全 文 ：19 2
九江医学 2洲 1年第 l (。卷第 4 李红)
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铁树叶提取液对白血病细胞株 K 5 6: 、
H L 一 6 0 增殖抑制作用的实验研究
孙玲玲 毕富勇 凌烈峰 石 必枝
皖南医学院生化教研室 (芜湖 24 10 ()1 )
摘要 目的 :观察铁树叶在白血病细胞株 K 56 2及 IH 一 60 中的作用 。 方法 : 细胞培养液中分别加人铁树叶 实
验组 I和实验组 2 )及 P . B . (S 对照组 l 和对照组 2 ) , 观察集落细胞数 、死活细胞计数及细胞蛋白质含量 。 实验组和
对照组比较 , 死活细胞计数和细胞蛋白含量 尸 值均 < 0 . ()5 , 集落细胞计数实验组抑制率 50 % 。 结果 :实验组和对
照组比较 , 死活细胞计数和细胞蛋白含量 尸 值均 < 0 . 05 ,集落细胞计数实验组抑制率 > 5() % 、 结论 :铁树叶提取液
对白血病细胞株 K 56 2及 H l_ 一 60 细胞的增殖有明显抑制作用 .
关键词 铁树叶 ; 白血病 ; 5K 6 2细胞 ; H L 一 6() 细胞
中国图书分类法分类号 R 7 3 . 7 ; R 一 3 ; Q 7
IN H IB I T IN G E F F E C T O F SA G O C Y C A S L E AV E S ON P R O L I F E R A T ION
O F L E U K EM IA K
S () 2 A N D H L 一 6 0 C E L L S
S u n L i n g l i n g B i F u y o n g
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M E T H O D
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K E Y WO R D S
决、即 C y e努 lae v se : L e u k en l 、 a : K S。 : C e ll、 ; H x一 6 () C e l ls
铁树属苏铁科苏铁属植物 ,为常绿灌木 ,全年可
采集 , 常以叶人药 。 中药常用 于活血止血 , 消肿止
痛 ’ 已有报道铁树叶可用于治疗 胃癌 、肺癌 、肝癌
等 2 _ 但铁树叶对 白血病的作用 尚未见报道 , 笔者
在白血病细胞株 K 5(’ : 及 H L 一 60 中分别加人铁树叶
提取液进行实验观察 ,现报告如下 。
材料和方法
1
.
1 材料 K 56 2细胞 (慢粒型 白血病细胞 )由东南
大学医学院提供 ; H L 一 60 细胞 (红 白血病 细胞 )由
天津血液研究所提供 ;人工栽培铁树 。
1
.
2 方法
1
.
2
.
1 铁树叶的提取 取新鲜铁树叶 10 9 ,洗净 ,
加入双蒸水 30 m L ,煮沸后文火煎煮 ,保持微沸状态
3 () , 1飞 In
。 冷却后 过滤 , 收集滤液 。 药 渣冉加 水 川
m l
_ 煎煮 30 n o in ,收集滤液 。 两次滤液混匀 , 浓缩得
到铁树叶提取液 10 m L 。 经除菌过滤后置 4 飞’ 冰箱
储存备用 。
1
.
2
.
2 细胞 培养 悬 浮细 胞 培 养 : 培 养基 为 含
2 0% 小牛血清的 16 4 0 液 ,在 37 ℃ C ( )、 培 养箱 , 1`毗-
育 72 h 。 集落细胞培养 : 培养基为 2 . 5% 甲基纤维
素 , 细胞终浓度为 1 . 0 火 l护 , 加人铁树叶提取液 . 置
9 6 孔板作集落细胞培养 ,并分成 4 组 。 实验组加人
铁树叶提取液 , 实验组 1 为 K 5 6: 细胞 , 实验组 2 为
闭厂 6 0 细胞 ; 对照组加人 0 . 01 mo 咖 m 飞 P
. 玛. 式 对
照组 l 为 K 56 : 细胞 , 对照组 2 为 H I , 一 60 细胞 在
饱和湿度下 , 置 C o z . 培养箱中孵育 7 2 h , 作细胞 讨-
数 , 71 5 个细胞为 1 个集落 。 每个样品做 了孔 ,集落
第 4期 孙玲玲 ,等 : 铁树叶提取液对白血病细胞株 凡6: 、 LH 一 60 增殖抑制作用的实验研究 19 3
细胞数取平均值 。 细胞形态观测和死活细胞计数 :
用台盼蓝染色 , 置倒置显微镜下观测 。 细胞蛋 白含
量测定 : 采用微量凯氏定氮法 ( jK de ah l )测定 。
注 :实验组与对照组比较 尸 < 0 . 05
2 结果
2
.
1 集落细胞计数 实验组 1 为 71 个 , 对照组 1
为 1 4 7 个 ,抑制率为 51 . 7% ;实验组 2 为 72 个 , 对
照组 2 为 14 5 个 ,抑制率为 50 . 3 % 。
2
.
2 细胞形态和死活细胞计数 见表 1。
表 1 细胞形态和死活细胞计数
细胞形态
活细胞
死细胞
实验组 1 对照组 1 实验组 2 对照组 2
大小不均 , 均匀饱满 , 大小不均 , 均匀饱满 ,
亮度差 亮度好 亮度差 亮度好
40 82 38 76
12 3 8 2
3 讨论
实验组和对照组 比较 ,死活细胞计数和细胞蛋
白含量 尸值均 < 0 . 05 ,集落细胞计数实验组 l 抑制
率为 51 . 7 % , 实验组 2 抑制率为 50 . 3 % , 抑制率均
> 50 %
。 本实验结果表明 : 铁树叶提取液对 K 56 : 细
胞和 H L 一 60 细胞增殖均有明显抑制作用 。 铁树叶
含苏铁贰 、新苏铁贰 A 及 B 、 苏铁双黄酮等成分 ’ } ,
可能是通过这些苏铁毒贰类起到对肿瘤细胞增殖的
抑制作用 ,这为铁树叶用 于临床治疗白血病提供理
论依据 ,其详细机制尚待进一步研究 。
注 :实验组与对照组比较 尸 < 0 . 05
2
.
3 培养细胞的细胞蛋白含量 见表 o2
表 2 培养细胞的细胞蛋白含量 (闽m )L
含氮量
蛋白含量
实验组 1
0
.
2 5 9
1
.
6 20
对照组 1
.
4 98
114
实验组 2
0
.
2 58
1 6 1 1
对照组 2
0
.
536
3
.
3 54
参 考 文 献
江苏新医学编 . 中药大词典 . 上海 : 上海科学技术出版社 , 1 9% .
1 86 0
潘敏求主编 . 中华肿瘤治疗大全 . 郑州 : 河南科学技术 出版社 ,
19 9 4
.
13 8
冉先德主编 . 中华药海 . 哈尔滨 : 哈尔滨出版社 , 19 9 3 . 14 65
( 20 0 1 一 1 0 一 3 ()收稿 )
(责任编辑 郑 锋 )
nU介」
·病例报告·
泛影葡胺引起严重过敏反应一例
江苏省江浦县人民医院 (江浦 2 1 18 00) 李军
关键词 碘 ;过敏 ;泛影葡胺 ;病例报告
患者女 , 34 岁 ,农民 , 因 3 天前突感左下腹疼痛 , 呈阵发
性加剧 , 伴向左侧腹股沟放射性疼痛来我院就诊。 查体 : 体
温 37 . 6 ℃ , 心率 80 次 /分 , 呼吸 20 次 /分 , 血压 1 15/75 nmr
-
垅 。 发育正常 , 营养一般 , 神清 , 痛苦面容 , 腹平软 , 左下腹
沿输尿管有压痛 ,无反跳痛 , 心肺听诊无异常 。 尿常规 :红细
胞附 , 脓细胞 十 ; B 超检查 : 左侧肾盂积水 。 诊断为 “ 左侧输
尿管结石 ” , 来本科做静脉肾盂造影 。 常规准备后做碘过敏
试验阴性 (上海淮海制药厂制造 30 % 泛影葡胺静脉注射 l
m L 观察 巧 m in) 。 静脉注射 76 % 泛影葡胺 5 m L 2 m in 后 ,
患者便感胸闷 , 气急 ,大汗淋漓 , 面色苍白 ,继之面部肿胀 , 以
双眼睑为著。 立即停止造影并进行抢救。 查体 : 血压 40 /20
~ 垅 , 脉搏 10 次 /分 , 呼吸 25 次 /分 ,病人神志模糊。 立即用 1偏盐酸肾上腺素 1 m L 皮下注射 , 肌肉注射非那根 25
mg
,静脉缓推 25 % 葡萄糖 40 m L 十 葡萄糖酸钙 10 r l ,静脉
滴注氢化可的松 10 m g 十 5 % 葡萄糖 5 0 m L , 同时吸氧 ,患
者病情稳定 ,胸闷缓解 , 面部 (特别是双眼睑肿胀 )减轻 ,血压
10 0/ 70
n l l l l
H g
,呼吸规律 ,脉搏 84 次 /分 。
讨论 泛影葡胺属离子型造影剂 ,在各类造影检查中应
用较广 , 由碘引起的过敏反应比较多见 , 一旦发生严重过敏
反应 , 死亡率较高 , 本例在注射后 2 m in 内发生 , 因发现早 ,
抢救及时未发生意外 。 根据 S h he a id 报告 4 例血管注射造
影剂后的死亡反应 , 其中 3 例在注射后 5 inl n 内发生反应 。
因此 ,临床应随时观察 、 高度警惕和做好准备以妥善处理 可
能发生的危险与并发症 。
(2 00 1 `
一
06 一 24 收稿 )
(责任编辑 郑 锋 )