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复方桐叶烧伤油的镇痛作用研究



全 文 :复方桐叶烧伤油的镇痛作用研究
刘丽沙1,李勇敏2,朱克俭2
(1. 湖南省湘潭市中医院,湖南 湘潭,411100;
2. 湖南省中医药研究院附属医院,湖南 长沙,410006)
通讯作者:朱克俭,湖南省中医药研究院附属医院,邮编:410006,E - mail:zkjo0731@ 263. net
[摘要] 目的:研究复方桐叶烧伤油的镇痛作用。方法:测定由醋酸引起的小鼠扭体反应和小鼠的热板痛阈值来鉴定
其镇痛效果。结果:复方桐叶烧伤油能明显抑制小鼠扭体反应,提高小鼠的热板痛阈值。结论:复方桐叶烧伤油具有较好的
镇痛作用。
[关键词] 复方桐叶烧伤油;镇痛作用;实验研究
[中图分类号]R276. 781. 1 [文献标识码]A [文章编号]1003 - 7705(2012)05 - 0149 - 01
复方桐叶烧伤油由桐叶、麻油组成。功能为清热解毒,
消肿止痛,祛腐生肌。用于面积小于 29%的Ⅱ度烧烫伤。
本研究是针对复方桐叶烧伤油增加“治疗慢性皮肤溃疡适
应症”之镇痛作用所进行的,并与正红花油进行比较,现将
其镇痛作用介绍如下。
1 实验材料
1. 1 药物 复方桐叶烧伤油由桐叶、麻油组成,由湘西宏成
制药有限责任公司提供,生产批号:20080501。赋形剂(基
质) :麻油,市售,用时高温消毒。正红花油由桂叶油、肉桂
油、丁香油、香茅油、松节油、血竭、水杨酸甲酯组成,由珠海
宏利药业有限公司生产,批号:ck090501。
1. 2 动物 BALB /C清洁级小鼠,♀,体重 18 ~ 20g;ICR 清
洁级小鼠,♀♂各半,体重 18 ~ 20g;合格证:004202。由湖
南斯莱克景达实验动物有限公司提供,许可证号:SCXK
(湘)2009 - 004。
2 剂量设计
本试验采用药物浓度来控制用药剂量。按体表面积创
面计算,60kg人单位面积用量为 0. 028mL /cm2,与 20g 小鼠
用量 0. 1mL /只相当。将成品视为 100%浓度,依次用基质
稀释成 25%、50%、100%浓度作为动物用药的低、中、高剂
量,按小鼠涂 0. 4mL,分别相当于 1、2、4 倍等效剂量。正红
花油用基质稀释成 50%,用等体积量。
3 方法与结果
3. 1 对醋酸引起扭体反应的影响[1] 取 ICR 小鼠 50 只,
雌雄各半,体重(19. 1 ± 0. 75)g,按体重随机分成 5 组,分别
为空白对照组、正红花油组、复方桐叶烧伤油低、中、高剂量
组。小鼠腹部去毛,用棉球在腹部分别涂麻油、50%正红花
油、25%复方桐叶烧伤油、50%复方桐叶烧伤油、100%复方
桐叶烧伤油,体积 0. 4mL,以不流为宜,可分 2 次,直到涂完,
棉球先浸药物后挤干,再定量给药,连续给药 3d。常规饲
养,自由饮水、进食。于末次给药 30min 后各鼠腹腔注射
0. 7%冰醋酸 0. 1mL /10g,记录 5 ~ 15min内的扭体次数。由
表 1 可见,与空白对照组比较,复方桐叶烧伤油高、中剂量组
小鼠扭体次数有显著性差异,其抑制率达 36. 0%、32. 2%。
表 1 复方桐叶烧伤油对小鼠扭体反应的影响( x ± s)
组 别 n 潜伏期 扭体次数 抑制率(%)
空白对照组 10 158. 3 ± 46. 6 28. 9 ± 7. 7 -
正红花油组 10 217. 5 ± 57. 1a 21. 8 ± 5. 4a 24. 6
复方桐叶烧伤油低剂量组 10 202. 4 ± 47. 4a - 23. 2 ± 4. 2
复方桐叶烧伤油中剂量组 10 224. 6 ± 68. 2a 19. 6 ± 7. 9a 32. 2
复方桐叶烧伤油高剂量组 10 245. 8 ± 74. 1b 18. 5 ± 9. 0b 36. 0
注:与空白对照组比较,aP < 0. 05,bP < 0. 01
3. 2 对小鼠热板痛阈值的影响[1] 取符合要求(平均痛阈值
20. 5 ±2. 0)的 BALB/C系雌性小鼠 50只,体重(19. 1 ± 0. 75)g。
分组与给药同上项试验。于末次涂药1h后,将小鼠放入热板测
痛仪内,热板温度为(55 ±0. 5)℃,自小鼠投入热板至出现舔后
足的时间为该鼠的痛阈值,隔 30min后再测 1次,求出平均痛阈
值进行统计。由表 2可见,与空白对照组比较,复方桐叶油烧伤
高、中、低剂量组平均痛阈值有显著性差异。
表 2 复方桐叶烧伤油对小鼠热板痛阈值的影响( x ± s)
组 别 n
给药后的痛阈值(s)
0 h 0. 5 h 1 h 1. 5 h
空白对照组 10 20. 2 ± 2. 9 21. 9 ± 2. 5 22. 5 ± 3. 3 22. 7 ± 2. 4
正红花油组 10 20. 8 ± 1. 5 27. 1 ± 6. 9a 27. 8 ± 6. 9a 27. 2 ± 6. 3a
复方桐叶烧伤油低剂量组 10 20. 4 ± 1. 7 25. 4 ± 4. 9 26. 4 ± 6. 8 26. 4 ± 6. 5
复方桐叶烧伤油中剂量组 10 20. 6 ± 1. 9 27. 3 ± 6. 4a 28. 1 ± 7. 1a 27. 2 ± 6. 9
复方桐叶烧伤油高剂量组 10 20. 5 ± 2. 2 28. 2 ± 6. 8a 28. 9 ±6. 0b 27. 8 ± 6. 6a
注:与空白对照组比较,aP < 0. 05,bP < 0. 01
4 讨 论
慢性皮肤溃疡是一种常见的难治性疾病,局部治疗是
目前的主要手段,保护剂、抗生素、维生素、微量元素制剂及
生长因子等为常用药物。中药复方桐叶烧伤油经临床证明
对慢性皮肤溃疡有较好的疗效[2]。油桐是大戟科油桐属落
叶小乔木,是一种实用的药用植物,其根、叶、果均可药用,
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第 28 卷第 5 期
2012 年 9 月 HUNAN JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 28 No. 5
Sep 2012
高效液相色谱法测定参麦注射液中人参皂苷 Rg1 和人参皂苷 Re的含量
李 伟
(湖南省益阳市中心医院,湖南 益阳,413000)
[摘要] 目的:建立高效液相色谱测定参麦注射液中人参皂苷 Rg1 和人参皂苷 Re 的方法。方法: 采用 Bon Chrome C18
( 4. 6mm × 250mm,5μm) ;流动相 A相为 0. 1mol /L的 KH2PO4 溶液,B 相为乙腈∶水 = 75∶ 25,PH = 3. 5 进行梯度洗脱,流速为
1. 0mL /min,检测波长为 203nm;柱温为 38℃。结果:参麦注射液中人参皂苷 Rg1 在 0. 4175 ~ 2. 0496μg 范围内与峰面积线性
关系良好( r = 0. 9998) ,平均加样回收率为 98. 40% ( RSD为 0. 58% ) ;人参皂苷 Re 在 0. 4864 ~ 2. 473μg 范围内与峰面积线性
关系良好( r = 0. 9997) ,平均加样回收率为 98. 67% ( RSD为 0. 53% ) 。结论: HPLC测定参麦注射液中人参皂苷 Rg1 和人参皂
苷 Re含量,其结果准确、灵敏度高、重现性好,操作简单、方法可靠,可以作为参麦注射液产品质量控制的方法之一。
[关键词] 高效液相色谱法;参麦注射液;人参皂苷 Rg1;人参皂苷 Re;实验研究
[中图分类号]R284. 1 [文献标识码]A [文章编号]1003 - 7705(2012)05 - 0150 - 02
参麦注射液主要是由人参、麦冬经提取后而成。具有益
气固脱、养阴生津、生脉等功效,临床上主要用于休克、冠心
病、病毒性心肌炎等治疗以及肿瘤化疗时的增效减毒。参麦
注射液主要含有多糖和皂苷类成分,其中的人参皂苷体现了
上述的药理作用[1],因此被认为是参麦注射液中主要的活性
成分。质量标准中采用香草醛比色法测定总皂苷[2]。本实
验在此过程中对相关文献[3]中的检测方法进行了改进,建
立了高效液相色谱法梯度洗脱测定参麦注射液中人参皂苷
Rg1、人参皂苷 Re的含量,现将其方法介绍如下。
1 实验材料
美国 Waters公司生产的高效液相色谱仪器,其中配有
717 自动进样器,1525 二元泵,2478 双通道检测器,1500 柱
温箱,Empower色谱工作站;AG154 电子分析天平;乙腈,甲
醇为色谱纯,水为高纯水,其他试剂均为分析纯;人参皂苷
Rg1(批号:20100918)、人参皂苷 Re(20100524)对照品购于
中国药品生物制品检定所,参麦注射液(批号:080718、
080811、081124)由正大青春宝集团公司提供。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 采用 Bon Chrome C18(4. 6mm × 250mm,
5μm) ;流动相 A 相为 0. 1mol /L 的 KH2PO4 溶液,B 相为乙
腈∶水 = 75∶ 25,PH = 3. 5 进行梯度洗脱,流速为 1. 0mL /min,
检测波长为 203nm。进样量为 10μL,柱温为 38℃。采用二
元梯度洗脱,梯度洗脱步骤:0 ~ 5min,B 相体积百分比为
25%;5 ~ 55min,B相的体积百分比增加至 65%;55 ~ 60min,
B相的体积百分比为 65%;60 ~ 75min,B相的体积百分比增
加至 80%。
2. 2 溶液制备
2. 2. 1 对照品溶液的制备 精密称取经过五氧化二磷减压
干燥的人参皂苷 Re 对照品 5. 790mg、人参皂苷 Rg1 对照品
6. 325mg,置于 50mL的容量瓶中,加入甲醇进行溶解并稀释
至刻度,摇匀,后静置,即得对照品溶液,放置于 - 20℃的冰
箱中贮存,备用(其中含有人参皂苷 Rg 10. 1235mg /mL,人参
皂苷 Re 0. 1028mg /mL)。
2. 2. 2 供试品溶液的制备 精密取 3 批参麦注射液(批号:
080718、080811、081124)各 20mL,分别置于 25mL 的容量瓶
中,加入流动相稀释至刻度,静置后即得。
2. 2. 3 阴性样品溶液的制备 取缺少人参的其他药味,制
成缺少人参的阴性样品,再按照 2. 2. 2
檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
项下的步骤制成阴性
民间使用历史悠久,特别是油桐叶,有消肿解毒之功效,能
治疗痈肿、丹毒、臁疮、冻疮、疥癣、烫伤、痢疾、肠炎。油桐
叶中有萜类:12 - O -棕榈酰基 - 4 -脱氧 - 4B - 16 -烃基
佛波醇 - 13 -醋酸酯、12 - O -棕榈酰基 - 4 -脱氧 - 4A -
16 -烃基佛波醇 - 13 -醋酸酯、12 - O -棕榈酰基 - 4 -脱
氧 - 16 -烃基佛波醇 - 13 -醋酸酯[3];近来又从油桐的叶、
根中分离鉴定了 6 个化合物,有 B -谷甾醇(Ⅰ)、槲皮素 -
3 - O - A - L -吡喃鼠李糖苷(Ⅱ)、杨梅素 - 3 - O - A - L -
吡喃鼠李糖苷(Ⅲ)、羽扇豆醇(Ⅳ)、白桦酸(Ⅴ)和齐墩果
酸(Ⅵ)[4]。油桐叶中的熊果酸与齐墩果酸有保肝、抗肿瘤、
抗氧化、抗菌、抗炎、抗病毒、降脂等作用[5],但其镇痛作用
的研究少见报道。本实验证明桐叶油有明显的镇痛作用,
为其药理作用研究提供了新证据。
参考文献
[1] 李仪奎,王钦茂 . 中药药理实验方法学[M]. 上海:上海科学
技术出版社,1991:317 - 318.
[2] 易惠芝 . 复方桐叶烧伤油治疗烧伤创面的疗效观察及护理干
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[3] Hirota T,Hajime O,Koichi K. Pisicidal constituents and related
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[4] 曹晖,肖艳华,王绍云,等 . 油桐叶和根化学成分的研究[J].
西南师范大学学报:自然科学版,2008,33(2) :30 - 32.
[5] 刘立萍 . 湘西油桐叶提取物抑菌活性的初步研究[J]. 食品
科技,2009,34(2) :210 - 215.
( 收稿日期: 2012 - 06 - 22)
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第 28 卷第 5 期
2012 年 9 月 HUNAN JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 28 No. 5
Sep 2012