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黄荆叶提取液抑菌作用的研究



全 文 :黄荆叶提取液抑菌作用的研究
吕源玲 王洪新
(江南大学食品学院 , 无锡 214036)
  摘 要 用黄荆叶的乙醇提取物对6 种细菌 、2 种酵母菌 、3 种霉菌三大类微生物进行抑菌实验 , 得出其最低抑
菌浓度(MIC)。由结果推断出黄荆叶提取物不失为一种良好的天然抗菌剂 , 可添加于食品和药物中。
  关键词 黄荆;抑菌作用
Inhibition Effect of Vitex negundo L.on Microorganisms
Lǜ Yuanling , Wang Hongxin
(School of Food Science and Technology , Southern Yangtze University , Wuxi 214036)
Abstract The MIC of the ethanol extract of the leaves of Vitex negundo L.was obtained by operating on
three types of microorganisms which including 6 kinds of germs ,2 kinds of yeasts and 3 kinds of molds.Ac-
cording to the results , it was deduced that the extract of the leaves of Vitex negundo L.can be used as natural
bacteriostatic agents and be added into food and medicine.
Key words Vitex negundo L.,bacteriostasis
  黄荆别名黄荆条 、黄荆子 、布荆 、荆条 、五指风 、
五指柑 ,为马鞭草科牡荆属植物黄荆 Vitex negundo
L.。它是落叶灌木或小乔木 ,广泛分布于我国长江
流域及南部各省区。山东亦有分布[ 1] 。黄荆子 、叶 、
枝及根入药 。黄荆具有止咳 、祛痰及缓解支气管痉
挛的作用 ,主治感冒 、咳嗽 ,哮喘 ,风痹 、疟疾 、胃痛 、
疝气 、痔漏。黄荆叶清热解表 、利湿解毒 ,主治感冒 、
中暑 、吐泻 、痢疾 、疟疾 、黄疸 、风湿 、跌打肿痛 、疮痛
疥癣 ,并能防止甲醛性关节炎肿胀的发展[ 2] 。黄荆
子 、黄荆根煎剂对金黄色葡萄球菌和卡他球菌均有
抑制作用[ 1] 。
  研究证明 ,各种致癌因子引起细胞裂变所形成
的癌细胞 ,其生长及发展与体内免疫功能和微血管
循环功能有密切关系 。当这些功能发生障碍 ,癌细
胞或癌栓便会迅速生长 ,发展成为巨大的实体瘤 。
金荞麦黄酮具有活血化瘀 、抗栓塞 、改善微循环 ,提
高免疫力等功能。抗癌试验表明 ,金荞麦制剂有明
显抑制实验动物 Lewis肺癌 、U14宫颈癌 、S180肉瘤
作用 。在体外还能明显抑制小鼠白血病细胞(P388)
和人胃腺癌细胞(SGC7901)对 3H-TdR的掺入。而
且金荞麦制剂无致突 、致畸作用 ,可开发为一种安全
的抗癌药物。
参 考 文 献
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41黄荆叶提取液抑菌作用的研究
  黄荆籽的提取物抗氧化成分及其抗氧化作用已
研究得比较深入[ 3] [ 4] ,但其叶提取物的抑菌研究未
见报道。本文初步研究了黄荆叶提取液对与人们日
常生活有密切关系的三大类微生物是否有抑制作
用 ,确定出黄荆对它们的最低抑菌浓度(MIC),为开
拓黄荆的应用找到理论依据。
1 实验材料
1.1 主要仪器与设备
101-0型电热鼓风干燥箱(上海沪南科学仪器
联营厂);PW-30精密培养箱(中国制造);JPT -型
架盘天平(上海衡器厂)
1.2 主要药品
95%乙醇(上海振兴化工一厂出品)
营养琼脂(江苏省宜兴市万石培养基厂出品)
1.3 菌种
细菌:金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、
白色葡萄球菌(Staphylococcus cremoris)、四联球菌
(Tetracoccus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠
杆菌(Escherichia coli.)、沙门氏菌(Salmonella typhi)
霉菌:根霉(Rhizopus)、毛霉(Mucor)、青霉
(Penicillium)
酵母菌:热带假丝酵母(Candidautilites)、酿酒酵
母(Saccharomyces cerevisiae)
以上菌种由无锡轻工大学食品学院和生物工程
学院提供 。
1.4 培养基
营养琼脂培养基:供培养各种细菌
蔗糖马铃薯培养基:供培养各种霉菌 、酵母菌
2 实验方法
2.1 黄荆叶提取液的制备
称取阴干黄荆枝叶 80g ,揉碎 ,加入 50%乙醇
800ml ,在 90℃水浴锅里回流浸提 2h ,再浸泡 3h ,用
布氏漏斗抽滤 ,充分洗涤后得滤液 800ml。将滤液
真空浓缩(65℃,0.08MPa)得 218ml浓缩液。
用移液管吸取 10ml浓缩液于恒重培养皿 ,在干
燥箱内 100℃烘6h ,称量 ,算出其净重为 1.01g ,固形
物含量为 0.101g/ml。
2.2 供试菌株的制备
将所有供测试的菌种移接入相对应的试管斜面
培养基上 ,每种接多支重复。细菌置于 37℃恒温培
养箱内培养 24h;霉菌 、酵母菌于 28℃培养 48h。每
种菌取 2支供测试用 ,其余置 0 ~ 4℃冷藏备用 。
2.3 培养基的配制及制备平板
取浓缩液与培养基于 250ml三角瓶配成不同浓
度黄荆液培养基(见表 1 、表 2),经 121℃高压蒸汽灭
菌 30min后 ,冷却至 50 ~ 60℃,无菌操作用移液管快
速吸取 15ml于各培养皿 。制备够充足数量备用 。
表 1 不同浓度黄荆液培养基的配制(供培养细菌)
黄荆叶提取液
(0.101g/ml)(ml)
营养琼脂
(g)
蒸馏水
(ml)
黄荆液培养
基浓度(%)
0 0 2.03 50.0 0
1 0.2 2.03 49.8 0.44
2 0.3 2.03 49.7 0.06
3 0.4 2.03 49.6 0.08
4 0.5 2.03 49.5 0.10
5 0.7 2.03 49.3 0.14
6 0.9 2.03 49.1 0.18
7 1.0 2.03 49.0 0.20
8 1.1 2.03 48.9 0.22
9 1.2 2.03 48.8 0.24
10 1.4 2.03 48.6 0.29
11 1.5 2.03 48.5 0.30
表 2 不同浓度黄荆液培养基的配制(供培养酵母菌 、霉菌)
黄荆叶提取液
(0.101g/ml)(ml)
蔗糖马铃薯
培养基*(ml)
黄荆液培养
基浓度(%)
0 0 50.0 0
1 0.2 49.8 0.04
2 0.3 49.7 0.06
3 0.4 49.6 0.08
4 0.5 49.5 0.10
5 0.7 49.3 0.14
6 0.9 49.1 0.18
7 1.0 49.0 0.20
8 1.1 48.9 0.22
9 1.2 48.8 0.24
10 1.4 48.6 0.28
11 1.5 48.5 0.30
  *蔗糖马铃薯培养基:市售新鲜马铃薯 , 去皮 , 切成小
块 , 称 100g ,加水约 400ml。 煮沸 30min , 纱布过滤 , 加葡萄糖
10g , 琼脂条 10g ,加水至 500ml , pH 自然。
2.4 菌悬液的制备
用接种环挑取一环菌体或孢子放入装有玻璃珠
的 50ml生理盐水里 ,充分振摇 10min ,制成菌体悬液
42                     中国野生植物资源               2002年第 21 卷第 5 期
或孢子悬液备用 。
2.5 抑菌实验
用1ml移液管吸取各菌悬液 0.2ml于不同浓度
的培养基中 ,用无菌三角涂布棒涂布均匀 ,待干后倒
置于恒温培养箱中培养(细菌 ,37℃, 24h;霉菌 、酵母
菌 28℃,48h),然后观察培养结果 。
3 培养结果与讨论
根据黄荆叶提取物的培养基浓度从高到低 ,不
断摸索 ,得出黄荆最低抑菌浓度测定结果(见表 3)。
表 3 确定黄荆叶提取物最低抑制浓度测定结果
菌种 黄荆液培养浓度(%)
0 0.04 0.06 0.08 0.10 0.14 0.18 0.20 0.22 0.24 0.28 0.30
白色葡萄球菌 +++ ++ - - - - - - - - - -
枯草芽孢杆菌 +++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ - - - - -
四联球菌 +++ +++ +++ ++ +++ +++ +++ ++ + - - -
金黄色葡萄球菌 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ + - - -
沙门氏菌 +++ +++ +++ ++ +++ ++ ++ + + + - -
大肠杆菌 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ + + + -
热带假丝酵母 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++
酿酒酵母 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++
青霉 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++
根霉 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++
毛霉 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++
  “ -”表示培养基上无菌;“ +”表示培养基上有菌
  实验结果表明 ,在这三大类微生物中 ,黄荆叶提
取物的浓缩液对细菌的抑制效果很明显 ,而对霉菌 、
酵母菌无抑制效果。被抑制的细菌中既有革兰氏阳
性菌也有革兰氏阴性菌;既有球菌也有杆菌 ,说明黄
荆叶提取物对细菌有广泛抑制作用 。对 6种细菌的
最低抑制浓度为:白色葡萄球菌 0.06%,枯草芽孢
杆菌 0.20%,金黄色葡萄球菌 0.24%,四联球菌 0.
24%, 沙门氏菌 0.28%,大肠杆菌 0.30%。如食品
中含有金黄色葡萄球菌 、沙门氏菌 、大肠杆菌会引起
食物中毒。其主要症状为呕吐 、腹泻 、腹痛 ,中毒严
重 ,可引起死亡[ 5] 。
综上所述 ,黄荆叶提取液不失为一种理想的抗
菌抑菌添加剂。本室将进一步研究其抑菌有效成分
及其药理毒理作用 。
参 考 文 献
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