全 文 ：图 1　黄芪甲苷薄层色谱图
A阴性样品　B对照品　C供试品　 1黄芪甲苷
表 1　 加样回收试验结果
样品量
(g)
样品
含量
(m g)
对照品
加入量
(m g)
实测值
(mg)
回收率
( )
平均
回收率
( )
RSD
( )
0. 256 3 0. 172 6 0. 081 9 0. 243 1 98. 3
0. 245 2 0. 165 8 0. 081 9 0. 244 2 95. 7
0. 251 5 0. 169 3 0. 163 8 0. 330 1 98. 2 97. 4 0. 99
0. 262 8 0. 176 9 0. 163 8 0. 337 8 98. 2
0. 249 0 0. 167 6 0. 245 7 0. 406 8 97. 4
0. 257 6 0. 173 4 0. 245 7 0. 410 7 96. 6
2. 11　样品测定
按拟定的含量测定方法对 6批样品进行测定 ,结果见表
2。
表 2 样品测定结果
批号 样品的含量(mg /粒) 平均含量(m g /粒)
20021123 0. 306 7 0. 306 3 0. 305 9 0. 306 3
20030625 0. 335 6 0. 341 8 0. 347 7 0. 341 7
20031125 0. 378 2 0. 381 9 0. 384 5 0. 381 5
20040329 0. 257 8 0. 251 2 0. 247 6 0. 252 2
20040918 0. 284 9 0. 285 6 0. 283 3 0. 284 6
20050206 0. 336 7 0. 336 7 0. 336 7 0. 336 7
3　结论
经多批样品中的黄芪甲苷含量测定 , 样品含量在 0. 25
～ 0. 38 mg /粒 , 暂定本品每粒含黄芪以黄芪甲苷 (C41H68
O14)计不得少 0. 25 m g。本法操作简便 , 结果准确 ,可用于益
心康泰的质量控制。
参考文献:
[ 1] 　国家药品监督管理局编. 《国家中成药质量标准汇编》(试
行),内科心系分册 [ S] . 292.
[ 2] 　中国药典 [ S] . 2000:249.
[ 3] 　赫丽晓 ,高天爱.糖尿康胶囊质量标准研究 [ J] . 中国药物与临
床 , 2004, 4(3):210.
[ 4] 　梁溢 ,陈幸 ,黎万寿 ,等.还伍胶囊中黄芪甲苷的定量分析 [ J] .
中成药 , 2004, 26(5):430.
银黄香薷胶囊质量标准研究
张守尧 1 , 　江秀娟 2 , 　王　鹏1 , 　张忠义 1
(1.南方医科大学珠江医院 ,广东 广州 510282;2.广东省药检所 ,广东 广州 510180)
收稿日期:2005-06-23
作者简介:张守尧(1965～ ),男 ,山东平度人 ,副主任药师 ,研究方向:药物分析 ,电话:020-61643554, E-m ail:shouyaozhang@ yahoo. com. cn。
关键词:银黄香薷胶囊;黄芩苷;TLC;H PLC
中图分类号:R927. 2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2006)12-1856-02
　　银黄香薷胶囊是我院研制的医院制剂 , 主要由金银花 、
黄芩 、香薷 、厚朴 、连翘等 7味药组成 ,具有解表化湿 ,清热解
毒之功能 , 临床用于风热夹湿和暑湿感冒 , 效果良好。为控
制制剂质量 , 我们在研究文献的基础上 [ 1～ 3] , 建立了适合该
制剂的质量控制方法 ,采用薄层色谱法对处方中的厚朴 、连
翘 、黄芩进行了定性鉴别 , 并用高效液相色谱法对方中黄芩
的主要化学成分黄芩苷进行了含量测定 ,结果满意。
1　仪器 、试药与试剂
LC-6A高效液相色谱仪(日本岛津)。
银黄香薷胶囊由珠江医院生产 , 所用药材购自广州市药
材公司 ,并经鉴定。对照药材及黄芩苷 、厚朴酚 、和厚朴酚对
照品由中国生物制品检定所提供。
薄层用硅胶 G(青岛海洋化工厂), 甲醇为一级色谱纯 ,
水为重蒸溜水 ,其它试剂均为分析纯。
1856
2006年 12月
第 28卷　第 12期
中 成 药
Chine se T raditiona l PatentM ed icine
Decem be r 2006
Vo.l 28　No. 12
2　定性鉴别
2. 1　厚朴
称取胶囊内含物 1. 5 g, 加甲醇 50 m L, 超声 30 m in, 滤
过 , 滤液蒸干 ,残渣加稀盐酸 20 mL使溶解 , 氯仿提取 3次 ,
每次 20 mL,合并氯仿液 , 用 2 NaOH 溶液提取 3次 ,每次
20 mL, 合并提取液 ,用盐酸调节 pH 至 1 ～ 2, 用氯仿提取 3
次 , 每次 20 m L, 合并氯仿液 , 用无水硫酸钠脱水后蒸干 , 残
渣加 1 mL无水乙醇溶解 , 作为供试品溶液。按处方比例制
备缺厚朴药材的阴性模拟样品 ,再按供试品处理方法制得阴
性对照溶液。另取厚朴对照药材 0. 8 g,甲醇 50 mL,超声 30
m in,滤过 , 滤液蒸干 ,残渣加 1 mL无水乙醇溶解 , 作为对照
药材溶液。再取厚朴酚 、和厚朴酚对照品 ,用甲醇溶解制成
每 1 mL各含 1 mg的混合溶液 ,作为对照品溶液。照薄层色
谱法试验 , 吸取上述供试品溶液 、对照药材溶液 、对照品溶
液 、阴性对照溶液各 10, 10, 2, 10 μL, 分别点于同一硅胶 G
板上 , 以氯仿-苯-醋酸乙酯(5∶4∶1)为展开剂 , 展开 , 取出 , 晾
干 , 喷以 5 香草醛硫酸溶液 , 105 ℃热风吹至显色清晰 , 日
光下检识 , 供试品色谱中 , 在与对照药材及对照品溶液色谱
相应的位置上 , 显相同颜色的斑点 ,而阴性对照液在相应位
置上无斑点。
2. 2　黄芩
称取胶囊内含物 1. 5 g, 加乙醚 30 m L, 超声 15 m in, 滤
过 , 滤渣挥尽乙醚 ,加甲醇 30 m L, 超声 30 m in,滤过 , 滤液水
浴蒸干 , 残渣加水 30 mL溶解 ,滤过 , 滤液用稀盐酸调 pH 值
至 1 ～ 2, 用醋酸乙酯提取 2次 ,每次 30 mL。合并提取液 , 蒸
干 , 残渣加甲醇 1 m L溶解 , 作为供试品溶液。按处方比例制
备缺黄芩药材的阴性模拟样品 ,再按供试品处理方法制得阴
性对照液。取黄芩对照药材 1 g,加甲醇 20 mL,超声 40 m in,
过滤 , 滤液水浴蒸干 , 残渣加甲醇 1 m L溶解 , 作为对照药材
溶液。再取黄芩苷对照品 , 加无水乙醇制成每 1 mL含 1 m g
的溶液 , 作为对照品溶液。照薄层色谱法试验 , 吸取上述供
试品溶液 、对照药材溶液 、对照品溶液 、阴性溶液各 3, 3, 10,
3 μL分别点于同一硅胶板上 , 以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水 (10
∶7∶1∶1)为展开剂 , 展开 , 取出 , 晾干 , 喷以 2 三氯化铁溶
液 , 日光下检识 ,供试品色谱中 ,在与对照药材及对照品溶液
色谱相应的位置上 , 显相同颜色的斑点 , 而阴性对照液在相
应位置上无斑点。
2. 3　连翘
称取胶囊内含物 1. 5 g, 加石油醚 30 mL, 超声 30 m in, 滤
过 , 滤液水浴蒸干 ,残渣加甲醇 1 mL溶解 ,作为供试品溶液。
按处方比例制备缺连翘药材的阴性模拟样品 ,按供试品处理
方法制得阴性对照液。另取连翘对照药材 0. 8 g, 同法制得
对照药材溶液。照薄层色谱法试验 , 吸取上述供试品溶液 、
对照药材溶液 、阴性溶液各 15, 10, 10μL分别点于同一硅胶
板上 , 用正己烷-醋酸乙酯 (17∶3)为展开剂 , 展开 , 取出 , 晾
干 , 喷以 5 香草醛硫酸溶液 , 105 ℃热风吹至显色清晰 , 日
光下检识 , 供试品色谱中 , 在与对照药材溶液色谱相应的位
置上 , 显相同颜色的斑点 , 而阴性对照液在相应位置上无斑
点。
3　黄芩苷的含量测定
3. 1　色谱条件
色谱柱:HYPERSIL BDS C18(4. 6 mm ×250 mm , 5 μm),
流动相:甲醇-水-磷酸(42∶58∶0. 2), 流速 1. 0 mL /m in, 检测
波长 276 nm , 衰减 4, 纸速 2 mm /m in。在此色谱条件下 , 对
照品 、样品及阴性样品的色谱图见图 1。
图 1　HPLC图谱
A 对照品　B样品供试液　C阴性对照液　 1黄芩苷
3. 2　对照品贮备液的制备
取黄芩苷对照品约 10 m g,精密称定 , 置 100 mL量瓶中 ,
加 50 甲醇适量 ,超声处理使溶解 , 放冷 , 加 50 甲醇至刻
度 ,摇匀 , 作为黄芩苷对照品贮备液。
3. 3　线性关系考察
精密吸取对照品贮备液 1. 0, 2. 0, 3. 0, 4. 0, 5. 0 m L,分别
置 10 m L量瓶中 , 50 甲醇定容至刻度 , 摇匀 ,分别取 10 μL
进样测定 ,每个浓度测定 3次 , 记录色谱图及其峰面积 , 以峰
面积平均值(A)对进样量(C(μg))进行回归 ,得标准曲线方
程。
A=- 4. 47×104 +2. 56×106C, r=0. 9995
　　在 0. 1～ 0. 5μg范围内 ,黄芩苷峰面积值与进样量有良
好的线性关系。
3. 4　精密度实验
精密吸取同一浓度的对照品溶液 10 μL, 重复进样 6
次 ,黄芩苷峰面积值的 RSD <2 。
3. 5　加样回收率试验
取已知含量的样品 (批号 20031107)约 0. 01 g 6份 , 精
密称定 ,分别精密加入对照品贮备液 (0. 1 m g /m L) 3. 0,
4. 0, 5. 0 m L,按上述样品测定方法提取并测定 ,结果见表 1。
表 1 加样回收率试验结果(n=3)
黄芩苷量
(mg)
加入黄芩苷
量(m g)
测得量
(m g)
回收率
( )
平均回收
率( )
RSD
( )
0. 386 9 0. 300 0. 673 6 95. 57
0. 393 6 0. 300 0. 684 2 96. 87
0. 386 5 0. 400 0. 777 0 97. 62
0. 385 8 0. 400 0. 796 6 102. 70 98. 8 2. 6
0. 387 3 0. 500 0. 885 9 99. 72
0. 375 6 0. 500 0. 877 1 100. 30
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第 28卷　第 12期
中 成 药
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3. 6　稳定性试验
取样品供试液分别于 0, 4, 8, 12 h进样测定 , 测得样品
中黄芩苷峰面积值的 RSD 为 0. 9 , 表明样品供试液在 12 h
内稳定性良好。
3. 7　重复性试验
取同一批样品(批号 20031107)6份 , 各约 0. 04 g, 分别
测定并计算 , 结果含量的 RSD 为 1. 8 , 表明方法的重复性
良好。
3. 8　样品含量测定
精密称取银黄香薷胶囊内容物约 0. 04 g,置 50 mL量瓶
中 , 加 50 甲醇 40 mL, 超声处理 40 m in,取出 , 放冷 ,用 50
甲醇定容 , 摇匀 ,微孔滤膜滤过 , 取续滤液 10 μL, 按上述色
谱条件进样测定 , 每个样品进样 3次 , 以标准曲线计算样品
中黄芩苷的含量 , 结果见表 2。
表 2 样品中黄芩苷的含量结果(n=3)
批号 黄芩苷含量(m g /g) RSD( )
20031107 37. 6 1. 0
20031111 36. 9 1. 8
20031201 44. 3 0. 5
4　讨论
4. 1　实验比较了甲醇-水-磷酸 、乙腈-水-磷酸体系及不同比
例情况下样品的色谱行为 ,最后优选出适合本制剂的最佳流
动相为甲醇-水-磷酸(42∶58∶0. 2)。
4. 2　样品提取溶剂。比较了 4种提取溶剂 (甲醇 、乙醇 、
70 乙醇 、50 甲醇)的提取效果 ,结果表明 , 用 50 甲醇提
取杂质峰最少 , 峰形也较好 , 没有严重的拖尾现象 , 提取率
高。
4. 3　样品提取时间。样品分别超声处理 20, 30, 40, 50, 60
m in, 测得黄芩苷含量分别为 33. 342 5、36. 864 4、 36. 820 8、
36. 855 3、 36. 887 0 mg /g, 试验结果表明 , 超声处理 30 m in,
含量不再增加 ,为了保证提取完全 , 故确定超声处理时间 40
m in。
参考文献:
[ 1] 　中国药典一部 [ S] . 2000:475.
[ 2] 　苏　强 ,倪　艳 ,王瑞明 ,等.祛斑洁颜胶囊的薄层鉴别和黄芩
苷的含量测定 [ J] .中成药 , 2003, 25(1):30-32.
[ 3] 　罗红霞 ,潘晓鸥.高效液相色谱法测定鼻窦炎口服液中黄芩苷
的含量 [ J] .中国药业 , 2004, 13(5):30-31.
HPLC-ELSD测定补气口服液中黄芪甲苷含量的方法研究
韩淑萍 1 , 　孙建宇 2
(1.杭州市第一人民医院 ,浙江 杭州 310006;2.杭州市中医院 ,浙江 杭州 310007)
收稿日期:2005-06-27
作者简介:韩淑萍(1972～ ),女 ,主管中药师 ,从事中药药剂研究 ,电话:0571-87065701-30117。
关键词:补气口服液;HPLC-ELSD;黄芪甲苷
中图分类号:R927. 2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2006)12-1858-02
　　补气口服液由黄芪 、麦冬等中药制成 ,具有补脾益气的
功能。黄芪是君药 , 其主要成分为黄芪甲苷 , 控制黄芪的质
量 , 即可控制本品的质量。目前 , 黄芪甲苷测定方法有薄层
扫描法 , 但误差较大。又由于皂苷为一类极性较大 , 结构复
杂的化合物 , 它只在紫外末端有吸收 , 若采用紫外检测末端
吸收法(200 ～ 210 nm),则有干扰峰 , 无法使用。因此我们采
用蒸发光散射检测仪(ELSD)作为检测手段 , 利用 HPLC法
测定补气口服液中黄芪甲苷的含量。
1　仪器与试药
惠普 HP1100系列液相色谱仪(美国安捷伦公司 ), A ll-
tech-ELSD蒸发光散射检测仪(美国奥泰公司)。色谱柱 Ag-
ilent C18柱(250 mm ×4. 6 mm , 5 μm)。甲醇 (色谱纯)、水
(重蒸馏水), 其他试剂均为分析纯。
黄芪甲苷对照品 (中国药品生物制品检定所)。补气口
服液 (杭州市 中医院 院内制 剂 ), 批号 为 20040624、
20040625、20040626、20040627。
2　色谱条件
色谱柱 Agilen tC
18
柱(250 mm ×4. 6 mm , 5μm);甲醇-水
(80∶20)为流动相;流速为 0. 5 mL /m in;柱温为 25 ℃;蒸发
光散射检测器检测 ,漂移管温度为 80℃, 气体流速为 2. 0 L /
m in。理论板数按黄芪甲苷峰计应不低于 3 000。在该色谱
条件下对照品 、样品和阴性对照的色谱图分别见图 1 ～ 3。
图 1　对照品 HPLC色谱图
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2006年 12月
第 28卷　第 12期
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Decem be r 2006
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