全 文 ：·研究论文·
［基金项目］国家自然科学基金资助项目 （编号：３０８６０３６６）；贵州省科技攻关项目（编号：黔科合ＳＹ字［２００９］３０９２）；贵州省科技计划重大专项
项目（编号：黔科合重大专项字［２００７］６０１０号）　［作者简介］郑林，女，硕士，讲师，电话：０８５１－６９０８８９９，Ｅ－ｍａｉｌ：ｍａｉｌｏｆｚｌ＠１２６．ｃｏｍ
超高效液相色谱测定大鼠口服荭草花后入血成分
郑林，陈慧，王爱民，黄勇，兰燕宇，王永林　（贵阳医学院 药学院，贵州 贵阳５５０００４）
［摘要］　目的：通过对荭草花提取物血清药物化学研究方法的建立，探讨荭草花提取物口服吸收后的入血成分。方法：采用
血清药物化学研究方法，在建立荭草花提取物超高效液相（ＵＰＬＣ）特征图谱的基础上，通过比较荭草花提取物、荭草花给药后
含药血清、空白血清ＵＰＬＣ特征图谱，鉴定荭草花口服给药后的血中移行成分。结果：口服荭草花提取物后，从血清中发现了
１５个入血成分，其中６个为荭草花提取物中原型吸收入血的成分，其余入血成分可能为原型成分的代谢产物。结论：１５个入
血成分可能是荭草花的体内直接作用物质，对其进行深入研究将有助于为荭草花的药效物质基础及药效机制奠定基础。
［关键词］　荭草花；血清药物化学；入血成分；超高效液相；特征图谱
［中图分类号］Ｒ９２７．２　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１００１－５２１３（２０１２）０２－００９１－０３
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ａｂｓｏｒｂｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｏｆ　ｒａｔ　ａｆｔｅｒ　ｏｒａｌ　ｔｈｅ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｄｍｉｎ－
ｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｆｒｏｍＰｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔａｌｅ　Ｌ．ｗｉｔｈ　ＵＰＬＣ
ＺＨＥＮＧ　Ｌｉｎ，ＣＨＥＮ　Ｈｕｉ，ＷＡＮＧ　Ａｉ－ｍｉｎ，ＨＵＡＮＧ　Ｙｏｎｇ，ＬＡＮ　Ｙａｎ－ｙｕ，ＷＡＮＧ　Ｙｏｎｇ－ｌｉｎ（Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ
ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｇｕｉｙａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ，Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ｇｕｉｙａｎｇ　５５０００４，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｂｉｏａｃｔｉｖｅ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｆｌｏｗｅｒｓ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔａｌｅ　Ｌ．
ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ｉｔｓ　ｓｅｒｕｍ　ｐｈａｒｍａｃｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｍｅｔｈｏｄ．ＭＥＴＨＯＤＳ　ＵＰＬＣ　ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｌｏｗｅｒｓ
ｆｒｏｍ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔａｌｅ　Ｌ．ｗｅｒｅ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ａｎｄ　ｓｅｒｕｍ　ｏｆ　ｒａｔｓ　ａｆｔｅｒ　ｏｒａｌ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｗａｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｗｉｔｈ　ｓｅ－
ｒｕｍ　ｐｈａｒｍａｃｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｂｌｏｏｄ　ｍｉｇｒａｔｉｎｇ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｌｏｗｅｒｓ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔａｌｅ　Ｌ．ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ
ｂｙ　ｃｏｍｐａｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ＵＰＬＣ　ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ，ｄｒｕｇ　ｃｏｎｔａｉｎｅｄ　ｓｅｒａ　ａｎｄ　ｂｌａｎｋ　ｓｅｒａ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｆｉｆｔｅｅｎ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ａｂ－
ｓｏｒｂｅｄ　ｉｎｔｏ　ｂｌｏｏｄ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ，ｔｈｅ　ｓｉｘ　ａｍｏｎｇ　ｗｈｉｃｈ　ｗｅｒｅ　ｏｒｉｇｉｎａｌ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒｅｓｔ　ｍｉｇｈｔ　ｂｅ　ｍｅｔａｂｏ－
ｌｉｔｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｏｒｉｇｉｎａｌ　ｏｎｅｓ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ　Ｔｈｅ　ｆｉｆｔｅｅｎ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ａｂｓｏｒｂｅｄ　ｉｎ　ｂｌｏｏｄ　ｍｉｇｈｔ　ｂｅ　ｔｈｅ　ｂｉｏａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ
ｆｌｏｗｅｒｓ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔａｌｅ　Ｌ　ａｆｔｅｒ　ｏｒａｌ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ．Ｆｕｒｔｈｅｒ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｗｈｉｃｈ　ｗｏｕｌｄ　ｂｅ　ｕｓｅｆｕｌ　ｔｏ　ｃｌａｒｉｆｙ
ｔｈｅ　ｂｉｏａｃｔｉｖｅ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ａｎｄ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｆ　ａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｌｏｗｅｒｓ　ｆｒｏｍＰｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔａｌｅ　Ｌ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：ｆｌｏｗｅｒｓ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔａｌｅ　Ｌ；ｓｅｒｕｍ　ｐｈａｒｍａｃｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ；ａｂｓｏｒｂｅｄ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｉｎ　ｂｌｏｏｄ；ＵＰＬＣ；ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ
　　荭草花为蓼科植物荭蓼Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔａｌｅ
Ｌ．的花序，又名水荭花，何草花，狗尾巴花；荭草花
具有行气活血，消积、止痛的功效，用于治疗头痛、心
胃气痛、腹中痞积等功效，以其全株荭草收载于
２００３年版《贵州省中药材、民族药材质量标准》
中［１－２］。课题组在对荭草各部位药理筛选实验中发
现荭草花水煮醇沉后的正丁醇萃取部位有较强的抗
心肌缺血，减少心肌梗死面积的作用［３］。但是对于
其有效部位的活性成分研究尚不明确。中药多数为
口服制剂，故只有吸收入血的成分才可能成为其有
效组分。因此，中药的活性成分及药效物质基础研
究应该在给药后的血清中进行［４］。中药血清药物化
学正是以口服中药后含药血清为出发点，探讨中药
的药效物质基础，此法也成功应用于六味地黄丸、地
黄、大青叶等中药研究中［５－７］。文献报道的关于荭草
花口服后的体内过程处于空白，实验中采用中药血
清药物化学方法对口服荭草花提取物后血清中的成
分进行分析，以期找到荭草花在体内的有效组分群，
为其药效物质基础及药用开发奠定基础。
１　材料
１．１　仪器　Ａｃｑｕｉｔｙ　ＵＰＬＣ系统（美国 Ｗａｔｅｒｓ公
司，包含二元超高压梯度泵，自动进样器、色谱柱温
箱、阵列二级管检测器）；低温冷冻高速离心机 ＡＬ－
Ｌｅｇｒａ６４Ｒ（美国 Ｂｅｃｋｍａｎ公司）；氮吹浓缩装置
ＭＴＮ－２８００Ｄ（天津奥特塞恩斯仪器有限公司）。
１．２　药品与试剂　荭草花药材（批号２０１００８１５，课
题组于２０１０年８月采收自贵州省贵阳市平坝荭草
种植基地，由贵阳医学院药学院生药学教研室龙庆
·１９·中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第２期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２　Ｊａｎ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．０２
DOI:10.13286/j.cnki.chinhosppharmacyj.2012.02.002
德副教授鉴定为Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔａｌｅ　Ｌ的干燥花
序）；原儿茶酸对照品（中国药品生物制品检定所，批
号８０９－２００１０２）；没食子酸、花旗松素、山奈素－葡
萄糖苷、槲皮素－鼠李糖苷、山奈素－鼠李糖苷、Ｎ－Ｐ－
香豆酰酪胺、槲皮素对照品（自制，纯度≥９８％）经
ＮＭＲ、ＭＳ鉴定，结构正确；甲醇、乙腈均为色谱纯，
甲酸为优级纯，其余试剂均为分析纯。
１．３　动物　健康成年ＳＤ大鼠，雌雄各半，体质量
（２２０±２０）ｇ，均为清洁级动物，检疫合格。购自贵阳
医学院实验动物中心。许可证号ＳＣＸＫ（黔）２００２－
０００１。
２　方法
２．１　荭草花提取物的制备　取荭草花药材适量，加
入１０倍量水煎煮３次，每次１　ｈ，合并煎煮液浓缩后
加入乙醇，使醇含量为６５％，醇沉过夜。抽滤，减压
回收乙醇至无醇味，加入１／２倍量的正丁醇萃取４
次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇至近干，加
入适量纯化水溶解，使灌胃药液质量浓度为５　ｇ·
ｍＬ－１（生药量），置于４℃保存。精密量取灌胃药液
０．１　ｍＬ，加入甲醇５　ｍＬ，超声、涡混后，高速离心
（１５　０００　ｒ·ｍｉｎ－１），取上清液进样分析。
精密称取没食子酸、原儿茶酸、花旗松素、山奈
素－葡萄糖苷、槲皮素－鼠李糖苷、山奈素－鼠李糖苷、
Ｎ－Ｐ－香豆酰酪胺、槲皮素对照品适量，至１０　ｍＬ量
瓶中，加甲醇超声溶解，摇匀，制备成混合对照品溶
液，于－２０℃保存，备用。
２．２　含药血清、空白血清供试品的制备　选取生长
状况相似的ＳＤ大鼠１２只，雌雄各半，随机分为两
组，正常饲养１周，以适应实验室环境。按每次１２
ｍＬ·ｋｇ－１剂量连续ｉｇ给药３　ｄ，３次／ｄ，空白组ｉｇ等
体积纯化水。给药组于末次给药１　ｈ后股动脉采
血，取全血后置于３７℃水浴３０　ｍｉｎ，取出后５　０００　ｒ
·ｍｉｎ－１离心１０　ｍｉｎ，取上层血清。将同组血清混
合，以消除个体差异。
分别取含药血清、空白血清１　ｍＬ，加入０．３　ｍｏｌ
·Ｌ－１甲酸０．２　ｍＬ、甲醇４　ｍＬ，涡混振荡、超声后，高
速（１５　０００　ｒ·ｍｉｎ－１）离心１０　ｍｉｎ，取上清液于洁净
试管中，４８℃氮气吹干。加入５％乙腈－水溶液０．２
ｍＬ溶解残渣，涡混、超声后，高速（１５　０００　ｒ·ｍｉｎ－１）
离心１０　ｍｉｎ，取上清液进样分析。
２．３　色谱条件　色谱柱：Ｗａｔｅｒｓ　ＢＥＴ　Ｃ１８（２．１
ｍｍ×１００　ｍｍ，１．７μｍ）；流动相：乙腈（含０．１％甲
酸）－０．１％甲酸水溶液，梯度洗脱：０～１５　ｍｉｎ，Ａ
（５％～２０％）；１５～２０　ｍｉｎ，Ａ（２０％～４０％）；２０～２２
ｍｉｎ，Ａ（４０％～１００％）；２２～２５　ｍｉｎ，Ａ（保持５％）。
检测波长：３００　ｎｍ；流速：０．３　ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温：４５
℃。
３　结果
３．１　方法学考察　取荭草花提取物及大鼠ｉｇ荭草
花提取物后得到的含药血清样品，连续进样６次，结
果显示，测得的各共有峰相对峰面积ＲＳＤ＜２％，表
明精密度良好；分别平行制备荭草花提取物及含药
血清样品各６份，测定样品的重现性，结果表明各共
有峰相对峰面积ＲＳＤ＜３％，重现性良好。
取含药血清分别于室温放置４　ｈ，冷藏４　ｈ，反
复冻融３次后按含药血清供试品制备方法处理后，
进样分析。结果显示，测得的各共有峰相对峰面积
ＲＳＤ在３％之内，表明样品稳定性良好。
３．２　成分分析　分别吸取荭草花提取物供试液、对
照品溶液各１μＬ，含药血清及空白血清供试品溶液
１０μＬ于超高效液相色谱仪，记录２５　ｍｉｎ色谱图，
并比较分析，确定荭草花口服吸收后的入血成分。
３．２．１　荭草花提取物化学成分分析　荭草花提取
物ＵＰＬＣ特征图谱及主要色谱峰归属见图１、表１。
通过比对荭草花提取物及对照品的保留时间及各峰
的紫外吸收，确定荭草花的主要化学成分。
图１　ＵＰＬＣ特征图谱
Ａ．荭草花提取物；Ｂ．混合对照品
Ｆｉｇ　１　ＵＰＬＣ　ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ
Ａ．ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｆｌｏｗｅｒｓ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔａｌｅ　Ｌ；Ｂ．ｍｉｘｔｕｒｅ　ｒｅｎｆｅｒ－
ｅｎｃｅ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ
表１　荭草花提取物 ＵＰＬＣ特征图谱色谱峰保留时间及归
属
Ｔａｂ　１　Ｔｈｅ　ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｅａｋｓ　ｏｆ
ＵＰＬＣ　ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　ｆｌｏｗｅｒｓ　ｏｆ
Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ　ｏｒｉｅｎｔａｌｅ　Ｌ．
峰号
荭草花提取物
ｔＲ／ｍｉｎ
对照品
ｔＲ／ｍｉｎ
化合物
１　 １．５０９　 １．５１０ 没食子酸
３　 ２．４７０　 ２．４４２ 原儿茶酸
７　 １０．１５３　 １０．０８１ 花旗松素
１１　 １３．３３１　 １３．２８６ 山奈素－葡萄糖苷
１２　 １３．４７７　 １３．４２８ 槲皮素－鼠李糖苷
１３　 １５．８２４　 １５．７７６ 山奈素－鼠李糖苷
１４　 １５．９８２　 １５．９９１　 Ｎ－Ｐ－香豆酰酪胺
１６　 １７．５９５　 １７．５５１ 槲皮素
·２９· 中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第２期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２　Ｊａｎ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．０２
书在相同色谱条件下，大鼠 ig 荭草花提取物后含药血
清，与空白血清、荭草花提取物 UPLC 特征图谱对
比，见图 2。结果显示:含药血清中检测到 15 个体
内移行成分。其中 1，2，3，4，5，11号峰等 6 种成分为
荭草花原型移行入血的成分，与已分离得到的对照品
紫外吸收对比得:1，3，11 号峰分别为没食子酸、原儿
茶酸、山奈素-葡萄糖苷。而其余 m1 ～ m9等 9 种成分
可能为大鼠口服吸收荭草花后产生的代谢物。
图 2 UPLC特征图谱
A．荭草花提取物;B．末次灌胃荭草花提取物 1 h 后含药血清;C． 空
白血清
Fig 2 UPLC fingerprint chromatogram
A． extract of flowers of Polygonum orientale L;B． the plasma contained
drug of the extractions from the flowers of Polygonum orientale L． aftrer
last time intragastric administration;C． blank plasma;
4 讨论
本实验首次应用超高效液相色谱结合血清药物
化学方法对口服荭草花后血清药物成分进行分析，
该分析方法所需时间短、稳定可靠、重现性好，能够
全面反映荭草花口服后吸收入血的药物成分，为快
速确定荭草花药效物质基础及代谢研究奠定基础。
在血清药物化学研究中，血清的采集及预处理
是关键。实验中比较了不同采血时间下大鼠血清特
征图谱，以特征图谱峰信息丰富为目标，优化采血时
间为末次给药 1 h 后。而对于血清样品的预处理，
比较研究了甲醇、乙腈沉淀，醋酸乙酯萃取及 HLB
固相萃取等方法，以甲醇沉淀法得到的血清特征图
谱信息最丰富，且操作简便、经济成本低。
根据分离得到的荭草花标准品中发现，荭草花
中的黄酮类成分相对含量较大。据文献报道，首过
效应是黄酮类化合物口服吸收生物利用度低的主要
原因，大部分黄酮类化合物经口服吸收后，在胃肠道
内即发生代谢、吸收，因此发挥药效的形式是其代谢
产物而不是其原型成分，而Ⅱ相代谢葡萄糖醛酸化
是黄酮类化合物在体内的主要代谢途径［8-9］。在实
验中我们采取加大给药剂量并多次连续给药的方
法，对含药血清进行制备，以期找到少量吸收入血的
黄酮类原型成分。但根据血清特征图谱中得到的各
峰得到，除发现 11 号峰山奈素-葡萄糖苷少量以原
型吸收入血之外，其余 4 种黄酮类原型成分即花旗
松素、山奈素-鼠李糖苷、槲皮素-葡萄糖苷及槲皮素
在体内均未发现原型吸收入血。陈峰等［10］对大鼠
口服槲皮素单体的体内代谢进行研究，发现在血清
中并未找到原型成分，用盐酸水解血样后，检测到槲
皮素及异鼠李素，提示槲皮素在体内以葡萄糖醛酸
或硫酸结合物的形式存在，代谢后发挥药效，与口服
荭草花提取物后在大鼠血清中未发现槲皮素原型成
分吸收入血一致。其余黄酮类成分的单体或复方成
分在体内的吸收代谢过程，目前尚无文献可以参阅。
在荭草花提取物中共标定 17 个化学成分，在大
鼠含药血清中找到 6 个原型吸收入血的成分，其余
原型成分在体内均未发现原型吸收，可能由于它们
所代表的成分在体内不能直接吸收入血，它们在体
内产生药效的形式可能为代谢产物的形式。在含药
血清中还发现了 m1 ～ m9等 9 个代谢峰，它们可能是
原型成分在体内的代谢转化，或机体口服吸收荭草
花后产生的应激性成分。对于在含药血清中找到的
大量移行入血的成分，推测它们可能是荭草花在体
内发挥药效的组分群。
实验中未能对含药血清中未知组分进行定性分
析，同时一些含药血清中具有的微量成分可能未被
检测，对于以上问题有待进一步利用质谱及分离手
段，对含药血清中主要的未知组分进行结构鉴定，为
荭草花的药用开发奠定基础。
参考文献:
［1］ 国家中医药管理局中华本草编委会． 中华本草． 第 2 册［M］．
上海:上海科技出版社，1999:1325．
［2］ 贵州省卫生厅．贵州省中药材质量标准［S］．贵阳:贵州人民卫
生出版社，1990:267．
［3］ 李勇军，何迅，刘志宝，等．荭草花化学成分的研究［J］．中国中
药杂志，2009，34(20) :2613-2615．
［4］ 王喜军．中药血清药物化学的研究动态及发展趋势［J］． 中国
中药杂志，2006，31(10) :759-762．
［5］ 王喜军，张宁，孙晖，等．六味地黄丸的血清药物化学研究［J］．
中国天然药物，2004，2(4) :219-222．
［6］ 丁岗，崔瑛，盛龙生，等．地黄血清药物化学的初步研究［J］．中
国天然药物，2003，1(2) :85-88．
［7］ 方建国，彭静，王文清，等．大青叶在大鼠中的血清药物化学研
究［J］．中国医院药学杂志，2008，28(6) :434-436．
［8］ 段坤峰，孟岩，张兰桐．中药与天然产物中有效成分的体内代
谢研究进展［J］．中国医药工业杂志，2009，40(9) :708-713．
［9］ 何佳珂，于洋，陈西敬，等．黄酮类化合物的药物代谢研究进展
［J］．中国中药杂志，2010，35(21) :2789-2794．
［10］ 陈峰，符乃光，任守忠．液相色谱-质谱联用法测定大鼠血浆中
的槲皮素代谢物［J］．中国药学杂志，2008，43(3) :225-227．
［收稿日期］2011-04-14
·39·中国医院药学杂志 2012 年第 32 卷第 2 期 Chin Hosp Pharm J，2012 Jan，Vol 32，No． 02