全 文 ：第 卷第 期 扬 州 大学学报 （农业与生命科学版 ）
年 月
桃枝枯病菌生物学特性研究
纪兆林、 戴 慧俊、 王 焱 、 宋 宏 峰 ， 童 蕴 慧 、 徐敬友 “
扬 州大学 园艺与植物保 护学 院 ， 江苏 扬州
江苏省农业科学院 园艺研究所 江苏省高效园 艺作物遗传改 良重点实验室 ， 江苏 南京
摘 要 ： 桃枝枯病是近年来在江 、浙 、 沪一带 出 现的一种新病害 ， 为有效防控桃枝枯病 ， 对其病 原桃拟茎 点霉
办 的生物学特性进行研究 。 结果表明 ： 桃枝枯病菌菌丝在 培养基 、温度 、 及光照
条件下生 长最好 ； 菌丝生长最适碳源是蔗 糖和葡萄糖 最适氮 源是 蛋 白胨和牛 肉 浸膏 。 病菌在 上易 产生 分生孢子
器 和分生孢子 。 分生孢子在温度 ： 、光照 ￡ 及 高湿 （ 以上 ） 条件下 萌发率最高 。 综合而言 ，
不 同 的 营养 培养基 、碳 源 、 氮源 ） 、 温度 、 光照 、 、湿度等环境条件对桃枝枯病菌菌丝生长和孢子萌发有显著影响 。
关键词 ： 桃枝枯病 ； 桃拟茎点霉 ； 生物学特性
中 图分类号 ： 文献标 志码 ： 文章编号 ：
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年 以来 ， 桃枝枯病在我 国南方桃产 区相继发生且逐年加重 ， 病原为半知菌类拟茎点霉属桃拟
客点 。 该病主要表现为新生枝条基部形成揭斑 ，
随后病斑环绕扩展并缢缩 ， 病斑 向枝 条上部扩展 ， 致使叶 片枯萎 、 变黄 、 脱落 ， 枝条 当年或翌年枯萎 、枯
死 ，严重影响桃树生长和产量 ， 病树产量一般损失 ， 发病严重的整棵桃树枯死 。 桃枝枯病菌
生物学特性鲜见报道 ，本试验对桃枝枯病病原菌生物学特性进行系统研究 ， 以期为病害深人研究及其田
间 防治方法提供理论依据 。
收稿 日期 ：
基金项 目 ： 国 家现代农业产业技术体 系建设专项 （ 江苏省农业科技 自 主创新资金项 目
作者 简介 ： 纪兆林 （ — ， 男 ， 江苏 句容人 ， 扬州大学副教授 、博士 ， 主要从事植物病害 防控及分子 植病研究 。
通信作者 ， ；
第 期 纪兆林等 ： 桃枝枯病菌生物学特性研究
材料与方法
供试茴株
桃枝枯病菌 自桃病枝分离获得的病原真菌⑷ ， 由本实验室提供 。
病原菌生长 条件研究
研究不 同培养基 、温度 、光照 、 、碳源和氮源等条件对桃枝枯病菌生长的影响 。
培养基处理 ： 选用 马铃薯 、葡萄糖 、琼脂 、水 、察 氏 （ 培
养基 （ 、 、 、 〇 、 、 蔗糖 、 琼脂 、水
、 麦芽糖培养基 麦芽糖 、琼脂 、水 和燕麦培养基 （燕麦片 、琼脂 、
水 。 病菌在 上 活 化培养 后 ， 用打孔器在菌落边缘打取直径 菌饼 并移
至上述各培养基平板 中 央 。 每处理重复 次 。 移菌后将各处理平板置于 ： 下培养 采用十字交
叉法测量菌落直径 ， 待菌落长满平板后持续观察分生孢子器形成时间和特征 。
温度处理 ： 按上述方法将活化菌饼接至 平板 中 央 ， 分别置于 、 、 、 ’ 恒温箱 中培
养 ， 每处理重 复 次 ， 后测量菌落直径 。
光照处理 ： 将活化菌饼接至 平板 中 央 ， 分别置于全光照 、 光照 、 全黑 暗条件下
培养 ， 每处理重复 次 ， 后测量菌落直径 。
值处理 ： 将活化菌饼分别移至 、 、 、 、 、 、 的不同 平板上 ， 置
于 。 下培养 ， 每处理重复 次 ， 后测量菌落直径 。
碳源处理 ： 分别用葡萄糖 、麦芽糖 、乳糖 、 淀粉等 种碳源等量置换察 氏培养基中 的蔗糖 ， 按上述
方法接种病菌 ， 每处理重复 次 ， 培养 后测 量菌落直径 。
氮源处理 ： 分别用甘氨酸 、 丙氨酸 、亮氨酸 、 硫酸铵 、硝酸铵 、 牛 肉浸膏 、蛋 白胨 、尿素等 种氮源等
量置换察氏培养基 中 的 〇 ， 按上述方法接种病菌 ， 每处理重复 次 ， 。 培养 后测量菌落直径 。
病原菌分 生孢子萌 发条件研究
将病菌接人 上于 下培养 后 ， 平板菌苔上产生分生孢子器 ， 器孔 口 分泌 出含有大量
分生孢子 的黄色黏液 ， 用移液器吸取分生孢子分泌液 ， 溶于 葡萄糖溶液 中 ， 摇匀 制成分生孢子悬浮
液母液 ，稀释孢子液浓度至 倍显 微镜下每视野 个分生孢子 ， 用于研究不同温度 、光照 、 湿
度和 对分生孢子萌发的影响 。 孢子萌发判 断依据为孢子萌发芽管长度达到孢子直径 的一半 。 孢子
萌发率 萌发孢子数 总 观察孢子数 。
温度 ： 取上述配制 的分生孢子悬浮液 滴于 凹玻片上 ， 分别置于温度 、 、 、 下培
养 ， 每处理重复 次 。 分别于培养 、 、 、 时镜检观察分生孢子萌发情况 ， 每次随机选 取 点观
察 个分生孢子 ，计算孢子萌发率 。
光照 ： 将分生孢子悬浮液玻片分别置于全光照 、 光照 、 全黑暗条件下 ° 培养 ， 每处
理重复 次 。 按上述方法镜检观察 ， 计算孢子萌发率 。
湿度 ： 将孢子悬浮 液制成玻片 ， 快速风干后置于相 对湿度 、 的人工气候箱 中 。 培
养 ， 每处理重复 次 。 按上述方法镜检观察 ， 计算孢子 萌发率 。
值 ： 用 或 溶液调节孢子悬浮液 值分别为 、
、 、 、 、 、 ， 各取 滴于凹玻片上 ， 于 下培养 ， 每处理重复 次 。 按上 述方
法镜检观察 ，计算孢子萌发率 。
数据分析
数据分析均采用 软件和 软件进行处理 。
结果与分析
病菌生长特 性
培养基对菌丝生长 的影 响 ： 病菌在 种培养基上生长差异显著 （ 图 ， 在 上 生长最快 ，
1 0 6 扬州大学学报 （农业 与 生命科学版 ） 第 卷
后开 始产生分生孢子器 ， 散布 于 整 个平板上 ， 分生孢子
器体型较大 ， 产生大量分生孢子 ； 其次是察 氏培养基 ， 菌落表 — ‘面呈现致密 白 色 ， 后产生分生孢子器 ， 散布 于整个平板
上 ， 分生孢子 器体型较小 ； 再 次是燕 麦 培养基 ， 分生孢 子器
后产生 ）集 中分布于平板 中 央位置 ， 体型较大 ， 色浅 ， 器 ：
孔 口 不 明显 ， 后期 变 为黑 褐色 ； 菌 丝生长最慢的 是麦芽糖培
养基 ， 培养基呈现透 明色 ， 菌丝稀薄 ， 后产生 白 色的载孢 察 氏 芽 糖 燕麦
体菌组织 ， 平板上几乎不形成分生孢子器 （ 图 。 培养基
温度对菌 丝生长 的影响 ： 由 图 可 见 ， 病菌在 图 培养 基对桃枝枯病菌菌丝生长的 影响
：范 围 内均 能生 长 ， 但各 温 度 之 间 菌丝生长 差异显 著 ，
为病菌生长最适 温度 ， 其次是 ， 另外病菌在低温
。 下生长要好于高 温 （ 。■
图 培养 基 中桃枝枯病菌菌落形 态及分生孢子器
培养 后拍照 ； ； 察氏培 养基 ； 麦 芽糖培养 基 ； 燕麦培养基
光照对菌丝生长 的影响 ： 光照 对病原菌丝生长影响 显著 ， — 光暗 交替最有利 于病菌菌
丝生长 ， 其次是全黑暗条件 ， 最后是全光照条件 （ 图 。 光照 时间越长 ， 菌落颜色越暗 。
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温度 光照时间 —
图 温度对桃枝枯病菌菌 丝生长 的影 响 图 光照对桃枝枯病菌菌丝生长 的影 响
不同 小写字母温度 处理间 差异显著 （ 〈 不同 小写字母光照处理间差异显著
对菌丝生长的影响 ： 由 图 可见 ，病原菌在 范 围 内均可生长 ， 时菌丝
生长速度较快 ， 适宜病菌生长 说明该菌适宜在 中性微酸环境中生长 。 时
菌丝生长较缓慢 ， 显著低于其他 处理 。
碳源对菌丝生长的影响 ： 由 图 可知 ， 桃枝枯病菌均能利用单糖 （葡萄糖 、 二糖 （ 乳糖 、 麦芽糖 、
蔗糖 ） 、 多糖 （ 淀粉 ） 作为碳源 ， 其 中蔗糖和葡萄糖最有利 于菌丝生长 ； 其次是麦芽糖和乳糖 ； 病菌在淀粉
上生长最慢 。
氮源对菌丝生长的影响 ： 由图 可见 ，病菌均能利用所试无机氮 硝酸铵 、硫酸铵 ） 和有机氮 （尿素 、蛋
白胨 、 丙氨酸 、 甘氨酸 、亮氨酸 、 牛 肉 浸膏 ） ， 但不 同氮源对病菌菌丝生长影 响很大 。蛋 白胨和牛 肉浸膏最适宜
第 期 纪兆林等 ： 桃枝枯病菌 生物学特性研究 〇
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° 蔗糖 葡萄糖 麦 芽糖 乳糖 淀粉
碳源
图 对桃枝枯病菌菌 丝生长 的影响 ’ 图 碳源对桃枝枯病菌菌 丝生 长 的影响
不同小写字母 处理间差异显著 （ 不同 小写字母碳源处理 间差异 显 著 （
病菌生长 ， 其次是丙氨酸 和亮氨酸 ， 再 次是甘氨酸 和尿素 ， 而在无机氮源硝 酸铵和 硫酸 铵培 养 基上 生 长
最慢 。
病菌分生孢子萌发 特性
温度对分生孢子萌发的影响 ： 由 图 可见 ，桃枝枯病菌分生孢子在 范围 内均可萌发 ，
时萌发率最高 ， 萌 发率为 其次是 ， 萌发率为 ： 孢子萌发率低于
孢子萌发率 ， 可见温度较高对孢子萌发影响较大 。 此外 随着时间 的延 长 ，孢子萌发率也相应提高 。
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温度
图 温度对桃枝枯病菌分 生孢子萌发 的影响
图 氣源对桃枝枯病菌菌丝生长 的影响
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不同小写字母氮源处理间 差异 显著 （ 相同萌 发时 间不 同小写字母处理间差异 显著 （
光 照对 分 生 孢 子 萌 发 的 影 响 ： 由 图 可 知 ，
「光照条件最有 利 于 孢子萌发 ， 随着 光照时 间的 々
延 长 ， 萌发率相应提高 ， 孢子 萌发 率达 显著高 ：
；
于全黑暗和全光照条件 ； 而全黑暗和 全光照 条件下孢子萌
；
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发率差异不显著 。
湿度对分 生孢子萌 发 的影 响 ： 由 图 可知 ， 分生
一
孢子萌 发需要 高 湿 ， 而在相 对 湿度 条件 下孢子 萌 发 ‘ ‘ ‘
率较低 ， 孢子萌发率仅为 。 光照时 间
对孢子萌发的影响 ： 由 图 可知 ， 在 图 光 照对桃枝枯病菌分生孢子萌发的影 响
范围 内病菌分生孢子均可萌 发 ， 但不 同 对孢子 萌
发影响较大 。 在设定 范 围 内 ， 不 同 时间 段孢子 萌 发率
； ； ；
呈现正态峰分布 ， 值 日寸袍子萌发率最高 ， 相同 萌 发时间不同小写字母处理间 差异 显著
时 孢子萌发率达到 其次是 、 而在 、 、 时孢子萌发率相对较低 。
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‘ 相 对湿度
图 湿度对桃枝枯病菌分生孢子萌发 的影 响 图 对 桃枝枯病菌 分 生孢 子萌 发 的 影 响 ‘
； ； ； ； ； ；
相同 萌发时间 不同 小写字母处理 间差异显著 （ 相同萌发时间不同小写字母处理间差异显著
讨论
桃枝枯病菌 的生物学特性研究鲜见报道 ， 本研究 中 该病菌 的生物学特性与 报道 的 士 其他
种病菌 的生物学特性基本一致 。 如引起病害 的 个种病菌的最适生长温度为 、 最
佳光照时间 为 、最适 为 ； 龙眼拟茎点霉 （ 生长适温为 、 最适
为 ， 以 蔗糖 、 葡萄糖 、 淀粉为碳 源和 以 蛋 白 胨 、 硫酸 铵 和硝 酸铵为 氮源 的培养基最有利 于
病菌生长 ， 分生孢子萌发要求高湿度 和营养刺激 ，最适萌发温度为 、 最适 为 ；
牛晓 庆等 研究表 明 油棕叶斑病菌 （ 的最适生长培养基为 ， 其次是燕麦 培养 基 、 察
氏培养基 ，病菌最适生长温度为 ： 、 最适 为 ， 以 葡萄糖为碳源 、蛋 白胨为氮源最适宜菌
丝生 长 ， 这些均与本研究结果基本一致 。 郭立忠等 对杨梅 叶枯病菌 （ 研究表 明 ， 病菌 菌
丝生 长 的最适温度 为 ： 、 最适 为 ， 分生孢子萌发 的最 适温度 为 、 最适
为 ， 在高湿 和水滴 中孢子萌 发率最高 ， 中 生长速度要 显著高于燕麦培养基 ， 蔗糖 、麦
芽糖最利 于病菌生长 ， 其次是葡萄糖 ， 而淀粉效果 较差 。 这也与 本研究结果基本一致 ， 但与 孢子萌发最
适 结果不尽一致 ， 可能 与病菌本 身及其寄主等 因 素有关 。
本研究结果表明 ， 不 同的 营养 （ 培养基 、碳源 、 氮源 ） 、温度 、 光照 、 、 湿度等环境条件对桃枝枯病病
原菌的菌丝生长或孢子 萌发有显著影响 。 在供试培养基 、碳源 、 氮源 中 ， 桃枝枯病菌在 中生长最
快 ， 其次是察氏培养基 最适合病菌生长 的碳源 为蔗糖和葡 萄糖 其次是麦芽糖和乳糖 ， 最适氮源为蛋 白
胨和牛 肉 浸膏 ， 其次是亮 氨酸 和丙氨酸 。 在温度 、光照 条件下最适宜病
菌生长 。 预试验结果表 明 ， 病菌分生孢子在清水 中 萌发率较低 ， 最 高萌 发率只有 在 葡
萄糖溶液 中 ， 孢子萌发率在 以上 ， 因 此本研究 采用 葡 萄糖溶液配制孢子悬浮液 ， 用 于萌 发
条件试验 。 温度 ： 、光照 — 及高湿条件最有 利于病菌分生孢子 的萌发 。 因此
在生产 中可通过栽培措施降低桃园湿度 ， 喷施 一定量酸碱营养溶液来 抑制病菌生长和孢子萌发 ， 从而减
少病菌 的残 留 和生存 ， 以 减缓病害 。 据 田间 观察 ， 春季 月 份和秋季 月 份是桃枝枯病的发病高峰 ， 而
此阶段的气温为 。 与 本研究病菌生长和 孢子萌发 的适宜温度范 围相 一致 ， 这也与
等 ° 和 卩 等 报道 的结果相一致 。 本试验结果表明 高湿环境有利于病菌孢子萌发 ， 室 内 接种也表
明高湿有利于病菌孢子侵染发病 （ 待 发表 ） ， 这与桃枝枯病菌分生孢子通过风雨传播 ° ’ 发病相符 。
本试验仅对桃枝枯病菌 的生物学特性进行 了初 步研究 ， 不 同 地理来源 的同一种病菌不同 个
体间生物学特性方面存在较大差异 ， 因此 ， 今后有必要对不 同地理来 源桃枝枯病原真菌菌株间的 生
物学特性进行比较研究 。 在整个研究过程 中 并未发现病菌 的有性态 ， 但此方面 尚无相关报道 ， 尚需进一
步试验确证 。 为有效防控桃枝枯病 ， 桃枝枯病 的发生规律 ， 包括病菌 的 越冬越夏情况 、 初侵染 、再侵染 、
传播途径 和传播方式将是今后进一步研究的重点 。
参 考文 献 ：
尹 良芬 ， 马琼瑶 ， 陈 育 桃 溃疡病 的鉴定 西南 农业学报 ， ：
第 期 纪兆林等 ： 桃枝枯病菌生物学特性研究
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牛晓庆 ， 唐庆华 ， 余凤玉 ， 等 油棕叶斑病的病原 鉴定及其生物 学特性 江西农业学报 ， ， ：
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严东 辉 桃树溃疡病侵染循环 的研究 西南林学院学报 ， ， ：
罗 利 娟 ， 习平根 ， 姜子德 ， 等 纯培养下拟茎点霉分生孢子的形成及意义 菌物学报 ， ，
责任编辑 张立元 ）
上接 第 面 ）
目前 ， 合理施肥模块对影响产量较大的氮肥进行了较多研究 ， 构建了精确施氮模型 ， 但对于磷 、钾肥
的决策则是通过课题组已 有 的试验结果或用户 自 定义设置合理比例而实现 ， 因而 ， 有关磷、 钾肥精确施
肥决策 尚有待进一步完善 。 此外 ， 尚需丰富专家 系统模块功能 ， 如 提供栽培管理技术指导 、 水稻生产质
量标准查询浏览 、肥料农药的施用方法等 ， 还可扩充建立专家远程诊 断系 统 、 生产基地传感器实时数据
显示与 自动诊断预警等功能 ， 以使系 统更完善 、功能更全面 、技术更先进 。
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责任编辑 王子 斌 ）