全 文 ：[ 基金项目] 广西壮族自治区科技厅科技攻关项目(编号:桂科攻 0322024-5G)　[ 作者简介] 黄兴振 ,男 , 硕士研究生 ,电话:13878684364 , E-
huangxingzhen6@yahoo.com.cn　[ 通讯作者] 蒋伟哲 ,男 ,副主任药师 ,电话:138786884364 , E-mai l:jiangw eizh e6813@yahoo.com.cn
岩黄连提取物主要药效学及急性毒性试验
黄兴振 ,刘雪萍 ,黄敏 ,黄增琼 ,李迪 ,蒋伟哲　(广西医科大学第一附属医院新药研究开发中心 ,广西 南宁 530027)
[ 摘要] 　目的:研究岩黄连提取物与主治功能相关的主要药效学指标及安全性。方法:通过岩黄连提取物对四氯化碳和对乙
酰氨基酚所致急性肝损伤的保护作用 ,对大鼠胆汁流量 、免疫功能的影响进行了研究 , 同时进行急性毒性试验。结果:岩黄连
提取物大剂量能明显减轻肝组织受损程度 ,对对乙酰氨基酚所致的急性肝损伤也有一定的保护作用 ,能明显提高细胞吞噬功
能;岩黄连提取物的 LD50为 298.5 mg·kg-1。结论:岩黄连提取物有显著的保护肝脏等作用 , 且毒性较小。
[ 关键词] 　岩黄连提取物;药效学;急性毒性试验
[中图分类号] R285.6　　[ 文献标识码] A　　[文章编号] 1001-5213(2007)02-0146-03
Study on main pharmacodynamics and acute toxicity of herba Corydalis saxicolae extract
HUANG Xing-zhen , LIU Xue-ping , HUANG Min , H UANG Zeng-qiong , LI Di , JIANG Wei-zhe (Center of
Drug Discovery , the Fir st A ffriated Hospita l of GuangXi Medical Univ ersity , Guangxi Nanning , 530027 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To study the main pha rmacodynamics and toxicity o f he rba Corydalis sax icolae ex tract.METHODS
Through the test to observe the pharmacodynamics of herba Corydalis sax icolae ex tract.The tests showed tha t herba Coryda-
lis S ax icolae ex tract could pro tect the liver damage tha t caused by carbon te trachlo ride and ace taminophen.Meanwhile it could
also have effect on immune function and Bile flow in r ats;the median lethal do se was determined.RESULTS　The damage o f he-
patic tissue was significantly decreased by the la rge dose of herba Corydalis sax icolae ex tract;it had effect on the liver damage
induced by acetaminophen;it could improve immune function obviously ;the median le thal do se wa s 298.5 mg·kg-1.CONCLU-
SION　Herba Corydalis sax icolae ex tr act have ma rked effect of pro tecting the liver in rats with minor toxicity.
KEY WORDS:he rba Corydalis sax icolae ex tract;pharmacodynamics;acute to xicity
　　岩黄连又叫岩胡 ,系罂粟科(Papaveraceae)紫
堇属(Corydal is)植物石生黄堇(Corydal is sa xict-
esta)的根 ,其性苦 ,凉 ,具有清热利湿 ,散瘀消肿的
作用 。临床上岩黄连注射液可用于急性黄疸型肝
炎 ,肝硬化 ,肝癌 ,疮疖肿毒 ,急性肠胃炎[ 1] 的治疗 。
为将岩黄连开发成口服新制剂 ,对岩黄连提取物主
要的药效学及其急性毒性进行了实验研究 ,现将结
果报道如下。
1　材料
岩黄连提取物 20 mg(岩黄连碱含量为7.8%,广
西医科大学第一附属医院新药研究开发中心);联苯
双酯滴丸(规格每丸 1.5 mg ,北京协和药厂 ,批号
02100101);环磷酰胺(上海华联制药有限公司 ,批号
20001205);对乙酰氨基酚(江苏省常熟华港制药有限
公司 ,批号 040717);谷丙转转氨酶(ALT)和谷草转氨
酶(AST)试剂盒(四川省迈克科技有限责任公司 ,批
号 040120);昆明种小鼠 , ♀♂各半 ,体质量:19 ～ 21
g ,SPF 级 Wistar 大鼠 80 只 , SPF 级 ,体质量 170 ～
190 g , ♀♂各半;广西医科大学实验动物中心 ,实验
动物使用许可证号:SYKG 桂 2003-0005;实验动物
生产许可证号:SCXKG桂 2003-2003;动物室温度:
(25±2)℃,相对湿度:(60±2)%。
2　方法与结果
2.1　岩黄连提取物对四氯化碳急性肝损伤的保护
作用[ 2] 　将小鼠随机分为正常对照 、联苯双酯(200
mg·kg-1)、岩黄连提取物大 、中 、小剂量(剂量分别
为 20 ,10 , 5 mg·kg-1)组 。正常对照组给予生理盐
水。动物灌胃(ig)给药 ,qd ,连续给药 4 d ,给药第 4
天上午除正常对照组外 ,每组均皮下注射0.2%四氯
化碳花生油溶液(20 μL·kg-1),24 h后取血分离血
清 ,测定血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶
(AST),并取肝组织按常规固定 、染色和组织病理
学检查。结果见表 1 ,2。
　　结果表明 ,注射四氯化碳 24 h后肝功能明显受
损 ,ALT 和 AST 显著升高 。岩黄连提取物大剂量能
明显减轻肝组织受损程度 ,降低 ALT 和 AST 水平 。
肝组织病理学检查发现 ,给予四氯化碳后 ,肝组织发
生变性和灶性 、碎屑状或带状坏死 ,岩黄连提取物大
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　表 1　岩黄连提取物对四氯化碳急性肝损伤 ALT 和 AST
的影响( x±s , U·L -1)
Tab 1　Efffect o f herba Corydalis sax icolae ex tract on ALT
and AS T o f the live r damage model mice caused by carbon
tetrachlo ride( x±s , U·L-1)
组别 动物数 剂量/mg·kg -1 A LT AST
正常对照 12 49.8±25.7b 60.9±25.3b
模型组 12 514.2±236.4 735.5±91.0
岩黄连提取物小剂量 12 5 331.2±117.2a 579.2±192.2a
岩黄连提取物中剂量 12 10 266.7±119.6b 605.2±174.9a
岩黄连提取物大剂量 12 20 157.2±85.1b 576.9±157.3b
联苯双酯 12 200 205.6±132.7b 496.0±130.9b
注:与模型组比较 , a P<0.05 , bP<0.01
表 2　岩黄连提取物对小鼠四氯化碳急性肝损伤病理组织
学的影响
Tab 2 　Efffect of herba Corydalis sax icolae ex tract on
pa thohisto lo gy of the liver damage mode l mice caused by car-
bon tetr achloride
组别 动物数 剂量/mg·kg -1
肝组织坏死动物数
无 轻度 中度 重度
正常对照 12 12 0 0 0
模型组 12 0 1 5 6
岩黄连小剂量 12 5 0 2 7 3
岩黄连中剂量 12 10 0 8 2 2
岩黄连大剂量 12 20 0 5 5 2
联苯双酯 12 200 0 6 5 1
注:各实验组与模型组比较 , P <0.05
剂量组的肝组织变性坏死程度均较对照组为轻。
2.2　岩黄连提取物对对乙酰氨基酚急性肝损伤的
保护作用[ 2] 将小鼠随机分为正常对照 、模型组 、联苯
双酯(200 mg·kg-1)、岩黄连提取物大 、中 、小剂量
(剂量分别为 20 , 10 ,5 mg·kg-1)组。正常对照组和
模型组给予生理盐水 。动物灌胃给药 ,连续给药 4
d ,qd ,给药第 4天上午除正常对照组外 ,每组均腹腔
注射对乙酰氨基酚 300 mg·kg-1 , 24 h 后取血分离
血清 ,测定 A LT 和 AST 。结果见表 3。
表 3　岩黄连提取物对对乙酰氨基酚急性肝损伤的 ALT 和
AS T 影响( x±s , U·L-1)
Tab 3　Efffect o f herba Corydalis sax icolae ex tract on ALT
and AS T of the liv er damage model mice caused by ace tamin-
ophen( x±s , U·L -1)
组别 动物数 剂量/mg·kg-1 A LT AST
正常对照 10 47.0±21.7b 66.2±23.7b
模型组 12 663.3±407.1 810.3±286.9
岩黄连提取物小剂量 12 5 320.0±236.7a 551.7±190.7a
岩黄连提取物中剂量 12 10 317.5±165.0a 498.3±190.8b
岩黄连提取物大剂量 12 20 290.8±179.2b 408.5±167.9b
联苯双酯 12 0.2 314.2±116.7b 549.2±231.0a
注:与模型组比较 , a P<0.05 , bP<0.01
　　结果表明 ,给予对乙酰氨基酚后 , ALT 和 AST
显著升高 。岩黄连提取物对乙酰氨基酚所致的急性
肝损伤也有一定的保护作用 ,大剂量组的 ALT 水
平和 AST 水平均明显低于模型组。
2.3　岩黄连提取物对大鼠胆汁流量的影响[ 2] 　实
验前禁食 12 ～ 16 h ,实验时用乌拉坦(1 g·kg-1)麻
醉 ,背位固定 ,开腹后在右上腹暴露出胆总管 ,结扎
下端 ,小心剪一小口 , 向胆总管近肝端插入外径 1
mm 左右的塑料管 ,形成瘘管引流胆汁。待胆汁流
量稳定后 ,测定给药前及给药后 2 h 的流量。岩黄
连提取物分为大 、小两个剂量组(20 ,10 mg·kg -1),
并以硫酸镁作为阳性对照组(3.3 g·kg-1),将药液
分别注入胃内 。结果表明 ,岩黄连提取物对胆汁分
泌流量无明显影响 ,结果见表 4 。
表 4　岩黄连提取物对大鼠胆汁流量的影响( x±s , U·L-1)
Tab 4　Effect of herba Corydalis sa xicolae extr act on bile
flow in rats( x±s , U·L-1)
组别 剂量/mg·kg -1
胆汁流量/mL
药前 2 h 药后 2 h
生理盐水 1.2±0.4 1.13±0.22
硫酸镁 3 300 1.10±0.17 1.5±0.3a
岩黄连提取物小剂量 10 1.1±0.3 1.3±0.3
岩黄连提取物大剂量 20 1.2±0.3 1.4±0.5
注:与空白组比较 , aP<0.05
2.4　岩黄连提取物对免疫功能的影响
2.4.1　对绵羊红细胞致小鼠溶血素抗体生成的影
响[ 2] 　取小鼠 60 只 ,体重 18 ～ 22 g , ♀♂兼用 ,随
机分为 5组:空白对照组(生理盐水 , 10 mL·kg -1)、
阳性组(环磷酰胺 ,20 mg·kg-1)、岩黄连提取物大 、
中 、小剂量组(分别为 20 , 10 ,5 mg·kg-1),各组分别
灌胃给药 ,qd ,连续 8 d ,第 4天每组每只小鼠腹腔注
射 3∶5绵羊红细胞(SRBC)悬液0.2 mL ,给予 SRBC
后 4 d , 取血分离血清 , 血清稀释 400 倍 , 加入
0.5 mL SRBC , 再加入 1∶10 稀释的豚鼠血清(补
体)1 mL ,37 ℃保温 10 min ,离心 ,取上清液测 OD
值(540 nm),以半数溶血值 HC50反映溶血素水平。
结果表明 ,岩黄连提取物能明显促进小鼠溶血素抗
体生成 ,结果见表 5。
表 5　岩黄连提取物对小鼠溶血素形成的影响( x±s)
Tab 5　Effect of herba Corydalis sax icolae ex tract on hemo-
ly sin in mice( x ±s)
组别 动物数 剂量/mg·kg -1
半数溶血值
(HC50)
空白对照 12 332.1±97.5
环磷酰胺 12 20 104.5±40.3b
岩黄连提取物大剂量 12 20 472.7±92.8b
岩黄连提取物中剂量 12 10 451.7±123.0a
岩黄连提取物小剂量 12 5 429.1±93.7a
注:与空白组比较 , aP<0.05 , bP<0.01
2.4.2　对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响[ 2] 　取小
鼠 60只 ,体质量 18 ～ 22 g , ♀♂兼用 ,随机分为 5
组:空白对照组(生理盐水 , 10 mL·kg -1)、阳性组
(联苯双脂 ,200 mg·kg -1)、岩黄连提取物大 、中 、小
剂量组(分别为 20 ,10 ,5 mg·kg -1), qd ,连续 7 d ,末
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次给药 1 h 后 ,小鼠静注碳素墨水0.1 mL·10 g -1 ,
于注入墨水后 2 , 10 min 分别取血 50 μL , 置于
0.1%碳酸钠溶液中 ,以正常小鼠血清 50 μL 溶于 3
mL 0.1%碳酸钠溶液校零 , 于分光光度计上 675
nm 处比色 ,测 OD值 ,按公式 k =log(OD 2/OD10)/
t10 -t2 =1/8 log(OD 2/OD10)计算吞噬指数。结果表
明岩黄连提取物能明显提高细胞吞噬功能 ,结果见
表 6。
表 6　岩黄连提取物对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响( x±s)
Tab 6 　Effect o f herba Corydalis sax icolae ex trac t on the
phagocyto sis function of mac rophage in mice( x±s)
组别 动物数 剂量/mg·k g -1 吞噬指数 k(×10-2)
空白对照 12 3.3±2.8
环磷酰胺 12 20 5.8±22.1a
岩黄连提取物大剂量 12 20 7.4±1.5b
岩黄连提取物中剂量 12 10 6.6±1.1b
岩黄连提取物小剂量 12 5 5.8±2.3a
注:与空白组比较 , a P<0.05 , bP<0.01
2.4.3　对 2 ,4-二硝基氯苯所致小鼠迟发型超敏反
应的影响　取小鼠 60 只 ,分组及给药剂量同试验
1。分组后当天每只小鼠皮下注射1.25% 2 ,4-二硝
基氯苯(DNCB)丙酮液0.02 mL ,当天即开始给药 ,
qd ,连续 8 d。第 7 天以0.25% 2 , 4-二硝基氯苯丙
酮液注射小鼠后右足垫 ,每只0.02 mL ,对侧足注射
相同容积的丙酮液作对照 , 38 h 后处死小鼠 ,取后
双足等同部分精确称重 ,以双足的重量差值(mg)作
为迟发型超敏反应指标 。结果表明 ,可抑制小鼠迟
发型超敏反应 ,见表 7 。
表 7　岩黄连提取物对 2 , 4-二硝基氯苯所致小鼠迟发型超
敏反应的影响( x±s)
Tab 7　Efffect of he rba Corydalis sax icolae ex tract on de-
layed type hypersensitivity induced by DNCB in mice( x±s)
组别 动物数 剂量/mg·k g -1
后双足重
量差值/mg
空白对照 12 79.8±17.9
环磷酰胺 12 20 56.5±10.0b
岩黄连提取物大剂量 12 20 61.8±17.6
岩黄连提取物中剂量 12 10 62.9±16.6a
岩黄连提取物小剂量 12 5 72.8±14.6a
注:与空白组比较 , a P<0.05 , bP<0.01
2.5　毒性试验(LD50的测定)[ 3] 　取健康小白鼠 50
只 , ♀♂各半 ,随机分为 5 组 ,各组剂量均按等比级
数设计 ,灌胃剂量分别为 560 , 450 ,360 ,290 ,230 mg
·kg-1(剂量等比级数为 1∶0.83)。 24 h 内 4 次给
药 ,连续观察 7 d ,记录动物毒性反应情况及死亡动
物数 。死亡动物解剖肉眼观未见心 、肝 、肺 、肾 、脾等
重要器官出血 、坏死等异常表现。
结果表明 ,小鼠灌胃岩黄连提取物 560 , 450 ,
360 ,290 ,230 mg·kg-1后 ,动物多在 2 d 内中毒死
亡。用 Bliss法计算出小鼠 ig 岩黄连提取物的 LD50
为298.5 mg·kg-1 , 95%可信限为257.2 ～ 346.5 mg
·kg-1 。因此 ,认为在一定剂量范围内应用是比较
安全的。
2.6　统计方法　计量资料均以 x ±s表示 ,采用华
西医科大学卫生统计学教研室的《中国医学百科全
书—医学统计学》统计软件包(第 2版)进行有关检
验。
3　讨论
实验表明岩黄连提取物大剂量能明显减轻肝组
织受损程度 ,降低 ALT 和 AST 水平;岩黄连对扑
热息痛所致的急性肝损伤也有一定的保护作用;对
免疫功能的影响方面岩黄连提取物能明显促进小鼠
溶血素抗体生成 ,能明显提高细胞吞噬功能 ,抑制小
鼠迟发型超敏反应 。急性毒性实验的结果岩黄连提
取物的 LD50为298.5 mg·kg-1 ,95%可信限为257.2
～ 346.5 mg·kg -1 ,因此 ,认为在一定剂量范围内应
用是比较安全的。长期毒性试验的结果也表明岩黄
连提取物的毒性是比较小的 。
参考文献:
[ 1] 　毛宇昂 ,梁永红.岩黄连的研究综述[ J] .时珍国医国药 , 2006 ,
17(4):630-631.
[ 2] 　贺松其 ,吕志平 ,文彬 ,等.茵陈紫金汤对小鼠四氯化碳急性肝
损伤的保护作用[ J] .中国中西医结合消化杂志.2005 , 1:26-
28.
[ 3] 　徐叔云.药理实验方法学[ M ] .北京:人民卫生出版社 , 2002:
226-227.
[收稿日期] 2006-06-05
[ 基金项目] 浙江省教育厅科研基金资助项目(编号:20030805)　[ 作者简介] 王增寿 ,男 , 医学硕士 , 主任药师 , 电话:0577-88816257 , E-m ail:
w angzs@m ail.w z.z j.cn
脑用表阿霉素壳聚糖微球的制备及其特性考察
王增寿 ,张华 ,朱光辉 ,蒋硕民 ,陈怡　(温州医学院附属第二医院药剂科 , 浙江 温州 325027)
[ 摘要] 　目的:以壳聚糖为载体材料 , 表阿霉素为模型药物 ,制备脑内局部给药缓释微球。方法:以液体石蜡为油相 , L-抗坏血
酸棕榈酸酯为交联剂 ,司盘-80为乳化剂 , 采用乳化化学交联技术制备表阿霉素脑用微球。用动态透析法研究微球的体外释
·148· 中国医院药学杂志 2007年第 27卷第 2期 Chin H osp Pharm J , 2007 Feb , Vol 27 , No.02