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胆木总生物碱的含量测定方法研究



全 文 :CHINA MODERN MEDICINE 中国当代医药
2012 年 6月第 19卷第 18期 ·药品鉴定·
胆木 (Nauclea officinalis Pierrc ex Pitard),又名乌檀 、药
乌檀、黄羊木,为茜草科乌檀属乔木,主要分布于广东、广西
和海南等地。 胆木性味苦、寒,具有清热解毒、消肿止痛之功
效。文献报道胆木的主要化学成分为吲哚类生物碱成分[1],笔
者曾对其中一种生物碱进行含量测定 [2],但不能说明胆木所
含总生物碱的情况, 故本文对胆木总生物碱的含量进行测
定,建立总生物碱的含量测定方法。
1 仪器与试药
1.1 仪器
V-650 紫外分光光度计;HH—W420 三用恒温水浴箱;
KQ2200E 医用超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
1.2 试药
胆木采于海南省五指山地区,由兴隆植物所李荣涛鉴
定;异长春花苷内酰胺对照品(南京中康,纯度 98.01%)。 其
他试剂均为分析纯。
2 方法
2.1 标准品溶液的制备
精密称取异长春花内酰胺碱对照品适量,加 70%的乙醇
超声溶解,制成每 1 毫升含异长春花内酰胺碱 0.009 6 mg 的
标准品溶液。
2.2 供试品溶液的制备
称取胆木药材粉末 0.5 g,精密称定,50 mL 70%乙醇回流
提取 40 min,放凉,补足失重,摇匀,静置。 吸取上清液 2 mL,
至 100 mL 容量瓶,70%乙醇定容,即得供试品溶液。
2.3 吸收波长的确定
精密吸取供试品溶液及对照品溶液适量,以相应试剂
70%乙醇为空白对照,在 200~600 nm 波长范围内进行扫描,
结果显示供试品溶液及对照品溶液在 222 nm 均有最大吸收
值,且紫外吸收波谱基本相同,故选择取 222 nm为测定波长,
见图 1,图 2。
图 1 标准品溶液紫外吸收图谱
图 2 供试品溶液紫外吸收图谱
胆木总生物碱的含量测定方法研究
杨卫丽 赖伟勇 高靖淋 刘 侠▲
海南医学院(海南省热带药用植物研究开发重点实验室),海南海口 571101
[摘要] 目的 建立胆木总生物碱含量测定方法。 方法 采用紫外分光光度法测定胆木中总生物碱的含量。 结果 建
立了胆木总生物碱的含量测定方法,测定波长为 222 nm,标准曲线为 Y = 62.841X + 0.036 3,R = 0.999 7(n = 9),线
性范围 0.000 96~0.019 2 mg/mL,平均回收率为 100.45%,RSD 为 0.62%(n = 9)。 结论 该方法稳定、可靠、专属性
强,可用于胆木总生物碱的含量测定,为胆木的质量控制提供了新方法。
[关键词] 胆木;总生物碱;含量;测定
[中图分类号] R927.2 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2012)06(c)-0067-02
Study on the determination method of total alkaloids in Nauclea officinalis
YANG Weili LAI Weiyong GAO Jinglin LIU Xia▲
Hainan Medical College (Key Laboratory of Hainan Institute for Research and Development of Topical Plant Medical),
Haikou 571101, China
[Abstract] Objective To establish the content determination method of total alkaloids in Nauclea officinalis. Methods
Used UV spectrophotometry to detect total alkaloids of Nauclea officinalis. Results The method of determinating the con-
tent of total alkaloids in Nauclea officinalis was established. Wavelength: 222 nm, Standard curve: Y = 62.841X + 0.036 3,
R = 0.999 7(n = 9) in the range of 0.000 96~0.019 2 mg/mL, the average recovery was 100.45%, and the RSD was 0.62%
(n = 9). Conclusion This method is simple, reliable, precise and provide a scientific basis for the quality controlling of total
alkaloids in Nauclea officinalis.
[Key words] Nauclea officinalis; Total alkaloids; Content; Determination
[基金项目] 海南省海口市重点科技计划项目(No2008-0000168)。
[作者简介] 杨卫丽(1979-),女,硕士,讲师,主要从事生药学研究。
▲通讯作者:刘侠,女,硕士,讲师,主要从事药剂学研究。
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中国当代医药 CHINA MODERN MEDICINE
·药品鉴定· 2012 年 6月第 19卷第 18期
2.4 标准曲线的建立
精密吸取对照品溶液 0.5,1,2,3,4,5,6,8,10 mL, 分别
至 25 mL 容量瓶中,70%乙醇定容,于 222 nm 下测定吸光度
值,以标准品浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,计算得标准
曲线方程 Y = 62.841X + 0.036 3,R = 0.999 7(n = 9),线性
范围0.000 96~0.019 2 mg/mL,见图 3。
图 3 异长春花内酰胺碱标准曲线
2.5 精密度试验
取对照品溶液在 222 nm 波长处连续 6 次测定吸光度,
RSD 为 0.48%,表明仪器精密度良好,结果见表 1。
表 1 精密度测试结果
2.6 稳定性试验
取供试品溶液在波长 222 nm 处进行测定, 并在室温下
每隔 2 h 测定 1 次,连续测定 7 次。 结果见表 2,表明供试品
在 10 h 稳定,其 RSD 为 0.30%。
表 2 稳定性测试结果
2.7 重现性试验
精密称取同一批号的样品 5 份,照“2.2”项下制备样品
溶液,并按样品测定方法,测定 5 次,RSD 为 0.83%,表明样
品的重现性良好。
2.8 加样回收试验
精密称取 0.2 g干燥至恒重的胆木样品粉末 3份,至 100 mL
圆底烧瓶,各加 20 mL 浓度为 0.083 04 mg/mL的对照品溶液
(即加入 1.660 8 mg 标准品),按“2.2”供试品溶液制备方法制
备,每份 3个平行样,平均回收率为 100.45%,RSD 为 0.62%,
结果见表 3。
表 3 加样回收率
3 结果
本文对胆木总生物碱含量测定的方法进行了考察,最终
确定了胆木中总生物碱含量测定方法。 采用紫外分光光度
法,选取 222 nm 为测定波长,进行含量测定,确定标准曲线
方程 Y = 62.841X + 0.036 3,R = 0.999 7(n = 9),线性范围
0.000 96~0.019 2 mg/mL,精密度,RSD 为 0.48%,表明仪器精
密度良好;稳定性 RSD 为 0.30%,表明供试品在 12 h 稳定;
样品重现性 RSD 为 0.83%,表明样品的重现性良好;平均回
收率为 100.45%,RSD 为 0.62%。该方法简便,可靠,可用于胆
木总生物碱的测定,为胆木的质量控制提供依据。
4 讨论
实验之初笔者同时也对酸性染料比色法进行考察,但是
样品经过显色后,在可见光区无吸收峰,故没有采用酸性染
料比色法进行含量测定。
本实验同时采用 70%乙醇回流提取样品,而未采用酸提
碱沉法,是由于胆木内所含的总生物碱为吲哚类生物碱,其
分子结构中存在苯胺型和酰胺型共轭效应,异长春花苷内酰
胺不但没有碱性,还呈现一定的酸性,因此应用常规的酸提
碱沉法无法提取得到胆木内总生物碱,故采用了 70%乙醇回
流提取胆木总生物碱[3-8]。
[参考文献]
[1] 宣伟东,卞俊,陈海生.中药胆木的化学成分[J]. 中国天然药物,2005,
5(3):3.
[2] 杨卫丽,刘明生,毛彩霓,等 . 胆木的生药学研究[J]. 中药材,2008,31
(9):1324.
[3] 张俊清,毛彩霓,杨卫丽,等. 胆木不同部位异长春花苷内酰胺的含量
研究[J]. 药物分析杂志,2008,15(10):47.
[4] Ch P. Vol 1,2005 Edition[M]. Beijing: Chemical Industry Press, 2005:
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物研究与开发,2007,15(5):124-126.
[6] 符建,邝少铁,曾祥周,等. 胆木浸膏片的抗炎作用研究[J]. 海南大学
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定和含量测定[J]. 中国天然药物,2006,4(2):104.
(收稿日期:2012-05-22 本文编辑:马 双)
1
2
3
4
5
6
0.646 385
0.648 563
0.649 246
0.641 547
0.651 036
0.632 034
0.48
测定次数 吸光度 RSD(%)
0
2
4
6
8
10
2.346 83
2.328 94
2.315 86
2.310 34
2.309 54
2.295 47
0.30
测定次数 吸光度 RSD(%)
1.1
1.2
1.3
2.1
2.2
2.3
3.1
3.2
3.3
0.164 209
0.163 647
0.163 851
0.167 342
0.160 536
0.162 954
0.160 153
0.161 483
0.159 389
10.177
10.132
10.149
10.426
9.885
10.077
9.854
9.960
9.794
101.72
101.27
101.43
104.21
98.80
100.72
98.49
99.55
97.88
100.45 0.62
样品 吸光度值
标准品含
量(mg)
回收率(%)
平均回收
率(%)
RSD(%)
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