全 文 ：FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
食 品 科 技
2009年 第 34卷 第 6期
油桐(Aleurites fordii Hemsl)是大戟科油桐属落
叶小乔木，不但是一种重要的干性油料植物，而
且是一种实用的药用植物，其根、叶、果均可药
用，民间使用历史悠久，特别是油桐叶[1]。《福建民
间草药》、《草木便方》均记载油桐叶有消肿解毒之
功效，能治疗痈肿，丹毒，臁疮，冻疮，疥癣，
烫伤，痢疾，肠炎[2]。油桐在我国湘西地区(包括怀
化市、湘西自治州和张家界市)资源非常丰富，民
间用油桐叶制作桐叶糍粑己有几百年的历史，可
能与油桐叶含有的抑菌活性成分和特有的香料物
湘西油桐叶抑菌活性物质的
进一步研究
More study on the antimicrobial activity of the extracts from
the leaves of Aleurites fordii Hemsl in western Hunan
LIU Li-ping, HE Xiao-qing, SHEN Hong-gui, MI Ying-bo
( Huaihua Bureau of Quality and Technical Supervision, Huaihua 418000)
Abstract: Base on the Primary Study of the Antimicrobial activity of the extracts from the leaves of Aleurites
fordii Hemsl in Western Hunan, the two extractive methods, current immersing and ultrasonic extraction was
compared, The results indicated that ultrasonic extraction method is better. The influence of three factors to
extraction effect also was studied using orthogonal test table L9(33) such as the rates of raw material to solvent,
the hours and times of ultrasonic extraction, the study indicates that the Antimicrobial activity of the extracts is
the best when the rate of raw material to solvent is 1 ∶12, the hours of ultrasonic extraction is 45 minutes, the
times of ultrasonic extraction is 3. The antimicrobial activity of five abstracts, petroleum ether, chloroform, acetic
acid acetic ester, n-butanol and water, were tested. It determined that the extractions are antibacterial with the
exception of petrolic ether and chloroform, but all behind the raw extraction.
Key words: Aleurites fordii Hemsl; extracts; antimicrobial activity
刘立萍， 贺小青， 沈宏桂， 米迎波
(湖南省怀化市质量技术监督局，怀化 418000)
摘要： 在湘西油桐叶抑菌活性物质初步研究的基础上，比较普通浸提和超声波萃取两种提取方
法，确定超声波萃取法为最佳提取方法；选取料液比、超声时间和超声次数 3个因素，通过 L9
(33)正交实验，确定最佳工艺参数为：料液比 1∶12，超声时间 45 min，超声 3次；比较石油醚、
氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和水 5种不同极性溶剂萃取物的抑菌效果，发现除石油醚层无抑菌效
果外，其他几种萃取物的抑菌效果比较相近，均比粗提物效果差，表现为协同作用。
关键词： 油桐叶；提取物；抑菌活性
中图分类号： TS 202.3 文献标志码： A 文章编号： 1005-9989(2009)06-0214-03
收稿日期： 2008-11-22
作者简介： 刘立萍(1966—)，女，湖南怀化人，高级工程师，主要从事化工分析、天然产物和食品检验工作。
提取物与应用
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DOI:10.13684/j.cnki.spkj.2009.06.072
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质有关。但是，目前国内对油桐叶活性成分的研
究还未见报道。本研究拟在对油桐叶传统认识
和利用的基础上，对油桐叶提取物的抑菌活性
开展一些初步研究，为油桐叶的实际利用提供
理论根据。
1 材料与方法
1.1 供试材料
1.1.1 供试菌种 金黄色葡萄球菌(Saphylococcus
aureus)、大肠杆菌 (Escherichla coli )、痢疾杆菌
(Shigella dysenteroae)和酵母菌(Sellipoidens)：湖南
省疾病预防控制中心，本实验室冷冻保藏。
1.1.2 供试植物样品及预处理 供试油桐叶于
2006年 8月 18日采自张家界市永定区金星油脂加
工厂后山，去掉叶柄，自然阴干后用粉碎机粉碎，
过 40目标准筛。样品粉末用塑料袋封存，备用。
1.1.3 试剂 牛肉蛋白胨固体培养基、牛肉蛋白
胨液体培养基、0.9%生理盐水、乙醇：AR；四环
素：东北制药总厂生产，生产批号为 200509007。
1.1.4 主要仪器 RE540-YAMATO 旋转蒸发仪，
SW-52 高压灭菌锅，CCV-1311 超净工作台，
LRE-250-GS人工气候箱和一般实验室仪器。
1.2 实验方法
1.2.1 培养基的制备[3] 按文献[3]的方法，分别制
备牛肉蛋白胨固体培养基和牛肉蛋白胨液体培养
基，备用。
1.2.2 菌悬液的制备(以下工作均在超净工作台上
完成) 把供试菌种行活化和复壮，用生理盐水将
复壮好的细菌洗脱，制成菌悬液，转入比浊管，
参比标准管将其浓度调至 1×108 cfu/mL，备用。
1.2.3 抑菌实验方法 用滤纸片法进行抑菌实验。
取 20片直径 6 mm灭菌滤纸，装入无菌青霉素小
瓶，准确加入 0.2 mL提取液和 0.1 mg/mL 的四环
素对照液，浸润 30 min后在 45 ℃下烘干备用。取
各种待试菌液各取 0.2 mL，制成含菌平板，再用
无菌镊子夹取浸有不同提取液的滤纸片按编号贴
于上述平皿中，每个平皿贴 4~6张。用四环素纸
片做对照。然后在 37 ℃培养 24 h，测抑菌圈直径
大小[4]。
1.2.4 提取物最佳提取方法的选择
1.2.4.1 普通浸提 称取油桐叶粉末 10 g 于 250
mL 三角瓶中，加入 100 mL 80%乙醇浸提 24 h，
浸提 2次，合并 2次提取液，50 ℃减压浓缩，60
℃干燥，将干物质称质量，配成含生药 1 g/mL的
溶液，按 1.2.3进行抑菌实验。
1.2.4.2 超声波提取法 称取油桐叶粉末 10 g 于
250 mL三角瓶中，加入 100 mL 80%乙醇，先浸提
30 min，再超声 1 h，然后浸提 24 h，其他步骤同
上。同时比较两种提取方法。
1.2.5 最佳提取工艺的选择 分别称取油桐叶粉
末 10 g，选取料液比 1∶8、1∶10、1∶12，超声时间
45、60、75 min，超声 1、2、3次 3个因素，按 L9
(33)正交表提取抑菌活性成分，50 ℃减压浓缩，60
℃干燥，制成含生药 1 g/mL的溶液，按 1.2.3进行
抑菌实验，找到最佳提取工艺参数。
1.2.6 提取物不同极性溶剂萃取物抑菌效果的比
较 称量 50 g油桐叶粉末按 1.2.5的最佳提取工艺
参数提取抑菌活性成分，50 ℃减压浓缩，60 ℃干
燥，干燥物加 50 mL 水进行溶解，分别用 50 mL
石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，再
浓缩干燥，制成含生药 1 g/mL的溶液，按 1.2.3法
进行抑菌实验。
2 结果与分析
2.1 最佳提取方法的选择
选用普通浸提法与超声波法两种方法对油桐
叶中抑菌活性物质进行提取，比较两种方法的提
取效果和抑菌效果，结果如表 1。
从表 1可见，采用不同方法提取的效果不同，
且所得的提取物抑菌效果也不同，超声波法提取
效果较好，固在本实验中确定为最佳方法。
2.2 最佳提取工艺的选择
分别称取 10 g油桐叶粉末，选取料液比，超
声时间，超声次数 3个因素按 L9(33)正交表进行实
验。结果表明料液比 1∶12，超声时间 45 min，超
声次数 3次的提取率最高且抑菌效果最好，在实
表 1 不同提取方法抑菌效果比较
提取
方法
提取率 /
%
抑菌效果/cm 总抑菌圈/
cmK D L
普通浸提法 24.62 2.2 2.0 1.8 6.0
超声波提取法 35.61 2.4 2.2 2.1 6.7
对照 2.4 2.5 2.1 7.0
表 2 因素水平表
水平
因素
料液比 A 超声时间/min B 超声次数 C
1 1∶8 45 1
2 1∶10 60 2
3 1∶12 75 3
提取物与应用
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验中确定为最佳提取工艺参数。
从表 3的统计分析结果可知，影响提取率的
主要因素是超声次数，其次是超声时间与料液比。
从表中可见，A3B1C3的提取效果最好。
从表 4 的统计分析结果可知，A3B1C3抑菌效
果最好，确定为最佳提取工艺参数；且影响抑菌
效果的主要因素是料液比和超声次数。
2.3 最佳提取物不同极性溶剂萃取物抑菌效果
比较
将石油醚层(Ⅰ)、氯仿层(Ⅱ)、乙酸乙酯层(Ⅲ)、
正丁醇层(Ⅳ)和水层(Ⅴ)萃取物分别进行抑菌实验，
结果如表 5。
由表 5可知，除石油醚和氯仿层以外，其他
几种萃取物抑菌效果相差不大，但均小于粗提物。
3 讨论
从研究结果可见，提取率越高，抑菌效果越
好，超声空化作用更有利于油桐叶中抑菌活性成
分的提取。
比较最佳初提物的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、
正丁醇和水层 5种萃取物的抑菌活性，本想从中
找出最佳抑菌组分，但是发现乙酸乙酯层、正丁
醇层、水层 3种萃取液的抑菌效果相近，但均较
粗提物差，对实验菌表现出协同作用，其他两种
萃取液无抑菌效果。所以粗提物的化学成分有待
进一步研究。
4 结论
本研究结果表明，油桐叶提取物作为抑菌剂，
对常见的致病菌金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢
疾杆菌具有高效的抗菌活性。
超声波法对油桐叶中抑菌活性物质的提取率
较普通浸提法高，且抑菌效果也较好。油桐叶中
抑菌活性成分的最佳提取工艺参数是：料液比 1∶
12，超声时间 45 min，超声 3次。油桐叶提取物
对实验菌的抑菌作用为协同作用。
参考文献：
[1] 容健材,廖锡,金菱.新编药理学[M].南京:江苏科技出版
社,1990:220-226
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[3] 周德庆 ,等 .微生物学教程 [M].北京 :高等教育出版社 ,
1993:29
[4] 王玲.中药大黄提取色素的抑菌作用研究.食品工业科技,
2000,21(6):27-28
表 3 L9(33)正交实验提取效果
实验号
因素
提取率/%
A B C
1 1 1 1 18.07
2 1 2 2 22.23
3 1 3 3 22.62
4 2 1 2 20.61
5 2 2 3 19.52
6 2 3 1 18.57
7 3 1 3 32.21
8 3 2 1 15.85
9 3 3 2 19.67
K1 62.92 60.86 52.49
K2 58.70 57.60 56.65
K3 67.73 70.89 74.35
k1 22.31 20.29 17.50
k2 19.57 19.20 16.88
k3 22.58 23.63 24.78
R 3.01 4.43 7.90
表 4 L9(33)正交实验抑菌结果与分析
实验号
抑菌圈大小/cm 总抑菌圈大
小/cmK D L
1 1 1 1 1.9 1.9 1.8 5.6
2 1 2 2 1.9 1.7 1.9 5.5
3 1 3 3 1.9 1.7 1.9 5.6
4 2 1 2 1.9 1.6 1.9 5.4
5 2 2 3 2.0 1.9 1.8 5.7
6 2 3 1 2.2 1.9 1.8 6.2
7 3 1 3 2.4 2.1 2.3 6.8
8 3 2 1 2.1 1.8 1.9 5.8
9 3 3 2 1.9 1.8 1.9 5.6
K1 16.7 17.4 17.6
K2 17.3 17.0 16.5
K3 18.2 17.8 18.1
k1 5.57 5.80 5.87
k2 5.77 5.67 5.50
k3 6.07 5.93 6.03
R 0.50 0.26 0.53
因素
A B C
注：K- 金黄色葡萄球菌；D- 大肠杆菌；L- 痢疾杆菌。
表 5 不同极性溶剂萃取物抑菌效果比较 cm
实验菌 粗提物 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 对照
K 1.9 － -- 1.7 1.7 1.7 2.0
D 1.9 － -- 1.6 1.7 1.8 2.5
L 1.8 － -- 1.5 1.7 1.6 2.3
注：“－”表示无抑菌效果；K- 金黄色葡萄球菌；D- 大肠杆菌；L-
痢疾杆菌；对照 - 四环素。
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