全 文 ：海金沙根及草的鉴定研究
南京中医学院 王春根 刘训红 常亚萍 .尹梅兰
摘要 本文对海金沙根及海金沙草进行了显微及薄层层析鉴别 , 并对总黄酮及咖啡酸进行了含量测
定 , 为开发利用这一药物资源提供了鉴定资料 。
海金沙根及草分别系海金沙科植物海金沙
L v s o d inUI j
a pon icu m ( hT
u n b
.
) S w
. 的根茎和
根及藤叶 , 为民间常用药材 。 据文献记载 , 海
金沙草中含氨基酸 、 黄酮等成分〔” , 近年来 ,
从海金沙草中提得咖啡酸及对香豆酸 , 具有缓
和 、 持久的利胆作用 〔 2 ’ 。 为了开发利用这一药
物资源 , 、 本文就显微特征 、 薄层层析及含量测
定等方面进行了鉴定研究 , 现 将 结 果报道于
下 。
( 图 I A , 图 2 )
根横切 面 表皮细胞一列 , 类圆形 , 排列
整齐 , 外被非腺毛 ; 外层厚壁细胞 2 一 3 列 ,
较大 , 类圆形 , 壁稍增厚 , 木化或微木化 , 内
层厚壁细胞 5 ~ 6 列 , 较小 , 壁厚木化 , 原生
中柱 , 内皮层为 6 个半月形的细胞 , 维管束周
韧型 , 木质部哑铃形 , 由多数管胞组成 , 直径
5 ~ 2 7件m 。 ( 图 I B , 图 3 )
一 、 显微特征
1
。 海金沙根
根茎横 切 面 表皮细胞一列 , 壁 增 厚 木
化 , 外被单细胞或多细胞非腺毛 , 黄棕色 , 厚
壁组织细胞多角形 , 木化 , 外层 6 ~ 7 列厚壁
细胞 , 较大 , 黑褐色 , 壁稍薄 , 内层厚壁细胞
黄棕色 , 壁厚 , 层纹较密 , 孔沟明显 ; 基本薄
壁组织 2 ~ 4 列 , 细胞较小 , 切向椭圆形 ; 原
生中柱 , 外围以内皮层细胞一列 , 类长方形 ,
排列整齐 , 胞腔内含黄色油状物 , 维管束鞘细
胞` 1 ~ 2 列 , 维管束周韧型 , 韧皮部狭窄 , 细
胞较小 , 多角形 , 木质部由多数管胞组成 , 多
角形 , 壁厚木化 , 壁沟较明显 , 管胞附近细胞
中含淡黄色块状物。 薄壁细胞中含有淀粉粒 。
圈 1 橄切面简圈
A
、 根茎 ( x 3 o )
B
、 根 ( x 76 )
C
、 茎 ( x 52 )
1
. 非腺毛 2 . 表皮 3 。厚壁组织 4 。 薄壁组 织
5
. 内皮层 6 。 切皮部 7 . 木质部
[ 1〕
〔 2〕
[ 3〕
·
22
今 考 文 做
南京药学院 《 中草药学 》 编写组 : 中草药学 ,
第 1 版 , 中册 , 2 75 一 2 81 页 , 江苏人民出版
社 , 1 97 6
《 浙江药用植物志 》 编写组 : 浙江药用植物
志 , 第 1 版 , 上册 , 3 52 一 357 页 , 浙江科学
技术出版社 , 1 9 80
《 安徽植物志 》 协作组 : 安徽植物志 , 第 1
版 , 第 2 卷 , 348 一 3 49 页 ,中国展望出版社 ,
1 9 87
4[ 〕 江苏省植物研究所 : 江苏植物志 , 第 1 版 ,
下册 , 18 6一 1 90 页 , 江苏科学技术出版社 ,
1 9 82
〔S J 徐世明等 : 中草药 , 26 ( 1 0 ) : 1 0 , 1 98 5
〔6〕 裘宝林 : 植物分类学报 , 1 8 ( 1 ) : 9 6 , 1 98 0
〔7」毛祖美等 : 中草药通讯 , 10 ( s ) : 3 3 , 1 97 9
中药材第12 卷第 1期 1 9 8 9年 1 月
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 1989. 01. 009
根茎粉末及解离组织 1 ()厚 壁 细胞 :横
断面观呈类多角形 , 纵切面观多呈长棱形 , 纺
锤形 , 末端渐尖或倾斜 , 少数呈类圆形或类三
角形 , 有的略呈角状分枝 , 直径 7 ~ 1 0林m , 长
峨9~ 1 7 0协m , 壁厚薄不一 , 2 ~ 8 卜m , 木化 ,
层纹大多细密而 明显 , 纹孔圆点状 、 短缝状 ,
孔沟多稀疏 。 (2 )管胞 : 主为梯 纹 管胞 , 直径
12 ~ 6邹m , 多角梭状 , 各面梯状纹孔多一列 。
(3 )非腺毛 : 1 ~ 6 个细胞 , 平直 、 弯曲 或 稍
拐折 , 顶端细胞较长 , 有的下部细胞较大 , 上
部细胞骤细 , 直径 1 8~ 3 2 (~ 5 5 )卜m , 长 1 2 0~
6 9 0卜m , 壁薄 , 有的胞腔内含黄 棕色 物 。 (4 〕
内皮层细胞 : 表面观呈长方形或类方形 , 垂周
图 3
表皮
根横切面洋圈 ( x 4 00)
厚壁组 织 3 . 内皮层 4 . 维 管束
圈 2 根茎徽切面详圈 ( x Z书 )
1
。 非腺毛 2 . 表皮 3 . 厚壁组织 4 . 薄璧组 织
6
. 内皮层 6 . 物皮部 7 . 木质部 8 . 团块物
一万药石第几卷第 1 期 1 9 一 8 9 年丽一
图 4 根尧粉末及解离组织图 ( x Z石5)
褪厚壁细胞 2 . 管胞 3 。 非腺 毛 4 . 内皮层细6 . 淀粉杜
壁稍厚 ,
排列整齐
卿波炸鑫弯曲
, 细胞内含黄
, 纵切面观细他扁平 ,棕色物或 .油 滴状勒。
( 5) 淀粉粒 : 单粒圆形、 椭圆形或广卵形 , 直
径 3 ~ 13 林m , 脐点点状或短缝状 , 层纹不明
显 , 复粒由 2 ~ 3分粒组成 。 (图 4 )
2
. 海金沙草 、
茎横切面 与根茎相似 , 其区别点在于 :
厚壁组织 6 ~ 6 列细胞 , 壁均较薄 , 基本薄壁
组织较宽广 , 内皮层细胞凯氏点明显 , 胞腔内
无黄色油状物 , 维管束中木质部 呈 三 ’叉 状 。
( 图工c , 图 5 )
叶横切面 表皮细胞一列 , 外被多细胞或
单细胞非腺毛 , 黄棕色 ; 叶肉栅栏组织与海绵
组织分化不完全 ; 主脉维管束周韧型 , 主脉处
上下表皮内侧均有厚壁组织 , 木化或微木化 。
.
( 图 6 )
叶表面观 表皮细跑垂周璧薄 , 深波状弯
曲 , ` 气孔位于下表皮 , 圆形或长圆形 , 直径24
~ 31 林m , 副卫细胞 2 一 4 个 , 直 轴式 或不定
式 。 非腺毛 1 ~ 4 个细胞 , 顶端细胞较长 , 长
12 6~ 6 9 0“ m , 直径 2 8一 3 2“ m , 壁厚至 5 “ m ,
有的胞腔内含棕色物。 ( 图 7 )
二、 薄层层析
取海金沙根 、 海金沙 草各 2 9 , 二份 , 一
份加 9 5% 乙醇回流 1小时 , 过滤 , 滤液蒸干 ,
加乙醇 1 m l溶解 , 为点样液A , 另一份置索氏
提取器中 , 用石油醚脱脂 4 小时后 , 用 , 5% 乙
醇提取至无色 (约 5小时 ) , 回收乙醇 , 残渣
加2 5m l乙酸乙酷溶解 ,再以 2% N a H C O 3液萃取
至无色 , 萃取液浓缩至干 , 加“ % 乙醇定容至
2 m l
, 为点样液B 。
取点样 液 A 10 尸 , 点于聚酞胺薄膜上 , 以
乙醇一水 ( 3 : 2 ) 为展开 剂 , 展 距 1 8d n ,
团 6 叶板切面简图 ( 为 2 35 )
1
. 非睐毛 2 。 上表友 3 . 叶 肉 健二 内皮层
5
. 初皮部 成 木质邵 . 7 . 厚壁组织 8 . 下表皮
’ 一田 红一 笼被切面礴曲( x 40 )
i
。 表皮 2 。 厚壁组织 .3
5
. 初皮部 6 . 木质部
萍壁组织 4 . 内火遥 图 7 叶表面现 ( x 2 35 )
A
。 上表皮 (示非旅毛 ) B 。 下表皮 (示 气孔 )
币两育骊函藉获丽了丁可万矿硕一
盯一…一几
关系数 r ` O ; 9 97 9 。 将样品液配制成一
定浓度 , 同法侧 己 , 总黄酮含量 ( A / m g ) 为 :
海金沙根 。 . 1 0 2 3 , 海金沙草 0 . 0 102 。 其方l畔回
收率为 9 5 . 2% ( n 二 5 ) 。O。.口0
O
O
O已00
0
0O
三二三习应二二
口 名
人 . 点样浓 A
1
。 海金沙草
B
薄层层析翅潜
B
. 点样液 B
2
. 海金沙根 5 . 咖啡映
四 、 咖啡酸含蚤测定
按薄层层析项下点样液 B 的制备方法及层
析条件进行薄层层析 , 用岛津 C s一 9 30 型薄层
扫描仪 ,在 久` = 3 3 0 n m 、 入R = 2 1 o n m 波 一长处 ,做
反射法锯齿扫描测定 。 咖啡酸斑点在 2 小时内
积分值稳定 , 线性范围 1~ 5件g : 回归方程 A =
1 9 8 0 9 C (件g ) + 3 3 5 0 9 . 9 , 相关系数 r = 0 . , 9 9 0。
样品测定按两点外标法计算 , 加样 回 收 率为
9 .7 8写 ( l卜 4 ) 。 测定结果 : 咖啡 酸 含量海
金沙草 0 . 36 % , 海金沙根微量 。
用 1 % A lc l: 乙醇液显色 , 置紫外灯下观察 ,
斑点呈黄绿色荧光 。 ( 图 S A )
取点样液 B l邻 1 , 点于聚酞胺薄膜上 , 以
苯一甲醇一冰醋酸 ( 4 5 , 20 ` 6 ) 为展开剂 ,
展距13 cm , 置紫外灯下观察 , 斑点 呈 蓝 色 荧
光 。 ( 图 s B )
、
三 、 总黄酮含量测定
取海金沙根 、 海金沙草及海金沙各 g2 , 精
密称定后 , 置索 氏提取器中 , 石油醚脱脂后 ,
用95 % 乙婷提取至无色 ( 约 5 小时 ) , 回收乙
醇至干 , 残泣加 2 5m l 乙 酸 乙醋溶解 , 以 2 %
N a H C o 。溶液萃取 , 弃去 N a H C o , 萃取液 ,再以
1% N
a O H从乙酸乙酷液中萃取总黄酮 ,调N a O H
萃取液至 pH Z 一 3 , 乙酸乙酷萃取 二次 , 回
收乙酸乙酿 ,精确加入 95 % 乙醇 s m l , 制成样品
液。 取样品浓少许 , 稀释后用岛津 U琴- 30 00
型紫外分光光度计在波长 2 0 ~ 4。。n m间抽描 ,
三者紫外光谱基本一致 , 最大吸收波长为 27
nm
。 以海金沙为对照品制备标准 曲线 , 总黄
酮含量 以吸收值为代表 , 线性范围 1一 6 . sm g
/ lm
, 回归方程A = o . 2 3 s s C ( m g /m l ) 一 0 . 1 2
一币药韧物百卷勇事巧万一 1 9 8 9 年印 -
五 、 小 给
海金沙系藏类植物 , 其各药用部分均符合
旅类植物的组织构造特点 , 表皮下有厚壁细胞
层 , 维管束周韧型 , 木质部无 导管而有管胞 ;
薄层层析及含量测定结果表明 , 不 同药用部分
所含成分尚不完全相同 , 海金沙根亥酮含量较
高 , 咖啡酸含量甚微 , 而海金沙草咖啡酸含量
较高 , 从而初步揭示了它们在临床应用上侧重
面的差异 。
. 本院 19 8 7届毕业生
致谢 江苏 省药检所沈彤云主任药师蹭送咖啡酸标准品 。
参 考 文 献
1[ 〕 .上海药物研究所 : 中草药有效成分的捉取和
分离 , 1 页 , 上海科技出版社 , 1 9 72
[ 2〕 余继曙等: 中草药 , 1 6 ( 3 ) : 93 , 1 9 8 5
全国中药经理计划会议
在北京怀柔召开
【本刊讯】 1 98 9年度全国中药经理计划会议于
19 88年 1 1月 22一 2 7日在北京怀柔召开 。 会议总结中药
三年大见成效的工作 , 编制 19 8 9年中药各项计划 , 研
讨理顺中药管理体制和整顿中药生产 、 流通秩序等问
题 。 卫生部副部长兼国家中医药管理局局长胡熙明同
志出席会议并作了重要讲话 。 〔 元四 辉 )