全 文 ：　第 28卷 第 3期
2010年 8月 　　　　　　　
贵州师范大学学报(自然科学版)
JournalofGuizhouNormalUniversity(NaturalSciences)　　　　　　　　
Vol.28.No.3
Aug2010
文章编号:1004— 5570(2010)03-0101-03
不同产地茯苓及茯苓皮中多糖成分的研究＊
张怡莎 1, 2 ,陈华国 1, 3 ,周　欣 1, 3 ,刘　海1 ,赵　超1, 3＊
(1.贵州师范大学 天然药物质量控制研究中心 ,贵州 贵阳　550001;2.安顺职业技术学院 ,贵州 安顺　561000;
3.贵州省山地环境信息系统与生态环境保护重点实验室 , 贵州 贵阳　550001)
摘要:目的:建立测定茯苓多糖的方法。方法:紫外分光光度法(苯酚 -硫酸比色法)。结果:湖南省茯苓相对于
贵州 、云南省茯苓多糖含量偏低 , 贵州 、云南省不同县的茯苓多糖含量有一些差异 ,茯苓皮中的茯苓多糖含量明
显比茯苓中的含量低。结论:本法对茯苓多糖成分进行系统全面的研究 , 为系统全面建立茯苓质量评价体系提
供一定的指导意义。
关 键 词:茯苓;紫外分光光度法;含量测定
中图分类号:O657.3　　文献标识码:A
AnalysisofpachymaninPoriacocos(Schw.)Wolfandpeel
ZHANGYi-sha1, 2 , CHENHua-guo1, 3 , ZHOUXin1, 3 , LIUHai1 , ZHAOChao1, 3＊
(1.ResearchCenterforQualityControlofNaturalMedicine, GuizhouNormalUniversity, Guiyang, Guizho550001, China;
2.VocationalandTechnicalColegeofAnshun, Anshun, Guizhou561000, China;3.KeyLaboratoryforMountain
AreasInformationSystemofandEcologicalEnvironmenProtection, Guiyang, Guizhou550001, China)
Abstract:Objective:ToestablishamethodfordeterminationofpachymaninPoriacocos(Schw.)
Wolf.Methods:Ultravioletspectrophotometryandphenol-sulfuricacidmethodwereused.Results:
ThecontentofpachymaninP.cocos(Schw.)WolffromHunanprovincewasmuchlowerthanthat
fromGuizhouandYunnanProvinces.Therearesomediferencesamongthecontentsofpachymanin
P.cocos(Schw.)WolffromdiferentregionsofGuizhouandYunnanprovinces.Moreimportantly,
thecontentsfromPoriapeelswereobviouslylowerthanthatfromsclerotium.Conclusion:Systematic
studyonthedeterminationofpachymaninPoriacocos(Schw.)Wolfwasdonetoprovideacompre-
hensiveevaluationontheherb.
Keywords:Poriscocos;ultravioletspectrophotometry;contentdetermination
0　引言
茯苓为植物多孔菌科真菌茯苓 Poriacocos
(Schw.)Wolf的菌核以及茯苓皮 ,多寄生于马尾
松或赤松的根部。茯苓多糖是茯苓水溶性部分的
主要成分 ,是茯苓的主要有效成分 。茯苓多糖类成
分中主含 β -茯苓聚糖(占 93%左右),尚含有羧甲
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＊ 收稿日期:2010-04-15
基金项目:贵州省中小企业局平台建设项目(黔中小发 [ 2008] 76号);贵州省发展和改革委员会(黔科合带帽字 [ 2008] 5005
号)
作者简介:张怡莎(1983-)女 , 安顺职业技术学院应用医药系 研究方向:中药学。
＊通讯作者:赵　超(1976.11-), 男 ,讲师 , 研究方向:天然药物化学 , E-mail:chaozhao@126.com
DOI :10.16614/j.cnki.issn1004-5570.2010.03.020
基茯苓多糖 ,木聚糖 ,茯苓次聚糖 , μ-茯苓多糖 f,茯
苓多糖 , (1, 3)-(1, 6)-β-D-葡聚糖 , 纤维素 ,硬脘
等 [ 1] 。其中所含有的丰富的茯苓聚糖 ,由于具有
β -(1※6)分枝 ,不具抗肿瘤作用 ,但若用化学方法
切去其分枝后 ,就转化为具有高度抗肿瘤的茯苓多
糖 。因此对茯苓多糖进行含量测定作为茯苓质量
控制的一部分 ,对于茯苓种植和生产具有良好的指
导作用和应用价值。
1　实验仪器与试药
1.1　仪器:岛津 UV-2501紫外分光光度计。
1.2　试药:葡萄糖(中国药品生物制品检定所 ,批
号:110833-200302):减压干燥至恒重。所用的苯
酚 ,浓硫酸试剂均为分析纯 。水为乐百氏纯净水。
1.3　苯酚试剂的制备:称取苯酚 4g于 100mL棕
色容量瓶中 ,加水溶解至刻度 ,即得 4%苯酚试液 。
1.4　对照品溶液的制备:精密称取减压干燥至恒重
的葡萄糖对照品 10mg置 50mL容量瓶中 ,加水溶解
并定容 ,配制成 0.2mg/mL的葡萄糖对照品溶液。
2　提取方法 [ 2 ～ 6]
精密称取茯苓粉(过 60目筛)0.5g于具塞锥
形瓶中 ,加入 1mol/LNaOH溶液 50mL,室温放置
12h,过滤 ,精密吸取续滤液 2.0mL于 50mL容量瓶
中 ,加水定容至刻度得样品液。
3　实验条件
精密吸取样品液 0.2mL于具塞试管中 ,加水
0.8mL,苯酚 1.0mL,浓硫酸 5.0mL,放置 50min后
于 488nm测定吸收度 。
4　方法学考察
4.1　稳定性试验
精密吸取茯苓混合粉末制备的样品液 0.2mL
于具塞试管中 ,加水 0.8mL,苯酚 1.0mL,浓硫酸
5.0mL,另精密吸取 1.0mL水置一试管中 ,同法操
作 ,作为空白 ,分别在 30min, 45min, 60min, 75min,
90min测定吸收值进行稳定性实验。其 RSD为
3.2%。结果表明供试品溶液在 90min内基本稳
定 。
4.2　精密度试验
取上述配制好的葡萄糖对照品溶液精密吸取
0.2mL于具塞试管中 ,加水 0.8mL,苯酚 1.0mL,浓
硫酸 5.0mL,放置 50min,另精密吸取 1.0mL水置
一试管中 ,同法操作 ,作为空白 ,连续五次测定吸收
值。其结果 RSD为 0.1%。表明仪器的精密度良
好。
4.3　重现性试验
分别称取茯苓粉混合样六份 ,制备得样品液 ,
精密吸取样品液 0.2mL于具塞试管中 , 加水
0.8mL,苯酚 1.0mL,浓硫酸 5.0mL, 另精密吸取
1.0mL水置一试管中 ,同法操作 , 作为空白 ,放置
50min后测定 6份样品的吸收度 , 其 RSD为
2.5%。结果表明重现良好 。
4.4　回收率试验
精密称取五份茯苓粉混合样各 0.25g于 50mL
具塞锥形瓶中 ,加入 1mol/LNaOH溶液 50mL,常
温下放置 12h, 过滤 。精密吸取续滤液 2mL于
50mL容量瓶中 ,加水定容至刻度 ,备用。
精密吸取 5份样品液和葡萄糖对照品液各
0.1mL于一支具塞试管中 ,加水 0.8mL,苯酚 1mL,
浓硫酸 5mL,另精密吸取 1mL水置于一试管中 ,同
法操作 ,作为空白 ,放置 50min,测定吸收值 。结果
如表 1。
表 1　样品回收率实验结果
Tab.1　TheexperimentalresultofSamplereturns-ratio
样品含
量 /mg
对照品加
入量 /mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回
收率 /%RSD/%
0.021 39 0.020 10 0.042 28 103.9
0.021 19 0.020 10 0.041 55 101.3
0.020 11 0.020 10 0.039 79 97.91 101.2 2.144
0.021 33 0.020 10 0.041 62 100.9
0.019 87 0.020 10 0.040 35 101.9
5　茯苓多糖的含量测定
5.1　标准曲线的绘制
精密量取 2.4项下葡萄糖对照品溶液 10mL,
加水 10mL,配制成 0.1mg/mL葡萄糖对照品溶液
20mL,备用。
精密吸取 0.1mg/mL的葡萄糖对照品溶液
0.2, 0.3, 0.4 , 0.5, 0.6, 0.7, 0.8mL于 10mL具塞
试管中 , 加水至 1mL, 加苯酚 1.0mL, 浓硫酸
5.0mL,放置 50min,测定其吸收值 ,以浓度为横坐
标(C), 吸收值为纵坐标 (A),得回归方程 A=
85.81C-0.0248 0(r=0.999 0),线形范围为 2.86
～ 11.43μg/mL。
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5.2　茯苓皮含量测定的计算和结果
表 2　茯苓皮中茯苓多糖的含量测定结果
Tab.2　Theassayingresultofpolysaccharide
ofPoriacocos(Schw.)Wolfpeel %
编号 产　地 含量 1 含量 2 平均含量
38 黎平县(3) 36.35 35.35 35.85
39 黎平县(4) 35.42 34.40 34.91
40 贵州威宁县黑石头镇 31.41 31.10 31.26
41 安徽金寨县燕子河镇 34.33 34.89 34.61
5.3　茯苓含量测定的计算和结果
分别对茯苓对照药材和茯苓各主产地药材进
行多糖含量测定 , 茯苓对照药材多糖含量为
62.89%(n=2)。各产地药材进行多糖含量测定
结果见表 3。
表 3　茯苓样品中茯苓多糖的含量测定结果
Tab.3　Theassayingresultofpolysaccharide
ofPoriacocos(Schw.)Wolf %
编号 产　地 含量 1 含量 2 平均含量
1 沈阳 62.50 63.43 62.97
2 云南 50.28 50.64 50.46
3 安徽亳州 65.43 65.75 65.59
4 安徽黄山 58.37 58.77 58.57
5 四川(1) 68.41 66.96 67.69
6 山东 69.63 70.65 70.14
7 重庆 61.39 62.69 62.04
8 四川(2) 72.68 74.14 73.41
9 安徽 65.54 67.36 66.45
10 福建武平 64.79 63.62 64.03
11 云南丽江 61.07 61.47 61.27
12 湖南邵阳市新邵县 57.04 58.31 57.68
13 安徽金寨县燕子河镇 56.88 58.08 57.48
14 福建永泰 53.31 53.52 53.42
15 湖南彬州 34.76 35.98 35.37
16 云南楚雄(野生) 68.90 67.88 68.39
17 安徽金寨县南溪镇 53.26 54.03 53.35
18 云南楚雄 71.05 71.38 71.22
19 安徽岳西二级 61.63 60.05 60.84
20 云南昆明 51.71 49.93 50.82
21 安徽岳西一级 61.77 62.78 62.28
22 湖南怀化 48.86 50.62 49.74
23 威宁黑石头镇 69.92 70.64 70.28
24 黎平县二望坡基地 73.94 75.79 74.86
25 黎平县述洞基地 54.05 52.96 53.51
26 黎平县高桥基地 68.90 67.88 68.39
27 黎平县高掌基地 59.07 58.93 59.00
28 黎平县龙安基地 43.80 44.51 44.16
29 黎平县四方山基地 39.92 39.67 39.80
30 黎平县(1) 62.92 63.86 63.39
31 黎平县大榕基地 66.98 65.09 66.04
32 黎平县(2) 57.56 57.93 57.75
33 贵州威宁 39.08 39.75 39.42
34 黎平县安民基地 65.71 66.27 65.99
35 黎平县界塘基地 69.62 69.32 69.47
36 黎平县墨门山基地 53.26 54.03 53.35
37 贵州榕江 70.51 70.66 70.59
6　结果与讨论
6.1　由实验结果 ,茯苓各主产区药材与对照药材
多糖含量相比可知 ,大部分多糖含量在 50%以上 ,
含量在 60%以上的有 21批 。湖南彬州 、黎平县四
方山基地 、贵州威宁 、安徽黄山四个产地含量在
40%以下。总体来说 ,湖南省茯苓相对于贵州 、云
南省茯苓多糖含量偏低。贵州 、云南省不同县的茯
苓多糖含量有一些差异 。说明茯苓中茯苓多糖的
含量区域性较强 ,同省不同地区茯苓多糖的含量有
明显差异 ,同时茯苓皮中的茯苓多糖含量明显比茯
苓中的含量低 ,在 35%左右 。
6.2　首次收集全国 37个不同产地的茯苓药材 ,包
括省内外及贵州黎平县十个种植基地药材 ,并将茯
苓及茯苓皮的多糖成分分别进行测定 ,说明茯苓皮
中茯苓多糖含量比茯苓中多糖含量低。
6.3　多糖的含量测定还有用多糖水解为还原糖的
碘量法测定 ,但由于碘量法操作麻烦 ,且结果一般
不够理想 ,所以用比色法测定茯苓多糖含量 ,反应
稳定 ,测定结果较好 。苯酚—硫酸比色法是测定多
糖含量较为经典有效的方法之一 ,如果时间允许 ,
只要重复操作 ,减少操作误差 ,在稳定性 、回收率等
方面都有明显的优越性。
参考文献:
[ 1] 北京医学院.中草药成分化学 [ M] .北京:人民卫生出
版社 , 1981:185.
[ 2] 夏超 ,韩英 , 符艳梅 ,等.不同产地茯苓聚糖的提取及含
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[ 3] 段启 ,王少军 , 曹君 ,等.茯苓皮中茯苓聚糖的含量测定
及提取工艺优选 [ J] .河南中医学院学报 , 2004, 11
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含量的影响 [ J] .时珍国医药 , 1998, 9(2):123.
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　第 3期 张怡莎 ,陈华国 ,周　欣 , 刘　海 ,赵　超:不同产地茯苓及茯苓皮中多糖成分的研究