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树头发提取物抑菌作用研究



全 文 : 2007, Vol. 28, No. 07 食品科学 ※基础研究66
收稿日期:2007-06-12
基金项目:湖南省教育厅资助项目(03C438)
作者简介:蒋盛岩( 1 9 6 7 - ),男,副教授,主要从事生物技术研究。
树头发提取物抑菌作用研究
蒋盛岩,赵良忠,陈立德,段林东,王放银
(邵阳学院生物与化学工程系,湖南 邵阳 422004)
摘 要:用树头发(pterula umbrinella Bres.)的乙醇水溶液提取物对三种细菌、两种酵母菌和两种霉菌进行抑菌研
究。结果表明,树头发提取物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母、赤酵母、黑曲霉和
桔青霉等都有抑制作用,对上述供试菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为 0.5%、0.5%、1.0%、3.0%、3.0%、2.5%、
2 .5 %;热处理对提取物的抑菌效果无影响。
关键词:树头发;提取物;抑菌作用
Study on Bacteriostasis of pterula umbrinella Bres. Extract
JIANG Sheng-yan,ZHAO Liang-zhong,CHEN Li-de,DUAN Lin-dong,WANG Fang-yin
(Department of Biological and Chemical Engineering, Shaoyang University, Shaoyang 422004, China)
Abstract :The antimicrobial effects of aqueous alcohol extract from pterula umbrinella Bres. against three kinds of germs, two
kinds of yeasts and two kinds of molds were studied. The results showed that pterula umbrinella Bres. extract has antimicrobial
effects against Escherichia coli, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Saccharomyes cerevisiae, Rhodotorula sp., Aspergillus
niger and Penicillium citrimum. The minimum inhibition concentrations(MIC) against these tested strains are 0.5%, 0.5%, 1.0%,
3.0%, 3.0%, 2.5% and 2.5% respectively. Temperature has little influence on the antimicrobial effect of pterula umbrinella Bres.
extract.
Key words:pterula umbrinella Bres.;extract;antimicrobial effect
中图分类号:Q935 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2007)07-0066-03
树头发是珊瑚菌科龙须菌属的一种真菌,别名黑龙
须、银头发,细丝状,黑色,担子果丛生,质韧,
基部细圆柱形,向上渐细,干后象人头发,生于高山,
多附于潮湿的黄栎树皮裂缝中,或悬挂在树枯枝上,具
有止咳止痛,接骨消肿的作用[ 1 -2 ]。现将树头发提取物
对细菌、酵母菌和霉菌的抑制作用研究结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
树头发(pterula umbrinella Bres.)由蒋盛岩、段林
东自湖南洞口雪峰山采集。
1.2 供试菌种
细菌为大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌
(Bacillus subtilis)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus
aureus);酵母菌为啤酒酵母(Saccharomyes cerevisiae)和
赤酵母(Rhodotorula sp.);霉菌为黑曲霉(Aspergillus
niger)和桔青霉(Penicillium citrimum)。以上菌种由湖南
邵阳学院生物工程实验室提供。
1.3 培养基
1.3.1 牛肉膏蛋白胨培养基
牛肉膏 5.0g,蛋白胨 10g,NaCl 1g,琼脂 20g,H2O
500ml,加热溶化,调 pH值 7.4~7.6,分装,121℃的
条件下灭菌 3 0 m i n,备用。
1.3.2 PDM培养基
马铃薯 200g,葡萄糖 15g,CaCl 2 1g,MgSO4 1g,
KH2PO 4 1g,(NH4) 2HPO 4 0 .5g,KNO 3 1g,琼脂 18g,
麦芽汁(12.7波美)80ml,VB1 100μg,加蒸馏水至1000ml,
pH5.8,121℃的条件下灭菌 30mi n,备用。
1.4 树头发提取物的制备
称取干燥的树头发 30g,装入 250ml三角瓶中,加
入 95 %乙醇 50ml,60℃振荡浸提 4h,过滤,滤渣在
同样条件下再浸提 4 h、过滤,合并两次滤液,真空冷
冻干燥,得固体提取物,4 ℃冰箱中保存,备用。
1.5 供试菌液制备
67※基础研究 食品科学 2007, Vol. 28, No. 07
1.5.1 细菌菌悬液和酵母菌悬液的制备
细菌用牛肉膏蛋白胨培养基,酵母菌用 PDM培养
基。将供试菌种分别接种到装有对应培养基的试管内,
进行扩大培养,细胞在 37℃培养 24h,酵母菌在 28℃
培养 24h,取活化好的菌种斜面,用无菌生理盐水配配
制成 1× 10 6~1× 10 7CFU/ml 的菌悬液,备用。
1.5.2 霉菌孢子悬液的制备
将供试菌种分别斜面接种到 P D M 培养基中,在
28℃培养 7 2 h,取活化好的斜面菌种,用无菌生理盐
水配制成 1× 106~1× 107CFU/ml的霉菌孢子菌悬液,
备用。
1.6 抑菌实验
1.6.1 滤纸片法测定抑菌作用
将滤纸用打孔器打成直径 6mm的圆形小纸片,分
装于洁净干燥的培养皿内,160℃干热灭菌 2h,备用。
将提取物溶于 30%的乙醇中,制备成质量分数为 3%的
溶液,用无菌镊子将滤纸片放入上述溶液中浸泡 24 h。
另取滤纸片分别放入 30%乙醇和无菌双蒸水中,作为对
比空白实验,分别记作 CK 1 和 CK 2,均浸泡 2 4 h。
取制备好的菌悬液 0.2ml,滴入已倒有相应固体培
养基的平皿表面,用涂布器使其均匀分布在培养基的表
面,用无菌镊子夹取浸有上述三种液体的滤纸片,放
入含菌平皿中,每皿三片,按上述相应条件培养,每
种菌作两个重复实验,量取抑菌圈直径,取平均值。
1.6.2 最低抑菌浓度(MIC)测定
在各平皿内,分别加入 2ml质量分数为 3%、2.5%、
2.0%、1.5%、1.0%、0.5%和 0.25%的树头发提取物溶
液,然后每皿倒入 15ml已溶化的 40℃左右的固体培养
基,混匀,冷却凝固后,每平皿加入 0 . 2 m l 悬液,涂
匀,按相应的条件培养,观察生长情况,每个浓度做
两个重复实验。
防腐剂对照实验:按上述方法将树头发提取物溶
液换成不同浓度的苯甲酸钠、山梨酸钾水溶液作为对比
实验。
观察结果是以不长菌的最低提取物溶液浓度为该提
取物或防腐剂的最低抑菌浓度。
1.6.3 温度对树头发提取物抑菌活性的影响
用 30 %乙醇配成质量分数为 3%、2 .5%、2 .0 %、
1.5%、1.0%、0.5%和 0.25%的树头发提取物溶液,分
别置于 8 0、1 0 0℃水浴和 1 2 1℃温热条件下,热处理
15mi n,然后测MIC。
2 结果与分析
2.1 树头发提取物的抑菌效果
滤纸片法实验结果:CK1和CK2都无抑菌圈,而树
头发提取物溶液对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色
葡萄球菌、啤酒酵母、赤酵母、黑曲霉和桔青霉的抑
制圈直径分别为 11.7、11.5、10.7、7.5、7.8、7.6和
8.0mm,这表明 30%乙醇和无菌水无抑菌作用,而一定
浓度的树头发提取物溶液对供试菌都有抑制作用,其中
对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的抑制作用较为显著,其
次是金黄色葡萄球菌,对供试酵母和霉菌的抑制作用相
对较弱,抑菌次序为:大肠杆菌>枯草芽孢杆菌>金黄
色葡萄球菌>桔青霉>赤酵母>黑曲霉>啤酒酵母。
2.2 树头发提取物对供试菌种的最低抑菌浓度(MIC)
树头发提取物对供试菌种的最低抑菌浓度实验结果
见表 1。从表 1可以看出,随着提取物溶液浓度的增加,
抑菌作用相应增强,树头发提取物对大肠杆菌、枯草
芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母、赤酵母、黑
曲霉和桔青霉的最低抑菌浓度(MIC)分别为 0.5%、0.5%、
1.0%、3.0%、3.0%、2.5%、2.5%,可见树头发提取
物在较低浓度下有较明显的抑菌作用。
树头发提取物与苯甲酸钠、山梨酸钾抑菌性能的比
较结果见表 2。从表 2 可以看出,与目前常用的食品防
腐剂苯甲酸钠、山梨酸钾相比,树头发提取物对供试
的细菌抑制能力较强,对供试的酵母菌和霉菌的抑制能
力较弱。
2.3 温度对树头发提取物抑菌作用的影响
用 30 %乙醇配成质量分数为 3%、2 .5%、2 .0 %、
1.5%、1.0%、0.5%和 0.25%的树头发提取物溶液,分
溶液质量分数(%) 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 金黄色葡萄球菌 啤酒酵母 赤酵母 黑曲霉 桔青霉
0 + + + + + + +
0.25 + + + + + + +
0.5 - - + + + + +
1.0 - - - + + + +
1.5 - - - + + + +
2.0 - - - + + + +
2.5 - - - + + - -
3.0 - - - - - - -
注:“+”表示有菌落生长; “-”表示无菌落生长。
表1 树头发提取物的最低抑菌浓度(MIC)
Table 1 Minimum inhibitory concentration (MIC) of pterula umbrinella Bres. extract
2007, Vol. 28, No. 07 食品科学 ※基础研究68
果表明,高温对树头发提取物的抑菌能力无明显影响。
3 讨 论
有关树头发提取物对细菌、酵母菌和霉菌的抑制作
用研究,在国内外尚未见报道。我们做了这方面的研究
工作,结果显示树头发提取物对供试的细菌、酵母菌、
霉菌有抑制作用,其中对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的抑
制作用较为显著,对供试酵母和霉菌的抑制作用相对较
弱。与目前常用的食品防腐剂苯甲酸钠、山梨酸钾相
比,树头发提取物对供试的细菌抑制能力较强,树头发
在天然食品防腐剂和药用等方面具有一定的开发价值。
参考文献:
[1] 《全国中草药汇编》汇编组.全国中草药汇编: 下册[M]. 北京: 人
民卫生出版社, 1978: 420.
[2] 江苏新医学院. 中药大辞典: 下册[M]. 上海: 上海人民出版社, 1986:
1536.
表2 树头发提取物与苯甲酸钠、山梨酸钾抑菌性能的比较
(以MIC表示)
Table 2 Compari son of antimicrobial activi ty among pterula
umbrinella Bres. extract, sodium benzoate and sodium sorbate
(based on MIC)
供试菌种 树头发提取物 苯甲酸钠 山梨酸钾
大肠杆菌 0.5 0.4 0.5
枯草芽孢杆菌 0.5 0.4 0.4
金黄色葡萄球菌 1.0 0.5 0.4
啤酒酵母 3.0 0.8 0.7
赤酵母 3.0 0.9 0.6
黑曲霉 2.5 0.7 0.6
桔青霉 2.5 0.6 0.5
别置于 8 0、1 0 0℃水浴和 1 2 1℃温热条件下,热处理
15min,冷却后测最低抑菌浓度(MIC),测得对大肠杆
菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母、赤
酵母、黑曲霉和桔青霉的最低抑菌浓度分别为 0 .5 %、
0 .5 %、1 . 0%、3 . 0%、3 . 0%、2 .5 %、2 . 5%,实验结
收稿日期:2007-06-12
作者简介:安广杰( 1 9 7 4 - ),女,博士,研究方向为农产品贮藏与加工。
改性水解明胶的理化性质分析
——热力学和流变学性质
安广杰 1,王 璋 2
(1.郑州轻工业学院食品与生物工程学院,河南 郑州 40002;2.江南大学食品学院,江苏 无锡 214036)
摘 要:本实验对改性水解明胶的流变学性质、热力学性质进行了研究。结果表明,相对于水解明胶而言,改
性水解明胶的变性温度范围较窄,焓变升高。改性水解明胶溶液的黏度随浓度的升高而升高,但是改性水解明胶
在质量浓度为 3 0 %时还具有较好的流动性。温度对改性水解明胶溶液黏度的影响很大,黏度与温度的关系符合
Arrhenius模型 lgη=lgA+Ea/2.303RT。在剪切速率较低的范围内,溶液呈现一种剪切变稀的假塑性流体状态。在剪
切速率高于 3 0 P a·s 时,呈现牛顿流体的状态。
关键词:改性水解明胶;理化性质;流变学性质;热力学性质
Analysis of Physicochemical Properties of Denaturalized Hydrolyzed Gelatin
—— Rheology Properties and Thermodynamics Properties
AN Guang-jie1,WANG Zhang2
(1.School of Food and Biological Engineering, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou 450002, China;
2.School of Food Science and Technology, Southern Yangtze University, Wuxi 214036, China)
Abstract :Rheology properties and thermodynamics properties of the denaturalized hydrolyzed gelatin were studied in this
paper. Results showed that the denaturalizing temperature range of denaturalized hydrolyzed gelatin became narrower and