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猫眼草粗提物对常见植物病原菌抑菌作用的初步研究



全 文 :猫眼草粗提物对常见植物病原菌
抑菌作用的初步研究
陈学文1 ,王麦玲2 ,吴文君2
(1.宁夏大学 化学化工学院 ,宁夏 银川 750002;
2.西北农林科技大学 植保学院 ,陕西 杨凌 712100)
提 要:以乙酸乙酯为溶剂 , 利用超声波技术对猫眼草全草有效成分进行提取 , 采用抑菌圈法室内分别
测定了猫眼草粗提物对 8 种常见的植物病原菌小麦赤霉病菌 、小麦根腐病菌 、番茄早疫病菌 、苹果炭疽
病菌 、西瓜枯萎病菌 、苹果腐烂病菌 、葡萄白腐病菌 、烟草赤星病菌的抑菌作用。结果表明:当在培养基
中加入粗提物质量浓度为 0.01g/ ml时 ,对其中的 5种病原菌的相对抑制率达 70%以上;当质量浓度为
0.005g/ml时 ,对其中 3种病原菌的相对抑制率达 60%以上 , 随着浓度的降低其抑制率显著减弱 ,几乎
没有抑菌活性。
关键词:猫眼草;粗提物;病原菌;抑菌作用
  猫眼草(Enphorbia lunulata Bge.)别名:猫
儿眼(东北 、华北),打碗花 、打盆打碗(河北)。是
大戟科(Euphorbiaceae)多年生草本植物。生于山
坡 、荒野 、田边及河岸向阳处 。分布于黑龙江 、吉
林 、辽宁 、河北 、山东 、内蒙古。长期以来一直作为
民间草药 ,味苦 ,性微寒 ,有毒 。有祛痰 、镇咳 ,散
结消肿 ,拔毒 ,止痒的功能 。用于慢性支气管炎的
咳嗽痰多;外治淋巴结结核 ,癣疱发痒。据中药大
典记载 ,全草含有黄酮类成分 ,临床证明对止咳祛
痰有效 ,已鉴定的有山柰酚 ,槲皮素 ,山柰酚-3-单-
L-鼠李糖甙及槲皮素-3-单-L 鼠李糖甙等 4 种。
种子中含有七叶内酯(Aesculetin)及猫眼草素
(Maoyancaosu),这二种成分有体外抑菌作用[ 1] 。
本试验旨在探讨猫眼草乙酸乙酯粗提物对常见植
物病原菌的抑制作用 ,希望能找到新的抗病资源 ,
为天然药物的农业开发利用提供一定的基础 。
1 材料与方法
1.1 供试菌种
小麦赤 霉病菌 (Fusarium graminearum
Schw);小麦根腐病菌(cochliobolus savus Drech-
sl);番茄早疫病菌(Alternaria solani Jones et
Grou);苹果炭疽病菌(Colletotrichum gloeospori-
oides Penz);西 瓜 枯 萎 病 菌 (Fusariu-
moxysporum f.sp.niveum);苹果腐烂病菌(Cy-
tospora sp);葡萄白腐病菌(Coniel la dipodiwl la
Speg);烟草赤星病菌(Alternaria alternata Fries)
均为西北农林科技大学植物保护学院植物病理学
实验室提供。
1.2 供试材料
猫眼草(Enphorbia lunulata Bge.)采自陕西
临潼 。
1.3 试剂及仪器
乙酸乙酯(工业品经过重蒸)、丙酮(AR)、
PDA培养基(按文献自制)压力蒸汽灭菌锅 ,超声
波仪 ,旋转蒸发仪 ,恒温干燥箱 。
1.4 提取方法
取猫眼草全草干粉 200g ,加入 1 000ml的乙
酸乙酯浸泡24h ,超声波提取 30min ,过滤 ,滤渣如
此重复提取 4 次 ,合并滤液一起用旋转蒸发仪减
压浓缩至膏状 ,然后在恒温干燥箱内控制温度在
40℃下干燥。
1.5 抑菌效力的室内测定
将猫眼草粗提物分别用丙酮配制成质量浓度
为 0.01g/ml 和 0.005g/ml的药液 , 在无菌条件
下 ,将供试菌种用 0.4cm 的打孔器打出一定数量
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繲收稿日期:2004-11-24
作者简介:陈学文 ,男 ,宁夏大学化学化工学院教师 ,现就读与西北农林科技大学植保学院 ,攻读硕士研究生学
位。
的菌饼备用;待培养基溶化后 ,按浓度由高到低用
吸管吸取 1ml药液 ,分别放入培养基内摇匀 ,然后
趁热倒入 10ml于 9cm培养皿中制成薄厚均匀的
平板 ,以 1ml丙酮代替1ml药液做对照;用接种针
小心将菌饼放置在含药培养基上 ,菌丝一面向下 ,
每皿接三块 ,按等边三角形形式排列在皿中央 ,然
后加盖并标记 ,置于 26℃温箱中培养;待培养 72h
后取出培养基 ,用卡尺量菌落直径(十字交叉量取
2次 ,用其平均数)。按下列公式计算抑制率:
菌落直径(cm)=2 次直径平均数-0.4(菌饼的直径)
抑制率(%)=对照菌落直径-处理菌落直径对照菌落直径 ×100%
2 结果与分析
分别以浓度为 0.01g/ml和 0.005g/ml的猫
眼草粗提物对常见植物病原菌做了室内抑菌测
试 ,结果见表 1。
从表 1可以看出 ,当浓度为 0.01g/ml时 ,猫
眼草粗提物对小麦赤霉病菌 、小麦根腐病菌 、番茄
早疫病菌 、苹果炭疽病菌 、西瓜枯萎病菌 、苹果腐
烂病菌 、葡萄白腐病菌 、烟草赤星病菌的抑制率
分别为 96.8%、68.1%、77.8%、77.7%、66.1%、
表 1 不同质量浓度的猫眼草粗提物的抑菌效果
对 照 0.01g/ml 0.005g/ml
菌落直径
(cm)
菌落直径
(cm)
抑制率
(%)
菌落直径
(cm)
抑制率
(%)
小麦赤霉病菌 4.40 0.14 96.8 1.22 72.3
小麦根腐病菌 2.70 0.86 68.1 1.10 37.4
番茄早疫病菌 1.90 0.42 77.8 0.69 63.7
苹果炭疽病菌 2.20 0.49 77.7 0.79 64.1
苹果腐烂病菌 5.53 1.63 70.5 2.71 50.9
葡萄白腐病菌 3.23 0.93 71.2 2.83 12.4
西瓜枯萎病菌 2.83 0.96 66.1 2.83 0.00
烟草赤星病菌 3.77 1.60 57.6 3.67 2.65
  注:菌落直径为 3次试验的平均值。
70.5%、71.2%、57.6%。而当浓度为 0.005g/ml
时 ,猫眼草粗提物只对小麦赤霉病菌 、番茄早疫病
菌 、苹果炭疽病菌有较好的抑菌作用 ,抑菌率分别
为 72.3%、63.7%、64.1%,对其余 5种病菌的抑
菌率均在 60%以下 ,甚至几乎没有抑菌作用。
本试验只是对猫眼草的粗提物进行了抑菌活
性的室内测试 ,至于具体的活性成分还不清楚。
同时 ,本试验对于常见植物病菌的抑制作用只着
眼于对菌丝的抑制效果 ,试验中一些被抑制的菌
丝饼是仅受到抑制 ,还是被杀死以及其作用机制 ,
都需要做进一步研究。另外 ,猫眼草粗提物对这
些植物病菌的孢子萌发的影响尚需探讨 。
参 考 文 献:
[ 1]  江苏新医学院编.中药大词典·上册[ M] .上海:上海科技
出版社 , 1985.
[ 2]  北京医学院编.中草药成分化学[ M] .北京:人民卫生出版
社 , 1980.
[ 3]  吴文君编著.农药学原理[ M ] .北京:中国农业出版社 ,
2000.
[ 4]  高锦明编著.植物化学[ M] .北京:科学出版社 , 2003.
[ 5]  周焱 ,刘暑艳 ,邹丽芳.几种野生植物提取物抑菌作用研究
[ J] .中国野生植物资源.2004 , 23(2):32~ 36.
[ 6]  严赞开 ,胡春菊.橙皮甙的抑菌效果研究[ J] .西北农业学
报 , 2004 , 13(2):87~ 89.
(上接第 38页)
参 考 文 献:
[ 1]  黄铁城 、张爱民主编.杂种小麦研究进展[ M ] .北京:中国
农业出版社 , 1993.
[ 2]  袁虎林 、刘宏伟等.化学杂剂 BAU9403诱导小麦雄性不育
及与小麦不同品种互作效应的研究[ J] .西北农业学报 ,
2002 , 11(3):13~ 16
[ 3]  袁虎林 、刘宏伟等.杂种小麦西杂一号高效制种技研究[ J] .
西北农业学报 , 2003 , 12(4):71~ 74.
[ 4]  陈生斗主编.中国小麦育种与产业化进展[ M ] .北京:中国
农业出版社 , 2002.
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