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苯丙氨酸和酪氨酸对白花曼陀罗组织培养的生长和产生生物碱的影响



全 文 :熔点 14 9oC,分子量 4 02 , 2 7 8 ; 成分 1 ,熔点 80 o C , 分
子 鼠连0 , 26 1。 三个成分的红外光谱均呈现羚基醋
基及映喃环 (8 80 厘米一 l) 吸收峰。 经过详细的核磁共
振及质谱分析 ,证明 I~ 1 分别为 3一经基一 i m br i c at al
一异戍酸脂 , 3一经基一 il 二br 允 at al 一 a 一甲基丁 酸 醋及
3
一经基一 im b r i e a t a l 安吉酸酚。
扛B o h l m a n n F 等 : C h e m B e r , 1 0 6 , 2盛7 9 ,
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o t o r h o b 。 、 £。 b r £。 扭 中的二菇成分
从菊科 万艺川 e hr 肠be 垠 公m b而`韶 a C u at r . 中分
离出三个新的吠喃二菇成分 ,并证明其结构为 I、 1
式 。
取 50 克植物地上部份 , 经乙醚一石油醚 ( 1 : 2)
提取 , 提取物经氧化铝层析 , 以乙醚一石油醚 (1 : 20)
洗脱 ,得 2 克长链脂肪醇 ; 继以 乙醚 一石油醚 ( 1 : 3) 洗
脱 , 得到成分 I、 1 的混合物 。 该物经多次硅胶制备
薄层层析 〔乙醚 一石油醚 (1 : 3 ) 〕得 25 毫克成分 I , 1 5
毫克成分H 及 8 毫克成分 1 。 柱体再以乙醚 一石油醚
( l
: 1、洗脱并甲醋化得 160 毫克油酸甲醋。
成分 I , 熔点 1 03 o C , 分子量 4 02 , 27 7 ; 成分 1 ,
珑罕以刀 B
I
,
R 二 C H Z一 C H ( C乓 ) ;
1

R = 一 C H一 C H Z一 C H 3
{
C壬王s
1
,
1又= 一 (卜 C H一 C H 3
C H 3
10 2
. 苯丙氨酸和酪氨酸对白花曼陀罗组织晤养 的
生长和产生生物碱的影响
本文研究了苯丙氨酸和酪氨酸对 白花曼 陀罗
(及之奴翔 了规滋 1 L . )组织培养中生物碱含量的影响。
于 M u ar sl i ge 一 s k o g 培养基 (简称M S培养基夕* 中加
进 1 P m Z , 4 一二氯苯氧 乙酸 (简称 2 , 4 一 D )和 i界琼
脂 (此培养基简称 R T 培养基 ) , 接种培养 32 个月。
然后将组织转移到下述三种培养基 ,即①新鲜的 R T
培养基 ; ② R T 一 P A 培养基 ( R T + 0 . 1% 苯丙氨酸 )
及 ③ R T 一 T Y 培养基 (R T 十 0 . 1界 酪氨酸 )上。 每
间隔 4 、 8 、 12 周枚集和秤重井计算生长指数 (生长指
数 = 最终干重 一最初干重 /最初干重 ) 。
此夕卜又分别于 4 、 8 、 12 周收集培养组织 , 干燥。
取组织 1 克 , 干燥 , 以氯仿提取其生物碱。 总生物碱
的含量是由三种培养基于三种时间内各取样 5 份进
行测定而得。 先用纸层析和薄层层析鉴别生物碱 ,并
以阿托品 、 胆碱 、 东食若碱 、 食若碱为标准品对照 。
然后将氯仿提取物进行气一液层析以测定各生物碱
的浓度 。
结果表明 : 阿托品 R f = 0 . 35( 橙色 ) , 胆碱 (未移
动 ,紫色 ) , 蓖若碱 R f = 0 . 3 6 (橙色 ) 。
在 R T 一 T Y 及 R T 一 P A 培养基上生长组织中阿
托品的含量分别为 2 . 30 及 1 . 12 毫克 /克 , 干重 ; 而
在 R T 培养基上仅有 0 . 384 毫克 /克 ,干重 。
另有 5种未知生物碱 ( A~ E ) , 其中 A 在 R T -
T Y 培养基上的浓度最大 , 达 5 . 5 毫克 /克 , 干重。
各种生物碱主 R T 一 T Y 培养基中的浓度在 8 周达到
最高峰 ,生长指数在 12 周后即不再增加 。
本研究提示 , 酪氨酸是托品类生物碱合成的前
体 , 虽然这一生物合成途径目前还未阐明。
* M s 培养基的组成可参见 p h y s i o l p l a n t a r u m ,
15
, 47 3
, 19 6 2
一 1 8 5一
DOI : 10. 13220 /j . cnki . ji pr . 1975. 03. 024
白花曼陀罗组织培养的生物碱浓度表
( 8 周 , 毫克 /克 , 干重 )
生 物 碱 R T R T 十 P A }R T十 T Y
0
.
3 8 4
0
.
0 7 6
2
.
3 0
现有数据提示 ,在有外加维生素 C 的情况下 , 组
织中维生素 C 的成分的增加是由于从培养基摄取维
生素 C所致 。 同样可见 ,随着维生素 C 浓度的增加 ,
生长指数也增加 。 上述结果表明 , 维生素 C 影响曼
陀罗和白花曼陀罗的生长。
〔M o h a n S 等 : I记 i a n J P h a r m , 3 6 ( 2 ) :
49
,
1 9 7 4 (英文 ) 榭启昆摘 叶三多校二
口叩碱
0
.
0 3 4
阿胆食
0
.
6 18
0
.
0 8 5
5 5
1 2 2
0
.
1 9 5 0
.
3 1 5
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0
.
0 6 4
10 4
. 芝麻的组织培养产生田醇
用 R T 培养 基 对 芝 麻 s( e sa 柳机 咖成`“ 哪
iL n n
.
)作组织培养 , 每间隔 6~ 8周将生长的组织转
移到新鲜的 R T 培养基再培养 。 共培养 3 6 个月 ,每
间隔 2 、 4 、 6 及 8 周计算生长指数 。
将生长的组织干燥粉碎 , 于 30 形 H CI (体积 /
体积 ) 中回馏加热 4 小时。 水解物用冷水洗涤至中
性 ,过滤 ,于 6 0o C 干燥 , 然后以沙氏提取器用苯提取
作薄层层析 , 并以氯仿提取作气 -液层析 。 计算幽醇
产量和组织的生长指数。
去除组织后残留的培养基于 95℃ 加热液化 , 调
整至 p H 3 , 以苯提取幽醇 。 用硅胶 G 薄层板 , 以正
己烷一丙酮 (8 : 2) 将提取物和对照品展开 , 空气干燥
后 , 以 5 0多 H Z SO ; 喷雾 。
结果共分离得 7 个斑点 , 与对照品相应者有 召-
谷街醇 (R f = 0 . 85 ) 、 胆当醇 ( R f = 0 . 88 ) 、 羊毛街醇
( R f = 0
.
89 )和豆留醇 (R f = 0 . 9 1 ) ; 另有三个未知物
的斑点 。
组织的生长指数以培养 6周时最高 (6 . 功 , 8 周
时为 5 . 6 。 街醇总含量亦以培养 6 周时较高 ( 12 . 7毫
克 /克 ,干重 ) , 8周时为 10 . 3 毫克 /克 , 干重。 残留
培养基中的 舀醇含量也以 6 周时为最高 (3 . 7 毫克 /
毫升 ) 。
将培养 6 周的组织提取物乙酞化 , 进行气一液层
析 ,显示有 7种昌醇类化合物 , 其中已分离并确定的
有 价谷街醇 (0 . 31 外) 、 胆幽醇 (o . n 界 ) 、 羊毛幽醇
( 0
.
13 多)和豆街醇 (0 . 28 多 ) ; 其余三种 ( 1 . 74 毫克 /
克 , 干重 , 0 . 17 多 ; 1 . 39 毫克 /克 , 干重 , 0 . 13 多 和
1
.
20 毫克 /克 ,干重 , 0 . 12 界)尚未确定。
本文提示 , 组织在管内培养长达 32 个月 , 仍持
有街醇类生物合成的能力 。
〔J a i n S C 等 : I n d i ; n J P h a r m , 3 5 ( 5 ) :
16 3
,
19 7 3 (英文 ) 榭启昆摘 叶二多扮 、
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〔uP s h P a K 等: I n d i a n J P h a r m , 3 4 ( 2) :
42
, 1 97 2 (英文 ) 黝启昆摘 叶三多校 ]
10 3
. 曼陀罗组织培养中维生素 C 的生长 和代谢
维生素 C 在植物生长和代谢中所起的作用 已有
报导 。 本文研究了曼陀罗和白花曼陀罗在组织培养
时由植物组织产生的维生素 C 以及外加不同浓度的
维生素 C 对组织生长所产生的影响。
组织培养 : 于 R T 培养基接种植物组织 , 培养
32 个月 , 然后将组织转移到下列三种培养基 : 新鲜
的 R T ; R T + 5 0 0 毫克 /升维生素 C ; R T + 1 0 00 毫
克 /升维生素 C 。 分别在 2 、 4 、 6 、 8 和 10 周收集和秤
重 ,并计算生长指数。
提取过程 : 将植物组织与 2务偏磷酸在乳钵中
研匀 ( 10 0毫克组织 : i 毫升偏磷酸 ) ,浸渍几秒钟 ,混
合液以低速离心 ,取澄清液作维生素 C测定。
维生素 C测定 : 取 1毫升样液 , 以 2 , 6 二氯苯酚
蓝靛酚与之反应 ,未反应的染料以戊醇提取 , 用分光
光度计于 546 毫微米处读取吸收值 , 并从 0 . 01 毫克
、 0 . 0 9毫克维生素 C制得的标准曲线中计算浓度。
结果表明 , 曼陀罗和 白花曼陀罗的愈合组织培
养 8 周 , 可见维生素 C 的成分增加 , 而第 10 周时生
长指数均见减少。 在加有 1 0 0 0 毫克 /升维生素 C 的
R T 培养基上生长的组织 ,其生长指数和维生素 C的
成份均较其它两种培养基者高。 白花曼陀罗在各类
培养基上所产生的维生素 C的浓度均比曼陀罗为高。
即使持续培养长达 3 2 个月 , 组织产生维生素 C 的能
力并不减少 。 多次再培养可增加维生素 C 的 含 量 。
如果在每 8 周后不作组织再堵养 , 则生长指数和维
生素 C 含量均下降。 10 5 . 番木瓜组织培养液中蛋白水解酶研究
一 18 6一