全 文 ：湘西产两种蛇根草中喜树碱含量的比较研究＊
易浪波 ,彭清忠 ,田向荣
(吉首大学生物资源与环境科学学院 ,湖南 吉首　416000)
摘　要:首次以湘西产日本蛇根草(Ophio r rhiza japonica)和广州蛇根草(Ophio r rhiza cantoniensis
H ance)为材料 ,采用乙醇浸取法提取其茎 、叶中喜树碱 ,并用高效液相色谱法分析其含量.报道了湘西产两
种蛇根草中均含有喜树碱 , 日本蛇根草茎 、叶中喜树碱含量分别为 0.00684%、0.00546%;广州蛇根草茎 、
叶中喜树碱含量分别为 0.00275%、0.00153%, 结果表明湘西产日本蛇根草中喜树碱含量较广州蛇根草
高.
关键词:日本蛇根草;广州蛇根草;喜树碱;高效液相色谱
中图分类号:Q946　　文献标识码:A　　文章编号:1008-4681(2007)09-0035-02
　　Wall等[ 1] 1966年首次从喜树皮中分离出一种
新生物碱 ———色氨酸二萜烯类生物碱 ,将其定名为
CPT(ampto thecin),其化学式为 C20H 16O4N 2 ,熔点
264-267 ℃,经临床试验证明这类生物碱具有抗癌
活性.1985年美国约翰 ·霍普金斯大学 Hisang 等
发现喜树碱的抗癌机理与某些作用于拓扑异构酶 Ⅱ
的抗癌抗生素并不相同 ,喜树碱的作用靶是拓扑异
构酶 Ⅰ[ 2] .此后 ,美国 、日本 、加拿大和英国等国家积
极投入喜树碱的开发 ,合成了数百个衍生物进行生
化筛选[ 3] .喜树碱成了续紫杉醇之后的第二个由植
物中提取的重要抗癌药物.近几年 ,在探索新的喜树
碱提取原料上有了新的发现 ,其中热点集中在茜草
科植物蛇根草上.
蛇根草(Ophiorrhiza)为茜草科植物 ,又名鸡冠
草 ,荷包草.我国的传统医学认为蛇根草性味苦寒 ,
有清热解毒之功效[ 4] .近几年研究发现 ,短小蛇根草
中含有抗癌物质喜树碱[ 5] ,但是短小蛇根草中喜树
碱较低 ,并且数量非常稀少 ,资源非常匮乏 ,故不能
用这种植物直接生产喜树碱.本文首次尝试采用乙
醇浸取法对湘西产两种蛇根草茎 、叶中喜树碱进行
提取 ,并对两种蛇根草的喜树碱含量进行对比分析 ,
以期筛选一种新的提取喜树碱的原材料.
1　材料与方法
1.1　植物材料
日本蛇根草(Ophiorrhiza japonica)和广州蛇
根草(Ophiorrhiza cantoniensis Hance)均采自湘西
吉首市的德夯风景区.采集后将材料洗净 ,分茎和叶
进行测定.处理中将茎叶分开 ,茎切成 4mm 的小
段.均置于干燥箱在 50℃下干燥 24小时 ,取出 ,分
别磨成粉末(120目),待用.
1.2　提取方法
于 100ml锥型瓶中精密称取干燥蛇根草茎 、叶
粉 15g ,加入适量 75%的乙醇溶液 ,置于常温下避光
浸取 24小时 ,进行真空抽滤 ,收集抽滤液 ,再加入适
量体积的乙醇溶液 ,重复两次 ,合并三次抽滤液.用
旋蒸仪将抽滤液在 45℃进行蒸发浓缩 ,将产品浓缩
到原体积的 1/3 ,浓缩液用 0.02μm 微孔滤膜再过
滤 ,以备测定.
1.3　喜树碱含量检测
色谱仪为岛津 LC-9A.色谱条件:检验波长:
254nm ,流动相:乙氰:水(3:7),柱温:30℃,流速:
1.0ml/min.定量方法是外标峰面积回归法.
取标准样品的峰面积平均值做纵坐标 ,喜树碱
量为横坐标 ,绘制标准曲线(如图 1所示).得到峰面
积(Y)与喜树碱量(X)的线形回归方程为:Y =
8972.58659 +3739.91397 ＊X , 相关系数 R =0.
99708 ,线性范围 5ng-130ng .
2　结果与讨论
2.1　两种蛇根草茎 、叶中喜树碱含量
实验结果表明 ,湘西产广州蛇根草中茎的喜树
碱含量为 0.0153‰,叶中喜树碱含量为 0.0275‰
(如图 2图 、3所示).日本蛇根草中茎的喜树碱含量
为 0.0549‰,叶中喜树碱含量为 0.0684‰(如图 2
图 3所示).通过比较发现在两种蛇根草中茎比叶的
喜树碱含量均高些;日本蛇根草比广州蛇根草喜树
碱总体含量高些(如表 1所示).
＊ 收稿日期:2007-06-06;修回日期:2007-07-12
作者简介:易浪波(1980-),女 ,湖南涟源人 ,吉首大学生物资源与环境科学学院助教 ,在读硕士.研究方向:植物生理学.
图 1　标准样品色谱图和标准曲线
图 2 两种蛇根草叶的提取液色谱图(A:广州蛇根草, B:日本蛇根草)
图 3 两种蛇根草茎提取液色谱图(A:广州蛇根草 , B:日本蛇根草)
表 1　两种蛇根草喜树碱的含量比较
喜树碱的含量 mg/ kg dw
广州蛇根草 日本蛇根草
茎 0.460 1.640
叶 0.413 1.026
2.2　结论
本研究虽然首次发现湘西产日本蛇根草和广州
蛇根草均含喜树碱 ,但两者喜树碱含量与喜树相比
明显偏低(据报道目前我国喜树果实中喜树碱含量
可达 0.1184%,叶片中可达 0.1584%[ 3]).就含量而
言 ,蛇根草显然不是一种提取喜树碱的优良材料 ,但
由于喜树作为一种乔木树种 ,生长周期长 ,一年的采
料量有限.因此 ,从蛇根草中提取喜树碱仍有前景.
且目前用蛇根草生产喜树碱有新的开发模式 ,通过
发根农杆菌 ,使蛇根草基因重组 ,变成有根形状的植
物培养体(毛状根).毛状根具有良好的生产喜树碱
能力.预计将来的工业生产中 ,使用基因重组技术 ,
可大大提高喜树碱的产量.
本研究结果证明了喜树碱存在于湘西产的两种
蛇根草中 ,开拓了喜树碱生产新的来源 ,为进一步开
发利用奠定了基础.
参考文献:
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[ 4] 福建省中医研究所.福建药物志(第 2册)[ M] .福州:福建科学
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[ 5] 中国植物化工网[ N/OL] .
责任编校:化石
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