0.15 mmol·L-1，备用。
精确称量 BHA粉末 0.039 8 g，溶解于 10 ml、50%
乙醇中，再取 100 μl用 50%乙醇溶液稀释至 100
ml，备用。精确称量 Vc粉末 0.054 4 g，溶解于 100
ml、50%乙醇中，再取出 1 ml，用 50%乙醇稀释至
100 ml，备用。精确称量四川山胡椒叶的乙醚萃取物
（0.010 0 g），置于 100 ml量瓶中，用 50%乙醇定容
备用。将 2 ml含不同浓度供试品的 50%乙醇溶液加
入 1 ml浓度为 0.15 mmol·L-1的 DPPH·乙醇溶液中，
室温下避光反应 30 min后（严格控制时间），在 5l7
nm波长测定吸光度，平行测定三次。以 VC，BHA
为阳性对照，以乙醇为阴性对照，对 DPPH·的清除
率 (I%)用以下公式计算：
式中：
A0—阴性对照的吸光值；
As—供试品和阳性对照品的吸光值。
1.3 脂质过氧化值（POV）测定
POV值测定法参照 GB/T5009.37-2003要求 [6]，采
用碘量法测定。称取三份 10 g左右的油脂样品（动物
油、植物油）置于 250 ml碘量瓶中，其中一份分别拌
入四川山胡椒叶粉末 0.1 g，取一份拌入四川山胡椒乙
醚萃取物和绒毛山胡椒乙醚萃取物 0.1 g。从未加入药
材的纯油样中取出 1 g，加入 30 ml三氯甲烷 -冰醋酸
混合液，振摇，使试样完全溶解。加入 0.5 ml饱和 KI
溶液，盖紧瓶塞，振摇 0.5 min，在暗处放置 3 min，
待油脂与KI反应。取出后加入50 ml去氧蒸馏水摇匀，
液体分层，上次为水层，下层为油层，立即用硫代硫
酸钠标准滴定液滴定，滴定至水层溶液变为淡黄色时
加 1 ml淀粉指示液（过早加入淀粉可能会导致滴定过
量），继续滴定至蓝紫色消失为止。将加入药材的油
样放置 48 h后，取 1 g按照上述方法测定。取相同量
三氯甲烷 -冰醋酸、碘化钾溶液、纯水，按上述方法
作空白实验。供试品 POV值按下列公式计算：

式中：
V1—试样消耗 Na2S2O4标准滴定液体积（ml）；
V2—试剂空白消耗 Na2S2O4 标准滴定液体积
（ml）；
C —硫代硫酸钠标准滴定液浓度，单位为摩尔
每升（mol·L-1）；
0.126 8—与 1.00 ml硫代硫酸钠溶液标准滴定溶
液 [C（Na2S2O4）=1.000 mol·L-1]相当的碘的质量，
单位为克（g）；
M—试样质量，单位为克（g）。
2 实验结果
2.1 自由基清除率
如表 1所示，四川山胡椒试样浓度为 VC浓度的
30倍时对自由基清除率相当于 Vc的 67.92%；浓度
为 BHA的 40倍时自由基清除率是其 58.60%。
表 1 不同供试品与 DPPH ·自由基反应的吸光度
Tab. 1 The absorbance of different test sample acted with DPPH ·
供试品 重量（g） 浓度（mg·L-1） 吸光度 自由基清除率I（%）
空白对照 0.015 2（DPPH ·） 60.80 0.621 0
VC 0.054 4 5.44 0.275 55.717
BHA 0.039 8 3.98 0.220 64.573
四川山胡椒
乙醚萃取物 1.610 0 100 0.386 37.842
2.2 脂质过氧化值（POV）
空白饱和 KI溶液需消耗硫代硫酸钠标准滴定液
0.80 ml。结果显示，动物油脂的 POV值由 0.050 8
升高至 0.368 0，植物油脂的 POV值由 0.437 8升高
至 0.837 5，而 48 h内供试品对动物油和植物油都有
（下转第 33 页）
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首先，泻心汤在煎的过程中由于黄连、大黄、黄芩中
的酸碱性成分，会产生不溶物沉淀，这些不溶物（也
有作者写为沉淀物）部分是否具有药效尚待进一步研
究；其次，本文以具有典型抑菌作用的黄连为核心，
考察不同配伍拆方研究，并与黄连组进行对比研究，
那么各配伍组合黄连组最后的浓度折算，应该以含相
同的黄连生药的质量浓度为准，否则不具可比性；
再者，中药或复方的药效是多方面的，如本文只是从
体外抑菌的角度考察大黄和黄芩对整方体外抑菌活性
的贡献或影响来考察，其结果也是非常片面的。选用
其他药理指标也是如此，不可能只选用一个或少数几
个指标来进行对比研究，就轻易下结论，因为不可能
将一个方剂的全部药效都体现出来，这是不合理的。
还有就是体外活性和体内活性是否具有相关性等等问
题，都有待于进一步证实；最后，对于中药复方应加
大基础研究，从各个角度阐述其活性和活性成分，从
大量基础实验中找出药效规律或作用机制。文中从体
外抑菌角度发现，大黄对抑菌作用起到相加作用；但
黄芩对全方的作用就很微妙，黄芩对不同菌种有时起
到相加作用，有时起到抑制作用，因此，泻心汤中是
否含有黄芩仍有待于不同角度综合比较，慎重对待。
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收稿日期：2015-02-27
（上接第 30 页）
不同程度的影响。在供试品作用下，植物油的 POV
值均有降低，粉末直接作用比乙醚萃取物和阳性对照
品 Vc和 BHA作用明显；四川山胡椒的供试品对猪
油 POV值则表现为使其增高，而阳性对照品对猪油
POV值有明显的抑制作用。
表 2 碘价法测定不同供试品与油脂作用时硫代硫酸钠消耗量和 POV值
Tab. 2 The consumption of sodium hyposulfite and POV values by
determination with oil
供试品 硫代硫酸钠标准滴定液消耗量（ml） POV值
猪油 植物油 猪油 植物油
阴性对照 0 h 1.20 4.25 0.050 8 0.437 8
48 h 3.70 7.40 0.368 0 0.837 5
四川山胡椒粉末 7.70 2.70 0.704 3 0.057 1
四川山胡椒乙醚萃取物 15.30 6.25 1.230 9 0.583 7
VC 1.50 3.65 0.088 8 0.361 7
BHA 2.05 3.75 0.158 6 0.374 4
3 结论
供试品对动物油脂和植物油脂 POV值的影响可
能与其物态有关。VC和 BHA在液体的植物油中不能
很好的溶解，因此不能发挥较强的作用，而在动物油
中，VC和 BHA可以充分与油脂分子混匀，因此作用
较强。另外，供试品对动物油和植物油的作用结果相
反可能是因为两种油脂的成分不同。植物中的活性成
分可能与动物油中的饱和脂肪酸或胆固醇发生某种
反应，使其加速氧化，碘价升高。
本实验结果表明，四川山胡椒试样浓度为 VC浓
度的 30倍时对自由基清除率相当于 VC的 67.92%；
浓度为 BHA的 40倍时自由基清除率是其 58.60%。
相同环境下，植物油脂比动物油脂在 48 h 内 POV值
上升幅度较大。加入供试品 48 h后，植物油的 POV
值均有降低，供试品作用的活性顺序为四川山胡椒粉
末 ＞ VC ＞ BHA ＞ 四川山胡椒乙醚萃取物。
两种四川山胡椒的供试品对猪油 POV值则表现
为使其增高，增高幅度为四川山胡椒乙醚萃取物＞四
川山胡椒粉末；阳性对照品对猪油 POV值有明显的
抑制作用，VC作用强于 BHA。综上所述，本实验表
明四川山胡椒叶能有效清理自由基，具有一定的体外
抗氧化活性，值得进一步的研究。
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收稿日期：2015-07-18