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第 32 卷 第 1 期 广东海洋大学学报 Vol.32 No.1
2012 年 2 月 Journal of Guangdong Ocean University Feb. 2012


收稿日期：2012-01-15
基金项目：现代农业产业技术体系建设专项资金项目( CARS-46)；国家“十二五”科技支撑计划项目(2012BAD26B02)；中央级公益性科研院所
基本科研业务费专项资金(2009JBFB01)；江苏省自然基金（BK2010146）
第一作者：张宁（1988－），女，硕士研究生，专业方向为水产养殖。
通讯作者：袁新华（1970－），男，研究员，硕士生导师。Tel:0510-85555796，E-mail: yuanxh@ffrc.cn
丁香油和乙醇混合液对福瑞鲤的麻醉效果
张 宁 1，马庆男 1，苏胜彦 1,2，董在杰 1,2，袁新华 1,2，朱文斌 1,2，刘 伟 1
（1. 南京农业大学无锡渔业学院，江苏 无锡 214081；2. 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和
养殖生物学重点开放实验室，江苏 无锡 214081）

摘 要：将丁香油溶与乙醇混合进行对福瑞鲤麻醉，结果表明：丁香油与 70%乙醇按 1︰1.5 得到的混合液与丁
香油相比，使用 3min 时对福瑞鲤具有更好的麻醉效果；混合液的半致死浓度为 0.223 3 mL/L，0.1 mL/L 混合液
在鱼密度达到 1 尾 /L 时的麻醉率最高；将处理过的样品血清进行生化指标检测，丁香油处理样品的 CREA 比对
照显著高，而混合液处理样品所有血清指标与对照差异都不显著。
关键词：福瑞鲤；麻醉；丁香油；乙醇
中图分类号：S965.116 文献标志码：A 文章编号：1673-9159(2012)01-0092-05

Anesthetic Effect of Clove Oil and Alcohol Mixture on Furui Carp

ZHANG Ning1, MA Qing-nan1, SU Sheng-yan1,2, DONG Zai-jie1,2,
YUAN Xin-hua1,2, ZHU Wen-bin1,2,LIU Wei1
(1.Wuxi Fisheries College, Nanjing Agricultural University, Wuxi 214081, China; 2.Key Open Laboratory of
Genetic Breeding and Aquaculture Biology of Freshwater Fishes, Ministry of Agriculture,
Freshwater Fisheries Research Center, Chinese Academy of Fishery Sciences, Wuxi 214081, China)

Abstract: In order to know the effect of the alcohol in the clove oil and alcohol mixture，different
volume clove oil and mixture were added in the water directly to prepare anesthetics respectively to
study the anesthetic effect on Furui carp. The result showed that on the condition that the volume of
clove oil was same, the effect of clove oil with alcohol on Furui carp was better than the effect of clove
oil without alcohol on Furui carp when the anesthetic time was 3 minutes, and the volume percent of
alcohol that could dissolve clove oil was 70 percent, and the ratio that clove oil was just dissolved in 70
percent alcohol was 1:1.5 when the temperature was 30℃. At the same time, the serum parameters of
Furui carp anesthetized by the mixture and clove oil were tested, which showed that the CREA of clove
oil group was significant higher than contrast group, but serum parameters of the mixture group had no
significant difference with the contrast group. So the alcohol could improve the anesthetic effect of the
clove oil and alcohol mixture, and the effect of the clove oil and alcohol mixture on Furui carp was
better than clove oil.
Key words: Furui carp; anesthesia; clove oil; alcohol

鲤鱼（Cyprinus carpio Linnaeus）是亚洲原产
的温带性淡水鱼，在我国有丰富的品种资源，广泛
的养殖面积，年产量高[1]。福瑞鲤是中国水产科学
研究院淡水渔业研究中心以建鲤和野生黄河鲤为
张 宁等：丁香油和乙醇混合液对福瑞鲤的麻醉效果

93第 1 期
基础群体选育获得的新品种，2011 年获得水产新产
品证书。由于福瑞鲤具有优异的生产性能，因而正
被推广养殖，其市场占有率也在提高。但鲤鱼喜跳
跃，应激反应往往带来一定的损失，而麻醉剂可以
使鲤鱼在进行测量、注射等离水操作过程以及运输
过程中，避免遭受除缺氧外感染病菌等更大伤害[1]。
丁香油作为安全环保的麻醉剂，在鱼类中的研
究与使用在国内外得到越来越广泛的关注[1-6]。丁香
油的主要成分：丁香酚、β-石竹烯、环氧石竹烯、α-
石竹烯等 28 种化合物[7]，其中丁香酚含量最高，在
64%-85%。丁香酚被 FDA 认定为对人体安全的麻
醉剂，多用于牙科手术中及口腔护理中[8]。丁香油
为淡黄色或无色的透明状液体，不溶于水，易溶于
醇、醚或冰醋酸，对鲤鱼和罗非鱼是一种高效、廉
价的麻醉剂[1]。将丁香酚与乙醇按 1︰8 比例制成溶
液，并与 MS-222 相比具有较强的麻醉作用[9]；以
吐温 80、司盘 80、无水乙醇和水为原料制成丁香
酚乳液对鲤鱼也有较佳麻醉效果[10]。但在乙醇对丁
香酚麻醉效果的影响及丁香酚和乙醇的配比方面
都没见进一步说明。因此，本实验将确定溶解丁香
油的乙醇浓度，将丁香油和乙醇按比例混合麻醉福
瑞鲤，并与丁香油的麻醉效果作对比，进一步研究
乙醇对丁香油麻醉效果的影响，以期在保持麻醉剂
高效的同时，减少丁香油的用量，进一步降低化学
麻醉剂使用成本，有助于指导生产。

1 材料与方法

1.1 材料
1.1.1 实验用鱼 福瑞鲤来自中国水产科学研究
院淡水渔业研究中心宜兴实验基地，福瑞鲤平均体
重 74.1 g，平均体长 14.3 cm。在相同规格水族箱内
饲养，并在实验前停食 24 h。
1.1.2 实验用水、药品及用具 饲养和实验用水是
经曝气 1 d 的自来水，实验平均外界温度为 30℃。
无水乙醇为分析纯，丁香油购于国药集团化学试剂
有限公司，密度为 1.036～1.050 g/mL，含量（以丁
香酚计）≥85%（质量分数）。量鱼板、电子秤、量
筒、移液枪、秒表、100mL 烧杯、玻璃棒等。麻醉
用塑料箱为 0.5 m×0.4 m×0.4 m。
1.2 实验方法
1.2.1 完全溶解丁香油的乙醇浓度的确定及丁香
油在此浓度乙醇中的溶解度 配制体积分数为
95%、90%、85%、80%、75%、70%、65%、60%、
55%、50%、45%、40%、35%、30%乙醇各 50 mL，
将 1 mL 丁香油分别加入上述各浓度乙醇中，观察
丁香油在不同浓度乙醇中的溶解情况，确定溶解丁
香油的乙醇浓度。
室温条件下，用去离子水配好此浓度乙醇，并
在 7 个 100mL 烧杯中分别加入 30 mL、40 mL、50
mL、55 mL、60 mL、70 mL、75 mL。在各个烧
杯中分别加入丁香油，直到不能再溶解为止，判断
标准为：加入丁香油，稍静置片刻后，缓缓摇动几
下（有助于丁香油溶解，切忌剧烈搅拌），短时间
内混合液表面刚好看不到油状物且内部呈透明状
无油状物或微小颗粒为止，每次溶解再做一次验
证。计算丁香油在此浓度乙醇中的溶解度。根据此
溶解度，配制丁香油在此溶解度时的丁香油和乙醇
混合液（以下简称“混合液”）为后续试验使用。
1.2.2 麻醉标准及操作 本实验麻醉指示及恢复
参照梁政远等[1]将麻醉分为 5 个阶段的标准，采用
其中的 A3 阶段麻醉指示，即完全失去反应能力，
鳃盖有张合微弱，停止游动。麻醉处理后的鱼测量
体重、体长，放入有充气泵的水箱中。通过秒表记
录鱼麻醉时间。
1.2.3 乙醇、丁香油、混合液麻醉效果比较
Marking 等[11]认为，理想的麻醉浓度需同时满足：
（1）3 min 之内麻醉；（2）5 min 之内苏醒。按此
标准，参照梁政远等[1]水温 28℃时，浓度为 0.05
mL/L 丁香油麻醉大鲤鱼时间为 102 s，麻醉小鲤
鱼的时间为 50 s，苏醒时间都在 5 min 内,同时根
据本实验温度 30℃，将丁香油麻醉浓度确定为 0.04
mL/L。
取 150 尾鱼，随机分 5 组，每组 30 尾，分别
放入盛 20L 水相同规格塑料箱内，分别用乙醇（浓
度据丁香油溶解度而定）、丁香油(浓度为 0.04
mL/L）和 3 种不同浓度混合液（浓度据丁香油溶解
度而定），对其进行麻醉，用秒表计算 3 min 时麻醉
的尾数，做 3 次平行实验。
1.2.4 混合液对鱼血清生化指标的影响 取丁香
油和混合液麻醉的鱼各 20 尾，尾部静脉抽血约 1
mL，静置 30 min 后离心，取血清，同时，取未麻
醉鱼 20 尾，尾部静脉抽血，作对照。
根据以往研究[3,12-15]，选取检测的血清生化指
标包括血糖（Glu）、甘油三酯（TG）、总蛋白（TP）、
白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、白球比（A/G）、
胆固醇（TC）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）、
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尿酸（UA）、碱性磷酸酶（AL）、谷丙转氨酶（ALT）。
血清生化用罗氏 T800 生化分析仪检测，检测
试剂盒为罗氏公司产品。
1.2.5 鱼密度对混合液麻醉效果的影响 取 60 尾
鱼，随机分为三组，第一组 10 尾，第二组 20 尾，
第三组 30 尾，分别放入盛 20 L 水相同规格塑料箱
内，再分别放入相同浓度混合液进行麻醉实验（浓
度的确定以 3 min 之内麻醉，5 min 之内苏醒为标
准），用秒表计算 3 min 时麻醉的尾数，做 3 次平
行实验。
1.2.6 混合液半致死浓度测定 本实验测 3min 时
混合液的半致死浓度，计算方法采用寇氏法（Harber
法）[16]：
lg LC50＝XK-d /2∑（pi + pi+1）
其中：XK为最大剂量组剂量的对数，d为相邻
两组对数剂量之差值(大剂量组减小剂量组)，pi、pi+1
为 各 剂 量 组 死 亡 率 。 LC50 的 95% 可 信 限 为
lg-1(lgLC50±1.96S · lgLC50) ， 其 中 S · lgLC50=
d·[ ∑pi(1-pi) /Ni ]1/2。
使用已配好的混合液，通过预实验测得，3 min
时鱼死亡率为0%的混合液浓度约为0.1 mL/L，鱼死
亡率为100%的混合液浓度约为0.45 mL/L，由此确
定将鱼分为4组，组间浓度比例为1.51︰1，4组混合
液浓度分别为0.45 mL/L、0.3 mL/L、0.18 mL/L、
0.11 mL/L。
取鱼 120 尾，每组 30 尾，分别放入盛有 30 L
水的相同规格塑料箱内，用不同浓度的混合液对其
分别进行麻醉致死，记下 3 min 时鱼死亡尾数。

2 结 果

2.1 溶解丁香油的乙醇浓度的确定及丁香油在此
浓度乙醇中的溶解度
观察得知，完全溶解丁香油的乙醇浓度为70%。
将丁香油分别溶解于不同体积70%乙醇中，得到不
同体积70%乙醇溶解丁香油的体积，已知丁香油和
乙醇的密度，可以得到室温下丁香油在70%乙醇中
的溶解曲线，如图1。由SPSS19.0得到，图1的一元
回归线方程：y=0.824x，进而得到30℃下，丁香油
在70%乙醇中的溶解度为45.2 g，由此，算出丁香油
在70%乙醇中达到饱和时的体积比为1︰1.5。
2.2 乙醇、丁香油、混合液麻醉效果比较
根据丁香油在乙醇中的溶解度，所使用得5种
麻醉剂中，70%乙醇、丁香油、混合液1、混合液2
和 混 合 液 3 所 含 丁 香 油 在 水 中 的 含 量 分 别 为 0
mL/L、0.04 mL/L、0.04 mL/L、0.024 mL/L和0.016
mL/L。
0
10
20
30
40
50
60
20 40 60 80
乙醇/g
丁
香
油
/g

图 1 丁香油在 70%乙醇中的溶解曲线
Fig.1 Dissolve curve of clove oil in 70% alcohol

将乙醇、丁香油与混合液的麻醉效果作对比
（图2），70%乙醇麻醉尾数为0，说明70%乙醇单独
无任何麻醉作用；SPSS19.0统计显示，0.1 mL/L混
合液1麻醉尾数显著高于0.04 mL/L丁香油（p＜
0.05)，而两者丁香油的浓度相同，0.06mL/L混合液
2麻醉尾数也显著高于0.04 mL/L丁香油（p＜0.05)，
但是混合液2丁香油的浓度要低，所以，等量丁香
油加乙醇后的麻醉效果显著好于不加乙醇的麻醉
效果，要达到相同麻醉效果，用混合液所需丁香油
的量更低；0.04 mL/L混合液3麻醉尾数为0，显著低
于0.04 mL/L丁香油（p＜0.05)，可能是因为混合液3
丁香油的浓度太低导致。
0 2
23
17
0
0
5
10
15
20
25
30
乙醇 丁香油 混合液1 混合液2 混合液3
3m
in
麻
醉
尾
数

图2 70%乙醇、丁香油、混合液的3min平均麻醉效果
Fig.2 Different average anesthetic number of 70% alcohol,
clove oil and mixture when anesthetic time was 3 minutes
2.3 混合液对鱼血清生化指标的影响
结果如表 3 所示。SPSS19.0 统计显示，AL 和
A/G，在丁香油和对照组之间差异显著；CREA、UA
和 Glu，在混合液与对照组之间差异显著，丁香油和
对照组之间差异也显著，但丁香油的显著性更强。
由此可见，混合液对鱼的血清影响相比丁香油较小。
张 宁等：丁香油和乙醇混合液对福瑞鲤的麻醉效果

95第 1 期

表 3 丁香油和混合液麻醉鱼的血清生化指标
Tab.3 Serum parameters of the fish anesthetized by clove oil and mixture
麻醉剂
ALT/
（U/L）
AL/
（U/L）
TP/
（g/L）
ALB/
（g/L）
GLB/
（g/L）
A/G
BUN/
（mmol/L）
CREA/
（μmol/L）
UA/
（μmol/L）
TC/
（mmol/L）
TG/
（mmol/L）
Glu/
（mmol/L）
对 照 17.29±2.48 5.00±0.31b 19.34±0.70 8.60±0.35 10.74±0.37 0.80±0.02a 1.35±0.12 3.37±0.27c 44.00±8.36b 2.26±0.13 1.14±0.08 3.48±0.52b
丁香油 15.89±6.33 8.44±1.30a 19.63±1.01 7.99±0.35 11.64±0.78 0.70±0.04b 1.37±0.14 16.89±2.83a 220.00±37.12a 2.02±0.10 1.42±0.17 9.25±1.74a
混合液 16.40±3.44 6.20±0.89a,b 19.29±0.55 8.06±0.31 11.23±0.32 0.72±0.02a,b 1.45±0.10 11.08±1.69b 162.47±33.09a 2.34±0.12 1.36±0.11 8.51±1.53a
同一列中数值凡具不同字母标记的表示差异显著（p<0.05）

2.4 鱼密度对混合液麻醉效果的影响
用0.1 mL/L 混合液分别麻醉不同密度鱼，
SPSS19.0统计显示，3 min时，密度1尾/L比密度0.5
尾/L的麻醉率显著高（p＜0.05)，而密度1.5尾/L与
密度1尾/L的麻醉率差异不显著（p>0.05)，如图3。
0%
20%
40%
60%
80%
100%
0.5 1 1.5
鱼密度/（尾/ L）
3m
in
麻
醉
率

图3 不同密度鱼在混合液麻醉3 min的麻醉效果
Fig.3 Anesthetic number of different density fish that were
anesthetized by mixture of same concentration three minutes later

2.5 混合液半致死浓度
3 min时死亡的尾数分别为30、24、12、0。
按公式计算3min时混合液半致死浓度LC50=0.223 3
mL/L，95%可信限为0.1172～0.4255 mL/L。

3 讨 论

丁香油作为安全的麻醉剂，成本低，麻醉效果
好，因而在鱼类麻醉上备受关注[17-23]。梁政远等[1]
报道了丁香油麻醉罗非鱼效果较好；张富林等将丁
香酚和乙醇按1︰8[9] 和1︰5[24]混合麻醉鲤鱼；陈德
芳等[25]将丁香酚溶于无水乙醇制成溶液，麻醉鲫
鱼。本实验在以上研究基础上，进一步得出完全溶
解丁香油的乙醇体积分数为70%，并确定了30℃时
丁香油和70%乙醇的最大混合体积比为1︰1.5，而
且使用此溶解比配制的混合液，可以在完全溶解丁
香油的同时，减少乙醇的用量，更节约了麻醉剂使
用成本，同时也为丁香油和70%乙醇的配比提供了
一定的依据，凡是丁香油和乙醇的混合比例小于1
︰1.5的混合液均可用来麻醉，张富林等[9,24]麻醉所
用的混合比例也在此范围内。
在乙醇、丁香油、混合液麻醉效果对比实验
中，可知70%乙醇单独使用无任何麻醉作用，混合
液中起主要麻醉作用的还是丁香油，而等体积丁香
油，加乙醇后对福瑞鲤的麻醉效果显著好于不加乙
醇对福瑞鲤的麻醉效果，所以，混合液中70%乙醇
起到促进丁香油麻醉效果的作用。而张富林等[9,24]
仅对混合液麻醉效果进行了研究，并未提及乙醇
的作用。本实验进一步提出乙醇可以促进丁香油
麻醉，增强麻醉效果，而且达到相同麻醉效果时，
用混合液所需丁香油的量更少，更节约成本。
对 鱼 血 清 生 化 指 标 进 行 检 测 显 示 ， UA和
CREA，丁香油、混合液分别与对照组间差异显著，
与梁政远等[3]检测丁香油对罗非鱼血浆生化指标的
影响中，CREA在麻醉前分别与麻醉中、麻醉后差
异显著这一结果相似。同时，本实验还检测到Glu
在丁香油和对照组之间、混合液和对照组之间也差
异显著，AL和A/G在丁香油和对照组之间差异显
著，说明麻醉会对鱼的血液机能产生一定影响，但
是相比丁香油麻醉，混合液麻醉对鱼血清指标的影
响相对要小。
为探究影响混合液麻醉效果的因素，本实验
在保证温度（30℃）不变的前提下，鱼体大小控
制在15 g左右，研究了相同浓度混合液对不同密
度的鱼的麻醉作用。在一定的密度内，麻醉率随密
度增大而增高，而超过一定密度，麻醉率无显著变
化，其可能与混合液浓度低有关。本实验混合液浓
度为0.1 mL/L时，鱼最佳麻醉密度为1尾/L。所以，
在实践中可根据鱼的密度，适当调整混合液使用
量。
为了保证混合液使用的安全性，本实验通过
半致死浓度来提出混合液的使用警戒线。3 min时
混合液的半致死浓度为0.223 3 mL/L，即207 mg/L，
这与吕世明等[10]测得10 min时丁香酚醇乳液半致
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死浓度为181.91mg/L不同，可能是因为二者死亡
一 半 时 的 时 间 设 定 不 同 。 丁 香 酚 浓 度 超 过 160
mg/L对鲤进行麻醉是不安全的[1,9]，所以，为了避
免鱼体受伤害，其使用也要适量。
总之，本实验按1︰1.5配制丁香油70%乙醇混
合液进行麻醉，与丁香油相比，大大提高了麻醉
效果，其中70%乙醇起到了促进麻醉的作用。同
时，此混合液对鱼血清影响不显著，且浓度0.1
mL/L时鱼最佳麻醉密度为1尾/L，3 min时混合液
的半致死浓度为207 mg/L。这一结果可为以后更好
应用于生产实践，在配比、鱼密度和用量方面提供
参考。

参 考 文 献

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