免费文献传递   相关文献

大叶醉鱼草提取物对黄脊竹蝗的生物活性



全 文 :詹寿发 ,陈 晔 ,樊有赋 ,等.大叶醉鱼草提取物对黄脊竹蝗的生物活性 [ J] .江苏农业科学 , 2011, 39(3):148-150.
大叶醉鱼草提取物对黄脊竹蝗的生物活性
詹寿发 , 陈 晔 , 樊有赋 , 甘金莲 , 杨林元 , 伍仕林
(九江学院生命科学学院 ,江西九江 332000)
  摘要:为探讨大叶醉鱼草(BuddlejadavidiiFranch)提取物对黄脊竹蝗(CeracriskiangsuTsai)的生物活性 ,采用冷
浸法 、索氏提取法 、超声波法提取大叶醉鱼草有效成分 , 分别对黄脊竹蝗 2龄和 4 ~ 5龄跳蝻进行毒力测定。结果表
明 ,超声波法对大叶醉鱼草有效成分的提取率最高 , 且其提取物的杀虫效果最好 , 对黄脊竹蝗 2龄和 4 ~ 5龄跳蝻的
LC50分别为 15.71、 24.58 mg/mL;其次为索氏提取法 , LC50分别为 19.07、28.07 mg/mL;冷浸法最低 , LC50分别为54.53、
72.80 mg/mL。同一种方法提取物的杀虫活性随提取物浓度的提高而增大 , 相同浓度提取物对黄脊竹蝗 2龄跳蝻的
杀虫效果明显高于对 4 ~ 5龄跳蝻。
  关键词:大叶醉鱼草;黄脊竹蝗;杀虫活性;提取方法
  中图分类号:S436.8+5  文献标志码:A  文章编号:1002-1302(2011)03-0148-02
收稿日期:2011-01-14
基金项目:江西省教育厅科技项目(编号:GJJ09353)。
作者简介:詹寿发(1964—),男 ,江西九江人 ,硕士 ,副教授 ,主要从事
植物资源学教学与研究工作。 E-mail:zhan9630@126.com。
  黄脊竹蝗(CeracriskiangsuTsai)属直翅目(Orthoptera)蝗
科(Locustidae),是我国南方毛竹林区的重要害虫 。黄脊竹蝗
大发生时 ,将竹叶吃尽 ,如同火烧一般 ,新竹被害即枯死 ,老竹
被害后 2 ~ 3年内不发新笋 ,被害竹林经济价值损失极大 。长
期以来 ,防治竹蝗主要使用化学农药 ,这样不但造成环境污
染 、杀伤有益生物 ,而且防治成本大 ,防治效果不稳定 。近年
来 ,从植物中筛选新的杀虫活性物质已成为害虫防治研究的
热点之一 。本试验以大叶醉鱼草 (BuddlejadavidiFranch)为
材料 ,以 95%乙醇为提取溶剂 ,采用冷浸法 、索氏提取法 、超
声波法提取大叶醉鱼草中的杀虫活性物质 ,并研究活性物质
对黄脊竹蝗的生物活性 ,旨在探索用天然产物防治黄脊竹蝗
的新途径 。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试植物采自江西省九江市莲花洞森林公园 ,经九江学
院生命科学学院陈晔教授鉴定为大叶醉鱼草(Buddlejadavidi
Franch)。黄脊竹蝗(CeracriskiangsuTsai)采自九江天花井国
家森林公园 ,由九江学院生命科学学院杨林元副教授鉴定 。
1.2 供试植物的采集与处理
采集大叶醉鱼草地上部分 , 60 ℃烘干后 ,用小型中药粉
碎机粉碎 ,粉末过 40目筛 ,干燥条件下保存备用 。
冷浸法:称取大叶醉鱼草粉末 30.0 g,置于 300mL锥形
瓶中 ,加入 95%乙醇 100mL,塞紧 ,冷浸 24h,其间不断振摇 ,
然后对其抽滤得提取液 。用同样的方法对滤渣重复提取
2次 ,合并滤液 ,用旋转蒸发仪减压浓缩至浸膏状 ,用 95%乙
醇 15mL溶解后定容至 30mL,配成提取液母液(每 1 mL提
取液母液相当于 1g干物质), 4 ℃冰箱中保存备用 。植物残
渣 60℃烘干后称重 ,计算提取率 。每个样 3次重复 。
索氏提取法:称取大叶醉鱼草粉末 30.0g,用滤纸包好后
装入索氏提取器内 ,在烧瓶中加入 95%乙醇 200 mL,加热回流
至提取液接近无色 ,抽滤得提取液 ,减压浓缩至浸膏状 ,浸膏用
95%乙醇 15mL溶解后定容至 30 mL,配成提取液母液(每 1
mL提取液母液相当于 1 g干物质), 4 ℃冰箱中保存备用 。植
物残渣 60℃烘干后称重 ,计算提取率。每个样 3次重复 。
超声波法:称取大叶醉鱼草粉末 30.0 g,置于 300 mL锥
形瓶中 ,加入 100 mL95%乙醇 ,然后放到超声波提取器中提
取 30 min,抽滤得提取液 。用同样的方法对滤渣重复提取 2
次 ,合并滤液 ,减压浓缩至浸膏状 。浸膏用 95%乙醇 15 mL
溶解后定容至 30 mL,配成提取液母液(每 1 mL提取液母液
相当于 1g干物质), 4℃冰箱中保存备用 。植物残渣 60 ℃烘
干后称重 ,计算提取率 。每个样 3次重复 。
1.3 试虫采集与处理
根据黄脊竹蝗的生活史与产卵习性 [ 1 -2 ] , 4月底从九江
市天花井国家森林公园竹林采挖黄脊竹蝗卵块 ,带土置光照
培养箱中温度(25±2)℃、相对湿度(80±10)%、光照 16 h
-黑暗 8 h的条件下继续孵化 ,待跳蝻出土后用尼龙纱网罩
在同样条件下以新鲜竹叶饲喂 ,根据跳蝻的发育情况 ,挑取 2
龄和 4 ~ 5龄跳蝻参试 。
试验虫笼选用 100目铁纱网做成直径 20cm、长 50cm的
圆筒形虫笼 ,两端各缝接长 20 cm的纱布供捆扎三角瓶 。选
用青皮竹一年生小枝叶 ,自分枝节间剪下 ,试验时将竹枝插于
三角瓶中水培 ,竹节没入水中 ,套入虫笼供试验跳蝻采食 。
1.4 生物活性测定
将室内饲养的 2龄跳蝻置试验虫笼中 ,每笼 30头 ,饥饿
6 h后 ,将不同提取方法得到的醉鱼草提取液母液 (干物质
1 g/mL)用蒸馏水配制成 5、10、20、40、80 mg/mL等 5个不同
的浓度 ,以蒸馏水为对照 ,用指压式小型喷雾器喷洒至竹叶湿
而不滴水为度 ,稍晾干后套入虫笼供跳蝻采食 。 3 d后更换
不带药的小竹枝饲喂 ,每种提取液设 3次重复 。用药后观察
跳蝻的生长情况 ,每隔 24 h统计 1次跳蝻死亡的数量 , 6d后
按以下方法计算跳蝻死亡率和校正死亡率:
死亡率 =试虫死亡数 ÷供试虫数 ×100%;
校正死亡率 =(处理组死亡率 -对照组死亡率)÷(1 -
对照组死亡率)×100%。
—148— 江苏农业科学 2011年第 39卷第 3期DOI :10.15889/j.issn.1002-1302.2011.03.103
参照刘霞等的方法 ,采用 MicrosoftOficeExcel统计函数
计算毒力回归方程 、LD50及其 95%置信区间 、相关系数等。
用同样的方法测定大叶醉鱼草不同提取方法提取物对黄
脊竹蝗 4 ~ 5龄跳蝻的生物活性 。
2 结果与分析
2.1 不同提取方法对大叶醉鱼草活性物质的提取率
冷浸法 、索氏提取法 、超声波法等 3种提取方法对大叶醉
鱼草的提取率存在一定差异。从整体看 ,冷浸法的提取率较
低 ,索氏提取法 、超声波法的提取率均高于冷浸法(表 1)。
表 1 不同提取方法对大叶醉鱼草各部位的提取率
提取方法 提取率(%)
冷浸法 6.24c
索氏提取法 9.14b
超声波法 9.67a
  注:数据后不同字母表示经 Duncan s新复极差检验在 5%水平
上差异显著。
2.2 大叶醉鱼草不同方法提取物对黄脊竹蝗 2龄跳蝻的生
物活性
不同提取方法得到的大叶醉鱼草乙醇提取物对 2龄跳蝻
的毒杀作用测定结果见表 2。不同提取方法提取物对黄脊竹
蝗 2龄跳蝻的毒力效应分析见表 3。
表 2 大叶醉鱼草提取液对黄脊竹蝗 2龄跳蝻的毒杀作用
提取方法 浓度(mg/mL)
试虫数
(头)
平均死亡数
(头)
死亡率
(%)
校正死亡率
(%)
冷浸法 5 30 3.67e 12.23 8.16
10 30 5.67de 18.94 15.14
20 30 7.33cd 24.43 20.93
40 30 12.67b 42.23 39.55
80 30 19.67a 65.57 63.97
索氏提取法 5 30 7.33e 24.43 20.93
10 30 10.67d 35.57 32.58
20 30 13.67c 45.57 43.04
40 30 20.67b 68.90 67.46
80 30 27.33a 91.10 90.67
超声提取法 5 30 8.00e 26.67 23.26
10 30 11.33d 37.77 34.88
20 30 16.00c 53.33 51.57
40 30 22.67b 75.57 74.43
80 30 28.33a 94.43 94.18
CK 30 1.33f 4.43 —
  注:数据后的字母用于对同一提取方法不同浓度处理结果间的
比较 ,不同字母表示在 5%水平上差异显著。
表 3 大叶醉鱼草不同提取方法提取液对黄脊竹蝗 2龄跳蝻的毒力效应
提取
方法
毒力回
归方程
LC
50(mg/mL)
LC50的
95%置信区间
(mg/mL)
相关系数
冷浸法 y=6.849 5+1.463 9x 54.53 34.16~ 87.04 0.984 0
索氏提取法 y=7.824 9+1.642 7x 19.07 14.00~ 25.97 0.972 7
超声提取法 y=8.180 4+1.763 2x 15.71 11.71~ 21.07 0.979 5
  从表 2、表 3可以看出 , 3种提取方法所得提取液对黄脊
竹蝗 2龄跳蝻均具有一定的毒杀活性 ,且毒杀效果均随提取
物浓度的提高而增大 。经 Duncan s新复极差检验 ,除冷浸法
较低浓度提取液处理外 ,索氏提取法 、超声波提取法不同浓度
处理间均达到显著差异(P<0.05)。比较不同提取方法所得
提取液对黄脊竹蝗 2龄跳蝻的毒杀作用 ,在相同处理浓度下 ,
冷浸法提取液的杀虫效果明显低于索氏提取法和超声法 ,最
高处理浓度校正死亡率为 63.97%, LC50为 54.53 mg/mL;索
氏提取法所得提取液最高处理浓度校正死亡率为 90.69%,
LC50为 19.07mg/mL;超声提取法所得提取液最高处理浓度
校正死亡率为 94.18%, LC50为 15.71 mg/mL,经 Duncan s新
复极差检验 ,差异均达到显著水平(P<0.05)。
2.3 大叶醉鱼草不同方法提取物对黄脊竹蝗 4 ~ 5龄跳蝻的
生物活性
用同样的方法观察大叶醉鱼草不同提取方法所得提取物
对黄脊竹蝗 4 ~ 5龄跳蝻的杀虫效果 。不同提取方法提取物
对黄脊竹蝗 4 ~ 5龄跳蝻的毒力效应见表 4。
表 4 大叶醉鱼草不同提取方法提取液对黄脊竹蝗 4~5龄跳蝻的毒力效应
提取
方法
毒力回
归方程
LC50
(mg/mL)
LC50的
95%置信区间
(mg/mL)
相关系数
冷浸法 y=6.340 1+1.17 78x 72.80 32.06 ~ 165.34 0.981 2
索氏提取法 y=6.925 3+1.240 8x 28.07 16.93~ 46.55 0.986 4
超声提取法 y=7.014 0+1.251 4x 24.58 15.13~ 39.93 0.995 2
  由表 4可见 ,大叶醉鱼草乙醇提取物对黄脊竹蝗 4 ~ 5龄
跳蝻同样具有毒杀活性 , 3种提取方法所得提取液的杀虫效
果也存在一定差距 ,同样表现为超声波法所得提取液的杀虫
效果最好 , LC50为 24.58 mg/mL;冷浸法的杀虫效果相对较
低 , LC50为 72.80 mg/mL;索氏提取法所得提取液的杀虫效果
略低于超声波法而高于冷浸法 , LC50为 28.07 mg/mL。比较
表 3与表 4的数据可明显看出 ,大叶醉鱼草乙醇提取物对黄
脊竹蝗低龄若虫的毒杀作用要明显高于对高龄若虫的作用。
3 结论与讨论
提取植物有效成分的方法有多种 ,冷浸法具有不需要特
殊设备 、操作简单 、安全方便等特点;但耗时长 ,提取效率相对
较低 。索氏提取法(属热提法)提取效率较高;但提取器容量
小 ,操作较复杂 ,耗时长 。超声波提取法具有方便快捷 、成本
低 、提取效率高且不破坏有效成分等优点 ,超声提取法已经越
来越多地被用于植物有效成分的提取 [ 4 -5] 。
大叶醉鱼草属马钱科(Loganiaceae)醉鱼草属(Buddleja)
植物 ,含有黄酮类 、苯丙素酚苷 、萜类 、皂苷 、木脂素 、甾醇和生
物碱等多种化学成分 ,具有抗菌消炎 、保肝利尿 、镇静止痛 、抗
氧化和杀虫等功效 [ 6 -7 ] 。本试验结果显示 ,大叶醉鱼草乙醇
提取物对黄脊竹蝗不同发育期的跳蝻均具有毒杀活性 ,其杀
虫效果随提取物的浓度提高而增大 。不同提取方法对大叶醉
鱼草有效成分的提取效率存在一定差异 ,相同浓度下对黄脊
竹蝗跳蝻的毒杀作用亦存在差异 ,索氏提取法和超声波提取
法的提取率较高 ,其提取物的杀虫效果也较好 。因此 ,从植物
中提取有效成分必须选择适当的提取方法 ,并尽量避免植物
活性物质在提取过程中遭受破坏 ,以提高自然资源的利用率 。
(下转第 150页)
—149—詹寿发等:大叶醉鱼草提取物对黄脊竹蝗的生物活性
蔡国祥.新植枇杷田块星天牛防治试验 [ J] .江苏农业科学 , 2011, 39(3):150-151.
新植枇杷田块星天牛防治试验
蔡国祥
(盐城生物工程高等学校 ,江苏盐城 224051)
  摘要:为做好星天牛的综合防治, 进行了室外小区防治试验。试验发现 ,施药方法以蛀孔中注射药剂后用黏土堵塞
蛀孔效果较好 ,以塞入蘸药棉球次之;药剂中以辛硫磷、毒死蜱较为敏感;施药浓度以 200倍液较为适宜。稀释倍数过
大 ,防治效果下降 ,过小则影响新植苗木生长。配合农业防治措施 ,在约 7 hm2枇杷田块 ,有效地控制了星天牛的危害。
  关键词:枇杷;星天牛;防治药剂;浓度;综合防治
  中图分类号:S436.65  文献标志码:A  文章编号:1002-1302(2011)03-0150-02
(上接第 149页)
大叶醉鱼草乙醇提取物对黄脊竹蝗高龄跳蝻的毒力效应
明显低于低龄跳蝻 ,可能的原因是随虫龄增大 ,抵抗或耐受药
物的能力逐步提高 。因此 ,对黄脊竹蝗的防治应尽量在低龄
跳蝻时期进行 。低龄跳蝻不仅对药物的耐受力较低 ,而且其
活动能力和活动范围小 ,便于开展防治工作 。本试验仅对大
叶醉鱼草提取物对黄脊竹蝗的生物活性进行了初步探讨 ,大
叶醉鱼草提取物中具体哪些成分对黄脊竹蝗具有杀虫活性以
及活性物质的作用机理尚需进一步探讨 。
参考文献:
[ 1]饶如春.黄脊竹蝗生物学特性及防治试验 [ J] .华东昆虫学报 ,
2002, 11(1):109-111.
[ 2]沈英杰 ,钱大益.赣北黄脊竹蝗发育历期及生物学特性观察 [ J].
昆虫知识, 1999, 36(3):144-146.
[ 3]刘 霞 ,路永贵 ,闫当萍.EXCEL在农药毒力测定中的应用 [ J].
中国农学通报 , 2009, 25(19):206-208.
[ 4]向洪平 ,葛建劳 ,张蓝月.超声波辅助苹取功能性天然色素的研
究与应用进展 [ J].江苏农业科学 , 2010(3):360-362.
[ 5]王和才 ,蔡 健 ,胡秋辉 ,等.超声波辅助提取紫红薯色素的工艺
研究[ J] .江苏农业科学 , 2009(2):236-238.
[ 6]张虎翼 ,潘竞先.醉鱼草属植物化学成分与生物活性研究进展
[ J].国外医药:植物药分册, 1995, 10(5):195-200.
[ 7]李治伟 ,陆德玲 ,冯俊涛 ,等.巴东醉鱼草不同方法提取物的杀虫
活性[ J] .西北农业学报 , 2009, 18(5):109-112.
  枇杷(Eriobotryajaponica),是蔷薇科苹果亚科的一个属 ,
为常绿小乔木 ,因果实形状似琵琶乐器而名。枇杷树形颇美 ,
而且生长迅速 ,叶绿茂盛 ,在不少地方被作为园艺观赏植物栽
培 [ 1 ] 。枇杷果实有润肺 、止咳 、止渴的功效;枇杷叶也是中药
的一种 ,以大块枇杷叶晒干入药 ,有清肺热胃 、降气化痰的功
用 ,常与其他药材制成 “强力枇杷露 ” “川贝枇杷膏 ”等 。另
外 ,中医理论认为 ,减肥应以健脾 、利水 、化痰为本 ,而枇杷具
备了这些功效 ,故枇杷是很好的减肥果品 [2 ] 。因此 ,枇杷具
有很好的观赏 、药用及经济价值 。近几年来 ,因环境条件变
化 ,星天牛(AnoplophorachinensisForster)在枇杷上的危害日
趋严重 ,造成树干蛀空 ,被风吹折 ,树形歪斜 ,失去观赏价值 ,
重害时可致枇杷枯死 。关于星天牛的生物学特性 ,早就有不
少报道 [ 3 ] ,但其防治技术未见系统的研究报告 。 2010年春 ,
盐城市城南盐塘河露天公园 ,其新植枇杷田块星天牛的危害
率近 30%,给枇杷的健康生长带来巨大的不良影响 。为此 ,
笔者对其防治技术进行了系统研究 ,试验结果如下 。
1 材料与方法
1.1 小区试验
地点设在盐城市城南盐塘河露天公园 ,试验用枇杷为新
收稿日期:2010-08-09
作者简介:蔡国祥(1964—),男 ,江苏射阳人 ,副教授 ,主要研究方向
为桑树病虫害防治实用新技术开发。 Tel:(0515)81899081;
E-mail:cgx64@sina.com.cn。
栽 3年生实生苗 , 总被害率在 30%左右 , 试验时每小区选
10株左右具有新鲜排泄物的树木作材料 , 挂标签作好标记 ,
每处理 3次重复 ,设空白对照 , 48 h后调查防治效果 ,以看不
到新鲜排泄物作害虫死亡计。如果是喷雾处理 ,则将配好的
药液用手持喷雾器喷雾 ,以茎干喷湿为度;如果是涂干 ,则用
5 cm宽漆刷蘸取配制好药液 ,涂刷树干 ,以对蛀孔周围涂湿
但不向下流药液为度;若是注射 ,则用一次注射器抽取配制好
的药液 ,从蛀孔中注入 ,以药液不从蛀孔流出为度 。供试农药
均为市售农药 。统计分析方法为 t测验 ,试验中涉及到百分
比资料 ,均经过反正弦(arcsinx)转换后再统计分析 。
1.2 综合防治
试验地点设在盐城市城南盐塘河露天公园 、盐城市内塘
河公园 、亭湖区盐东镇苗圃 。以盐城市苗圃未防治的田块作
对照 。试验点采用人工捕捉成虫 ,手工敲压产卵的枝条 ,注射
50%辛硫磷乳油 200倍液或 480g/L毒死蜱乳油 200倍液 ,后
用黏土堵塞蛀孔等防治措施 。试验前和试验 1个月后各调查
1次被害率 ,计算防治效果 ,调查时每个试验点抽查 3 ~ 4块
典型样本田块 ,每个样本田块 5点取样 ,每个样点抽查 10株
枇杷计算被害率 。统计分析方法同小区试验 。
2 结果与分析
2.1 不同施药方法对防治效果的影响
从表 1试验结果看出 ,施药方法中以注射效果最好 ,以塞
蘸药棉球次之 ,再次是涂干 ,以喷雾效果最差 。涂干和喷雾因
害虫在树干中蛀食 ,药剂接触不到虫体 ,故防治效果较差 。
—150— 江苏农业科学 2011年第 39卷第 3期