全 文 ：人参研究 GINSENG RESEARCH 2016 年第 1 期
四种体系评价辽东丁香枝不同部位抗氧化活性
蔡恩博 屠书梅 杨利民 * 刘德民 贾立安 周文岩 郑曼玲 张伟元
（吉林农业大学中药材学院·吉林 长春·130118）
摘 要：目的 对辽东丁香枝的总提液、氯仿层、乙酸乙酯层、正丁醇层、水层进行抗氧化活性的评定。 方法
采用清除 DPPH自由基、清除 ABTS+.自由基、还原性和总酚含量测定的方法，利用分光光度法测
定辽东丁香枝不同部位在不同浓度下的抗氧化能力及总酚含量。 结果 辽东丁香枝不同部位具有
明显的清除 DPPH、ABTS+.自由基的能力，且有较好的还原能力和较高的总酚含量。 在清除 DPPH
自由基体系中，乙酸乙酯层的抗氧化能力最强，其 IC50值最低为 0.033mg/mL，正丁醇层和氯仿层
的次之，IC50 分别为 0.0546，0.0638mg/mL，在清除 ABTS+自由基体系中，各部位抗氧化活性大小
为：乙酸乙酯层>总提液>氯仿层>正丁醇层>水层；还原性体系测定中，乙酸乙酯层的还原能力接
近于 BHT的；乙酸乙酯层的总酚含量最大，为 164.7μg/mg,接近 BHT的 168.2μg/mg。 结论 辽东丁
香枝具有较好的抗氧化活性，其抗氧化能力与总酚含量有较好的相关性，需要进一步深入研究，开
发为天然抗氧化剂。
关键词：辽东丁香；抗氧化；总酚；相关性
Four Systems to Evaluate Antioxidant Activities of Different Extracts
from Syringa wolfii C. K. Schneider
Cai En-bo, Tu Shu-mei, Yang Li-ming* , Liu De-ming ,Jia li-an, Zhou wen-yan ,Zheng Man-ling,Zhang wei-yuan
( College of Chinese Medicinal Materials, Jilin Agricultural University, ChangChun,130118)
Abstract: objective To evaluate total solution、chloroform extract、ethyl acetate extract、normal butanol
extract and water extract of Syringa wolfii C. K. Schneider. Methods using DPPH radical
scavenging assay and ABTS radical scavenging assay, reducing power assay and total phenolics
determination systems, and evaluate the antioxidant properties and total phenolic content of
different extracts with varies concentrations measured by spectrophotometer. Results: Syringa wolfii
C. K. Schneider possessed significant antioxidant properties in DPPH radical scavenging system
and ABTS radical scavenging assay, high reducing power and total phenolic content. In DPPH
radical scavenging assay, ethyl acetate extract showed highest antioxidant property with lowest IC50
value of 0.033mg/mL, normal butanol extract and chloroform extract were weaker compared to ethyl
acetate extract, with IC50 value of 0.0546 and 0.0638mg/mL respectively. In ABTS radical
scavenging activity, the different extracts of Syringa wolfii C. K. Schneider from strong to weak is in
the order: ethyl acetate extract >total solution >chloroform extract >normal butanol extract >water
extract. In reducing power assay, ethyl acetate extract showed the same property as BHTs; ethyl
acetate extract possessed the highest phenolic content compared with other extracts, it was with the
value of 164.7μg/mg approached the value of 168.2μg/mg from BHT.Conclusion Syringa wolfii C.
K. Schneider exhibited significant antioxidant properties, its antioxidant properties depend on its
total phenolic content which need lucubration to develop the different extracts of Syringa wolfii C.
K. Schneider to nature antioxidant.
Key words: Syringa wolfii C. K. Schneider; antioxidant; total phenolic; correlation
作者简介：蔡恩博，男，实验师，研究方向：天然产物化学。
* 通信作者：杨利民,男,教授,博士生导师,主要从事药用植物生态与资源可持续利用研究。 E-mail: ylmh777@126.com.
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2016 年第 1 期
辽东丁香(Syringa wolfii C. K. Schneider)是木犀科
(Oleaceae)丁香属(Syringa)落叶灌木 [1]，生长在山坡杂木
林中、 灌丛中、 林缘或河边， 或针叶混交林中， 海拔
500～1600米。主要分布于我国河北至黑龙江一带[2]，其
中在黑龙江，吉林，辽宁分布最多，其它地区有较少的
散布。辽东丁香因其花色特殊(紫色或淡紫色)，花期长，
在北方被广泛应用于庭院观赏植物。目前，国内外对辽
东丁香的药理作用鲜有报道， 辽东丁香在民间偏方有
用到治疗慢性病毒性肝炎的作用[3]。因此为其药理作用
进行科学证明并开发利用需要进一步实验研究。
在健康方面，氧化作用与抗氧化作用受到人们的
高度重视。生命体内的各个组织通常含有一定量和一
定种类的自由基。氧化代谢作用是人体所需能量的主
要来源，对机体有很重要的作用[4]。 然而，机体内的自
由基含量过高，则会导致许多疾病（如 DNA 损伤，心
血管疾病，癌症，老年化等[5～8]。虽然人的机体的组织具
有抗氧化能力和恢复能力，以防止过度氧化作用的破
坏，但并不能完全抵制 [9]，大量利用合成抗氧化剂如
BHT、BHA，对机体可产生一定的毒害 [10～12]，一些天然
抗氧化剂已证明具有较好抗氧化能力，并研制成为抗
氧化剂[13～15]。为清除自由基，寻找天然抗氧化剂成为一
种必然趋势，较多的研究目标锁定于确定天然抗氧化
剂的成分[16]，由于丁香属具有较强的抗氧化作用[17]，且
目前对辽东丁香枝的抗氧化活性鲜有研究，因此通过
四种体系对辽东丁香枝的抗氧化活性能力进行了测
试。
1 材料与方法
1.1 实验原料与试剂
辽东丁香采自长春市净月潭国家森林公园，经吉
林大学药学院丛登立副教授鉴定为辽东丁香（Syringa
wolfii C. K. Schneider）的枝。
DPPH (1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼 ) SIGMA 公
司；ABTS BIOBASIC 公司；BHT (2,6-二叔羟基苯甲
酚) 滨州邦宝化工有限公司；无水乙醇、甲醇、Folin-
Ciocalteu 试剂、过硫酸钾、铁氰化钾、三氯乙酸、三氯
化铁、无水碳酸钠等均为国产分析纯。
1.2 仪器与设备
T6新世纪紫外分光光度计(北京普析通用仪器有
限责任公司)；LA114 型电子天平 (常熟市百灵天平仪
器有限公司)；KQ-250DB 型超声波清洗器 (昆山市超
声仪器有限公司)；101-2 型数显电热恒温干燥箱 (上
海阳光实验仪器有限公司 )；RE-5205 型旋转蒸发器
(上海亚荣生化仪器厂)；GL-ZM 型离心机 (上海市离
心机械研究所)；电子恒温水浴锅(天津泰斯特仪器有
限公司)。
1.3 实验方法
1.3.1 辽东丁香枝的提取及各部位的制备
称取干燥辽东丁香枝 6kg，处理成粗粉，分别用
12 倍量，10 倍量，8 倍量的 50%乙醇浸泡 12 小时，超
声(100HZ，60min)提取三次，过滤，合并滤液，用旋转
蒸发仪减压浓缩，放入蒸发皿，水浴锅 60℃蒸成浸膏
状，将浸膏在水中弥散，依次加入石油醚，氯仿，乙酸
乙酯，水饱和正丁醇，按料液比 1:1 进行萃取，减压浓
缩，静止，蒸干，得石油醚部位 2.1g，氯仿部位 23.2g，
乙酸乙酯部位 37.44g，正丁醇部位 82g。
1.3.2 清除 DPPH自由基体系测定抗氧化活性
DPPH 溶液的制备 ： 精密称取 DPPH 样品
10mg，放入 250ml 容量瓶中用甲醇定容，得到质量浓
度为 0.04mg/ml 的 DPPH溶液，备用，全过程避光。
样品溶液的制备： 分别准确称取干燥至恒重的
辽东丁香枝部位：总提液、氯仿层、乙酸乙酯层、正丁
醇层、水层及标准品 BHT，各 75mg。 在 10mL 容量瓶
中用甲醇定容，得质量浓度为 7.5mg/mL 的样品母液，
从样品母液中分别移取一定体积的量定容 （甲醇）在
25mL容量瓶， 最终配制成的样品溶液的质量浓度为
0.009、0.018、0.037、0.075、0.15、0.31、0.62mg/mL。
样品溶液清除 DPPH 自由基能力的测定： 将配
制好的总提液、氯仿层、乙酸乙酯层、正丁醇层、水层
的样品溶液及 BHT对照品溶液。 按表 1 加入反应液，
摇匀，密封反应 30min，在 515nm 处测定样品溶液的
吸光度值，用甲醇作为空白对照（本操作需在室温避
光条件下进行）。 根据下列公式计算样品溶液的清除
率。 DPPH自由基清除率%=[A0-(Ai-Aj)]/A0*100
表 1 DPPH 实验加样表
Tab. 1 DPPH experimental sample table
半数抑制率的计算: 半数抑制率( IC50)指清除率
为 50%时所需抗氧化剂的质量浓度，其数值越趋近于
0，抗氧化能力越强。 采用 SPSS16.0 统计软件计算各
部位的 IC50。
1.3.3 清除 ABTS+·自由基体系测定抗氧化活性
ABTS+·溶液的制备 : 5mL，14mM 的 ABTS 和
5mL，l4.9mMK2S2O8 混合产生 ABTS+·， 在避光条件
下保持静止 16h，工作液要求其在 734nm 波长下的吸
光度为 0.70±0.02。
样品溶液的制备: 分别准确称取干燥至恒重的
蔡恩博等：四种体系评价辽东丁香枝不同部位抗氧化活性
A0 3mL 甲醇+3ml DPPH·溶液
Ai 3mL 样品溶液+3ml DPPH·溶液
Aj 3mL 样品溶液+3ml 甲醇
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浓度
（mg/ml）
清除率%（mean）
BHT 氯仿层 乙酸乙酯层 正丁醇层 总提液 水层
0.009 30.82 13.30 14.14 7.86 9.76 10.51
0.018 42.65 22.22 26.37 18.64 22.46 9.20
0.037 53.05 25.32 39.73 23.73 25.90 10.07
0.075 89.43 45.90 93.04 54.85 35.06 11.24
0.15 93.37 70.49 96.75 93.99 77.13 22.77
0.31 94.27 94.54 95.74 97.53 93.3 48.91
0.62 98.14 95.81 95.40 95.22 92.48 77.37
总提液、BHT、氯仿层、乙酸乙酯层、正丁醇层、水层各
部位 30mg，用无水乙醇定溶于 10mL 的容量瓶中，配
制成浓度为 3mg/mL 的样品母液，从样品母液中分别
移取一定体积的量定容（甲醇）在 25mL 容量瓶中，分
别配制成质量浓度为 0.018、0.037、0.075、0.15、0.31、
0.62、1.24mg/mL 的样品溶液，待用。
样品溶液的测定: 将配制好的的总提液、BHT、
氯仿层、乙酸乙酯层、正丁醇层、水层的样品溶液按表
2 加入反应液，在操作过程中需室温下避光，加入反
应液后应摇匀，6min 后在 734nm 波长下测定吸光度
值。 根据下列公式计算清除率： 清除率%=[A2-(B2-
C2)]/A2*100
表 2 样品溶液工作表
Tab.2 Composition of extract reaction solution
半数抑制率的计算: 半数抑制率( IC50)指清除率
为 50%时所需抗氧化剂的浓度， 其数值越趋近于 0，
抗氧化能力越强。 采用 SPSS16.0 统计软件计算不同
试剂萃取部位的 IC50值。
1.3.4 还原性试验
样品溶液的制备: 分别准确称取干燥至恒重的
总提取物、BHT、氯仿层、乙酸乙酯层、正丁醇层、水层
各 30mg，用甲醇定溶于 10mL 的容量瓶中，配制成浓
度为 3mg/mL 的样品母液，从样品母液中分别移取一
定体积的量定容（甲醇）在 10mL 容量瓶，得样品溶
液 ， 其质量浓度分别为 0.009、0.018、0.037、0.075、
0.15、0.31、0.62mg/mL,待用。
样品溶液的测定: 取各浓度样品液 2.5mL，加入
2.5 mL 0.2 mol/mL pH 值 6.6 磷酸盐缓冲液和 2.5 mL
1%铁氰化钾（K3Fe(CN)6），混合均匀(1:1:1)，于 50℃反
应 20min。取出冷却至室温加入 2.5 mL 10%三氯乙酸
溶液，而后于 200r 离心 10 min，取上清液 2.5 mL，加
入 2.5 mL 蒸馏水，0.5mL 0.1%FeCl3溶液(5:5:1)，振荡
摇匀，静止 10min。 应用紫外分光光度计于 700 nm波
长处测定吸光度值， 以 BHT 作为对照， 用甲醇做空
白。 测定的吸光度值越高则代表该化合物还原力越
强。
1.3.5 总酚测定实验
标准曲线的制作 : 精密称取标准品没食子酸
0.0040g，甲醇溶解转入 100mL 容量瓶，备用。 再分别
吸取 0.5mL、1.0mL、2.0mL、4.0mL、8.0mL 于 25mL 容
量瓶中加 2.5mL Folin-Ciocalteu 试剂摇匀 , 在 0.5～
8min 内加入 2mL 无水 Na2CO3（75g/L），50℃水浴中加
热 5min， 冷却后用蒸馏水定容，760nm 处测吸光度
值。对测得的数据采用直线回归法计算出标准曲线的
回归方程：A =6.2468m -0.045，(R2=0.999)， 在 0.02～
0.32mg 范围内线性关系良好。
样品溶液的配制及测定 : 准确称取 20mg 辽东
丁香各部位于 10mL 容量瓶中，甲醇定容后，从中取
0.5mL 定容于 25mL 容量瓶中 ， 加入福林酚试剂
2.5mL， 在 0.5 至 8 分范围内间断加入 2mL 无水
Na2CO3（75g/L），在 50℃水浴中加热 5min，冷却后用蒸
馏水配平，760nm处测吸光度值，用蒸馏水作对照。
2 结果与分析
2.1 清除 DPPH自由基体系测定抗氧化活性结果
2.1.1 不同浓度下辽东丁香枝不同部位及 BHT 对
DPPH自由基的清除率见表 3、图 1，采用 SPSS16.0 统
计软件对结果进行分析，得 IC50，结果见表 4。
表 3 辽东丁香枝不同部位及 BHT 对 DPPH 自由基的清除率
Tab.3 DPPH radical-scavenging activities of different extracts
from the Syringa wolfii C. K. Schneider
图 1 各浓度辽东丁香枝不同部位 DPPH 法清除自由基活性
Fig.1 DPPH radical -scavenging activities of different extracts
from the Syringa wolfii C. K. Schneider and BHT by different
solvents at different concentrations.
表 4 辽东丁香枝不同部位及 BHT 清除 DPPH 自由基的 IC50
Tab.4 The IC50 value of different extracts from the Syringa wolfii
C. K. Schneider and BHT in DPPH radical-scavenging activities
A2 3mLABTS+·+ 158μL 无水乙醇
B2 3mLABTS+·+ 158μL 样品溶液
C2 3mL 无水乙醇 + 158μL 样品溶液

















IC50 BHT 氯仿层
乙酸乙
酯层
正丁醇
层
总提液 水层
0.0217 0.0638 0.0330 0.0546 0.0701 0.3281
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2.1.2 小结
由表 3和图 1 可知随着各部位浓度的增加，清除
DPPH 自由基的能力也随之增强， 在浓度为 0.075~
0.62mg/mL 时，BHT 和乙酸乙酯层的清除能力趋于稳
定。 氯仿层、乙酸乙酯层、正丁醇层及总提液对 DPPH
自由基的清除能力较强 ， 且乙酸乙酯层的浓度为
0.075-0.15mg/mL 时，清除率较 BHT 强。 各部位中乙
酸乙酯层清除一半自由基时的质量浓度最低，抗氧化
活性最强， 正丁醇层的抗氧化活性较氯仿层稍强，相
差不大。由表 4的 IC50值可知，辽东丁香枝不同部位
与标准品 BHT 比较， 其对 DPPH 自由基的清除率由
大到小顺序依次为：BHT >乙酸乙酯层>正丁醇层>氯
仿层>总提液>水层。
2.2 清除 ABTS+自由基体系测定抗氧化活性结果
2.2.1 不同浓度下辽东丁香枝总提液不同部位及
BHT 清除 ABTS+·活性结果见表 5、 图 2， 采用
SPSS16.0 统计软件对结果进行分析，得 IC50，结果见
表 6。
表 5 不同浓度下辽东丁香不同部位及 BHT 对 ABTS+·的清除率
Tab.5 ABTS+ radical-scavenging activities of different extracts
from the Syringa wolfii C. K. Schneider and BHT at different
concentrations.
图 2不同浓度下辽东丁香不同提取部位清除 ABTS+自由基活性
Fig.2 ABTS radical -scavenging activities of different extracts
from the Syringa wolfii C. K. Schneider and BHT by different
solvents at different concentrations
2.2.3 半数抑制率的计算 采用 SPSS16.0 统计软件计
算不同部位的 IC50。 计算结果见表 6
表 6 通过 SPSS 软件计算出辽东丁香枝不同部位及 BHT 清
除 ABTS+自由基的 IC50
Tab.6 The IC50 value of different extracts from the Syringa wolfii
C. K. Schneider and BHT in ABTS+ radical-scavenging activities
by using SPSS
2.2.4 小结
由图 2 可知随着各部位质量浓度的增加， 清除
ABTS+·的能力也随之增强，氯仿层、乙酸乙酯层、正
丁醇层、总提液的清除能力较强，在浓度为 0.31mg/ml
时 ， 对 ABTS+·的清除率已超过 40% ； 在浓度为
0.62mg/mL 时，对 ABTS+·清除率已超过 50%。 其中乙
酸乙酯层和总体液的清除率均已超过 70%，且乙酸乙
酯层的清除率大于总体液。正丁醇层和氯仿层的清除
率弱于总体液，作用能力相差不大，正丁醇层的较氯
仿层的稍弱。由表 6的 IC50值可知，辽东丁香枝不同
部位与标准品 BHT 比较，其对 ABTS+·的清除率由大
到小的顺序依次为：BHT>乙酸乙酯层>总提液>氯仿
层>正丁醇层>水层。
2.3还原性测定实验结果
2.3.1 实验结果
不同浓度下辽东丁香枝不同部位及 BHT 的吸光
度值结果见表 7、图 3。
表 7 不同浓度下辽东丁香不同部位及 BHT 的吸光度值
Tab.7. The absorbency of different extracts from the Syringa wolfii
C. K. Schneider and BHT at different concentrations
图 3 辽东丁香枝不同部位及 BHT 的还原能力
Fig.3 Ferric reducing activities of different extracts from the
Syringa wolfii C. K. Schneider and BHT at different concentrations
浓度
（mg/ml）
清除率%（mean）
BHT 氯仿层 乙酸乙酯层 正丁醇层 总提液 水层
0.018 7.82 7.9 5.84 4.57 0.77 1.84
0.037 12.42 12.27 8.12 5.45 4.31 3.82
0.075 42.79 16.08 8.55 9.72 10.00 4.81
0.15 63.50 31.59 20.37 6.77 21.23 4.81
0.31 87.27 42.45 42.17 44.62 42.46 6.79
0.62 97.70 64.17 74.22 58.32 70.31 11.45
1.24 99.69 82.93 99.43 99.71 99.00 19.94









IC50 BHT 氯仿层
乙酸乙
酯层
正丁醇
层
总提液 水层
0.097 0.329 0.285 0.358 0.308 40.701
浓度
（mg/ml）
吸光度
BHT 氯仿层 乙酸乙酯层 正丁醇层 总提液 水层
0.009 0.141 0.109 0.092 0.045 0.066 0.07
0.018 0.150 0.155 0.264 0.065 0.091 0.09
0.037 0.328 0.204 0.413 0.123 0.137 0.096
0.075 0.806 0.363 0.866 0.358 0.217 0.99
0.15 1.501 0.643 1.153 0.503 0.416 0.136
0.31 2.356 1.039 1.366 0.925 0.731 0.220
0.62 2.828 2.047 2.436 1.331 1.269 0.366



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人参研究 GINSENG RESEARCH 2016 年第 1 期
2.3.2 小结
采用铁离子还原法测定辽东丁香枝各部位不同
浓度的还原能力，测定的吸光度值越高则代表该样品
的还原能力越强。 由图 3 可知随着各部位浓度的增
大，各部位的吸光度值增大，即还原能力逐渐增强。各
部位的还原能力有一定的差异， 结合表 7 和图 3 可
知，从整体看各部位还原能力大小为：BHT>乙酸乙酯
层>氯仿层>正丁醇层>总提液>水层。
2.4 总酚测定实验结果
2.4.1 测定结果
表 8 辽东丁香部位的总酚含量
Tab.8 The phenolics content of different extracts from the
Syringa wolfii C. K. Schneider
2.4.2 小结
由表 8可知，辽东丁香枝各部位总酚含量的大小
为：BHT>乙酸乙酯层>氯仿层>正丁醇层>总提液>水
层，其中，乙酸乙酯层的总酚含量为 164.7μg/mg 接近
于 BHT 的 168.2μg/mg， 氯仿层和正丁醇层的总酚含
量是乙酸乙酯层的一半。
2.5 抗氧化能力与总酚的相关性分析（SPSS软件）
2.5.1 相关系数 ρ 是一个无量纲的数值， 且-1≤ρ≤
1，ρ>0为正相关，ρ<0为负相关，ρ的绝对值接近于 1，
说明相关性越好，ρ 的绝对值接近于 0，说明相关性越
差，检验结果见表 9。
表 9 相关性结果
Tab.9 Results of test of Correlations
2.5.2 利用 SPSS16.0 分析得 DPPH 与总酚的 ρ 值为-
0.774、ABTS+·与总酚的 ρ值为-0.672。 ρ的绝对值接
近于 1，说明相关性较好，总酚含量与清除率存在一
定的关系。
3 讨论
3.1 在清除 DPPH 自由基实验中，预先配制 9 个质量
浓度梯度进行实验，质量浓度范围为 0.0045～1.24mg ／
mL， 通过对实验结果的分析 ， 在质量浓度为
0.0045mg/mL 时， 清除效果不明显， 在质量浓度为
0.62mg/mL 时 ， 其达到最佳清除效果 ， 清除率为
95.40%，最终确定质量浓度为 0.009～0.62mg/mL。且随
着浓度的增大，清除率逐渐增大，表明清除率与剂量
成良好的依赖关系。 在该实验体系中，乙酸乙酯层清
除 DPPH自由基的能力高于其他部位。
3.2 在清除 ABTS+自由基的实验中 ， 质量浓度为
0.0045、0.009mg/mL 时，清除效果不明显，由数据得出
辽东丁香清除 ABTS+自由基的最佳质量浓度范围
0.018-1.24mg/mL 并呈现良好的量效关系。
3.3 在还原性实验中，乙酸乙酯层的还原能力接近于
BHT。
3.4 辽东丁香不同部位清除 DPPH、ABTS+自由基的
抗氧化能力与总酚含量的关系可知， 总酚含量越大，
抗氧化能力越强。 因此，不同部位抗氧化能力与总酚
物质的含量有较大的相关性。同时该结果也客观地反
映了 DPPH 法、ABTS+·法测定辽东丁香抗氧化活性
的准确性。
3.5 辽东丁香资源丰富且又是庭院、街道观赏、绿化
物种，辽东丁香枝具有较好的抗氧化作用，在食品保
鲜、抗氧化剂、保健品等领域具有一定的开发价值。
参 考 文 献
[1]傅沛云.东北植物检索表[M].科学出版社,1995,
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辽东丁香枝氯仿层 87.7
辽东丁香枝乙酸乙酯层 164.7
辽东丁香枝正丁醇层 82.6
辽东丁香枝总提液 64.8
水层 17.1
BHT 168.2
DPPH ABTS
Phenolics
Pearson Correlation（ρ） -.774 -.672
Sig. (2-tailed) .071 .144
N 6 6
,
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