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栗壳提取物抗氧化活性研究



全 文 :  辽宁大学学报
   自然科学版
第 35卷 第 4期  2008年
JOURNALOFLIAONINGUNIVERSITY
     NaturalSciencesEdition
      Vol.35 No.4  2008
栗壳提取物抗氧化活性研究
王 新* ,刘 彬 ,孟凡瑞 ,王 欣 ,李 丽
(辽宁大学 药学院 ,辽宁 沈阳 110036)
摘 要:以水为溶剂从栗壳中提取得到栗壳提取物 CSE.以猪油和芝麻油作为底物 , 采用烘箱贮藏法测定
油脂的 POV值 ,研究 CSE对油脂的抗氧化活性.以 Fenton反应为产生· OH模型 、邻苯三酚自氧化反应为
产生 O2 -·模型 ,用紫外和可见分光光度法试验了 CSE对模型中产生的· OH和 O2 -· 的清除作用.结果
表明:CSE具有一定的抗油脂氧化能力;CSE具有良好的清除 · OH作用 , 且清除作用与浓度呈正相关性 ,
EC
50
为 80.3 mg· L-1;CSE对 O
2
-·没有显著的清除作用.
关键词:栗壳提取物;抗氧化;油脂;羟自由基;超氧阴离子自由基.
中图分类号:TQ460.3  文献标识码:A  文章编号:1000-5846(2008)04-0348-03
  栗壳为壳斗科植物栗(CastaneaMolissima)
Bl.的外果皮 ,性味甘涩 、平 、无毒 ,治反胃 、鼻衄 、
便血[ 1] .近年来 ,对栗壳的研究报道较少 ,仅有人
对其化学成分[ 2]及其提取物的抗菌抗炎作用和
对胃肠平滑肌运动的影响等生物活性[ 3 ~ 4]进行了
研究.本文研究了栗壳提取物对油脂的抗氧化活
性及其对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作
用 ,为评价其药理作用提供依据.
1 材料与方法
1.1 仪器 、材料与试剂
UV-2501PC型紫外 -可见吸收光谱仪(日本
岛津公司);SHB-Ⅲ型循环水式多用真空泵(郑州
长城科工贸有限公司);101-A型数显式电热恒温
干燥箱(上海阳光仪器有限公司);DF-101S型集
热式恒温加热水浴槽(巩义市峪予华仪器厂);PHS
-3C型精密数显酸度计(上海天达仪器有限公
司).
板栗:购于辽宁省丹东市宽甸满族自治县某
农贸市场.
芝麻油:新榨 ,滤过后待用;猪油:市售新鲜猪
板油熬制而成;所用试剂均为国产分析纯 ,使用前
未经处理.
1.2 实验方法
1.2.1 栗壳提取物的提取
取市售板栗 ,将其割口后放入烘箱 ,调 80 ℃
左右烘至壳肉分离后剥壳 ,然后将栗壳粉碎 ,烘
干.取 10 g栗壳碎末放入 250 mL圆底烧瓶中 ,加
150mL蒸馏水 ,加入少量氢氧化钠 ,使其 pH=8.
5左右 ,在 90℃恒温下浸提 3 h,抽滤.滤渣用与
第一次浸提相同的条件下再浸提一次 ,经抽滤分
离后 ,合并两次的滤液.滤液经减压蒸馏 ,干燥得
栗壳提取物 CSE.
1.2.2 对油脂抗氧化活性的测定
取 50g的猪油和芝麻油各数份 ,分别加入一
定量的 CSE,充分混匀后 ,置于 60 ℃恒温箱中避
光保存 ,每 24 h搅拌 1次 ,并交换它们在恒温烘
箱中的位置 ,定期取样测定过氧化值(POV),同
时进行空白试验 ,以 POV值的大小衡量 CSE的抗
氧化活性 ,每个样品重复三次 ,取平均值.POV值
的测定按照 GB/T5009.37-1996方法进行.
1.2.3 对羟自由基的清除作用
* 作者简介:王 新(1976-),男 ,辽宁东港人 ,硕士 ,辽宁大学讲师 ,从事天然产物活性成分研究.
 基金项目:辽宁省教育厅科学研究计划资助(05L162)
 收稿日期:2008-03-26
CSE对羟自由基的清除作用测定按文献 [ 5]
方法进行.
1.2.4 对超氧阴离子自由基的清除作用
CSE对超氧阴离子自由基的清除作用测定按
文献 [ 6]方法进行.
2 结果与讨论
2.1 CSE添加量对油脂抗氧化效果的影响
在猪油和芝麻油中分别加入占油脂重的
0.01%、0.03%和 0.05%的 CSE,进行抗氧化实
验 ,实验结果见图 1和图 2.由图 1可知 ,在猪油
中加入不同量的 CSE,其 POV值均比空白值低 ,
说明 CSE对猪油具有一定的抗氧化作用 ,并且随
着 CSE添加量的增加 ,其抗氧化性越好.由图 2
可知 ,不同量的 CSE对芝麻油也具有一定的抗氧
化作用 ,但其抗氧化效果与添加量之间没有明显
的量效关系.
2.2 CSE与其他抗氧化剂对油脂抗氧化效果的
对比
在猪油和芝麻油中分别加入相同量的 CSE
及抗氧化剂 VC和特丁基对苯二酚(TBHQ),进行
抗氧化实验 ,实验结果见图 3和图 4.可见 ,在对
新鲜猪油的抗氧化实验中 , TBHQ的抗氧化能力
最高 , VC的抗氧化能力最弱 , CSE的抗氧化能力
介于 TBHQ与 VC之间;在对新鲜芝麻油的抗氧
化实验中 , CSE的抗氧化能力与 VC近似 ,均比
TBHQ弱.说明 CSE对动物油的抗氧化能力要优
于对植物油的抗氧化能力.
2.3 CSE对自由基的清除作用
以苯甲酸和甘露醇作对比 , 研究了 CSE对
Fenton反应产生的 · OH的清除作用 ,实验结果
见表 1.可见 CSE对· OH有一定的清除作用 ,且
清除作用与 CSE的浓度呈正相关性.对 · OH达
50%清除率所需浓度(EC50)为 80.3 mg· L-1.
CSE对· OH的清除能力强于甘露醇 ,但比苯甲
酸弱;以 VC作对比 ,研究了 CSE对邻苯三酚自氧
表 1 不同抗氧化剂对羟自由基的清除作用
苯甲酸 甘露醇 CSE
浓度 /
(mg· L-1) E/%
EC
50
/
(mg· L-1)
浓度 /
(mg· L-1) E/%
EC
50
/
(mg· L-1)
浓度 /
(mg· L-1) E/%
EC
50
/
(mg· L-1)
12.5 44.2 200 43.5 32.5 20.1
25.0 55.7 19.4 300 47.1 312 65.0 43.5 80.3
50.0 67.5 400 55.8 97.5 62.2
75.0 82.7 500 64.3 130.0 76.4
349     第 4期        王 新 ,等:栗壳提取物抗氧化活性研究
化反应产生的 O2 -·的清除作用 ,实验结果见表
2.可见 CSE对 O2 -·也有一定的清除作用 ,但效
果不明显 ,其清除率明显低于相同条件下 VC对
O2 -·的清除率.
表 2 不同抗氧化剂对超氧阴离子
自由基的清除作用
VC CSE
浓度 /
(mg· L-1)
E/
%
浓度 /
(mg· L-1)
E/
%
20 43.8 10 11.2
30 67.5 20 12.2
50 82.7 40 14.7
60 83.5 60 10.6
3 结论
栗壳是板栗加工过程中的废弃物 ,资源丰富 ,
价廉易得.抗氧化 、抗自由基活性物质的研究已成
为生命科学研究的热点.本研究表明 ,栗壳提取物
对猪油与芝麻油均有一定的抗氧化作用 ,对羟自
由基具有良好的清除作用 ,表明栗壳提取物是一
种优良的天然抗氧化剂和自由基清除剂 ,这为对
其进一步研究 、开发和应用提供了一定的科学依
据.
参 考 文 献 :
[ 1]  江苏新医学院.中药大词典 [ M] .上海:上海人民出
版社 , 1977, 1820.
[ 2]  赵德义 ,高文海 , 化成文 , 等.板栗壳化学成分的初
步研究 [ J] .陕西林业科技 , 2003, 2:1-3.
[ 3]  吴龙云 ,凌桂生 , 许振朝.板栗壳浸膏的抗菌抗炎作
用及对胃肠平滑肌运动的影响 [ J] .广西中医药 ,
2002, 25(4):54-56.
[ 4]  李云雁 ,宋光森.板栗壳提取物抑菌作用研究 [ J] .
林产化学与工业 , 2004, 24(4):61-64.
[ 5]  金鸣 ,蔡亚欣 , 李金荣 , 等.邻二氮菲 -Fe2+氧化法
检测 H2O2 /Fe2+产生的羟自由基 [ J] .生物化学与
生物物理进展 , 1996, 23(6):553-555.
[ 6]  邹国林 , 桂兴芬 , 钟晓凌 , 等.一种 SOD的测活方
法———邻苯三酚自氧化法的改进 [ J] .生物化学与
生物物理进展 , 1986, (4):71-73.
StudyonAntioxidativeActivityofExtractsFromtheShel
ofCastaneaMolissimaBl.
WANGXin, LIUBin, MENGFan-rui, WANGXin, LILi
(SchoolofPharmaceuticalSciences, LiaoningUniversity, Shenyang110036 , China)
Abstract: TheshelofCastaneaMolisimaBl.wasextractedwithwaterandextractsnotedasCSEwere
obtained.TheantioxidativeactivityofCSEwasmeasuredbyovenexperimentsusinglardandsesameoilas
substrates.ThescavengingefectsonhydroxylradicalsandsuperoxideanionradicalsofCSEwerestudiedby
UV-Visiblespectroscopy.Thehydroxylradicalsandsuperoxideanionradicalsareproducedrespectivelyby
Fentonreactionandpyrogalolautoxidationsystem.TheresultsshowedthatCSEpossessesantioxidativeactivi-
tyinlipidandhadthescavengingactivitytohydroxylradicals, inaconcentration-dependentmanner.The
scavengingcapacitytohydroxylradicalswasrepresentedbytheconcentrationscavenging50% ofalofradi-
cals, whichofCSEwas80.3mg/L.CSEhadnoremarkablescavengingactivitytosuperoxideanionradicals.
Keywords: extractsfromtheshelofCastaneaMolissimaBl.;antioxidativeactivity;lipid;hydroxyl
radicals;superoxideanionradicals.
(责任编辑 李 超)
350 辽宁大学学报  自然科学版                          2008年