全 文 ：石河子北郊温室甜瓜根结线虫鉴定初报
王晓东 ,全俊仁 ,李国英 ,王晓辉
(新疆兵团绿洲农业生态重点实验室 ,新疆石河子　832003)
摘　要:2003 年 3月 5 日 ,从石河子北郊温室中采回具有大量根结的甜瓜根 ,经室内解剖镜检 , 发现根内有大量根
结线虫和卵 , 通过形态观察和测量 、鉴别寄主反应 ,雌虫酯酶同工酶凝胶电脉等方法进行比较鉴定 , 确定为南方
根结线虫(Meoidogyne incognita)。
　　关键词:石河子;甜瓜;根结线虫;鉴定
中图分类号:S436.5　　　文献标识码:A　　　文章编号:1001-4330(2003)06-0374-02
Identification of Root-knot Nematode on Muskmelon in the
North Outskirts Greenhouse of Shihezi
WANG Xiao-dong ,QUAN Jun-ren ,LI Guo-ying ,WANG Xiao-hui
(Key Laboratory of Oasis Ecology Agriculture of Xinjiang Bingtuan Shihezhi 832003 , China)
Abstract:Many muskmelon roots taking on the large quantity of root-knots were collected from a greenhouse
in north of Shihezi city on March 5 ,2003.The samples were observed a lot of Root-knot nematodes and eggs by
dissecting nicroscope.According to morphological characters observation and measurement dates ,differential host re-
action , the causal factor was finally identified to be Meoidogyne incognita.
Key word:Shihezi;muskmelon;root-knot nematode;identifacation
2002年12月初石河子北郊温室内播种了1 534.1 m2 甜瓜 ,2003年 1月中旬开始发病 ,并大量死亡 ,
2月中旬死亡过半 ,3月 5日前去调查 ,挖出病株的根 ,发现上有大量根结 ,经解剖镜检内有大量梨形线
虫雌虫和卵 ,经鉴定为南方根结线虫。
1　症状及发生情况
甜瓜根结线虫病主要危害甜瓜的根部 ,在侧根上形成大小不一的瘤状组织 ,初根色正常 ,表面光滑 ,
后逐渐变为黄褐色 ,严重时全根布满根结。地上部分 ,由于根变畸形并且功能衰退 ,致使植株瘦弱 ,茎蔓
纤细 ,叶片自下而上逐渐黄化 、枯死脱落 ,植株挂果率低 ,果实小 ,严重时整株萎蔫死亡 。经调查整个棚
内发病率达66%,棚内温度 20 ～ 26℃,湿度 55%～ 70%,前作为南方花卉。
2　材料与方法
2.1　材 料　病株和病土采自新疆石河子市北郊温室大棚内 。
2.2　形态学鉴定　挑取根结上的卵块放在有无菌水的培养皿中 ,置于 28℃的光照培养箱中孵化 4 d ,
然后挑取孵化出的二龄幼虫 ,经65℃水浴热死处理 ,用 FAF 固定液固定后 ,以水为浮载剂在光学显微镜
下观察和测量体长 、口针长。
2.3　雌虫会阴花纹的制作观察　将带根结的病根放在有少量自来水的培养皿中 ,置于解剖镜下用拨针
将雌虫拨出。然后在玻片上滴一小滴 45%的乳酸 ,用吸管将雌虫吸起放入乳酸中 ,再用双面刀切取雌
虫的末端 ,用小头毛笔把所切尾端内的组织轻轻地刷去。将会阴花纹的切面朝下放入一张干净玻片上
的甘油滴中 ,整理好会阴花纹后盖上盖玻片 ,最后用封片剂封片晾干 。干后取特征典型的 50份切片在
OLYMPUS-BX50万能显微镜下观察并照相 。
2.4　鉴别寄主反应试验　将采来的含线虫病土与灭菌土 1∶3混合 ,分装在六个大花盆中 ,然后播上棉
收稿日期:2003-09-19
作者简介:王晓东(1975-),男 ,山东人 ,硕士 ,主要从事甜瓜病害研究.
新疆农业科学　2003 ,40(6):374 ～ 375
Xinjiang Agricultural Sciences
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
花 、花生 、西瓜 、番茄 、辣椒 、烟草 、甜瓜。待苗长至 50 d后倒盆 ,洗根检查根结形成情况 。
2.5　雌虫酯酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳　参考吴玉柱 、陈玉芳[ 1 ,2] 中的方法 ,分别挑取根结内产卵
期雌虫 30头 ,放入盛有 1 ml甘油的小型研磨器中 ,冰浴条件下研磨 ,研磨后低温离心 5 min(12 000 r/
min),取 70 μl样品与少量 Loading buffer混匀 ,每穴加样80 μl ,4℃条件下电泳 ,电压 120V。电泳完毕 ,将
凝胶浸在 pH6的磷酸缓冲液中 37℃保温 30 min ,倾出缓冲液 ,倒入染色液 ,室温下过夜 ,倾出染色液 ,用
自来水冲洗掉胶板上的沉淀 ,然后将酶带清晰的胶板保存在 7%的乙酸中 ,并记录和照相 。
3　结果与分析
3.1　形态观察及测量结果
雌虫　体膨大呈梨形或柠檬形 ,有突出的颈部 ,头冠平 ,唇区稍突起 ,略成帽状 ,排泄孔在口针基部
球处 ,双卵巢。
幼虫　线形 ,常在卵中呈“8” ,蜕皮后破卵而出 ,即为二龄幼虫 ,无色透明 ,平均体长 388.9μm(360 ～
430 μm),口针长平均为 11.95 μm(10 ～ 12.5 μm)。尾部尖细 、平滑。
卵　一般排列在胶质的卵巢中 ,一个卵巢中含有大量的卵。卵一般呈乳白色 、半透明 、椭圆形 ,排出
的卵块后期呈淡褐色 。图 1 ,图2 ,图 3
图 1　雌虫形态　　　　　　图 2　二龄幼虫头部形态　　　　　　　　　　图 3　卵
　　　　Figl female　　　　　　　Fig2 2nd stage juvenile headle　　　Fig3 eggs of the Root-knot nematode
3.2　会阴花纹观察　经观察 50份会阴花纹 ,发现它们有一些共同的特征:有明显的高而方的弓 ,线纹
平滑至波浪状 ,侧面处有些分叉 ,但无明显的侧线 ,与 Eisenback等[ 3]描述的南方根结线虫相似 。图 4
3.3　寄主鉴别试验　　　试验表明该根结线虫能够感染烟草 、西瓜 、辣椒和甜瓜 ,与报道的南方根结线
虫(Meoidogyne incognita)[ 3]表现一致。表 1
表 1　鉴别寄主反应
Table1 Differential host reaction to Meloidogyne incognita
种类 烟草 棉花 西瓜 番茄 辣椒 花生 甜瓜
测试结果 + - + + + - +
　　+表示线虫能寄生致病;-表示线虫不能寄生致病
3.4　电泳结果　聚丙烯酰胺凝胶电泳同工酶分析 ,是根结线虫有效的生化分类方法 ,早在 1971年 ,
Dickson等人利用圆盘电泳分析了 4种最常见根结线虫的脱氢酶和水解酶 ,发现 4种最常见根结线虫在
酯酶酶型上有区别 ,酶的表型在群体间稳定 ,不受寄主植物的影响。1990年 Esbenshade &Triantaphyllou
列出了4种最常见种和其它几种重要种的酯酶和苹果酸脱氢酶的谱带类型 ,进一步证明其谱带类型具
有种的特异性。
电泳结果表明 ,只有一条谱带 ,经测量计算谱带迁移率为 0.47 ,与 1990年 P.R.Esbenshade A.C.Tri-
antaphyllou所报道的 4种根结线虫酯酶电泳谱带类型中的南方根结线虫酶谱一致 ,说明此线虫为南方根
结线虫(Meoidogyne incognita)。图 5
4　结论与讨论
4.1　通过症状观察 、形态观察和测量 、鉴别寄主反应 、雌虫酯酶同工酶凝胶电泳分析等 ,确定感染新疆
·375·6期　　　　　　　　王晓东等:石河子北郊温室甜瓜根结线虫鉴定初报　　　　　　　　　　　　
石河子北郊温室中甜瓜的根结线虫为南方根结线虫(Meoidogyne incognita)。
4.2　研究的甜瓜根结线虫为新疆在甜瓜上首次发现。经调查根结线虫之所以在石河子发生 ,主要是由
于引种南方花卉携带虫源造成 。由于其寄主范围很广 ,温室大棚一般土质疏松 、通气良好 ,温湿度与南
方的天气也较为相似 ,在这种环境中很易生存 、寄生 、定殖 。一旦定殖下来 ,其危害甚大 ,可感染寄主范
围内的所有寄主 。因此 ,在花卉引种 、试种时 ,要检测和检疫 ,防止新的病虫侵害传入和大面积流行 。
图 4　会阴花纹　　　　　　　　　　　图 5　酯酶电泳谱型
Fig4　Perined patterns　　　　　　　　　　　Fig5 Esterase phenotype
参考文献:
[ 1] 吴玉柱 ,季延平 ,刘殷 ,等.牡丹根结线虫的鉴定[ J] .森林病虫通讯.2000 ,(6):6～ 7.
[ 2] 陈玉芳 ,吴建宇 ,等.用Phast Systerm电泳仪快速鉴定根结线虫种类[ J] .植物病理学报 , 1998 , 28(1):73～ 77.
[ 3] A.L.泰勒 , J.N.萨塞[ 美] .植物根结线虫(生物学 、分类鉴定和防治)[M] .北京:科学出版社 ,1983.
香梨 、砀山梨组织培养及脱毒快繁技术
宋　梅 ,王淑娟 ,刘振江 ,刘红旗
(1.新疆农七师农科所 ,新疆奎屯　833200;2.新疆乌苏市水利局 ,新疆乌苏　833200)
摘　要:利用组织培养技术 , 研究出了适宜新疆特色品种香梨及其授粉树砀山梨增殖及生根的培养基配方 , 同时　
　　　　　研究了热处理获得其无毒的方法。
关键词:香梨;砀山梨;组织培养;热处理;脱毒快繁
中图分类号:S662.3　　　文献标识码:B　　　文章编号:1001-4330(2003)06-0376-02
1　热处理脱毒
1.1　材 料
盆栽一年生杜梨砧木 ,盆内土质为壤土与炉渣混合基质 ,春季取待脱毒的香梨 、砀山梨接穗切接于
盆栽杜梨砧木上 。秋季放入果窖内越冬休眠 。翌年春季移出窖 ,自然生长一个月后待用 。
1.2　培养室
双层玻璃保温 ,用四联电炉持续加热 ,用感热探头进行温度自动控制 ,用日光灯补充光照。室内同
时悬挂温度计和湿度计。
1.3　方 法
自然生长的盆栽苗新枝长至 5 cm以上时 ,对各新枝在最顶叶片下做好标记 ,4月 10日将盆载苗移
入热处理培养室 。培养室温度升至 38±1℃。调节控温仪 ,使之恒定 ,同时使室内空气相对湿度保持
74%以上 。光照强度保持 2 001 lux 左右 ,每天光照 10 h ,热处理持续 35 d ,2002年热处理 2次。
新疆农业科学　2003 ,40(6):376 ～ 377
Xinjiang Agricultural Sciences