全 文 ：排钱草药材质量评价方法的研究
钟 鸣1， 张宝璟2， 王 超2， 余胜民1， 宗 杨2， 马骁驰2， 张厚利2 *
(1． 广西民族医药研究院，广西 南宁 530001;2． 大连医科大学药学院，辽宁 大连 116044)
收稿日期:2015-04-29
基金项目:辽宁省科技厅省自然科学基金 (2015020667)
作者简介:钟 鸣，男，教授，研究员，从事中药药效物质基础研究。E-mail:gxmyskjb@ 163． com
* 通信作者:张厚利，女，副教授，硕士生导师，从事中药药理学研究。Tel:15842660928，E-mail:houlizh@ 163． com
摘要:目的 建立排钱草药材的质量评价方法。方法 采用 TLC 鉴别法，以三氯甲烷-甲醇 (4 ∶ 1)为展开剂，在紫
外光灯 (254 nm)下检视排钱草中 N，N-二甲基色胺及 5-甲氧基-N，N-二甲基色胺。再采用 HPLC色谱法，对两者含
有量进行测定。结果 在 TLC鉴别中，254 nm下有一个明显的荧光斑点，分离度良好;在 HPLC 色谱中，N，N-二甲
基色胺、5-甲氧基-N，N-二甲基色胺进样量在 2 ～ 30 μg /mL范围内与峰面积均呈现出良好的线性关系 (n = 5) ，两者
平均回收率分别为 99. 8%、100. 5%，RSD 分别为 1. 06%、1. 83%。而且，不同采收期、部位的排钱草中这两种成分
含有量有明显差异。结论 该方法可用于排钱草药材的质量控制。
关键词:排钱草;质量评价;N，N-二甲基色胺;5-甲氧基-N，N-二甲基色胺;TLC;HPLC
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2016)01-0130-04
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2016. 01. 029
Quality evaluation of Phllodium pulchellum
ZHONG Ming1， ZHANG Bao-jing2， WANG Chao2， YU Sheng-min1， ZONG Yang2， MA Xiao-chi2，
ZHANG Hou-li2 *
(1． Guangxi Institute of Nationality Medicine，Nanning 530001，China;2． College of Pharmacy，Dalian Medical University，Dalian 116044，China)
ABSTRACT:AIM To establish a method for the quality evaluation of Phllodium pulchellum． METHODS
TLC was applied to detecting 5-methoxy-N，N-dimethyltryptamine and N，N-dimethyltryptamine in Phllodium pul-
chellum with chloroform-methanol (4 ∶ 1)as developing solvent under the UV light (254 nm)． Then HPLC was a-
dopted to determine the contents of these two constituents． RESULTS In TLC，it had a distinct fluorescence spot
under 254 nm with good separation． In HPLC，N，N-dimethyltryptamine and 5-methoxy-N，N-dimethyltryptamine
showed good linear relationships in the ranges of 2 － 30 μg /mL ，whose average recoveries were 99. 8% (RSD =
1. 06%)and 100. 5% (RSD = 1. 83%)． In addition，the contents of these two constituents in different picking
time and parts of Phllodium pulchellum showed obvious difference． CONCLUSION This method can be used for
the quality control of Phllodium pulchellum．
KEY WORDS:Phllodium pulchellum;quality evaluation;N，N-dimethyltryptamine;5-methoxy-N，N-dimethyl-
tryptamine TLC;HPLC
排钱草为我国壮族民间常用草药，来源于豆科
植物排钱树 Phyllodium pulchellum (L．)Desv 的干
燥根，别名钱排草、叠钱草、钱串草，主要分布于
福建、江西、两广等地，其性平，味涩，具有活血
祛瘀、清热利湿、除湿消肿、软坚散结等功效，常
用来治疗急、慢性肝炎、血吸虫病、肝脾肿大、子
宫脱垂、跌打损伤等症［1］。其中，排钱草总生物
碱对人肝星状细胞增殖具有抑制作用，并同时抑制
肝纤维化相关胶蛋白的表达［2］;对化学损伤性肝
纤维化具有较强的改善作用，能显著降低血清
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ALP、ALT的活性，降低肝脏 Hyp水平［3］;通过观
察大鼠肝脏组织病理改变，发现它可明显减轻肝纤
维化的病变程度，抑制肝纤维化的发展［3］;能显
著降低免疫性肝纤维化大鼠肝脏组织Ⅰ、Ⅲ型胶原
mRNA的表达［4］;能提高免疫性肝纤维化大鼠血清
IFN-γ的水平，改善肝组织纤维化程度［5］。从排钱
草中分离得到的化学成分主要为生物碱、醇、糖、
挥发油以及酚等，其中种子中含有棕榈酸、硬脂
酸、油酸、亚油酸、亚麻酸，同时还含有大黄素甲
醚-1-葡萄糖基鼠李糖苷、半乳糖配甘露糖等［6］;
根部含有 α-香树脂醇、白桦脂醇以及 β-谷甾醇;
全株富含柠檬酚、异柠檬酚、蟾毒色胺、禾草碱
等［7］。另外，干宁等［8］从排钱草正丁醇萃取物中
分离得到 N，N-二甲基色胺、5-甲氧基-N，N-二甲
基色胺。
查阅相关文献发现，排钱草这一民族草药至今
仍未被《中华人民共和国药典》收载，有关其总
生物碱化学成分的文献报道也很少，故有必要对其
建立一套完整的质量标准研究体系，以期为排钱草
药材的合理开发与质量控制提供依据。
1 仪器与材料
Satorius BS210S电子天平 (北京赛多利斯仪器
系统有限公司) ;KQ3200DB 数控超声波清洗器
(昆山市超声仪器有限公司) ;Ultimate 3000 高效液
相色谱仪，包括 UV-DAD 检测器 (美国 Dionex 公
司) ;Diamonsil 色 谱 柱 (4. 6 mm × 250 mm，
5 μm)。甲 醇、磷 酸、氯 仿、石 油 醚 (60 ～
90 ℃)、乙酸乙酯、丙酮均为分析纯;乙腈为色谱
纯;水为 HPLC柱色谱用水、娃哈哈纯净水。薄层
色谱板 (青岛海洋化工有限公司)。N，N-二甲基
色胺、5-甲氧基-N，N-二甲基色胺标准品 (自制，
经 HPLC色谱仪检测，其纯度 ＞ 99%)。排钱草由
广西南宁民族医药研究所药理室钟鸣教授提供。
2 排钱草药材薄层鉴别
2. 1 对照品溶液的制备 分别精密称取 N，N-二
甲基色胺、5-甲氧基-N，N-二甲基色胺对照品适
量，加甲醇制成 1 mg /mL的对照品溶液，即得。
2. 2 供试品溶液的制备 取 9 月采自广西的排钱草
根部粗粉 0. 1 g，加入甲醇 10 mL，超声(100 Hz)
处理 30 min，甲醇补至 10 mL，过滤，即得。
2. 3 薄层条件 吸取供试品溶液 8 μL、对照品溶
液 2 μL，分别点于同一块以羧甲基纤维素钠为黏
合剂的硅胶 GF254 薄层板上，在以三氯甲烷-甲醇
(4 ∶ 1)、氨饱和蒸气为展开剂的溶剂中展开，取
出，晾干，置紫外灯 (254 nm)下检视，结果见
图 1 (a) ，荧光斑点清晰可见。然后，再喷以改良
碘化铋钾溶液，日光下观察，结果见图 1 (b) ，供
试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，显现出相
同颜色的橙色斑点。
a. 254 nm下 b. 日光下
1 ～ 3． 排钱草药材的叶、枝、根 4． N，N-二甲基色胺 5. 5-甲
氧基-N，N-二甲基色胺
1 － 3． leaves，stems and roots of Phllodium pulchellum 4． N，N-dime-
thyltryptamine 5. 5-methoxy-N，N-dimethyltryptamine
图 1 排钱草薄层色谱图
Fig. 1 TLC chromatograms of Phllodium pulchellum
3 排钱草药材有效成分含有量的测定
3. 1 N，N-二甲基色胺、5-甲氧基-N，N-二甲基色
胺含有量的测定
3. 1. 1 对照品溶液的制备 同“2. 1”项
3. 1. 2 供试品溶液的制备 同“2. 2”项
3. 1. 3 色谱条件 Diamonsil ODS色谱柱 (4. 6 mm ×
250 mm，5 μm) ;流动相为乙腈-水 (含 0. 03%磷
酸) ，梯度洗脱 (0 ～ 15 min，5 ∶ 95;15 ～ 25 min，
90 ∶ 10;25 ～ 40 min，5 ∶ 95) ;体积流量
1. 0 mL /min;检测波长 220 nm;进样量 10 μL;
柱温30 ℃。理论塔板数按 5-甲氧基-N，N-二甲基
色胺峰计算，应不低于 3 000。然后，吸取对照
品以及供试品溶液各 10 μL，依次进样测定，结
果见图 2。
3. 1. 4 线性关系考察 精密称取 5-甲氧基-N，N-
二甲基色胺对照品 (0. 5 mg /mL)溶液 2、5、10、
20、30 μL，再精密称取 N，N-二甲基色胺对照品
(0. 05 mg /mL)溶液 2、5、10、20、30 μL，依次
进样，在“3. 1. 3 “项色谱条件下测定峰面积，以
峰面积 (Y)对进样量 (X)进行回归，得到 5-甲
氧基-N，N-二甲基色胺的标准曲线方程 Y =
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A． 排钱草 B． N，N-二甲基色胺 C． 5-甲氧基-N，N-二甲基色胺
A． Phllodium pulchellum B． N，N-dimethyltryptamine C． 5-me-
thoxy-N，N-dimethyltryptamine
图 2 HPLC色谱图
Fig. 2 HPLC chromatograms
5. 184 7X + 0. 512 5，r = 0. 998 2 (n = 5) ，N，N-
二甲基色胺的标准曲线方程 Y = 5. 121 8X + 0. 586 9，
r = 0. 996 8 (n = 5)。结果表明，5-甲氧基-N，N-二
甲基色胺在 1 ～ 15 μg范围内，N，N-二甲基色胺在
0. 1 ～ 1. 5 μg 范围内，与峰面积均呈良好的线性
关系。
3. 1. 5 精密度考察 取 5-甲氧基-N，N-二甲基色
胺对照品溶液适量，在 “3. 1. 3 “项色谱条件下重
复进样 5 次。结果，测定其峰面积 RSD 为 1. 89%
(n = 5) ，表明仪器精密度良好。
3. 1. 6 重复性试验 取同一样品制备 5 份供试品
溶液，在“3. 1. 3 “项色谱条件下测定 N，N-二甲
基色胺以及 5-甲氧基-N，N-二甲基色胺的含有量。
结果，两者峰面积 RSD 分别为 1. 51%、1. 45%
(n = 5) ，表明该方法重复性良好。
3. 1. 7 稳定性试验 取同一份供试品溶液适量，
在“3. 1. 3 “项色谱条件下，于 0、2、4、8、12、
24 h进样。结果，测定 N，N-二甲基色胺以及 5-甲
氧基-N，N-二甲基色胺峰面积 RSD分别为 1. 21%、
1. 18%，表明供试品溶液在 24 h内稳定。
3. 1. 8 加样回收率试验 取排钱草粉末 0. 1 g，共
10 份，取 5 份加入 5-甲氧基-N，N-二甲基色胺
(1 mg /mL)溶液 2 mL，剩下 5 份加入 N，N-二甲
基色 胺 (1 mg /mL) 对 照 品 0. 1 mL，按 照
“3. 1. 2”项下方法制备供试品溶液，在 “3. 1. 3”
项色谱条件下进样分析，测定峰面积，计算回收
率，结果见表 1 和表 2。
表 1 5-甲氧基-N，N-二甲基色胺加样回收率试验
Tab. 1 Recovery tests for 5-methoxy-N， N-dimethyl-
tryptamine
序号
取样量 /
g
原有量 /
mg
加入量 /
mg
测得量 /
mg
回收率 /
%
平均回收率 /
%
RSD /
%
1 0. 103 2. 83 2. 00 4. 80 98. 9
2 0. 102 2. 81 2. 00 4. 88 102. 7
3 0. 104 2. 86 2. 00 4. 92 102. 1 100. 5 1. 83
4 0. 101 2. 78 2. 00 4. 74 98. 6
5 0. 106 2. 92 2. 00 4. 92 100. 2
表 2 N，N-二甲基色胺加样回收率试验
Tab. 2 Recovery tests for N，N-dimethyltryptamine
序号
取样量 /
g
原有量 /
mg
加入量 /
mg
测得量 /
mg
回收率 /
%
平均回收率 /
%
RSD /
%
1 0. 103 0. 10 0. 10 0. 20 99. 0
2 0. 102 0. 10 0. 10 0. 20 101. 0
3 0. 104 0. 10 0. 10 0. 20 99. 0 99. 8 1. 06
4 0. 101 0. 10 0. 10 0. 20 99. 0
5 0. 106 0. 11 0. 10 0. 21 100. 9
3. 1. 9 样品测定 取不同采摘时间、部位的排钱
草药材 (产地广西)适量，按“2. 2”项下方法制
备供试品溶液，在 “3. 1. 3 “项色谱条件下分析，
结果见表 3。
表 3 排钱草中两种成分含有量测定结果 (x ± s，n =5)
Tab. 3 Determination results of the contents of two constit-
uents in Phllodium pulchellum (x ± s，n =5)
采摘
时间
部位
含有量 (g /100 g生药)
N，N-二甲基色胺 5-甲氧基-N，N-二甲基色胺
3 月 叶 — 2. 90 ± 0. 12
枝 — 1. 37 ± 0. 15
根 0. 113 ± 0. 10 2. 75 ± 0. 13
9 月 叶 — 3. 40 ± 0. 12
枝 — 1. 54 ± 0. 13
根 0. 106 ± 0. 08 3. 26 ± 0. 10
11 月 根 0. 110 ± 0. 05 2. 98 ± 0. 11
4 讨论
在薄层色谱法鉴别试验中，分别对三氯甲烷-
甲醇、石油醚-丙酮、三氯甲烷-丙酮、乙酸乙酯-
甲醇、三氯甲烷-丙酮-甲醇 (均在氨饱和蒸气中
展开)进行了考察，结果以三氯甲烷-甲醇
(4 ∶ 1)、氨饱和蒸气为展开剂的溶剂系统的薄层
色谱保留行为最好，因此选择该展开剂溶剂系
统。同时，本实验采用紫外灯 (254 nm)下检视
和喷以碘化铋钾溶液显色两种方法来考察实验结
果，并互相印证，结果表明该方法具有分离度
好、斑点清晰、简便易行等特点，可用于排钱草
药材的鉴别。
提取溶剂选择了甲醇、酸提碱沉-乙醇提取法、
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酸提碱沉-三氯甲烷萃取法进行比较，同时对样品进
行了回流提取与超声提取的对比研究。结果显示，
选择甲醇超声提取药材时，提取效果好、效率高。
本实验将薄层色谱与高效液相色谱法结合，该
质量评价方法较以往单一评价指标更科学、系统。
通过对广西不同时节、部位排钱草药材中有效成分
含有量的测定结果可知，其叶与枝均不含 N，N-二
甲基色胺，而根部则含有该成分，但由于其含有量
较低，所以在薄层色谱中没有检测到相应斑点，而
利用敏感度较高的 HPLC色谱则检测到这一特征吸
收峰。同时，排钱草的叶、枝、根部均含有 5-甲
氧基-N，N-二甲基色胺，并且在 9 月份药材根部
中，其含有量最高，另外叶中该成分的含有量明显
高于枝。综上所述，在今后的质量控制中，应主要
选择广西 9 月排钱草药材的根部进行重点研究，可
达到更好的试验效果，而其他地方不同时节排钱草
药材中有效成分的含有量测定还需作进一步研究。
参考文献:
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HPLC-ELSD法同时测定不同产地白果药材中 4 种萜内酯类成分
张群群1， 李慧芬1，2， 张学兰1，2
*
， 吴 鹏1， 王均秀1， 宋梦晗1， 赵 鑫1
(1. 山东中医药大学，山东 济南 250355;2. 国家中医药管理局中药炮制传承基地，山东 济南 250355)
收稿日期:2015-07-13
基金项目:济南市高校自主创新计划项目 (201303027)
作者简介:张群群 (1988—) ，女，硕士，从事中药新药研发与中药炮制原理研究。Tel:18753151090，E-mail:zhangqunqun01@163． com
* 通信作者:张学兰 (1963—) ，女，教授，从事中药新药研发与中药炮制原理研究。Tel: (0531)89628081，E-mail:zhang8832440@ si-
na． com
摘要:目的 建立 HPLC-ELSD法同时测定白果药材中白果内酯和银杏内酯 A、B、C。方法 白果乙酸乙酯萃取物
的分析采用 Kromasil C18色谱柱 (250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ;流动相为甲醇-0. 1%甲酸水 (38 ∶ 62) ;柱温 30 ℃，
体积流量 0. 8 mL /min。结果 白果内酯和银杏内酯 A、B、C 分别在 1. 01 ～ 40. 40 μg、1. 03 ～ 41. 20 μg、2. 37 ～
94. 80 μg、1. 51 ～ 60. 40 μg范围内线性关系良好 (r ＞ 0. 999 5) ，平均回收率在 97. 3% ～ 99. 2%之间。5 个不同产地
(山东济南、临沂、泰安，广西桂林和江苏泰兴)白果药材中四者的含有量分别为 75. 55 ～ 219. 73、54. 79 ～
135. 88、200. 37 ～ 853. 39、119. 31 ～ 498. 06 μg /g。结论 白果中 4 种萜内酯类成分的总含有量以江苏省泰兴市产
者为最高。
关键词:白果;白果内酯;银杏内酯 A;银杏内酯 B;银杏内酯 C;产地;HPLC-ELSD
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2016)01-0133-04
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2016. 01. 030
Simultaneous determination of four terpene lactones in Ginkgo Semen from dif-
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January 2016
Vol． 38 No． 1