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南天竹抑菌活性的初步研究



全 文 :吴利民,陆宁海,王国昌,等. 南天竹抑菌活性的初步研究[J]. 江苏农业科学,2012,40( 7) : 284 - 285.
南天竹抑菌活性的初步研究
吴利民,陆宁海,王国昌,崔建新,杜开书
( 河南科技学院资环学院植物保护系,河南新乡 453003)
摘要: 采用生长速率法,测定了南天竹不同器官的提取液对小麦纹枯病菌( Rhizoctonia cerealis) 、番茄褐斑病菌
( Helminthosporiurn carposaprum) 、番茄早疫病菌( Alternaria solani) 、黄瓜褐斑病菌( Corynespora cassiicolai) 的抑菌作用,
结果表明,当质量浓度为 0. 1 g /mL时,南天竹不同器官的提取液对 4 种病原菌菌丝生长都有一定的抑制作用,但不同
器官的抑菌活性不同,其中南天竹叶提取液的抑菌活性较强,抑制率均高于 50% ;根提取液的抑菌活性次之;茎和果
实提取液的抑菌活性较弱,抑制率均低于 50%。
关键词: 南天竹; 抑菌作用; 活性筛选
中图分类号: S482. 2 + 92 文献标志码: A 文章编号: 1002 - 1302( 2012) 07 - 0284 - 02
收稿日期: 2011 - 12 - 05
基金项目: 河南省科技攻关项目( 编号: 20100356 ) ; 河南科技学院高
层次人才科研资助项目( 编号: 060109) 。
作者简介:吴利民( 1977—) ,女,甘肃西峰人,硕士,讲师,主要从事生
物农药的开发研究与教学。E - mail: xxwu5@ 163. com。
通信作者:陆宁海,男,博士,副教授,从事生物农药的开发研究。
Tel: ( 0373) 3040147; E - mail: gsninghai@ 163. com。
随着化学农药在使用中产生的一系列公害问题被发现
[如环境污染、杀伤天敌、破坏生态平衡、3R ( residue、resist-
ance、resurgence) 等问题],开发高效、低毒、低残留的新型无
公害农药,逐渐成为植物病害防治的重要途径。植物是生物
活性化合物的天然宝库,其产生的次生代谢产物超过 40 万
种,其中大多数化学物质如萜烯类、生物碱、类黄酮、甾体、酚
类、独特的氨基酸和多糖等均具有杀虫或抗菌活性[1 - 2]。20
世纪 80 年代后,我国植物源杀菌剂研究开发进展迅速,并取
得了一系列的成果[3 - 6],为实现植物病害无公害防治,生产绿
色、环保、安全的农产品提供了重要技术保障。从植物体内的
次生物质中寻找能抑制有害生物的有效成分,人工直接提取
应用或明确有效成分结构后人工合成制作农药,已成为无公
害农药的开发热点之一[7]。南天竹( Nandina domestica) 含多
种生物碱,茎、根含有南天竹碱、小檗碱,茎含原阿片碱、异南
天竹碱。另外,茎和叶含木兰碱;果实含异可利定碱、原阿片
碱;叶、花蕾及果实均含有氢氰酸;叶尚含穗花杉双黄酮、南天
竹苷 A及南天竹苷 B。叶煎剂对金黄色葡萄球菌、福氏痢疾
杆菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌、大肠杆菌均有抑制作用,可治疗感
冒、百日咳、目赤肿痛、瘰疬、尿血。果实敛肺止咳,清肝明目,
治久咳、气喘、疟疾。根祛风、清热,除湿、化痰,治风热头痛、
肺热咳嗽、湿热黄疸、风湿痹痛。有关南天竹对植物病原菌的
抑制作用未见详细报道。本试验研究了南天竹提取物对 4 种
植物病原菌菌丝生长的抑制作用,现将研究结果报道如下。
1 材料与方法
1. 1 植物样品的制备
将南天竹的根、果皮、叶、枝、果实洗净,自然阴干,分别用
粉碎机粉碎,各称 20 g,分别加入 100 mL 丙酮溶剂,置于
250 mL 三角瓶中冷浸提取 3 次,时间各为 48 h,合并滤液,浓
缩为 1 g /mL,移装于 25 mL 三角烧瓶,密封,于冰箱 ( 4 ~
8 ℃ ) 冷藏备用[8]。
1. 2 供试菌种
供试菌种为小麦纹枯病菌 ( Rhizoctonia cerealis) 、番茄褐
斑病菌( Helminthosporiurn carposaprum) 、番茄早疫病菌( Alter-
naria solani) 、黄瓜褐斑病菌 ( Corynespora cassiicolai) ,由河南
科技学院植物保护系植物病理教研室提供。
1. 3 抑菌活性的测定
采用生长速率法[9 - 10]进行抑菌生物活性测定。在无菌
条件下,分别取各器官提取液 5 mL 置于 50 mL 38 ℃的 PDA
灭菌培养基中,以加入等量溶剂为对照,摇匀,倒入直径 6 cm
的灭菌培养皿中制成平板。冷却凝固后接入生长一致、直径
为 4 mm菌饼,每皿接 1 个菌饼,每处理重复 3 次,放入 25 ℃
恒温培养箱中培养 4 d,测菌落直径,计算抑菌率。
2 结果与分析
2. 1 南天竹根提取液对 4 种植物病原菌菌丝生长的抑制
作用
试验结果表明( 表 1) ,南天竹根提取液对 4 种植物病原
菌菌丝生长有较强的抑制作用,且抑制率均高于 35%,但对
不同病原菌菌丝生长的抑制作用强弱不同。其中对小麦纹枯
病菌菌丝生长的抑制作用最强,抑制率高达 57. 5%,对番茄
褐斑病菌和黄瓜褐斑病菌菌丝生长的抑制作用次之,对番茄
早疫病菌菌丝生长的抑制作用相对较弱,抑制率为 35. 7%。
表 1 南天竹根提取液对 4 种植物病原菌菌丝生长的抑制作用
植物病原菌 处理平均菌落直径( mm)
对照平均菌落
直径( mm)
抑菌率
( % )
小麦纹枯病菌 30. 4 71. 5 57. 5a
番茄褐斑病菌 35. 3 65. 8 46. 4b
番茄早疫病菌 48. 6 75. 6 35. 7c
黄瓜褐斑病菌 36. 4 68. 2 46. 6b
注:表中同列数据后不同小写字母代表差异显著( P < 0. 05 ) 。表 2、
表 3、表 4 同。
—482— 江苏农业科学 2012 年第 40 卷第 7 期
DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2012.07.097
2. 2 南天竹叶提取液对 4 种植物病原菌菌丝生长的抑制
作用
试验结果表明( 表 2) ,南天竹叶提取液对 4 种植物病原
菌菌丝生长有较强的抑制作用,且抑制率均高于 50%,但对
不同病原菌菌丝生长的抑制作用强弱不同。其中对小麦纹枯
病菌菌丝生长的抑制作用最强,抑制率高达 71. 3%,对番茄
褐斑病菌和黄瓜褐斑病菌菌丝生长的抑制作用次之,对番茄
早疫病菌菌丝生长的抑制作用相对较弱,抑制率为 50. 9%。
表 2 南天竹叶提取液对 4 种植物病原菌菌丝生长的抑制作用
植物病原菌 处理平均菌落直径( mm)
对照平均菌落
直径( mm)
抑菌率
( % )
小麦纹枯病菌 20. 5 71. 5 71. 3a
番茄褐斑病菌 25. 6 65. 8 61. 1b
番茄早疫病菌 37. 1 75. 6 50. 9c
黄瓜褐斑病菌 26. 3 68. 2 61. 4b
2. 3 南天竹茎提取液对 3 种植物病原菌菌丝生长的抑制
作用
试验结果表明( 表 3) ,南天竹茎提取液对 4 种植物病原
菌菌丝生长有一定的抑制作用,但对不同病原菌菌丝生长的
抑制作用强弱不同。其中对小麦纹枯病菌菌丝生长的抑制作
用较强,抑制率为 49. 9%,对番茄褐斑病菌和黄瓜褐斑病菌
菌丝生长的抑制作用次之,对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制
作用相对较弱,抑制率为 27. 0%。
表 3 南天竹茎提取液对 4 种植物病原菌菌丝生长的抑制作用
植物病原菌 处理平均菌落直径( mm)
对照平均菌落
直径( mm)
抑菌率
( % )
小麦纹枯病菌 35. 8 71. 5 49. 9a
番茄褐斑病菌 42. 6 65. 8 35. 3b
番茄早疫病菌 55. 2 75. 6 27. 0c
黄瓜褐斑病菌 40. 5 68. 2 40. 6b
2. 4 南天竹果实提取液对 4 种植物病原菌菌丝生长的抑制
作用
试验结果表明( 表 4) ,南天竹果实提取液对 4 种植物病
原菌菌丝生长有一定的抑制作用,但对不同病原菌菌丝生长
的抑制作用强弱不同。其中对小麦纹枯病菌菌丝生长的抑制
作用较强,抑制率为 41. 8%,对番茄褐斑病菌和黄瓜褐斑病
菌菌丝生长的抑制作用次之,对番茄早疫病菌菌丝生长的抑
制作用相对较弱,抑制率为 20. 4%。
表 4 南天竹果实提取液对 4 种植物病原菌菌丝生长的抑制作用
植物病原菌 处理平均菌落直径( mm)
对照平均菌落
直径( mm)
抑菌率
( % )
小麦纹枯病菌 41. 6 71. 5 41. 8a
番茄褐斑病菌 45. 6 65. 8 30. 7b
番茄早疫病菌 60. 2 75. 6 20. 4c
黄瓜褐斑病菌 44. 8 68. 2 34. 3b
3 讨论与分析
试验结果表明,南天竹不同器官提取液对 4 种植物病原
菌菌丝生长均有一定的抑制作用,但对不同病原菌菌丝生长
的抑制作用强弱不同。其中对小麦纹枯病菌菌丝生长的抑制
作用较强,对黄瓜褐斑病菌菌丝和番茄褐斑病菌菌丝生长的
抑制作用次之,对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制作用相对
较弱。
试验结果表明,南天竹不同器官提取物对 4 种植物病原
菌菌丝生长的抑制作用不同。其中果实提取液的抑菌活性最
低,对 4 种植物病原菌菌丝生长的抑制率均低于 42% ; 南天
竹茎提取液对 4 种植物病原菌菌丝生长的抑制率均低于
50% ;南天竹叶提取液对 4 种植物病原菌菌丝生长有较强的
抑制作用,抑制率均高于 50%。
试验中采用南天竹粗提液进行室内生测,某些含量较少
但有抑菌活性的物质有可能难以表现活性,应该采用活性追
踪的方法对粗提液进行进一步的分离、纯化,以寻找或确定其
主要或有效抑菌活性成分[11 - 13]。对杀菌剂而言,离体条件下
无效的提取液有可能会在活体上表现活性,如乙膦铝、三环唑
等只在活体上表现活性[14 - 15],因此有必要对南天竹提取液进
行活体抑菌测验,以便于进一步研究。南天竹提取液的杀菌
谱、作用方式、作用机理有待于进一步研究。
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