全 文 ：　
　
A　　　　　　　　　　　　　　　　　　　B　　　　　　　　　　　　　　　　　　　C
A.对照品;B.供试品;C.缺黄芩对照品;1.黄芩苷
图 6　百合健脾润肺胶囊 HPLC色谱图
表 2　样品的含量测定结果(n=3)
批号 黄芩苷的含量(mg/粒)
090824 4.50
091020 4.40
100224 4.50
3　讨论
黄芩苷的含量测定试验参考文献[ 1]黄芩项下黄芩苷的含
量测定方法 , 采用流动相甲醇-水—磷酸(47∶53∶0.2), 流
动相乙腈-0.2%磷酸(28∶72),结果黄芩苷采用流动相甲醇
-水—磷酸(47∶53∶0.2)可以基线分离不受其他组分干扰 ,
分离效果好 , 准确度高。
参考文献:
[ 1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[ S] .一部.北京:北京化
学工业出版社 , 2005:58～ 539.
(收稿日期:2011-03-24)
玉葡萄根药材鞣质含量的测定
任永福1 , 刘红斌2
(1.云南省药物研究所制药厂 , 云南 昆明 650111;2.云南省药物研究所 , 云南 昆明 650111)
　　摘　要:目的:建立玉葡萄根药材中鞣质含量的测定方
法。方法:用紫外分光光度法进行测定 , 测定波长为 760 nm。
结果:没食子酸对照品浓度在 1.01 μg/ mL ～ 10.08 μg/m L 范
围内浓度与吸光度线性关系良好(r =0.9997 , n=6), 平均回
收率 97.76%(RSD=2.09%, n=9)样品溶液在显色反应以后
再稳定 30 min , 此后的 90 min 内样品稳定。 结论:该方法稳
定性较好 , 精密度 、重现性及回收率变异系数均在 3%以下 , 方
法准确可靠 , 可用于玉葡萄根鞣质含量的测定。
关键词:玉葡萄根;鞣质;紫外分光光度法
中图分类号:R284 文献标识码:A
文章编号:1007-2349(2011)07-0070-02
玉葡萄根[ 1]为云南地区民间使用的草药 , 具有祛风除湿 、
舒筋活络 、消肿镇痛之功效 , 用于跌打损伤等的治疗 , 是“金
品”痛舒胶囊 、肿痛气雾剂等系列药品使用的药材之一。曾收
载于《中国药典》(1977 年版)、《云南省药品标准》(1996 年
版)。目前标准中仅有鞣质的定性鉴别 , 对其含量测定未见报
道 , 本文参照中国药典[ 2] , 采用紫外分光光度法[3]对玉葡萄根
鞣质的含量测定进行方法学研究 , 以期能对该药材的质量控
制提供技术参考 。
1　实验材料与仪器
1.1　试剂试药　玉葡萄根采自安宁市 、楚雄市和大姚县。没
食子酸对照品(中国药品生物制品检定所 , 批号:110831 -
200302);磷钼钨酸试液(按《中华人民共和国药典》 2005 年版
一部附录Ⅹ ⅤB 配制);干酪素(化学纯);水为重蒸水;提取用
的乙醇为化学纯 ,其他试剂试药为分析纯。
1.2　仪器　UV2501 分光光度计(日本 Shimadzu);天平
(Metle r To ledo)。
2　方法与结果
2.1　鞣质的测定方法
2.1.1　总酚　精密量取供试品溶液 2 m L , 置 25 mL 棕色量
瓶中 , 照标准曲线的制备项下方法 , 自“加入磷钼钨酸试液
1 mL”起 ,加重蒸水 10 mL , 依法测定吸光度 , 从标准曲线中读
出供试品溶液中没食子酸的量(mg), 计算 ,即得。
70 云 南 中 医 中 药 杂 志　　　　　　　　　　2011 年第 32 卷第 7 期DOI :10.16254/j.cnki.53-1120/r.2011.07.042
2.1.2　不被吸附的多酚　精密量取供试品溶液 25 mL ,加至
已盛有干酪素 0.6 g 的 100 m L具塞锥形瓶中 ,密塞 , 置 30 ℃
水浴中保温 1 h ,时时振摇 , 取出 ,放冷 , 摇匀 , 滤过。弃取初滤
液 ,精密量取续滤液 2 m L , 置 25 mL 棕色量瓶中 ,照标准曲线
的制备项下的方法 , 自“ 加入磷钼钨酸试液 1 mL”起 , 加水
10 mL ,依法测定吸光度 , 从标准曲线中读出供试品溶液中没
食子酸的量(mg),计算 , 即得。
糅质的含量计算式:糅质含量=总酚-不被吸附的多酚
2.2　对照品溶液的配制　精密称取没食子酸对照品适量 , 加
水溶解后制成含没食子酸 50.40 μg/ mL 的溶液。
2.3　样品溶液的配制　取安宁药材粉末适量(按品种项下的
规定), 精密称定 , 置 250 m L 棕色量瓶中 , 加 45%乙醇
150 m L , 放置过夜 ,超声处理 10 min ,放冷 , 用重蒸水稀释至刻
度 , 摇匀 ,静置(使固体物沉淀),滤过 , 弃去初滤液 , 精密量取
续滤液 20 m L ,置 100 m L棕色量瓶中 , 用重蒸水稀释至刻度 ,
摇匀 , 即得。
2.4　线性关系考察　精密量取对照品储备液 0.5 、1.0 、2.0、
3.0、4.0、5.0 m L , 分别置 25 mL 棕色量瓶中 , 各加水 11.5、
11 、10、9、8 、7mL ,用 29%碳酸钠溶液稀释至刻度 , 摇匀 , 放置
30 min 以相应的试剂(重蒸水+29%碳酸的溶液)为空白 , 在
760 nm 的波长处测定吸光度 , 以吸光度为纵坐标 , 浓度为横
坐标 , 绘制标准曲线。计算得回归方程为:Y=0.129 2X+
0.000 8(r =0.999 7), Y-对照品吸收度 , X-对照品浓度 , 以
上结果表明该方法在 1.01 μg/ mL ～ 10.08 μg/ mL 范围内线
性关系良好。
2.5　精密度试验　精密吸取上述对照品储备液 2.0 mL , 按
上法操作 , 显色后连续测定 6 次 , 测定结果的 RSD=0.43%,
表明本法精密度良好。
2.6　重复性试验　取同批样品 ,按鞣质测定方法分别进行供
试品溶液的制备并测定 , 重复 6 次。测定结果的 RSD =
1.18%,表明本法重复性良好。
2.7　稳定性试验　取样品溶液在 30 min 反应稳定后的 0、
10 、20、30、60 min 时间点进行考察 , 测定结果的 RSD 为
0.91%,结果显示样品溶液在 30 min 反应稳定后的 1 h 内
稳定。
2.8　回收率试验　取玉葡萄根 9 份样品精密称定 ,分置已编
号为 1 ～ 9 的 250 m L棕色容量瓶中 , 在 1 、2 、3 号棕色容量瓶
中分别加入浓度为 3.45 mg/ mL 的没食子酸对照品溶液各
8 mL , 在 4、5、6 号棕色容量瓶中分别加入浓度为 3.45 mg/
mL 的没食子酸对照品溶液各 10 m L , 在 7、8、9 号棕色容量瓶
中分别加入浓度为 3.45 mg/ mL 的没食子酸对照品溶液各
12 m L ,然后按确定好的样品处理方法同法处理 ,将处理好的
样品溶液按含量测定方法同法测定 , 计算回收率 , 结果平均回
收率为 97.76%, RSD为 2.09%,表明本法回收率良好。
2.9　3个产地玉葡萄根药材鞣质含量测定　按含量测定方法
测定 3个产地样品的鞣质含量 ,含量按干燥品计 , 测定结果见
表 1。
表 1　3个产地样品鞣质测定结果
样品来源 测定次数 鞣质含量平均值/ % 按干燥品计含量/ %
安宁 3 6.70 7.49
楚雄 3 8.31 9.30
大姚 3 7.26 8.14
3　小结
考虑到玉葡萄根中的鞣质成分与结构的复杂性和仪器使
用的可行性 , 因此用紫外可见分光光度法测玉葡萄根中的鞣
质含量。 在测定波长为 760 nm , 对照品浓度为 1.01 ～
10.08 μg/ mL的范围内 , 浓度与吸光度线性关 系良好 ,
r =0.999 7;平均加样回收率为 97.76%, RSD =2.09%。此
方法测定玉葡萄根中的鞣质含量方法简便易行 , 结果相对准
确可靠 , 重现性好。故此研究结果可为研究玉葡萄根药材的
质量控制方法提供技术参考。
药典要求的碳酸钠浓度为 29%, 有文献报道可以选用
20%碳酸钠。试验比较了 35%、29%、20% 3 种浓度下同一对
照品溶液同一操作条件下的的吸收度 , 发现当使用 20%碳酸
钠来测定时 , 吸收值偏低。 35%碳酸钠下的吸收和 29%碳酸
钠下的吸收接近 , 故仍采用药典规定浓度的碳酸钠。值得注
意的是 , 在配制碳酸钠溶液时 , 选用的是含有结晶水的碳酸
钠 , 如果要用无水碳酸钠 , 需要进行换算。否则在测定时会造
成溶液极易析出晶体的情况。
试验比较了 10 、20 、30、40 和 50 min 时间段 , 同一对照品
溶液同一操作条件下的吸收度。结果显示 30 min 后反应趋
于稳定 , 故显色时间确定为 30 min。
参考文献:
[ 1] 云南省药材公司.云南中药资源名录[ M] .北京:科学技术出版
社 , 1993:311.
[ 2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[ S] .一部.北京:化学工
业出版社 , 2010:附录 XB , 62.
[ 3] 沙美.紫外分光光度法测定次水杨酸铋中水杨酸的含量[ J] .中国
药师 , 2010 , 13(5):751～ 752.
(收稿日期:2011-02-22)
712011 年第 32 卷第 7 期　　　　　　　　　　云 南 中 医 中 药 杂 志