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中药猫人参中的抗肿瘤活性成分



全 文 :第二军医大学学报 2011年 7月第 32卷第 7期  htp://www.ajsmmu.cn
AcademicJournalofSecondMilitaryMedicalUniversity, Jul.2011, Vol.32, No.7 · 749  ·
DOI:10.3724/SP.J.1008.2011.00749 ·论 著·
中药猫人参中的抗肿瘤活性成分
徐一新 1, 2 ,项昭保 3 ,陈晓晶 2 ,陈海生 1*
1.第二军医大学药学院天然药物化学教研室 ,上海 200433
2.上海健康职业技术学院生物医药系 ,上海 200237
3.重庆邮电大学生物信息学院 , 重庆 400065
  [摘要 ]  目的 对中药猫人参(镊合猕猴桃 ActinidiavalvataDunn.根)中的抗肿瘤活性成分进行研究。方法 运用多
种色谱分离方法进行分离纯化 ,通过 1HNMR、13CNMR、MS等波谱技术确定化合物的结构 , 并采用 MTT法测试了部分单体化合
物的体外细胞毒活性。结果 分离并鉴定了 11个化合物 ,其中 10个为三萜类化合物:2α, 3α, 24-三羟基乌苏烷 -12-烯
-28-酸(1), 积雪草酸(2), 科罗索酸(3), 2α, 3α, 23, 24-四羟基乌苏烷 -12-烯 -28-酸(4), 2α, 3α, 24-三羟基乌苏
酸 -11-烯 -13β , 28-内酯(5), 2α, 3α, 24-三羟基齐墩果烷 -12-烯 -28-酸(6), 2α, 3α, 19α, 24-四羟基乌苏烷 -12
-烯 -28-酸(7), 2α, 3α, 24-三羟基乌苏烷 -12, 20(30)-二烯 -28-酸(8), 2α, 3β, 24-三羟基乌苏烷 -12-烯 -28
-酸(9), 齐墩果酸(10);1个植物甾醇:β -谷甾醇(11)。采用MTT法测试了化合物 1、2、3、 4、7对 A549(人肺癌细胞)、LOVO
(人结肠癌细胞)、HepG2(人肝癌细胞)等 3种人肿瘤细胞株的体外细胞毒活性。结论 化合物 3 ~ 8为首次从该植物中分离
得到 , 其中 2、 3对 LOVO和 HepG2细胞株有一定的抗肿瘤活性 , 且随着单体化合物极性的增大 ,细胞毒活性下降。
  [关键词 ]  猕猴桃科;猫人参;镊合猕猴桃;化学成分;抗肿瘤药
  [中图分类号 ]  R286.91   [文献标志码 ]  A   [文章编号 ]  0258-879X(2011)07-0749-05
Anti-tumorconstituentsfromtherootsofActinidiavalvata
XUYi-xin1, 2 , XIANGZhao-bao3 , CHENXiao-jing2 , CHENHai-sheng1*
1.DepartmentofNaturalMedicinal, SchoolofPharmacy, SecondMilitaryMedicalUniversity, Shanghai200433, China
2.DepartmentofBiomedicineandDrugs, ShanghaiHealthVocational&TechnicalColege, Shanghai200237, China
3.CollegeofBio-information, ChongqingUniversityofPostsandTelecommunications, Chongqing400065, China
[收稿日期 ]  2011-03-30    [接受日期 ]  2011-05-12
[基金项目 ]  上海市卫生局科研课题(2008051).SupportedbyResearchProjectofShanghaiMunicipalHealthBureau(2008051).
[作者简介 ]  徐一新,博士生.E-mail:xuyixin1968@163.com
*通信作者(Correspondingauthor).Tel:021-81871250, E-mail:haishengc@hotmail.com
  [ Abstract]  Objective Tostudytheanti-tumorconstituentsfromtherootsofActinidiavalvataDunn..Methods Column
chromatographictechniqueswereusedtoisolateandpurifythechemicalconstituentsoftheplantandtheirstructureswereelucidatedby
spectroscopicanalysis, including1HNMR, 13CNMRandMS.Thecytotoxicactivitiesofsomeindividualcompoundswereexaminedby
MTTassay.Results Tentriterpenoids:2α, 3α, 24-trihydroxyurs-12 -en-28-oicacid(1), asiaticacid(2), corosolicacid
(3), 2α, 3α, 23, 24-tetrahydroxyurs-12-en-28-oicacid(4), 2α, 3α, 13β , 24-tetrahydroxyurs-11-en-28-oicacid-
13-lactone(5), 2α, 3α, 24-trihydroxyolean-12-en-28-oicacid(6), 2α, 3α, 19α, 24-tetrahydroxyurs-12-en-28 -oic
acid(7), 2α, 3α, 24-trihydroxyurs-12, 20(30)-dien-28-oicacid(8), 2α, 3β, 24-trihydroxyurs-12-en-28-oicacid
(9), andoleanolicacid(10), andoneplantsterolβ -sitosterol(11)wereisolatedfromtheCHCl3 fractionoftherootsofActinidia
valvataDunn..Thecytotoxicactivitiesoffivecompounds(1, 2, 3, 4, and7)againstA549, LOVOandHepG2 cellineswere
evaluated.Conclusion Compounds3-8 areisolatedfromthisplantforthefirsttime.Compounds2 and3 possesscytotoxicactivity
againstLOVOandHepG2 cellines, andthecytotoxicactivitydecreaseswiththeincreaseofpolarityofindividualcompound.
  [ Keywords]  Actinidiaceae;Actinidiavalvata;ActinidiavalvataDunn.;chemicalcompounds;antineoplasticagents
[ AcadJSecMilMedUniv, 2011, 32(7):749-753]
  猫人参为镊合猕猴桃 ActinidiavalvataDunn.的
根 ,系浙江民间常用草药 [ 1 -2] 。具有清热解毒 、消肿
疖的功效。主要用于治疗骨髓炎 、疮疡脓肿 、肝硬化
黄疸腹水 、消化系统肿瘤等。根据浙江省肿瘤医院
报道 , 猫人参连续数年位居抗肿瘤配方中的前十
名[ 3] 。为寻找抗肿瘤活性成分 ,并为中药标准化提
· 750  · 第二军医大学学报  2011年 7月 ,第 32卷
供科学依据 ,本课题组对镊合猕猴桃根的化学成分
进行了研究 ,分离并鉴定了 11个单体化合物 ,其中
化合物 3 ~ 8为首次从该植物中分离得到 , 并采用
MTT法测试了单体化合物 1、2、3、4、7对 A549(人肺
癌细胞)、LOVO(人结肠癌细胞)、HepG2(人肝癌细
胞)等 3种人肿瘤细胞株的体外细胞毒活性。
1 仪器 、试剂和药材
  RY-2型熔点测定仪 (温度未校正);Bruker
DRX-600型和 BrukerAV-400型核磁共振仪;Au-
tospecPremier型和 Q-Tofmicrospectrometer(Mi-
cromass, U.K.)型质谱仪;WelscanMK-2型全自动
酶标仪(Labsystems生产);岛津 LC-10AT液相色谱
仪;SymmetryPrepRP-C18制备色谱柱 (7 μm,
7.8mm×150 mm, WatersCo.);薄层色谱硅胶及柱
色谱硅胶为青岛海洋化工厂生产;SephadexLH-20
为 GEHealthcareBio-SciencesAB(Sweden)公司产
品;色谱溶剂系统为石油醚 /乙酸乙酯(不同比例)、
氯仿 /甲醇(不同比例)、甲醇 /水 (不同比例),均为
分析纯或色谱纯;提取用甲醇为工业级。
  猫人参药材于 2008年 8月采自浙江省临安市
洪岭乡 ,经第二军医大学药学院生药学教研室郑汉
臣教授鉴定为猕猴桃科 Actinidiaceae猕猴桃属 Ac-
tinidia植物镊合猕猴桃 ActinidiavalvataDunn.的根。
样品保留于第二军医大学药学院天然药物化学教研
室 ,标本号为 CHS20080801。
  细胞株 A549、LOVO、HepG2由上海医药工业研
究院药理研究室冻存和传代。
2 方法和结果
2.1 提取与分离 干燥的猫人参药材 20 kg,粉碎
成粗粉 ,用甲醇渗漉 3次 ,得到甲醇提取液 ,减压浓
缩至浸膏 ,加水 500 ml混悬 ,依次用氯仿 、正丁醇萃
取 ,各部位减压浓缩 ,干燥 ,氯仿萃取部位得 544 g,
正丁醇萃取部位 361 g。采用 MTT法 ,以 A549、LO-
VO及 HepG2为筛选指标进行细胞毒活性测定 ,结
果表明:氯仿萃取部位有一定的细胞毒作用。取氯
仿萃取物 200 g,用氯仿 /甲醇混合溶剂溶解 ,加硅胶
拌样 ,上样于硅胶(200 ~ 300目)柱 ,以石油醚 /乙酸
乙酯(50:1 ~ 5:1)、氯仿 /甲醇(30:1 ~ 5:1)洗
脱 , TLC检查 ,合并得到 8个流分(Fr.1 ~ 8)。各流
分分别通过硅胶 、SephadexLH-20、HPLC进一步分
离纯化 ,分得化合物 1(65.4 mg)、 2(35.2 mg)、3
(13.8 mg)、4(8.7 mg)、5(11.4mg)、6(46.5 mg)、7
(10.1 mg)、8(4.2 mg)、9(12.8 mg)、10(5.6 mg)、
11(25.7mg,化合物的结构式见图 1。
图 1 化合物 1 ~ 10的结构式
Fig1 Chemicalstructuresofcompounds1-10
2.2 化合物结构鉴定
2.2.1 化合物 1 白色无定形粉末 ,溶于甲醇 ,
Libermann-Buchard反应阳性;m.p.210 ~ 213℃(分
解);ESI-MSm/z511 [ M+Na] +、487 [ M-H] - ,
结合 1HNMR、13CNMR、DEPT谱 ,推断化合物 1的分
子式为 C30H48O5。1HNMR(pyridine-d5 , 600MHz)5.
43(1H, br.s, 12-H), 4.56(1H, d, J=1.8 Hz, 3β -
H), 4.41(1H, m, 2β -H), 4.08(1H, d, J=10.8Hz,
24-H), 3.78(1H, d, J=10.8 Hz, 24 -H), 2.59
(1H, d, J=11.4 Hz, 18 -H), 1.65(3H, s), 1.10
(3H, s), 1.00(3H, s), 0.97(3H, s), 0.94(3H, d, J=
6.0Hz), 0.90(3H, d, J=6.0Hz)。13CNMR的归属见
表 1。与文献[ 4]对照 ,确定化合物 1为 2α, 3α, 24-
三羟基乌苏烷 -12 -烯 -28-酸(2α, 3α, 24-tri-
hydroxyurs-12-en-28-oicacid)。
2.2.2 化合物 2 白色无定形粉末 ,溶于甲醇 ,
Libermann-Buchard反应阳性;m.p.242 ~ 244℃。
ESI-MSm/z511 [ M+Na] +、999 [ 2M+Na] + ,结
合1HNMR、13CNMR、DEPT谱 ,推断化合物 2的分子
式为C30H48O5;1 HNMR(pyridine-d5 , 600 MHz):5.
43(1H, br.s, 12 -H), 4.22(1H, m, 2β -H), 4.21
(1H, m, 3α-H), 4.19(1H, d, J=10.8 Hz, 23-H),
第 7期.徐一新 ,等.中药猫人参中的抗肿瘤活性成分 · 751  ·
3.70(1H, d, J=10.8 Hz, 23-H), 2.58(1H, d, J=
11.4Hz, 18-H), 1.10(3H, s), 1.03(9H, br.s), 0.
93(3H, d, J=6.6 Hz), 0.89(3H, d, J=6.0 Hz);
13CNMR的归属见表 1。与文献 [ 4]对照 ,确定化合物
2为 2α, 3β , 23-三羟基乌苏烷 -12 -烯 -28-酸
(2α, 3β, 23-trihydroxyurs-12-en-28-oicacid),
即积雪草酸(asiaticacid)。
2.2.3 化合物 3 白色无定形粉末 , 溶于氯仿 ,
Libermann-Buchard反应阳性;m.p.251 ~ 253℃;EI
-MSm/z(%)472(M+· , 2)、454(1)、248(100)、
203(92)、189(11)、133(36),结合 1HNMR、13CNMR、
DEPT谱 ,推断化合物 3的分子式为C30H48O4;1HN-
MR(pyridine-d5 , 600 MHz):5.45(1H, br.s, 12 -
H), 4.06(1H, ddd, J=7.2, 4.0 Hz, 2β -H), 3.37
(1H, dJ=7.2 Hz, 3α-H), 2.61(1H, d, J=10.2
Hz, 18-H), 1.26(3H, s), 1.20(3H, s), 1.06(3H,
s), 1.03(3H, s), 0.99(3H, s), 0.98(3H, d, J=6
Hz), 0.95(3H, d, J=6 Hz);13CNMR的归属见表 1。
与文献 [ 5-6]对照 ,确定化合物 3为 2α, 3β -二羟基
乌苏烷 -12-烯 -28 -酸(2α, 3β -dihydroxyurs-
12-en-28-oicacid),即科罗索酸(corosolicacid)。
2.2.4 化合物 4 白色无定形粉末 , 溶于甲醇 ,
Libermann-Buchard反应阳性;ESI-MSm/z527
[ M+Na] +、 503 [ M -H] - , HRESI-MSm/z
527.334 5 [ M +Na] + (计 算值:C30 H48 O6 Na
527.334 9),结合 1HNMR、13CNMR、DEPT谱 ,确定化
合物 4的分子式为 C30H48O6;1HNMR(pyridine-d5 ,
400MHz):4.89(1H, br.s, 3β -H), 4.41(1H, m, 2β
-H), 4.02(1H, d, J=10.8 Hz, 23 -H), 4.19(1H,
d, J=10.8Hz, 23-H), 4.40(1H, d, J=10.8 Hz, 24
-H), 4.60(1H, d, J=10.8 Hz, 24 -H), 2.61(1H,
d, J=11.4Hz, 18-H), 1.16(3H, s), 1.06(3H, s),
1.03(3H, s), 0.94(3H, d, J=6.0 Hz), 0.90(3H, d,
J=6.0 Hz), 12-H信号被水峰掩盖;13 CNMR的归
属见表 1。与文献 [ 7]对照 ,确定化合物 4为 2α, 3α,
23 , 24-四羟基乌苏烷 -12 -烯 -28-酸(2α, 3α,
23 , 24-tetrahydroxyurs-12-en-28-oicacid)。
2.2.5 化合物 5 白色无定形粉末 , 溶于甲醇 ,
Libermann-Buchard反应阳性;ESI-MSm/z509
[ M+Na] +、525 [ M+K] +、995 [ 2M+Na] +、1 011
[ 2M+K] +、521 [ M+Cl] -、 531 [ M+COOH] ,结
合 1HNMR、13CNMR、DEPT谱 ,推断化合物 5的分子
式为 C30H46O5;1HNMR(pyridine-d5 , 400 MHz):6.
12(1H, d, J=10.2Hz, 12-H), 5.62(1H, dd, J=10.
2, 3.0 Hz, 11 -H), 4.58(1H, br.s, 3β -H), 4.49
(1H, dd, J=2.4, 10.8 Hz, 2β -H), 4.06(1H, d, J=
10.8 Hz, 24-H), 3.85(1H, d, J=10.8 Hz, 24-H),
2.26(1H, br.s, 18-H), 1.65(3H, s), 1.18(3H, s),
1.04(3H, s), 1.02(3H, s), 0.93(3H, d, J=6.6
Hz), 0.80(3H, d, J=6.6 Hz);13CNMR的归属见表
1。与文献 [ 4-5]对照 ,确定化合物 5为 2α, 3α, 24-三
羟基乌苏烷 -11-烯 -28-酸 -13β , 28-内酯(2α,
3α, 13β, 24-tetrahydroxyurs-11-en-28-oicacid
-13-lactone)。
2.2.6 化合物 6 白色针状晶体(甲醇), Libermann
-Buchard反应阳性;m.p.251 ~ 253℃;ESI-MSm/
z511 [ M+Na] +、999 [ 2M+Na] +、487 [ M-H] -;
结合 1HNMR、13CNMR、DEPT谱 ,推断化合物 6的分
子式为 C30H48O5;1HNMR(pyridine-d5 , 600 MHz):
5.45(1H, d, J=3.6Hz, 12-H), 4.57(1H, d, J=2.4
Hz, 3β -H), 4.43(1H, m, 2β -H), 4.09(1H, d, J=
10.8 Hz, 24-H), 3.81(1H, d, J=10.8 Hz, 24-H),
3.26(1H, dd, J=4.2, 14.4 Hz, 18-H), 1.66(3H,
s), 1.18(3H, s), 1.01(3H, s), 1.00(3H, s), 0.97
(3H, s), 0.90(3H, s);13CNMR的归属见表 1。与文
献[ 4]对照 ,确定化合物 6为 2α, 3α, 24-三羟基齐墩
果烷 -12-烯 -28 -酸(2α, 3α, 24-trihydroxyolean
-12-en-28-oicacid)。
2.2.7 化合物 7 白色无定形粉末 ,溶于甲醇 ,
Libermann-Buchard反应阳性;m.p.273 ~ 275℃;EI
-MSm/z(%)504(M+· , 4)、146(100)、264(21)、
248(61)、218(39)、219(35)、205(26)、203(45)、189
(33)、133(54),结合 1HNMR、13CNMR、DEPT谱 , 推
断化合物 7的分子式为 C30H48O6;1HNMR(pyridine
-d5 , 600 MHz):5.56(1H, br.s, 12-H), 4.56(1H,
s, 3β -H), 4.42(1H, ddd, J=11.4, 1.8 Hz, 2β -
H), 4.09(1H, d, J=10.8 Hz, 24-H), 3.80(1H, d,
J=10.8 Hz, 24 -H), 3.08(1H, m, 16 -H), 3.01
(1H, s, 18 -H), 1.64(3H, s), 1.63(3H, s), 1.40
(3H, s, 29 -CH3), 1.09(3H, d, J=6.0 Hz, 30 -
CH3), 1.08(3H, s), 1.00(3H, s);13CNMR的归属见
表 1。与文献 [ 8]对照 ,确定化合物 7为 2α, 3α, 19α,
24-四羟基乌苏烷 -12-烯 -28-酸(2α, 3α, 19α,
24-tetrahydroxyurs-12-en-28-oicacid)。
2.2.8 化合物 8 白色无定形粉末 ,溶于甲醇 ,
Libermann-Buchard反应阳性;ESI-MSm/z509
· 752  · 第二军医大学学报  2011年 7月 ,第 32卷
[ M+Na] +、485 [ M-H] -、 521 [ M+Cl] -;结合
1HNMR、13CNMR、DEPT谱 ,推断化合物 8的分子式
为 C30H46O5;1HNMR(pyridine-d5 , 400 MHz):5.46
(1H, br.s, 12-H), 4.81(1H, s, 30-H)、4.76(1H,
s, 30-H), 4.61(1H, br.s, 3β -H)、4.46(1H, m, 2β
-H)、4.13(1H, d, J=11.3 Hz, 24-H)、3.83(1H,
d, J=11.3Hz, 24-H), 2.74(1H, d, J=11.4 Hz, 18
-H), 1.70(3H, s), 1.13(3H, s), 1.10(3H, d, J=6.
0 Hz, 29-CH3), 1.02(3H, s), 1.01(3H, s);13CNMR
的归属见表 1。与文献[ 9]对照 ,确定化合物 8为 2α,
3α, 24-三羟基乌苏烷 -12 , 20(30)-二烯 -28-酸
[ 2α, 3α, 24-trihydroxyurs-12, 20(30)-dien-28-
oicacid] 。
2.2.9 化合物 9 白色无定形粉末 , 溶于甲醇 ,
Libermann-Buchard反应阳性;ESI-MSm/z511
[ M+Na] +,结合 1HNMR、13 CNMR、DEPT谱 ,推断化
合物 9的分子式为 C30H48O5;1HNMR(pyridine-d5 ,
600MHz):5.43(1H, t, J=3, 3.6 Hz, 12-H), 4.42
(1H, d, J=10.8 Hz, 24-H), 4.28(1H, m, 2β -H), 3.
69(1H, d, J=10.8 Hz, 24 -H), 3.55(1H, d, J=
9.0Hz, 3α-H), 2.59(1H, d, J=11.4 Hz, 18-H), 1.
57(3H, s), 1.17(3H, s), 0.98(3H, s), 0.94(3H, s),
0.95(3H, d, J=6.0 Hz), 0.92(3H, d, J=6.6 Hz);
13CNMR的归属见表 1。与文献 [ 4-5]对照 ,确定化合物
9为 2α, 3β, 24-三羟基乌苏烷 -12-烯 -28 -酸
(2α, 3β, 24-trihydroxyurs-12-en-28-oicacid)。
2.2.10 化合物 10 白色无定形粉末 ,溶于氯仿 ,
Libermann-Buchard反应阳性;m.p.265 ~ 267℃;EI
-MSm/z(%)456(M+· , 6), 392(4), 248(100),
233(6), 203 (54), 189 (22), 133 (47), 结合
1HNMR、13CNMR、DEPT谱 ,推断化合物 10的分子式
为 C30H48O3;1 HNMR(pyridine-d5 , 600 MHz):5.48
(1H, br.s, 12-H), 3.45(1H, t, J=3.6, 7.8 Hz, 3-
H), 2.63(H, d, J=11.4 Hz, 18-H), 1.26(3H, s),
1.25(3H, s), 1.06(3H, s), 1.01(3H, s), 0.99(3H,
s), 0.98(3H, s), 0.93(3H, s);13CNMR的归属见表
1。与文献 [ 4-5] 对照 ,确定化合物 10为齐墩果酸
(oleanolicacid)。
2.2.11 化合物 11 白色针状结晶(石油醚);m.p.
137 ~ 139℃;EI-MSm/z414[ M] +, 396[ M-H2O] ,
381[ M-CH3 ] ;TLC与 β -谷甾醇对照品 Rf值相同;
1HNMR数据与对照品一致 ,确定化合物 11为 β -谷
甾醇(β -sitosterol)。
2.3 活性测定 采用 MTT法 [ 10]测试了化合物 1、
2、3、4、7对 A549、LOVO、HepG2等 3种人肿瘤细胞
株的体外细胞毒活性。实验方法如下:96孔板每孔
加入浓度为(4 ~ 5)×104个 /ml的细胞悬液 100 μl
(培养液为:RPMI1640+15%小牛血清 +双抗),置
37℃、5%CO2培养箱内。 24 h后 , 加入样品液 , 10
μl/孔 ,设双复孔 , 37℃, 5%CO2作用 72h。每孔加入
5mg/ml的 MTT溶液 20μl,作用 4h后加入溶解液 ,
100μl/孔 ,置培养箱内 ,溶解后用 MK-2全自动酶
标仪测 570 nm处光密度(D)值 。结果(表 2)显示:
化合物 2、3对 LOVO细胞株和 HepG2细胞株有一定
的细胞毒活性 ,且随着单体化合物极性的增大 ,细胞
毒活性下降 ,此结论与文献[ 11]基本一致。
表 1 化合物 1 ~ 10的碳谱数据(氘代吡啶)
Tab1 13CNMRdatafor1-10 inpyridine-d5
Position 1a 2a 3b 4b 5a 6a 7a 8b 9a 10a
1 43.1t 47.9t 48.1t 42.8t 43.0t 43.0t 43.1t 43.2t 47.9t 38.9t
2 66.2d 68.8d 68.7d 66.2d 66.0d 66.2d 66.2d 66.2d 68.6d 28.2t
3 74.2d 78.1d 84.0d 73.4d 74.3d 74.3d 74.2d 74.2d 85.3d 78.4d
4 45.1s 43.6s 40.0s 47.3s 45.2s 45.2s 45.1s 45.2s 43.9s 39.2s
5 49.4d 47.9d 56.0d 44.5d 48.8d 49.5d 49.5d 49.4d 56.4d 55.7d
6 18.8t 18.4t 19.0t 18.8t 18.4t 18.9t 19.0t 18.8t 19.2t 18.8t
7 33.9t 33.1t 33.6t 33.5t 31.9t 33.7t 34.0t 33.9t 33.8t 33.1t
8 40.1s 40.0s 40.2s 39.8s 42.2s 40.0s 40.6s 40.1s 39.9s 39.6s
9 48.1d 47.8d 48.2d 48.0d 60.5d 48.2d 47.9d 48.0d 48.1d 48.1d
10 38.5s 38.2s 38.6s 38.1s 42.3s 38.7s 38.6s 38.5s 38.2s 37.3s
11 23.8t 23.7t 23.9t 24.7t 129.4d 24.1t 24.3t 23.8t 23.9t 23.6t
12 125.5d 125.5d 125.7d 125.2d 133.7d 122.5d 128.0d 125.8d 125.4d 122.5d
13 139.2s 139.2s 139.4s 139.1s 89.4s 144.8s 139.9s 138.9s 139.2s 144.1s
(续下表)
第 7期.徐一新 ,等.中药猫人参中的抗肿瘤活性成分 · 753  ·
(接上表)
Position 1a 2a 3b 4b 5a 6a 7a 8b 9a 10a
14 42.5s 42.5s 42.7s 42.3s 37.9s 42.2s 42.1s 42.5s 42.4s 42.1s
15 28.6t 28.6t 28.8t 29.8t 25.8t 28.3t 29.2t 28.5t 28.6t 28.2t
16 24.9t 24.8t 25.0t 28.4t 23.1t 23.7t 26.4t 24.8t 24.8t 23.9t
17 48.0s 48.0s 48.2s 47.9s 45.2s 46.6s 48.3s 48.2s 48.0s 46.7s
18 53.5d 53.4d 53.6d 53.4d 53.6d 42.0d 54.6d 55.6d 53.4d 41.8d
19 39.4d 39.4d 39.6d 39.2d 38.1d 46.4t 72.7s 37.7d 39.4d 46.3t
20 39.4d 39.3d 39.5d 39.2d 40.3d 30.9s 42.3d 153.8s 39.3d 31.0s
21 31.0t 31.0t 31.2t 30.9t 31.0t 34.2t 26.9t 32.7t 31.0t 34.2t
22 37.4t 37.4t 37.6t 37.3t 32.0t 33.2t 38.5t 39.6t 37.4t 33.2t
23 23.8q 66.3t 29.5q 63.9t 23.8q 23.7q 23.8q 23.6q 24.1q 28.5q
24 65.2t 14.4q 17.8q* 68.8t 64.8t 65.2t 65.2t 65.2t 65.6t 16.1q
25 17.1q* 17.5q* 17.1q* 16.8q* 16.0q* 17.4q* 17.2q* 17.2q* 17.3q 15.8q
26 17.3q* 17.5q* 17.5q* 17.2q* 17.9q* 17.1q* 17.1q* 17.3q* 17.3q 17.3q
27 23.7q 23.8q 24.0q 23.6q 19.1q# 26.1q 24.6q 23.5q 23.8q 26.2q
28 180.0s 179.9s 180.0s 180.0s 179.4s 180.2s 180.6s 179.3s 179.9s 180.2s
29 17.4q* 17.4q* 17.6q* 17.3q* 19.3q# 33.2q 27.1q 16.5q 17.5q 33.2q
30 21.3q 21.3q 21.5q 21.2q 19.6q# 23.8q 17.2q* 105.0t 21.3q 23.8q
 a:TestedbyaBrukerDRX-600;b:TestedbyaBrukerAV-400;* , #:Signalsmaybeinterchangeablewithineachcolumn
表 2 单体化合物的体外细胞毒活性测定(IC50)
Tab2 IC50 oftheanticancerpotentialofthecompounds
[ ρB/(μg· ml-1)]
Cel 1 2 3 4 7 DOX
A549 34.6 34.7 34.6 >100 >100 0.72
LOVO 13.9 6.9a 2.9a >100 >100 0.37
HepG2 34.5 33.1 9.2a >100 87.5 0.78
 A549:Humanpulmoniccarcinoma;LOVO:Humancoloniccarcino-
ma;HepG2:Humanhepaticcarcinoma;a:Weaklyactive;DOX:Doxo-
rubicin, positivecontrol
3 讨 论
  本研究从猫人参的氯仿萃取部位分离鉴定了
11个化合物 ,其中 , 10个为三萜类化合物 , 1个为植
物甾醇 , 6个化合物(3 ~ 8)为首次从该植物中分离
得到。同时 ,采用 MTT法测试了 5个单体化合物
(1、2、3、4、7)对 A549、LOVO、HepG2等 3种人肿瘤
细胞株的体外细胞毒活性。结果表明:积雪草酸
(2)和科罗索酸(3)对 LOVO和 HepG2细胞株有一
定的抗肿瘤活性 ,且随着单体化合物极性的增大 ,细
胞毒活性下降。本实验为进一步研究猫人参的抗肿
瘤活性成分奠定了物质基础。
[参 考 文 献 ]
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[本文编辑 ]  尹 茶