全 文 ：74 林业科技开发 2013 年第 27 卷第 2 期
3 结 论
以桉树浆纤维素微纳纤丝为改性剂，改善了三聚
氰胺树脂浸渍纸的耐磨性和热学性能，扩大了微纳纤
丝的使用范围。通过试验得到以下结论:微纳纤丝的
添加量为 15%时，DSC 图谱上第 3 个吸热峰的峰面
积最大，说明它与三聚氰胺浸渍液反应过程热量变化
(热焓)最大，参与反应的物质量更多。并且纤维素
微纳纤丝添加量为 15%时，三聚氰胺浸渍纸饰面材
料的耐磨性显著提高，而添加量为 20%时，耐磨性下
降。这是由于过多的添加量使微纳纤丝在三聚氰胺
浸渍液中分散不均匀，从而影响了浸渍纸饰面材料的
耐磨性。对复合体系的傅里叶红外图谱的分析表明，
纤维素微纳纤丝已经进入三聚氰胺甲醛树脂体系。
微纳纤丝的均匀分散对于提高三聚氰胺甲醛树脂浸
渍液的耐磨性是必要的。
参考文献
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( 责任编辑 葛华忠
櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒
)
doi:10． 3969 / j． issn． 1000－8101． 2013． 02． 020
超声萃取－柱色谱法分离鉴定乌桕叶抑螺活性成分
罗坤水1，余能富1，邹峥嵘2* ，徐林初1
(1．江西省林业科学院，南昌 330032;2． 江西师范大学生命科学学院)
摘 要:根据笔者前期研究结果，乌桕叶乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位具有较强的抑螺活性。为分离鉴定乌桕
叶中的抑螺活性物质，采用超声波辅助溶剂提取、溶剂分步萃取和多种柱层析联用等方法从乌桕叶乙醇提取物中
分离得到多个单体化合物，依据化合物的理化性质和波谱学特征，鉴定出 3 个黄酮类化合物，分别为山柰酚、槲皮
素和异槲皮苷，均为首次从该植物中得到。
关键词:乌桕;抑螺成分;超声萃取; 柱色谱法;黄酮
收稿日期:2012－08－29 修回日期:2012－11－11
基金项目:国家科技支撑项目“林业血防生态安全体系构建技术研究
与示范”(2011BAD38B07) ;国家林业局建设项目“江西省鄱阳湖抑螺
防病林试验示范区建设”(林计批字［2007］527 号)。
作者简介:罗坤水(1971 －) ，男，副研究员，主要从事森林培育与林业
血防研究。通讯作者:邹峥嵘，男，副教授。E-mail:jxlkylks@ sina． com
Separation and determination of molluscicidal composition from Sapium sebiferum by supersonic extrac-
tion-column chromatography∥LUO Kun-shui，YU Neng-fu，ZOU Zheng-rong，XU Lin-chu
Abstract:Based on previous research，ethyl acetate extraction of ethanol extract of Sapium sebiferum had strong mollusci-
cidal activity． In order to separate and determine molluscicidal composition from Sapium sebiferum leaves，supersonic ex-
traction，fractional solvent extraction and column chromatography were used to separate many constituent． According to
their physicochemical properties and spectroscopic characteristics，three flavonoids were seperated，and were identified as
kaempferol，quercetin，isoquercitrin． Three compounds were all separated from this plant．
Key words:Sapium sebiferum;molluscicidal composition;supersonic extraction;column chromatography;flavonoid
First author’s address:Jiangxi Academy of Forestry，
Nanchang 330032，China
乌桕(Sapium sebiferum)系大戟科乌桕属落叶
乔木，是我国特有的木本油料树种［1］。我国乌桕资
技术开发 欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗
林业科技开发 2013 年第 27 卷第 2 期 75
源丰富，变异类型多，仅江西栽培变异类型就有 10 余
个。乌桕性凉味苦，以叶、根、皮入药，具有清热解毒、
消肿、利水通便、消积、杀虫等功效，是一种重要的中
药［2］。有关研究表明，乌桕是一种抑螺效果较好的
植物材料，乌桕叶的水浸液对钉螺具有较强的毒杀活
性［3］。笔者在前期研究中，对采自江西的 10 个乌桕
变异类型和红叶桕乙醇提取物的灭螺活性采用活体
毒杀法进行了筛选，确定了灭螺活性较强的 3 个品
种［4］。本研究旨在对抑螺活性较强的赣丰 1 号乌桕
叶中的次生代谢产物进行分离纯化和结构鉴定，为分
析乌桕抑螺物质和作用机理提供理论依据。
1 材料与方法
1． 1 材料与试剂
试验用材料为赣丰 1 号乌桕无性系，采自江西广
丰乌桕种植示范基地。
试验试剂:95%乙醇(AＲ) ，福晨化学试剂厂;甲
醇(AＲ) ，天津市永大化学试剂开发中心;氯仿(AＲ) ，
天津市永大化学试剂开发中心;乙酸乙酯(AＲ) ，成都
市科龙化工试剂厂;254 nm硅胶预制薄层板，青岛海
洋化工厂;层析用聚酰胺为上海摩速公司产品;Seph-
adex LH－20 为 Mitsubishi Kasei 公司产品;氘代试剂
为 Merck公司产品。
1． 2 仪器与设备
Ｒ－201 型旋转薄膜浓缩蒸发仪，郑州杜甫仪器
厂生产;SHB－C型循环水真空泵，郑州杜甫仪器厂生
产;DHG－9240A 型电热恒温鼓风干燥箱，上海精密
实验设备有限公司生产;SG250H 型超声振荡洗涤
器，上海冠特超声仪器有限公司生产;HH－6 型数显
恒温水浴锅，国华电器厂生产;ZF －1 型三用紫外线
分析仪，厦门东星电子仪器厂;YANACO 熔点测定
仪，日本柳本公司;Bruker AVANCE －400 超导核磁共
振仪，瑞士 Bruker公司。
1． 3 试验方法
1． 3． 1 乌桕叶提取物的制备
乌桕叶处理:乌桕叶样品采回实验室后，用清水
洗净，在室内阴凉通风处自然风干后粉碎，过 20 目
筛，得乌桕叶干粉，置室温下保存备用。取乌桕叶干
粉 5． 13 kg，用 95%乙醇溶液浸泡提取 3 次。每次提
取均在浸泡 24 h 后再超声处理 30 min，再冷浸提取
24 h。合并 3 次的提取液，采用旋转减压薄膜蒸发浓
缩得到流浸膏 820． 6 g。
1． 3． 2 乌桕叶萃取物的制备
取上述流浸膏 202． 3 g 加入适量蒸馏水均匀分
散得到混悬液，使得提取物均匀悬浮分散在水中。按
照极性大小，依次以石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁
醇萃取，每种溶剂均分别萃取 3 次。回收溶剂，得石
油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物。
1． 3． 3 黄酮苷类化合物的分离与纯化
取乙酸乙酯萃取部位 119． 0 g，甲醇溶解，适量的
硅胶拌样均匀，50℃水浴挥干，进行硅胶柱层析分离，
氯仿 /甲醇(V /V)9∶ 1 ～ 5∶ 3混合溶剂梯度洗脱，每 200
mL一个馏分，采用薄层检测方法检测合并 Ｒf值相似
的馏分。
1． 3． 4 化合物的理化性质和波谱数据测定
熔点用 YANACO熔点测定仪测定;1H－NMＲ，13 C
－NMＲ用 Bruker AVANCE －400 超导核磁共振仪在
室温条件下测定，溶剂为氘代溶剂 DMSO－d6，TMS 为
内标。
2 结果与分析
2． 1 乌桕叶乙醇提取物的得率
采用超声辅助溶剂提取的方法，既避免了高温回
流提取过程中高温对化学成分的破坏作用，又大大提
高了提取物的得率，使乌桕叶中的化学成分被充分地
提取出来，提取物得率可以达到 15． 98%。
2． 2 乌桕叶总提取物的萃取分离
经过萃取以后，乌桕叶总提取物中的各种化学成
分均按照极性的大小而被分离，得到石油醚萃取物
2． 583 7 g，乙酸乙酯萃取物 119． 596 7 g，正丁醇萃取
物 37． 525 1 g，给后续的分离纯化带来了很大的便利。
2． 3 乌桕叶中的黄酮苷类化合物
乙酸乙酯萃取物经过硅胶柱反复柱层析分离纯
化和重结晶，得到了多个高纯度的单体化合物。经过
对化合物理化性质和波谱数据的测定，鉴定它们的化
学结构。
化合物 1:黄色粉末，m． p． ＞ 300℃。三氯化铝反
应呈阳性，提示化合物 1 可能为黄酮类化合物。1H －
NMＲ(DMSO－d6，400 MHz) :8． 05(2H，d，J = 9． 2 Hz，
H－2，6) ，6． 87(2H，d，J = 9． 2 Hz，H－3，5) ，6． 48(1H，
d，J = 2． 0 Hz，H－8) ，6． 20(1H，d，J = 2． 0 Hz，H－6)。
13C －NMＲ(DMSO －d6，100 MHz)δ:177． 2(C －4) ，
165． 8(C－7) ，160． 6(C－5) ，158． 5(C－4) ，158． 1(C－
9) ，148． 3(C －2) ，137． 2(C －3) ，130． 9(C －2，6) ，
124． 0(C－1) ，116． 2(C－3，5) ，104． 7(C －10) ，99． 6
(C－6) ，94． 7(C－8)。以上波谱数据与文献［5］山柰
酚基本一致。将化合物 1 与山柰酚标准品进行 TLC
检测，在不同的展开剂系统中，两者的 Ｒf值及显色行
欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗 技术开发
76 林业科技开发 2013 年第 27 卷第 2 期
为均相同，故将化合物 1 定为山柰酚(Kaempferol;3，
5，7，4’－Tetrahydroxyflavone;C15H10O6
帨帨帨
師師師
師師師
)。
OH
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帪帪帪
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O
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帨帨帨
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OH
OH

OH
山柰酚化学结构式
化合物 2:黄色粉末，m． p． ＞ 300℃。三氯化铝反
应呈阳性，提示化合物 2 可能为黄酮类化合物。1H －
NMＲ(DMSO－d6，400 MHz) :7． 69(1H，d，J = 2． 0 Hz，
H－2) ，7． 49(1H，dd，J = 2． 0，8． 0 Hz，H －6) ，6． 90
(1H，d，J = 8． 0 Hz，H－5) ，6． 38(1H，d，J = 2． 0 Hz，H－
8) ，6． 21(1H，d，J = 2． 0 Hz，H －6)。13C －NMＲ(125
MHz，DMSO－d6)δ:161． 3(C－9) ，156． 7(C－5) ，148． 2
(C－4) ，145． 5(C －3) ，122． 3(C －1) ，120． 2(C －
6) ，116． 1(C －5) ，115． 5(C －2) ，103． 4(C －10) ，
93． 8(C－8)。以上波谱数据与文献［6］的槲皮素基
本一致。将化合物 2 与槲皮素标准品进行 TLC 检
测，在不同的展开剂系统中，两者的 Ｒf值及显色行为
均相同，故将化合物 2 定为槲皮素(Quercetin;2，(3，4
－Dihydroxyphenyl)－3，5，7－trihydroxy －4H －1－benzo-
pyran －4－one;C15H10O7
師師師

師師師 帪帪帪
)。
OH
OH

O
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師師師
OH
OH
HO
槲皮素化学结构式
化合物 3:黄色粉末，m． p． 180 ～ 182℃。三氯化
铝反应和Molish反应均显阳性，表明化合物 3 为黄酮
苷类化合物。1H －NMＲ(DMSO －d6，400 MHz) :7． 59
(1H，d，J = 2． 0 Hz，H－2) ，7． 60(1H，dd，J = 2． 0，9． 0
Hz，H－6) ，6． 79(1H，d，J = 9． 0 Hz，H－5) ，6． 42(1H，
d，J = 2． 0 Hz，H－8) ，6． 21(1H，d，J = 2． 0 Hz，H－6) ，
5． 47(1H，d，J = 7． 0 Hz，Glu，H －1)。13 C －NMＲ(100
MHz，DMSO－d6) :94． 5(C －8) ，99． 7(C －6) ，104． 4(C
－10) ，116． 0(C －2) ，117． 2(C －5) ，122． 0(C －1) ，
122． 4(C－6) ，134． 2(C －3) ，146． 2(C －3) ，145． 0(C －
4) ，156． 8(C －9) ，157． 3(C －2) ，162． 2(C －5) ，164． 9
(C－7) ，178． 6(C －4) ，101． 2(C －1) ，78． 5(C －5) ，
77． 4(C－3) ，74． 3(C －2) ，70． 6(C －4) ，61． 9(C －
6)。以上波谱数据与文献［7］的异槲皮苷基本一
致，故将化合物 3 定为异槲皮苷(Isoquercitrin;Quer-
cetin －3－O－β－D－glucopyranoside;C21H20O12)。
异槲皮苷化学结构式
3 讨 论
(1)乌桕根皮中含有种类较多的黄酮及其苷类
化合物，并从中分离得到多种化合物［8－9］。本研究分
离得到的 3 个化合物:山柰酚(Kaempferol;3，5，7，4
－ Tetrahydroxyflavone;C15 H10 O6)、槲皮素(Quercetin;
2，(3，4－Dihydroxyphenyl)－3，5，7－trihydroxy －4H －1－
benzopyran －4－one;C15 H10 O7)、槲皮苷(Isoquercitrin;
Quercetin －3－O－β－D－glucopyranoside;C21H20O12) ，为
首次从该种植物中分到。
(2)黄酮类物质在许多植物中是主要的抑菌杀
虫成分。本研究从抑螺活性较强的乌桕提取物乙酸
乙酯萃取部位中分离纯化到种类较多黄酮类化合物，
表明乌桕中所含有的黄酮类化合物可能是其抑螺作
用的物质基础之一。在后续的研究中，将进一步研究
黄酮类化合物的抑螺活性机理，为新型抑螺药物的开
发提供结构新颖的先导化合物。
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( 责任编辑 葛华忠)
技术开发 欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗