全 文 ：【中药研究】
椒目药材质量评价方法的研究
徐淑媛１　孙静芸１　许家鸾２　蒋剑平２
１　浙江省杭州创新中药标准化研究所有限公司　浙江 杭州 ３１００５３
２　浙江省中医院　浙江 杭州 ３１００５３
摘要　目的：建立椒目药材质量评价和以亚麻酸为指标的含量测定方法。方法：以浸出物、椒目油总
量、及亚麻酸含量为评价指标，亚麻酸采用甲酯化法，ＧＣ色谱条件：弹性石英毛细管柱、程序升流
量、进样口温度２２０℃，检测器温度２２５℃。结果：以乙醇的浸出物平均为１９．１３％，以氯仿索氏提取
的油脂总量平均为２１．３５％，椒目油中含亚麻酸平均为１７．７９％。结论：该方法稳定、合理、可行。
关键词　椒目　质量评价　亚麻酸　气相色谱
　　椒目为芸香科花椒属植物花椒 （Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ
ｂｕｎｇｅａｎｕｍ　Ｍａｘｉｍ）的干燥成熟种子［１］，我国大部分
地区均有分布，收载于四川、山东、河南、甘肃等地
方中药材标准。椒目味苦、辛，性寒，有小毒；有利
水、平喘之功效，临床用于治疗水肿胀满，痰饮喘逆
等症，其主要平喘有效成分亚麻酸存在于椒目油中。
国内外学者虽然对花椒属植物研究已有不少报
道［２］，但对椒目质量评价和以亚麻酸为指标的含量测定
方法未见报道。我们在研究临床用药 “椒枝软胶囊”的
过程中，为了选择优质的椒目药材和产地、有效地控制
提取工艺、制定可控的质量标准，结合药理试验结果，
以药材的浸出物、椒目油总量以及椒目油中亚麻酸含量
等为评价指标，进行椒目药材质量研究。
１　仪器与试药
１．１　仪器：Ａｇｉｌｅｎｔ　６８９０气相色谱仪，ＦＩＤ检测器。
１．２　试剂：亚麻酸对照品 （批号：Ｌ２３７６）购自ｓｉｇ－
ｍａ公司，其他试剂均为分析纯级别。
１．３　药材：四川椒目购于浙江省杭州地区萧山药材
公司，河南、山东椒目由浙江省中医院采集，均经由
浙江中医药大学药学院资源鉴定教研室姚振生教授鉴
定为芸香科花椒属植物花椒 （Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ　ｂｕｎｇｅａ－
ｎｕｍ　Ｍａｘｉｍ）的干燥成熟种子。
２　方法与结果
２．１　浸出物：取本品药材适量，粉碎，过二号筛，
取约４ｇ，精密称定，按 《中国药典》２００５年版一部
附录ⅩＡ浸出物冷浸法测定，以乙酸乙酯、丙酮、乙
醚、乙醇为溶剂进行浸出物含量考察，结果其浸出物
含量分别为１５．９６％、１４．９７％、１６．８８％、１８．９８％，
即以乙醇浸出物量最多，故采用乙醇为溶媒。
２．２　油脂总量测定：分述如下。
２．２．１　提取方法的选择：取 “２．１”项下供试品约３
～５ｇ，精密称定，采用冷浸２４ｈ、热提２ｈ进行提取方
法考察，见表１。结果：热提法油脂得率较高，故采
用热提法提取油脂。
表１　不同提取方法提取油脂总量检测结果 （％）
溶剂 冷浸 热提
乙酸乙酯 １５．９６　 １８．３７
丙酮 １４．９７　 ２１．９８
乙醚 １６．８８　 １９．９８
２．２．２　不同提取溶剂的考察：取 “２．１”项下供试品
约１ｇ，精密称定，采用索氏提取法以不同溶剂提取
２ｈ，挥干溶剂，于Ｐ２Ｏ５ 干燥２４ｈ，称重，计算油脂
总量，见表２。结果：氯仿提取油脂总量最高，故选
用氯仿。
表２　不同溶剂提取油脂总量检测结果 （％）
溶剂 石油醚 乙酸乙酯 丙酮 乙醚 正己烷 氯仿
得量 ２１．２３８　１８．３７４　２１．９７７　１９．９８４　２０．６３４　 ２２．２３８
２．２．３　不同提取时间的考察：取 “２．１”项下供试品约
１ｇ，精密称定，采用索氏提取法，以氯仿为提取溶剂，
分别考察１ｈ、２ｈ、３ｈ、４ｈ、５ｈ的提取率。结果，在１～
５ｈ内其提取油脂总量差异不大，故确定提取时间为１ｈ。
２．２．４　椒目油总量测定：取不同产地、不同批次药材适
量，粉碎，过二号筛，各取约１ｇ，精密称定，用氯仿
３５ｍｌ索氏提取１ｈ，挥干溶剂，于Ｐ２Ｏ５ 干燥２４ｈ，称重，
计算椒目得油量。结果，平均得油量为２１．３％。
３　椒目油中亚麻酸含量测定
３．１　色谱条件与系统适应性试验［２－４］：弹性石英毛细
管柱 （６０ｍ×３５０μｍ，０．５μｍ）ＨＰ－ＩＮＮＯＷＡＸ；程
序升流量，载气 （Ｎ２）初始１ｍｌ／ｍｉｎ，保持８ｍｉｎ，
·３８６·浙江中医杂志２０１２年９月第４７卷第９期
以１０ｍｌ·ｍｉｎ－２升至３ｍｌ／ｍｉｎ，保持１０ｍｉｎ；氢气
４０ｍｌ／ｍｉｎ；空气４００ｍｌ／ｍｉｎ；分流比５０∶１；进样口
温度：２２０℃；检 测 器 温 度：２２５℃；恒 温 进 样：
２２５℃。理论板数按亚麻酸甲酯峰计应不低于５０００。
３．２　对照品溶液的制备及标准曲线的绘制：精密称取
亚麻酸对照品，加甲醇制成每１ｍｌ中含５ｍｇ的对照品
溶液。精密吸取对照品溶液１ｍｌ，置１０ｍｌ容量瓶中，
加入０．５ｍｏｌ·Ｌ－１的氢氧化钾甲醇溶液２ｍｌ，于６０℃水
浴中加热３０ｍｉｎ，放冷，加入１５％三氟化硼甲醇溶液
２ｍｌ，于６０℃水浴中加热２０ｍｉｎ，放冷，加入正己烷
２ｍｌ，再加２ｍｌ饱和氯化钠溶液，分取上层液，续用正
己烷萃取３次，合并正己烷并定容至１０ｍｌ，即得。
精密吸取亚麻酸甲酯对照品溶液０．１ｍｌ、０．２ｍｌ、
０．４ｍｌ、０．５ｍｌ、１ｍｌ分别至５ｍｌ容量瓶中，加内标
０．２ｍｌ，用正己烷稀释至刻度，摇匀，各进１μｌ，记录
峰面积，以亚麻酸甲酯与内标的峰面积比值为纵坐
标，浓度为横坐标进行线性回归，得其线性回归方程
为：Ｙ＝０．８６８７Ｘ－０．０２２１，ｒ＝０．９９９８。亚麻酸甲酯
在０．２６１１～２．６１１０ｍｇ／ｍｌ范围内呈良好的线性关系。
３．３　供试品溶液的制备：分述如下。
３．３．１　方法的选择：依据文献报道［３－４］，对亚麻酸采
用甲酯化法。
３．３．２　甲酯化条件的考察：分述如下。
３．３．２．１　皂化时间的选择：取一定量的椒目油，按
“对照品溶液制备”项下操作，分别皂化 １０ｍｉｎ、
２０ｍｉｎ、３０ｍｉｎ、４０ｍｉｎ，测定，计算，结果发现皂化
２０～３０ｍｉｎ比较理想，故选择皂化时间３０ｍｉｎ。
３．３．２．２　皂化温度的选择：取一定量的椒目油，按
“对照品溶液制备”项下操作，分别在２０℃、４０℃、
６０℃、８０℃下皂化，测定，计算，结果发现在６０℃下
皂化比较理想，故选择６０℃进行皂化。
３．３．２．３　皂化试剂量的选择：取一定量的椒目油，
按 “对照品溶液制备”项下操作，分别在不同量的
０．５ＭＫＯＨ·ＭｅＯＨ下皂化，测定，计算，结果发现
在２ｍｌ　０．５ＭＫＯＨ·ＭｅＯＨ溶液下皂化比较理想，故
选用２ｍｌ　０．５ＭＫＯＨ·ＭｅＯＨ溶液皂化。
３．３．２．４　酯化试剂量的选择：取一定量的椒目油，
按 “对照品溶液制备”项下操作，分别在１、２、４ｍｌ
的１５％ＢＦ３·ＭｅＯＨ 溶液中进行酯化，测定，计算，
结果发现取２ｍｌ酯化比较理想。
３．３．２．５　酯化时间的选择：取一定量的椒目油，按
“对照品溶液制备”项下操作，分别酯化 １０ｍｉｎ、
２０ｍｉｎ、３０ｍｉｎ，测定，计算，结果发现酯化２０ｍｉｎ较
理想。
３．３．２．６　 供试品制备条件的确定：取椒目油约
１００ｍｇ，精密称定，分别置 １０ｍｌ容量瓶中，加入
０．５ｍｏｌ·Ｌ－１的氢氧化钾甲醇溶液２ｍｌ，于６０℃水浴
中加热３０ｍｉｎ，放冷，加入１５％三氟化硼甲醇溶液
２ｍｌ，于６０℃水浴中加热２０ｍｉｎ，放冷，即得。
３．４　稳定性试验：取同一批样品溶液，分别在室温
放置０ｈ、０．５ｈ、１ｈ、２ｈ、３ｈ、７ｈ、８ｈ后测定，计算
其峰面积比得其ＲＳＤ为１．６４％。说明，样品溶液在
８ｈ内较稳定。
３．５　精密度试验：吸取同一标准溶液，于不同日期
重复进样６次，记录峰面积，计算标准品峰面积与内
标峰面积比值，分别计算其日间精密度的ＲＳＤ，结果
均小于３％，说明精密度良好。
３．６　重复性试验：取椒目油约１００ｍｇ　６份，精密称
定，按 “供试品溶液的制备”项下操作，测定，结果
每１ｍｇ椒目油平均含０．１８６ｍｇ亚麻酸，其 ＲＳＤ为
１．４７％。
３．７　准确度试验：取椒目油约５０ｍｇ　９份，精密称
定，分别以亚麻酸含量计以１∶０．８、１∶１、１∶１．２
吸取亚麻酸对照品溶液，按 “供试品溶液的制备”项
下操作，测定，计算，结果其平均回收率均在９５％～
１０５％之间，ＲＳＤ均小于３％。
３．８　样品测定结果：取不同批号的样品，按 “供试
品溶液制备”项下操作，进样测定。结果：其平均值
为１７．７９％。
４　讨论
该实验由于检测的脂肪酸含不饱和双键，极易氧
化，故样品甲酯化后应尽快进样检测。本实验对椒目
油进行甲酯化条件考察，结果以６０℃皂化３０ｍｉｎ，再
酯化２０ｍｉｎ较合理。用内标法定量，其精密度、稳定
性、重复性和准确度试验均在合理范围之内，说明此
方法可行。
本实验结果表明，以浸出物、椒目油总量及亚麻
酸含量为评价指标对椒目药材质量控制有一定的参考
意义。
５　参考文献
［１］四川省卫生厅．四川省中药材标准［Ｍ］．成都：四川科学技术
出版社，１９７９：２６２－２６３．
［２］王晓明，扈健，李玲．气相色谱填充柱法同时测定α－亚麻酸和
角鲨烯［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２００６，１６（２）：２１２，２４７．
［３］王文泽，赵余庆，李铣 ．我国１０个产地抗哮喘中药椒目中α－
亚麻酸的含量测定［Ｊ］．亚太传统医药，２００５（４）：７８－８０．
［４］王威，闫喜英，李振宝，等．紫苏子中α－亚麻酸的气相色谱法
测定［Ｊ］．药物分析杂志，２０００，２０（５）：３１６－３１７．
收稿日期　２０１２－０４－０３
·４８６· 浙江中医杂志２０１２年９月第４７卷第９期