全 文 ：２０１５年８月 甘　肃　农　业　大　学　学　报 第５　０卷
第４期１３５～１４０ ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＧＡＮＳＵ　ＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ 双 月 刊
枣叶枣芽中黄酮含量测定及其清除ＤＰＰＨ
自由基的作用
赵欣１，张进帮２，张丽１，祝霞１，韩舜愈１
（１．甘肃农业大学食品科学与工程学院，甘肃 兰州　７３００７０；２．兰州高原红枣业有限公司，甘肃 兰州　７３００６０）
摘要：为进一步提高枣产品的附加值，实现枣树的综合开发利用，试验采用紫外分光光度法和高效液相色谱法
分别对４种不同采摘时期（盛花后第０天和第７天）的枣叶和枣芽样品进行黄酮含量的测定，并分析了各样品醇提
物对ＤＰＰＨ自由基的清除效果．结果表明：两种方法均可用于黄酮类化合物的分析检测．不同采摘时间、部位及品
种的样品中黄酮含量各不相同，除骏枣叶的黄酮含量略低于骏枣芽外，‘七月’枣、‘大王’枣及‘灰枣’的枣叶黄酮含
量均比枣芽中的高．其中６月１２日采摘的七月枣叶中黄酮含量最高为１８．８４ｍｇ／ｇ，其醇提物对ＤＰＰＨ自由基的清
除率达到４３．１８％，显著高于对照．说明各样品对ＤＰＰＨ自由基均有一定的清除作用，且与其中的黄酮含量高度相
关，可做为有效的天然自由基清除剂．
关键词：枣叶；枣芽；黄酮；ＤＰＰＨ
中图分类号：Ｓ　６６５．１　　　　文献标志码：Ａ　　　　　文章编号：１００３－４３１５（２０１５）０４－０１３５－０６
第一作者：赵欣（１９９１－），女，学士，研究方向为果蔬加工．Ｅ－ｍａｉｌ：５１２２４５７７＠ｑｑ．ｃｏｍ
通信作者：韩舜愈，男，教授，博士，硕士生导师，主要从事果蔬加工及葡萄酒酿造研究．Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｓｎｄｈｓｙ＠１６３．ｃｏｍ
基金项目：兰州高原红枣业有限公司资助项目．
收稿日期：２０１４－０４－２１；修回日期：２０１４－０５－１６
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｉｎ　ｊｕｊｕｂｅ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ
ｂｕｄｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｒｅｍｏｖａｌ　ｏｆ
ＤＰＰＨ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌｓ
ＺＨＡＯ　Ｘｉｎ１，ＺＨＡＮＧ　Ｊｉｎ－ｂａｎｇ２，ＺＨＡＮＧ　Ｌｉ　１，ＺＨＵ　Ｘｉａ１，ＨＡＮ　Ｓｈｕｎ－ｙｕ１
（１．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｇａｎｓｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌａｎｚｈｏｕ　７３００７０，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｌａｎｚｈｏｕ　Ｇａｏｙｕａｎｈｏｎｇ　Ｊｕｊｕｂｅ　Ｉｎｄｕｓｔｒｙ　Ｃｏ，Ｌｔｄ，Ｌａｎｚｈｏｕ　７３００６０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｆｏｕｒ　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｊｕｊｕｂｅ　ｌｅａｖｅ　ａｎｄ　ｂｕｄ　ｗｈｉｃｈ　ｐｉｃｋｅｄ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｅｒｉｏｄ　ｗｅｒｅ　ｑｕａｎｔｉｆｉｅｄ　ｆｏｒ　ｆｌａ－
ｖｏｎｅｓ　ｂｙ　ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ（ＵＶ）ａｎｄ　Ｈｉｇｈ　Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　Ｌｉｑｕｉｄ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ），
ｔｈｅｉｒ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｔｏ　ｓｃａｖｅｎｇｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ＤＰＰＨ　ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｂｏｔｈ　ｍｅｔｈ－
ｏｄｓ（ＵＶ　ａｎｄ　ＨＰＬＣ）ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｎｄ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，ＨＰＬＣ　ｓｈｏｗｅｄ　ｈｉｇｈｅｒ　ｓｅｎ－
ｓｉｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ａｃｃｕｒａｃｙ．Ｐｉｃｋｉｎｇ　ｐｅｒｉｏｄｓ，ｐａｒｔｓ　ａｎｄ　ｖａｒｉｅｔｉｅｓ　ｍａｄｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｆｌａｖｏｎｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ，ｌｅａｖｅｓ　ｔｅｎｄｅｄ　ｔｏ
ｂｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｂｕｄｓ　ｉｎ　ｃｕｌｔｉｖａｒｓ‘Ｑｉｙｕｅ’‘Ｄａｗａｎｇ’ａｎｄ‘Ｈｕｉ’ｊｕｊｕｂｅ．‘Ｊｕｎ’ｊｕｊｕｂｅ　ｓｈｏｗｅｄ　ｏｐｐｏｓｉｔｅ　ｔｅｎｄ－
ｅｎｃｙ，ｌｅａｖｅｓ　ｗｅｒｅ　ａ　ｌｉｔｔｌｅ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｂｕｄｓ．‘Ｑｉｙｕｅ’ｌｅａｖｅｓ　ｐｉｃｋｅｄ　ｉｎ　Ｊｕｌｙ　１２ｔｈ　ｈａｄ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ
ｆｌａｖｏｎｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ，ａｎｄ　ｉｔｓ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｃｏｕｌｄ　ｓｃａｖｅｎｇｅ　ＤＰＰＨ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌｓ　ｆｏｒ　４３．１８％，ｍｕｃｈ　ｈｉｇｈｅｒ
ｔｈａｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐｓ，ｍｅａｎｗｈｉｌｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｅｌｉｍｉｎａｔｉｎｇ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌｓ　ｓｕｂｍｉｔｔｅｄ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｐｅｒｔｉｎｅｎｃｅ
ｗｉｔｈ　ｆｌａｖｏｎｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｊｕｊｕｂｅ　ｌｅａｖｅ；ｊｕｊｕｂｅ　ｂｕｄ；ｆｌａｖｏｎｅｓ；ＤＰＰＨ
DOI:10.13432/j.cnki.jgsau.2015.04.024
甘 肃 农 业 大 学 学 报 ２０１５年
　　枣（Ｚｉｚｉｐｈｕｓ　ｊｕｊｕｂａ　Ｍ．）为鼠李科枣属植物，
是原产于我国的特有经济树种，栽培历史至少有
３　０００ａ，在我国分布广泛［１］．枣树适应性强，在山、
沙、碱、旱地都能生长，目前在甘肃省兰州、临泽、敦
煌、临夏、庆阳等地均有枣树种植［２］．枣果具有很高
的营养与药用保健功效，富含维生素、多糖、熊果酸、
多酚等，特别是其中的黄酮类物质具有较强的抗氧
化活性，有预防心血管疾病、防癌抗癌、调节免疫、抗
衰老、抗菌、抗炎等诸多作用［３－４］．如罗丽等［５］研究表
明，沙枣果乙醇提取物中黄酮类物质含量高达
３０．７５ｍｇ／ｇ，其对·ＯＨ、Ｏ２－·自由基的清除率均
显著高于沙棘果乙醇提取物．
目前，对红枣中黄酮类化合物的分析检测多集
中于果肉，而对枣叶和枣芽中的研究还鲜见报道．与
果肉相比，枣叶、枣芽更易贮藏，但目前仅用于饲料
加工，造成了一定的浪费，如可对其开发利用，不但
有大量原料来源，更可提高产品的附加值［６］．王培香
等［７］进行了沙枣叶醇提物各组分对ＤＰＰＨ 自由基
清除作用的研究，结果表明沙枣叶可作为天然自由
基清除剂，具有很大的开发利用前景．本试验分别以
盛花后第０天和第７天４个品种（‘七月’‘大王’‘灰
枣’‘骏枣’）的枣叶与枣芽为研究对象，采用芦丁标
准品做对照，分别利用紫外分光光度法和高效液相
色谱法测定其中的黄酮含量，同时分析比较不同样
品中醇提物清除２，２－二苯基－１－苦肼基（ＤＰＰＨ）自由
基能力的强弱，评价各样品的体外抗氧化能力和自
由基清除能力的强弱，以期为建立枣叶、枣芽中黄酮
含量的快速检测方法及红枣的综合开发利用提供科
学依据．
１　材料和方法
１．１　试验材料
枣叶及枣芽：采自兰州市西固区河口镇，均选自
新鲜的，健康的枣树，采摘后样品分别用聚氯乙烯保
鲜袋包装密封后，－８０℃保藏待测．
１．２　仪器与试剂
真空冷冻干燥机（ＬＧＪ－１０型，北京松源华兴科
技发展有限公司）、紫外－可见分光光度计（Ｇｅｎｅｓｉｓ
１０ｓ型，Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ公司）、电子天平
（ＣＰ２１４型，奥豪斯仪器有限公司）、电热恒温水浴锅
（ＨＨ－Ｓ型，金坛恒丰仪器制造有限公司）、风热恒温
鼓风干燥箱（ＧＺＸ－ＧＦ１０１－ＩＩ型，上海跃进医疗机械
有限公司）、超声振荡器（ＫＱ－５００Ｅ型，昆山超声仪
器有限公司）、高效液相色谱仪（Ｕ－３０００型，Ｔｈｅｒｍｏ
Ｆｉｓｈｅｒ　ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ公司）、超低温冰箱（ＤＷ－８６Ｌ７２８
型，青岛海尔集团）．
芦丁标准品（成都思科华生物有限公司）、二苯
代苦味酰自由基（ＤＰＰＨ）标准品（梯希爱上海化成
工业发展有限公司）、Ｖｃ、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化
钠、乙醚、无水甲醇等试剂均为分析纯．甲醇、磷酸为
色谱纯．
１．３　试验方法
１．３．１　紫外分光光度法测定黄酮含量
１．３．１．１　标准溶液的制备　将芦丁标准品置于
１０５℃干燥至恒质量，精密称取１０ｍｇ，用甲醇溶液
溶解并定容至１００ｍＬ，得到质量浓度为１００μｇ／ｍＬ
的芦丁标准溶液［８－１０］．
１．３．１．２　最大吸收峰的确定　准确吸取标准品溶
液１ｍＬ，加入５％ ＮａＮＯ３１ｍＬ，摇匀，静置６ｍｉｎ；
加１０％ Ａｌ（ＮＯ３）３１ｍＬ，摇匀，静置６ｍｉｎ；再加
４％ ＮａＯＨ　４ｍＬ，摇匀，放置１０ｍｉｎ．以相应试剂作
空白对照，在波长４００～６００ｎｍ之间进行扫描，确
定最佳吸收波长．
１．３．１．３　标准曲线的绘制　分别量取０、１．０、２．０、
３．０、４．０、５．０、６．０、７．０、８．０、９．０、１０．０ｍＬ标准品溶
液于１０ｍＬ容量瓶中，甲醇定容，使其质量浓度依
次为０、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００μｇ／ｍＬ．
各取１ｍＬ于试管中，加１ｍＬ甲醇溶液，加５％
ＮａＮＯ３溶液０．３ｍＬ，摇匀，静置６ｍｉｎ后，再加入
１０％ Ａｌ（ＮＯ３）３溶液０．３ｍＬ，摇匀，静置６ｍｉｎ，最
后加４％ ＮａＯＨ溶液２ｍＬ，摇匀，静置１０ｍｉｎ后，
于最佳吸收波长处测定吸光度Ａ，绘制标准曲线．
１．３．１．４　样品测定　将枣叶、枣芽样品置于真空冷
冻干燥机中，于－４５℃下保持２ｈ．精密称取干燥后
的样品各０～５ｇ，研碎后加入甲醇１０ｍＬ，冷浸暗室
反应４～５ｈ后超声波振摇１ｈ，过滤，水浴蒸去部分
溶剂，滤液取１ｍＬ转移至１０ｍＬ容量瓶中，加甲醇
至刻度，摇匀，作为供试品溶液．精密吸取供试溶液
３ｍＬ置１０ｍＬ容量瓶中定容，测定其吸光度，并计
算样品中黄酮含量．
６３１
第４期 赵欣等：枣叶枣芽中黄酮含量测定及其清除ＤＰＰＨ自由基的作用
１．３．１．５　回收性试验　精密量取已知总黄酮含量
的样品提取溶液，分别加入芦丁标准品１ｍｇ，按
１．３．１．４测定各样品吸光度，计算黄酮含量及回收
率．
１．３．１．６　重复性试验　取每种样品各３份，按照
１．３．１．４测定其吸光度，计算黄酮含量及相对标准
偏差（ＲＳＤ）．
１．３．２　高效液相色谱法测定黄酮含量
１．３．２．１　色谱条件　色谱柱为ＢＤＳ　ＨＹＰＥＲＳＩＬ
Ｃ１８（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，粒径５μｍ）；流动相为甲醇
－０．０５％Ｈ３ＰＯ４∶水（４２∶５８）；流速１．０ｍＬ／ｍｉｎ；检
测波长２５４ｎｍ；柱温２５℃［１１－１３］．
１．３．２．２　标准溶液的制备　精密称取芦丁标准品
０．５３ｍｇ，用甲醇溶解定容至１０ｍＬ，０．２２μｍ膜过
滤备用．
１．３．２．３　样品制备　准确称取样品各５．０ｇ，分别
加入１００ｍＬ甲醇溶液，回流提取２次，收集液体，
待滤液冷却后在分液漏斗中加入相同体积的乙醚溶
液，上下层混匀３～５次，静置后分离下层溶液以除
去样品提取液中的叶绿素．收集滤液，用０．２２μｍ
膜过滤，备用．
１．３．２．４　线性关系考察　分别精密量取上述标准
品溶液１．０、２．０、４．０、８．０、１０．０μＬ进样，以色谱峰
面积（Ｙ）对浓度（Ｘ）进行回归统计．
１．３．２．５　样品含量测定　取制备好的供试样品，每
次进样１０μＬ，测定峰面积，由线性方程计算出样品
中的黄酮含量．
１．３．３　样品醇提物对ＤＰＰＨ自由基的清除作用
１．３．３．１　样品溶液的制备　取枣叶、枣芽样品各
５．０ｇ，按照１．３．２．３的方法进行处理，下层溶液用
甲醇定容至５０ｍＬ，即为枣叶枣芽黄酮提取液，避光
保存，备用［１４－１６］．
１．３．３．２　ＤＰＰＨ 溶液的配制　准确称取４４ｍｇ
ＤＰＰＨ，用甲醇溶解并定容于１００ｍＬ容量瓶中
（ＤＰＰＨ质量浓度为０．４４ｍｇ／ｍＬ）．于０～４℃下避
光保存备用．
１．３．３．３　清除率的测定　将制备好的样品提取液
各取１．０ｍＬ置于试管中，分别加入０．４４ｍｇ／ｍＬ
的ＤＰＰＨ 溶液１ｍＬ，摇匀，暗室反应３０ｍｉｎ，在
５１７ｎｍ处测定其吸光度Ａｉ．以甲醇代替样品做空白
对照，测定其吸光度Ａｃ，根据下式计算清除率．
清除率／％＝［（Ａｃ－Ａｉ）／Ａｃ］×１００％
式中：Ａｃ为１．０ｍＬ甲醇加１．０ｍＬ　ＤＰＰＨ溶液的
吸光度；Ａｉ为１．０ｍＬ样品液加１．０ｍＬ　ＤＰＰＨ溶
液的吸光度．
２　结果与分析
２．１　样品黄酮含量
２．１．１　紫外分光光度法检测结果　
２．１．１．１　最佳吸收波长的确定　由图１可知，芦丁
标准溶液在５０８ｎｍ处有最大吸收波长，因此选择
５０８ｎｍ为紫外分光光度法检测样品中黄酮含量的
最佳吸收波长．
图１　芦丁最大吸收波长扫描图
Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｍａｘｉｍｕｍ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｓｃａｎ　ｏｆ　ｒｕｔｉｎ
２．１．１．２　样品黄酮含量的测定　同一品种不同采
摘部位、同一部位不同采收时间、不同品种同一部位
样品中黄酮含量各不相同（图３）．除‘骏枣’叶的黄
酮含量略低于‘骏枣’芽外，其他３个品种的枣叶黄
酮含量均比枣芽中的高．６月１２日采摘的七月枣叶
中黄酮含量达到１８．８４２ｍｇ／ｇ，是所有样品中最高
图２　芦丁标准曲线
Ｆｉｇ．２　Ｔｈｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｃｕｒｖｅ　ｏｆ　ｒｕｔｉｎ
７３１
甘 肃 农 业 大 学 学 报 ２０１５年
图３　紫外法测得枣叶、枣芽样品中的黄酮含量
Ｆｉｇ．３　Ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅ　ｏｆ　ｊｕｊｕｂｅ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｂｕｄｓ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｂｙ　ＵＶ
的，分别是同时期采摘‘大王’枣叶、‘灰枣’叶及‘骏
枣’叶的１．３２、１．３９、３．６４倍．枣芽中黄酮含量最高的
为６月１８日采摘的七月枣芽，除此之外，较晚的采收
时间更有利于枣芽中黄酮物质的积累，特别是６月１８
日所采七月枣芽及灰枣芽中的黄酮含量分别比６月
１２日采摘样品中的高４０．１４％和１２．３９％．
黄酮类物质在植物体内主要是通过莽草酸和丙
二酸途径合成［１７］，这些前体物质均源自初生代谢并
经酶催化形成几大类基本骨架，再由不同类型的酶
促反应修饰，产生各种各样的次生代谢产物．较晚采
收的枣芽中黄酮含量普遍较高，这可能是由于随着
气温升高，在干旱胁迫条件下，诱导产生黄酮类物质
上游合成的关键酶［１８］，促进了其的合成．然而，植物
中黄酮类物质的产生与分布具有器官及生长发育时
期的特异性，且其含量大都随着花的发育和果实的
形成呈现先升高后降低的变化趋势［１９］，这是否是造
成枣叶和枣芽中黄酮物质积累规律差异的原因，还
有待于进一步研究．
２．１．１．３　回收性试验　由表１可知，所有样品的加
标回 收率均 在 ９０％ 以上，平 均回 收率 达到了
９６．６４４％，均满足试验要求，检测方法可靠．
２．１．１．４　重复性试验　由表２可知，经过３次平行
试验，样品的相对标准偏差在１．０１～４．１３，具有较
好的重现性．
表１　加标回收率测定结果
Ｔａｂ．１　Ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｔｅ
样品
黄酮含量／
（ｍｇ·ｇ－１）
加入芦丁量／
ｍｇ
测得量／
ｍｇ
回收率／％
平均回
收率／％
相对标准
偏差
‘七月’鲜叶（６．１２） １８．８４２　 １．０　 １９．８３９　 ９９．７
‘七月’鲜叶 （６．１８） １４．５５０　 １．０　 １５．５１３　 ９６．３
‘七月’鲜芽 （６．１２） ９．７９３　 １．０　 １０．６９８　 ９０．５
‘七月’鲜芽 （６．１８） １３．７１７　 １．０　 １４．７０２　 ９８．５
‘大王’枣叶 （６．１２） １４．３００　 １．０　 １５．２７８　 ９７．８
‘大王’枣叶 （６．１８） １７．４６７　 １．０　 １８．４３１　 ９６．４
‘大王’枣芽 （６．１２） １１．８５０　 １．０　 １２．８３２　 ９８．２
‘大王’枣芽 （６．１８） １２．４６７　 １．０　 １３．３９６　 ９２．９
‘灰枣’叶 （６．１２） １３．５０８　 １．０　 １４．４７７　 ９６．９
‘灰枣’叶 （６．１８） １２．３００　 １．０　 １３．２３８　 ９３．８
‘灰枣’芽 （６．１２） ９．９２５　 １．０　 １０．８７４　 ９４．９
‘灰枣’芽 （６．１８） １１．１５６　 １．０　 １２．１５１　 ９９．５
‘骏枣’叶 （６．１２） ５．１０８　 １．０　 ６．０９２　 ９８．４
‘骏枣’叶 （６．１８） ５．２２６　 １．０　 ６．１９２　 ９６．６
‘骏枣’芽 （６．１２） ６．４８７　 １．０　 ７．４６９　 ９８．２
‘骏枣’芽 （６．１８） ６．５２６　 １．０　 ７．５０３　 ９７．７
９６．６４４　 ２．５０９
８３１
第４期 赵欣等：枣叶枣芽中黄酮含量测定及其清除ＤＰＰＨ自由基的作用
表２　样品的重复性试验结果
Ｔａｂ．２　Ｔｈｅ　ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ　ｔｅｓｔ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅ
样品 含量／（ｍｇ·ｇ－１） 平均含量／（ｍｇ·ｇ－１） 相对标准偏差 （ＲＳＤ）
‘七月’鲜叶（６．１２） １９．０５０　 １８．８００　 １８．６７５　 １８．８４２　 １．０１
‘七月’鲜叶（６．１８） １４．５５０　 １４．９２５　 １４．１７５　 １４．５５０　 ２．５８
‘七月’鲜芽（６．１２） ９．８００　 １０．０３０　 ９．５５０　 ９．７９３　 ２．４５
‘七月’鲜芽（６．１８） １３．８００　 １３．５５０　 １３．８００　 １３．７１７　 １．０５
‘大王’枣叶（６．１２） １４．０５０　 １４．１７８　 １４．６６２　 １４．２９７　 ２．２６
‘大王’枣叶（６．１８） １７．０５０　 １７．０５０　 １８．３００　 １７．４６７　 ４．１３
‘大王’枣芽（６．１２） １１．６７５　 １１．９９３　 １１．８９０　 １１．８５３　 １．４０
‘大王’枣芽（６．１８） １１．９２５　 １２．９２５　 １２．５５０　 １２．４６７　 ４．０５
‘灰枣’叶（６．１２） １３．４２５　 １４．０５０　 １３．０５０　 １３．５０８　 ３．７４
‘灰枣’叶（６．１８） １２．３００　 １２．６７５　 １１．９２５　 １２．３００　 ３．０５
‘灰枣’芽（６．１２） ９．８００　 １０．３００　 ９．６７５　 ９．９２５　 ３．３３
‘灰枣’芽（６．１８） １１．０６３　 １０．８５０　 １１．５５６　 １１．１５６　 ３．２５
‘骏枣’叶（６．１２） ５．２２５　 ４．９７５　 ５．１２５　 ５．１０８　 ２．４６
‘骏枣’叶（６．１８） ５．１５２　 ５．２６１　 ５．２６５　 ５．２２６　 １．２３
‘骏枣’芽（６．１２） ６．６７１　 ６．５７０　 ６．２２０　 ６．４８７　 ３．６５
‘骏枣’芽（６．１８） ６．２８１　 ６．５８８　 ６．７１０　 ６．５２６　 ３．３９
２．２　高效液相色谱测定结果
通过计算，得到回归方程为Ｙ＝８１．９０７　Ｘ＋
０．５６０　８，其中Ｒ２＝０．９９９　９．由图４可知，不同品种
样品中黄酮含量差异显著，‘大王’枣叶及枣芽中的
图４　高效液相色谱测定样品黄酮含量
Ｆｉｇ．４　Ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｃｏｎｔｅｎｔ
ｉｎ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｂｙ　ＨＰＬＣ
黄酮含量均高于‘骏枣’叶及枣芽．６月１２日采摘‘大
王’枣叶中黄酮含量最高为１３．８６６，分别是‘骏枣’叶
及枣芽的２．６３倍和３．５５倍．而同一品种不同采摘部
位的黄酮含量则差异不大．此外，４种样品中的黄酮
含量与紫外分光光度法的检测结果基本一致．
２．３　样品醇提物对ＤＰＰＨ自由基的清除能力
不同采摘时间、部位及品种均能影响样品醇提
物对ＤＰＰＨ自由基的清除效果（图５）．所有样品对
ＤＰＰＨ自由基的清除效果均显著高于对照，其中以
６月１２日采摘的‘七月’鲜叶的清除率最高，达到
４３．１８％，是ＶＣ的１．９４倍．枣芽中清除ＤＰＰＨ自由
基能力最强的为６月１８日采摘的‘七月’枣芽，比
ＶＣ高了７２．７１％，但却低于‘七月’鲜叶的清除率．同
时各样品表现的清除效果与其中黄酮含量的变化基
本一致．
图５　枣叶、枣芽醇提物对ＤＰＰＨ自由基的清除作用
Ｆｉｇ．５　Ｔｈｅ　ｒｅｍｏｖａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｊｕｊｕｂｅ　ｌｅａｆ　ａｎｄ　ｂｕｄ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｔｏ　ＤＰＰＨ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ
９３１
甘 肃 农 业 大 学 学 报 ２０１５年
　　黄酮类物质主要通过酚羟基与自由基反应生成
较稳定的半醌式自由基，终止自由基链式反应，从而
起到抗氧化的作用．徐变娜等［２０］研究了不同时期梨
枣叶茶抗氧化成分组成及活性差异的分析，结果表
明，样品中酚类及黄酮类物质的含量较高，其抗氧化
活性也相对较好，这与本试验结果基本一致．
３　结论
１）　根据回收性及重复性试验，通过比较紫外
分光光度法及高效液相色谱法的检测结果，二者均
可用于黄酮类化合物的分析检测．
２）　不同品种红枣树中黄酮物质的积累具有器
官特异性，且受成熟时期的影响显著，枣叶及枣芽中
黄酮物质的含量变化趋势不尽相同．
３）　枣叶及枣芽的醇提物对ＤＰＰＨ 自由基有
显著的清除作用，它们的平均清除率分别为３７．６８％
和３４．１４％，且各样品的清除率存在差异，除了与其
中的黄酮含量相关，可能还受种类及其他成分的影
响，具体原因尚待研究．
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（责任编辑　赵晓倩）
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