全 文 ：收稿日期:2006-12-13;　修订日期:2007-02-14
基金项目:江西省教育厅课题(赣教技函 [ 2005] 248)
作者简介:王小丽 (1977-),女(汉族),江西南康人 ,现任赣南医学院讲
师 ,硕士学位 ,主要从事中草药的研究.
黄花倒水莲提取物对小鼠实验性肝
损伤的保护作用
王小丽1 , 黄　真 1 , 江丽霞2 , 范小娜 1 , 曾　靖1
(1.赣南医学院基础医学院 ,江西 赣州　341000;　2.赣南医学院第一附属医院 ,江西 赣州　341000)
摘要:目的 研究黄花倒水莲提取物对小鼠实验性肝损伤的保护作用。 方法 采用四氯化碳(CCl4)、硫代乙酰胺(TAA)、
扑热息痛(AAP)致小鼠急性肝损伤模型 ,测定小鼠血清 ALT, AST活性 。结果 黄花倒水莲提取物对四氯化碳 、硫代乙酰
胺 、扑热息痛所致小鼠实验性肝损伤有明显保护作用。结论 黄花倒水莲提取物可明显降低四氯化碳 、硫代乙酰胺 、扑热
息痛致小鼠急性肝损伤模型血清 ALT, AST活性。
关键词:黄花倒水莲;　保肝作用;　谷丙转氨酶;　谷草转氨酶
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)06-1320-01
ProtectiveEffectsofPolygalafallaxHemsl.onExperimentalLiverInjury
WANGXiao-li1 , HUANGZhen1 ,JIANGLi-xia2 ,FANXiao-na1＊ ,ZENGJing1
(1.GannanMedicalColege, Ganzhou, 341000, China;2.FirstAfiliatedHospitalofGannanMedicalColege,Ganzhou, 341000, China)
Abstract:ObjectiveTostudytheprotectiveefectofPolygalafallaxHemsl.onexperimentalliverinjury.MethodsTheactivity
ofserumALTandASTweremeasuredinthemodelmiceofliverinjuryinducedbycarbontetrachloride(CCl4), acetaminophen(AAP)andthioacetamide(TAA).ResultsTheserumALTandASTactivitiesweresignificantlyloweredinthemodelmiceof
liverinjureinducedbyCCl4 andAAPandTAAafterPolygalafalaxHemsl.wasgivenoraly.ConclusionPolygalafalaxHemsl.exhibitsprotectiveefectonexperimentalliverinjury.
Keywords:PolygalafalaxHemsl.;　Protectiveeffectonliver;　ALT;　AST
　　黄花倒水莲 PolygalafalaxHemsl.(PFH)[ 1]又称假黄花远
志 , 主产于湖南 、广西 、江西 、广东和云南等地 , 药用其全草。味
甘 、微苦 ,性平。具有补益 、强壮 、祛湿 、散瘀功效 ,主治虚弱虚肿 、
急慢性肝炎 、腰腿酸痛 、跌打损伤 [ 2] 。本文报道黄花倒水莲提取
物对小鼠实验性肝损伤的保护作用。
1　材料
1.1　药物
1.1.1　黄花倒水莲提取物的制备 取干燥黄花倒水莲(购自赣
州市医药公司)200 g,加双蒸水过液面 2 cm, 煮沸 2次 。 30 min/
次 , 合并滤液 , 浓缩至 400ml。加 3倍量 95%的乙醇 ,放冰箱静置
过夜 , 次日减压过滤 ,并回收滤液中乙醇 ,继续浓缩滤液得无醇味
的提取物。提取物加双蒸水至 200 ml使药液为相当于生药 1 g/
ml。用 0.5%NaOH调整 pH为 7.0。置冰箱中备用。
1.1.2　药物 四氯化碳 ,上海长江化工厂 , 批号 84003;硫代乙酰
胺 , 陶湾化工厂 , 批号 881219;扑热息痛 , 汕头金石制药总厂 , 批
号 040304。
1.2 　动物 健康成年昆明种小鼠(由本院医学实验动物中心提
供),雌雄各半 , 体重 20 ～ 25g,随机分组。
1.3 　仪器 日本产日立 -7060型全自动生化仪(HITACHI)。
2　方法 [ 3 ～ 5]
2.1　黄花倒水莲提取物对四氯化碳致小鼠肝损伤的影响 小鼠
32只 , 随机分为 4组 ,每天 ig3.0, 5.0 g/kg的黄花倒水莲提取物
或同体积的生理盐水 , 共 9 d。末次给药 1 h后 ,给药组按 10 ml/
kgip0.1% CCl4花生油溶液 ,对照组 ip同体积的花生油溶液 ,禁
食 16 h后 , 取血分离血清 , 测定血清谷丙转氨酶(ALT)、血清谷
草转氨酶(AST)的活性。结果见表 1。
2.2 　黄花倒水莲提取物对扑热息痛致小鼠肝损伤的影响 小鼠
32只 ,随机分为 4组 ,每天ig3.0, 5.0g/kg的黄花倒水莲提取物或
同体积的双蒸水 , 共 9 d。末次给药后 24 h后, 给药组按 0.150 g/
kgip扑热息痛溶液 ,对照组 ip同体积的生理盐水溶液 ,禁食 16 h
后 , 取血分离血清 ,测定血清 ALT, AST的活性。结果见表 2。
表 1　PFH对四氯化碳致小鼠肝损伤的影响( x±s)
组别 剂量 C/g· kg-1 AST/U· dl-1 ALT/U· dl-1
花生油　　　　 102.6±10.4＊＊ 76.9±11.2＊＊
四氯化碳　　　 1.0 1118.3±125.2 1225.1±108.8
四氯化碳+PFH 1.0+3.0 672.4±104.6＊ 813.1±106.4
四氯化碳+PFH 1.0+5.0 513.8±91.4＊＊ 683.2±98.5＊＊
　　与四氯化碳组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01
表 2　PFH对扑热息痛致小鼠肝损伤的影响( x±s)
组别 剂量 C/g· kg-1 AST/U· dl-1 ALT/U· dl-1
生理盐水　　　 106.6±9.1＊＊ 61.7±6.1＊
扑热息痛　　　 0.15 331.4±51.2 89.9±5.4
扑热息痛+PFH 0.15+3.0 254.3±36.7＊ 70.3±5.9＊
扑热息痛+PFH 0.15+5.0 236.6±42.6＊＊ 58.2±5.3＊＊
　　与扑热息痛组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01
2.3　黄花倒水莲提取物对硫代乙酰胺致小鼠肝损伤的影响 小
鼠 32只 , 随机分为 4组 ,每天 ig3.0, 5.0g/kg的黄花倒水莲提取
物溶液或同体积的双蒸水 ,共 9 d。末次给药后 1h后 , 给药组按
0.05 g/kgip硫代乙酰胺溶液 , 对照组 ip同体积的生理盐水溶
液 , 禁食 16 h后 ,取血分离血清 ,测定血清 ALT, AST的活性 。结
果见表 3。
3　结果
3.1　黄花倒水莲提取物对四氯化碳致小鼠肝损伤的影响 黄花
倒水莲提取物对四氯化碳致小鼠肝损伤血清 ALT, AST活性的升
高具有明显的拮抗作用。
3.2 　黄花倒水莲提取物对扑热息痛致小鼠肝损伤的影响 黄花
倒水莲提取物可明显降低扑热息痛致小鼠肝损伤血清 ALT, AST
活性。
3.3　黄花倒水莲提取物对硫代乙酰胺致小鼠肝损伤的影响 黄
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时珍国医国药 2007年第 18卷第 6期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2007VOL.18NO.6　
花倒水莲提取物可明显降低硫代乙酰胺致小鼠肝损伤血清 ALT,
AST活性。
表 3　PFH对硫代乙酰胺致小鼠肝损伤的影响( x±s)
组别 剂量 C/g· kg-1 AST/U· dl-1 ALT/U· dl-1
生理盐水　　　　 105.8±11.2 58.5±4.2＊
硫代乙酰胺　　　 0.05 260.7±62.5 102.7±6.7
硫代乙酰胺 +PFH 0.05+3.00 192.2±32.6＊ 71.8±4.9＊
硫代乙酰胺 +PFH 0.05+5.00 186.1±31.4＊＊ 56.3±4.2＊＊
　　与硫代乙酰胺组比较 , ＊ P<0.05, ＊＊P<0.01;n=8
3　讨论
四氯化碳 、扑热息痛 、硫代乙酰胺损伤肝脏的生化机制不同。
一般认为 , 四氯化碳损伤肝组织机制是四氯化碳经肝细胞色素
P450代谢激活后生成三氯甲基(· CCl3)自由基 , 可引起生物膜脂
质过氧化 , 造成膜结构和功能损伤 , 蛋白质等物质合成代谢发生
障碍 , 而硫代乙酰胺损伤肝细胞机制可能是损害了细胞膜结构和
功能。大剂量扑热息痛经肝细胞色素 P450代谢后 ,生成的半醌自
由基过多使肝内 GSH消耗 ,并与肝细胞蛋白质进行共价结合 ,引
起肝细胞坏死。以上实验结果提示 , 黄花倒水莲水提取物对四氯
化碳 、扑热息痛 、硫代乙酰胺所致小鼠急性肝损伤均有明显的保
护作用 ,能使急性肝损伤小鼠血清 ALT, AST活性明显降低 ,具有
明显的保肝作用。 说明黄花倒水莲水提取物对三氯甲基(·
CCl
3
)、半醌自由基 , 引起生物膜脂质过氧化 , 造成膜结构和功能
损伤 , 蛋白质等物质合成代谢所引起的障碍及肝细胞坏死具保护
作用。
参考文献:
[ 1 ] 　陈书坤.中国远志属植物的分类研究 [ J] .植物分类学报 , 1991, 29
(3):193.
[ 2 ] 　江苏新医学院.中药大辞典 , 下册 [ M] .上海:上海科学技术出版
社 , 1986:2079.
[ 3 ] 　祁　雪 ,刘秀梅 ,陈晓光 ,等.鹿茸口服液对小鼠实验性肝损伤的保
护作用 [ J] .中药药理与临床 , 2004, 20(1):42.
[ 4 ] 　王晓东 ,赵军宁 ,彭龙玲 ,等.关幼波验方制剂肝炎康颗粒剂对实验
性肝损伤的作用研究 [ J].中药药理与临床 , 2004, 20(1):38.
[ 5 ] 　赵　鹏 ,姚思宇 ,李　彬 ,等.皂苷对乙醇性肝损伤的保护作用 [ J] .
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收稿日期:2006-12-06;　修订日期:2007-01-18
作者简介:王福霞 (1963-),女(汉族),湖北京山人 ,现任湖北省宜昌市第一人
民医院副主任药师,学士学位,主要从事中药鉴定与中药化学成分研究工作.
高效液相色谱法测定天麻胶囊中天麻素的含量
王福霞 1 , 康红英 2
(1.湖北省宜昌市第一人民医院　443000;　2.湖北省宜昌市药品检验所　443000)
摘要:目的 建立高效液相色谱(HPLC)法测定天麻胶囊中天麻素的含量。方法 采用色谱柱为 NUCLEOSILC18(10μm,
4.6mm×250mm);流动相为乙腈-水(3∶97);流速为 1.0 ml· min-1;柱温为 25℃;检测波长:220 nm。结果 天麻素 在
10.83 ～ 64.98μg· ml-1范围内线性关系良好(r=0.999 9),回归方程为:A=99.1571C-21.266 7, 天麻素平均回收率为
99.2%, RSD为 0.6%, n=5。结论 该法操作简便 ,结果可靠 , 重现性好 ,可用于控制天麻胶囊的质量。
关键词:高效液相色谱法 ;　天麻胶囊;　天麻素
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)06-1321-02
HPLCDeterminationofGastrodininTianmaGranule
WANGFu-xia1 ,KANGHong-ying2
(1.No.1 PeoplesHospital, Yichang, 443000, China;　 2.YichangInstituteforDrugControl, Yichang
443000, China)
Abstract:ObjectiveToestablishHPLCmethodfordeterminationofGastrodininTianmaGranule.MethodsTheanalyticalcol-
umnwasanucleosilC18(10μm, 4.6 mm×250 mm).Themobilephaseconsistedofacetonitrile-water(3∶97).Theflowratewas1.0ml· min-1 andthecolumntemperaturewas25℃ .Thedeterminationwavelengthwas220nm.ResultsThecalibration
curvewaslinearintherangeof10.83 ～ 64.98μg· ml-1(r=0.999 9).TheregressionequationwasA=99.1571C-21.266 7.
Theaveragerecoverywas99.2%, RSDwas0.6%(n=5).ConclusionThemethodissimple, reliableandreproduciblefor
qualitycontrolofGastrodininTianmaGranule.
Keywords:HPLC;　TianmaGranule;　Gastrodin
　　天麻胶囊具有健脑安神的功能。用于失眠健忘 ,神经衰弱以
及高血压病引起的头昏头痛。组方为天麻 、羌活 、独活 、杜仲等药
材制成的复方中成药 。方中天麻为君药 ,其性味甘平 , 息风止痉 ,
祛风除湿 , 通痹止痛。天麻的主要成分为天麻素 ,该成药卫生部
部颁质量标准中没有含量测定项 [ 1] 。参考国内文献 [ 2 ～ 4] , 本文
运用 HPLC法进行天麻素的含量测定研究 , 建立了一套成熟的
HPLC测定方法 , 提供了该产品质量标准控制新方法 , 使其质量
标准得到提高与进一步完善 ,产品质量更有保证。
1　仪器与试药
Agilent1100Series高效液相色谱仪;METTLERAE240电子
分析天平。 HH-4数显恒温水浴锅(江苏省金坛市荣华仪器制造
有限公司)。天麻素对照品(批号:807-9201, 中国药品生物制品
检验所 ,供含量测定用);天麻胶囊 3批 , 均为市售品 , 规格均为
0.25 g/粒;白山市长白山制药厂(批号 20050601), 通化盛和药
业股份有限公司 (批号 20060603 ), 吉林通化药业股份有限公
司 (批号 20051101);乙腈为色谱纯 , 水为纯化水 , 其它试剂均为
分析纯 。
2　方法与结果
2.1　色谱条件 色谱柱为 NUCLEOSILC18(10 μm, 4.6 mm×
250 mm);流动相为乙腈-水 (3∶ 97), 检测波长 220 nm;柱温
25℃;流速 1.0 ml· min-1;进样量 10 μl。
2.2　溶液的制备
2.2.1　对照品溶液的制备 精密称取在 60℃减压干燥 4h的天
麻素对照品 10.83 mg, 置 50 ml量瓶中 , 加流动相溶解并稀释至
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2007VOL.18NO.6 时珍国医国药 2007年第 18卷第 6期