全 文 ：[ 收稿日期] 2005-07-05;　[ 修订日期] 2005-11-11
[ 作者简介] 肖宝红(1970-),女,硕士 ,主治医师。
中药猫眼草对小鼠 Lewis肺癌细胞凋亡的影响
肖宝红 ,张春玲 ,王英年 ,孙荣丽 ,武晓
(青岛市中心医院呼吸内科 ,山东 青岛　266042)
[ 摘要] 　目的　探讨中药猫眼草对 C57BL/ 6 小鼠 Lewis 肺癌细胞凋亡的影响。方法　将 Lew is肺癌 C57BL/
6 小鼠分为模型组 、猫眼草 7.5 、15.0、30.0 、60.0 g/kg 组和顺铂组 , 应用流式细胞仪和 TUNEL 法检测猫眼草对
Lew is 肺癌细胞凋亡的影响。结果　猫眼草 30.0、60.0 g/ kg组瘤质量与模型组相比有显著性差异(F=7.90 , q=
4.16、6.21 , P<0.05);猫眼草后 3 组及顺铂组凋亡率与模型组相比有显著性差异;猫眼草 60.0 g/ kg 组及顺铂组凋
亡指数(AI)与模型组相比有显著性差异(t=2.63 、1.93 , P<0.05)。结论　中药猫眼草能诱导肺癌细胞凋亡 ,且该
作用随剂量的增加而增强。
[ 关键词] 　猫眼草;肺肿瘤;细胞凋亡
[ 中图分类号] 　Q954.6-33　　[文献标识码] 　A　　[ 文章编号] 　1008-0341(2006)06-0525-03
EFFECTS OF CHINESE MEDICINE CRESCENT EUPHORBIA ON INDUCED CELL APOPTOSIS IN Lewis LUNG CANCER IN
MICE　X I AOBAO-HONG , Z HANGCHUN-LI NG , WANG Y I NG-N I AN , et al　(Department of Respi ratory Diseas es , Cen-
t ral Hospi tal of Qingdao , Qingdao 266042 , Chin a)
[ ABSTRACT] 　Ob jective　To s tudy induced cel ls apoptosis by Chinese medicine C rescent euph orbia in Lew is lung cancer
(LLC)in mice.　Method s　The C57BL/ 6 mice w ith LLC w ere divided in to M odel , C rescent -eu phorbia 7.5 , 15.0 , 30.0 and
60.0 g/ kg and Cisplatin(DDP)g rou ps.In hibitory rates of each group w ere detected by f low cy tomet ry and TUNEL.　Result s
The inhibitory rates and the apoptotic rates of C rescen t euphorbia in doses of 30.0 , 60.0 g/ kg and DDP group w ere signifi cantly
higher than those of the cont rols(F=7.90;q=4.16 , 6.21;P<0.05).In addit ion , the apoptotic index in C res cen t-eu phorbia
60.0 g/ kg group and DDP g roup w as high er than that of the con t rol group(t=2.63 , 1.93;P<0.05).　Conclusion　Crescent
euph orbia could indu ce the apoptosi s on LLC , and the ef fect increas es w ith th e increase of the dose.
[ KEY WORDS] 　Crescent eupho rbia;lung neoplasms;ap op tosi s
　　为了观察中药猫眼草对肺癌的抑制作用 ,本实
验建立了 Lewis肺癌小鼠模型 ,并采用流式细胞仪
及 T UNEL 法观察猫眼草对肺癌细胞凋亡的影响 。
现报告如下。
1　材料与方法
1.1　药物与试剂
猫眼草全草购自青岛同仁堂大药房 ,产品批号:
040901。细胞凋亡测试盒由 Roche公司提供 。
1.2　猫眼草水提物的制备
猫眼草生药 500 g 加水 5 000 mL ,煮沸20 min ,
连续 2次 ,4层纱布过滤后 ,浓缩至 500 mL ,制成口
服液 ,每 1 mL 含生药 1.0 g ,高压蒸汽杀菌后 ,于
4 ℃冰箱中贮存备用 。
1.3　方法
1.3.1　动物分组 　取 C57BL/6 小鼠 ,随机分为空
白对照组 、模型组 、猫眼草 7.5 、15.0 、30.0 、60.0 g/
kg 组及顺铂组 ,每组 10只。
1.3.2　荷瘤动物模型的建立　取传代后 14 d 的
Lewis肺癌瘤源小鼠 ,脱颈处死 ,固定于鼠板上 ,常
规消毒 ,于超净工作台中 ,从腋部皮下剥取肿瘤组
织 ,剔除纤维包膜和坏死组织 ,在无菌平皿中剪碎 ,
置组织研磨器中加4 ℃生理盐水轻轻研磨 ,过滤 ,制
成瘤细胞悬液 ,调整细胞浓度为 1×1010/ L。除空
白对照组外 ,其他各组小鼠均于右腋部皮下注射上
述瘤细胞悬液 0.2 mL 以建立模型 。
1.3.3　给药方法　从接种瘤细胞次日开始猫眼草
各组以 7.5 、15.0 、30.0 、60.0 g/kg 猫眼草灌胃给
药 ,连续12 d;顺铂组每日腹腔注射顺铂 1 mg/kg ,
每天1次 ,连续 7 d。每天观察小鼠饮食及肿瘤生长
情况。末次灌胃给药后 24 h ,小鼠称质量 ,处死。
1.4　观察指标
观察各组瘤质量 、抑瘤率 、细胞凋亡率 、瘤组织
病理学变化及肿瘤细胞凋亡情况 。
2　结　　果
2.1　猫眼草对小鼠 Lew is肺癌细胞增殖的影响
猫眼草 30.0 、60.0 g/kg 组瘤质量与模型组比
较 ,差异有显著意义(F =7.90 , q=4.16 、6.21 , P<
0.05)。猫眼草 30.0 、60.0 g/kg 组抑瘤率较模型组
明显提高。见表 1。
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表 1　各组瘤质量与抑瘤率比较( x±s)
组别 n 瘤质量(m/ g) 抑瘤率(χ%)
模型组 10 1.89±0.56
猫眼草组
　 7.5 g/ kg 10 1.90±0.57 0.584
　15.0 g/ kg 10 1.57±0.37 16.923
　30.0 g/ kg 10 1.27±0.69 32.785
　60.0 g/ kg 10 0.79±0.42 58.255
顺铂组 10 0.74±0.30 60.992
2.2　各组细胞凋亡率比较
模型组 、猫眼草 7.5 、15.0 、30.0 、60.0 g/kg 组
及顺铂组凋亡率分别为 1.19%、9.44%、15.49%、
16.43%、24.37%、15.58%。其中猫眼草后 3 组及
顺铂组细胞凋亡率与模型组比较有明显提高 。
2.3　肿瘤组织病理学变化
模型组癌细胞呈片状或巢状分布 ,细胞生长旺
盛 ,无坏死 。猫眼草 7.5 g/kg 组可见癌细胞生长旺
盛 ,大部分未见明显改变;猫眼草 15.0 g/kg 组癌细
胞生长较旺盛 ,呈片状分布 ,可见点状坏死;猫眼草
30.0 g/kg 组可见癌细胞核固缩 、小片状坏死;猫眼
草 60.0 g/kg 组可见大片癌细胞核固缩 、碎裂 、坏
死。顺铂组瘤组织内有大片细胞崩解的碎片 ,细胞
核固缩。
2.4　猫眼草对小鼠肿瘤细胞凋亡的影响
模型组 、猫眼草 30.0 、60.0 g/kg 组及顺铂组凋
亡指数分别为(0.79±1.60)%、(4.00±7.15)%、
(5.93±5.96)%、(7.07±10.15)%,猫眼草60.0 g/
kg 组及顺铂组的凋亡指数与模型组相比有显著性
差异(t=2.63 、1.93 , P<0.05)。
3　讨　　论
肺癌是严重危害人类身体健康的常见癌症之
一。其治疗仍以手术 、化疗 、放疗与生物治疗为主 ,
但有其局限性和明显的毒副作用。近年来大量的研
究表明 ,天然植物中存在具有治疗价值的抗癌药物 ,
天然植物药物以其所特有的低毒 、有效 、无耐药性及
整体调节等多方面的优势 ,在肿瘤治疗中起着越来
越重要的作用[ 1] 。
猫眼草全草化学成分含黄酮类成分 、猫眼草素 、
山柰粉 、槲皮素 、山奈粉-3-单-L 鼠李糖甙及槲皮素-
3-单-L-鼠李糖甙 ,还含有甾醇 、挥发油 、酚类物质 、
有机酸及蜡质等 。有祛寒 、镇咳 、平喘 、拔毒止痒 、利
尿消肿之功。功能主治:散播结 ,杀虫 。近年来 ,开
始了对猫眼草及其提取物的抗肿瘤作用的研究 。
ARISAWA等[ 2] 从猫眼草中提取出黄酮化合物及
一种细胞毒成分 β-peltoboykinoli cacid ,并探讨了 β-
pel toboykinolic acid对体外不同人体癌细胞株的细
胞毒性 ,证明了该细胞毒成分对 Meth-A 小鼠纤维
肉瘤的抗肿瘤作用 。如应用该细胞毒成分和丝裂霉
素 C 及 OR-432联合进行治疗 ,能增强 C57BL/6小
鼠对 B16-BL6小鼠黑瘤的抗肿瘤作用[ 3] 。另外 ,有
泽宗久[ 4] 也从猫眼草中分离出了有抗癌作用的黄酮
类成分。高志良[ 5] 应用大剂量猫眼草治疗早期弥漫
性肝癌取得了满意的疗效。在中国民间 ,已经有用
猫眼草组方来治疗癌症 ,如纵隔肿瘤[ 6] 、食管癌及乳
癌等 ,但相关文献资料对猫眼草的抗癌作用机制报
道甚少 。
顺铂抗瘤谱广 ,目前被临床广泛应用 ,成为当前
最常用的抗癌药物之一 。顺铂对肿瘤细胞的杀伤主
要是由于顺铂能引起肿瘤细胞的生长抑制和诱导细
胞凋亡[ 7] 。细胞凋亡是细胞主动参与的自杀机制 ,
是抗肿瘤药物抑制肿瘤细胞生长的机制之一 ,被视
为评估药物疗效的一项新指标[ 8] 。本实验为观察猫
眼草对肺癌生长的影响 ,采用 C57BL/6小鼠移植性
Lewis肺癌作为模型 ,猫眼草水提物灌胃给药 ,并与
应用顺铂相比较 。结果显示 ,不同剂量猫眼草对小
鼠移植性肺癌有不同程度的抑制作用 , 30.0 以及
60.0 g/kg 组瘤质量 、抑瘤率与模型组比较 ,差异均
有显著意义 。本文结果亦显示 ,随着剂量的增大 ,猫
眼草的抑瘤作用逐渐增强 ,但猫眼草的最大用药量
有待进一步研究 。本实验采用 T UNEL 标记法观
察猫眼草对小鼠肺癌细胞凋亡的影响 。结果显示 ,
猫眼草 60.0 g/kg 组小鼠肿瘤的凋亡指数较模型组
有显著性差异 ,提示猫眼草可通过诱导细胞凋亡而
发挥其抗癌作用。
总之 ,猫眼草对 Lew is肺癌有明显的抑制作用 ,
且猫眼草抑制肺癌细胞的作用随剂量的增加而增
高 ,并有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。
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(下转第 528页)
·526· 齐鲁医学杂志 2006年 12月第 21卷第 6期　Med J Qilu , December 2006 , Vol.21 , No.6
5倍[ 2] 。
妊娠后卒中的发病原因及发病机制复杂多样 。
妊娠缺血性卒中伴有子痫的孕妇 ,部分病人有局灶
性神经功能缺损症状和影像学异常 ,大部分仅表现
为数日至数周的可逆性神经功能缺损和神经影像学
改变 ,而无真正的脑组织缺血性坏死。脑血栓 、脑水
肿发生与脑血管痉挛 、血压快速升高 、血管自动调节
能力丧失和血-脑脊液屏障破坏有关。病理性妊娠
可并发 DIC ,且妊娠也可引起血栓性血小板减小性
紫癜 ,易导致脑深部或皮质梗死 。妊娠伴有绒毛膜
癌时 ,绒毛膜上皮肿瘤细胞侵蚀脑血管 ,易造成局部
血栓形成 ,如果栓子脱落既可以引起 TIA ,也可形
成脑栓塞 。此外 ,葡萄胎妊娠 、异位妊娠 、胎盘剥离 、
羊水栓塞等都是造成脑栓塞的原因 。患有风湿性心
瓣膜病 、瓣膜修补术后的妊娠妇女 ,易患细菌性心内
膜炎 ,易导致栓塞性疾病;而妊娠又使患风湿病的危
险性增加 ,可进一步加重脑栓塞的危险性。脑静脉
血栓形成(CV T)多见于妊娠后期 ,这可能与妊娠时
血液高凝状态 ,以及血流淤滞时脑静脉内皮损伤有
关。在一些发展中国家 , CV T 的发生还与产后感
染 、脱水有关。
妊娠后出血性卒中的危险性也明显增加 ,国外
报道相对危险度为 2.5[ 2] 。出血时脑皮质可有多处
出血灶 ,出血灶多见于皮质与白质交界处 ,有的形成
大血肿破入脑室或蛛网膜下隙 。子痫和脑血管畸形
破裂是发生脑出血最常见的原因。子痫死亡者尸检
40%以上有脑实质出血 ,为严重高血压及血管痉挛
导致自动调节控制丧失和血管壁破裂引起 ,凝血功
能障碍也起一定作用。至于妊娠是否增加脑动-静
脉畸形破裂的危险性 ,目前尚有争论。妊娠后蛛网
膜下隙出血主要发生于动脉瘤及动-静脉畸形破裂
的病人。DIAS等[ 3] 曾对动脉瘤破裂导致的蛛网膜
下隙出血病人进行了回顾性调查 ,发现 90%以上病
人发生在妊娠期 。大多数学者认为 ,高龄孕妇动脉
瘤出血的危险性增加 ,妊娠期间 ,血流动力学状态 、
孕妇的生理都发生了变化 ,这些变化对动脉瘤破裂
出血造成了一定影响[ 4 , 5] 。
本研究对 33例病人的临床资料进行了分析与
总结 ,发现如下特点:①妊娠后缺血性卒中与出血性
卒中的患病率相近 。②引起妊娠卒中的病因复杂多
样 ,子痫是主要原因之一 。③高龄孕妇易发生蛛网
膜下隙出血 。④妊娠蛛网膜下隙出血 ,特别是高龄
孕妇蛛网膜下隙出血病死率高 。文献报道 ,蛛网膜
下隙出血为该类病人第 3 位非产科性致死原因[ 5] 。
⑤子痫并发脑出血预后差。
通过对妊娠卒中的分析与总结 ,不但明确了妊
娠与卒中具有密切的相关性 ,对其发病原因 、发病机
制和临床特点也有了进一步的了解 ,子痫与妊娠卒
中的关系更应引起重视。与非妊娠卒中相比 ,妊娠
卒中许多方面 ,包括病因 、发病机制和临床特点都有
很大差异。因此 ,对该类疾病深入了解不仅对正确
诊断和治疗有重要意义 ,同时也为妊娠卒中的预防
提供了有价值的临床资料。
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(本文编辑　厉建强)
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