全 文 ：基金项目：２０１２年湖南省研究生科研创新项目（编号：ＣＸ２０１２Ｂ３１４）；
湖南省产学研结合专项计划项目（编号：２００９ＸＫ６００１－５）
作者简介：唐韵熙（１９８８－），女，湖南农业大学在读硕士研究生。
Ｅ－ｍａｉｌ：ｔｙｘ１９８８５７＠ｇｍａｉｌ．ｃｏｍ
通讯作者：邓放明
收稿日期：２０１３－１０－１０
第２９卷第６期
２ ０ １ ３年１ １月
ＯＯＤ＆ＭＡＣＨＩＮＥＲＹ
食 品 与 机 械
Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．６
Ｎｏｖ．２ ０ １ ３
１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００３－５７８８．２０１３．０６．０４１
椪柑核中柠檬苦素类似物提取条件优化
Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｌｉｍｏｎｏｉｄｓ ｉｎ Ｐｏｎｋａｎ－ｐｉｔ
唐韵熙１，２
ＴＡＮＧ Ｙｕｎ－ｘｉ１，２
邓放明１，２
ＤＥＮＧ Ｆａｎｇ－ｍｉｎｇ１，２
（１．湖南农业大学食品科学技术学院，湖南 长沙 ４１０１２８；２．食品科学与生物技术湖南省重点实验室，湖南 长沙 ４１０１２８）
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｈｕｎａｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ，Ｈｕｎａｎ ４１０１２８，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｈｕｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ，Ｈｕｎａｎ ４１０１２８，Ｃｈｉｎａ）
摘要：以椪柑核为原料，研究水溶助剂法提取椪柑核中柠檬
苦素类物质的最佳工艺参数。结果表明：以水杨酸钠为提取
溶剂，提取剂浓度为２．５ｍｏｌ／Ｌ，提取时间６ｈ，浸提温度
４０℃，料液比１∶２０（ｍ∶Ｖ）条件下，柠檬苦素类物质的最佳
提取率为４．２１％，四因素对柠檬苦素类物质提取率的影响次
序为料液比＞浓度＞时间＞温度。
关键词：椪柑；种子；柠檬苦素类物质；提取
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｌｉｍｏｎｏｉｄｓ ｉｎ Ｐｏｎｋａｎ－ｐｉｔ ｗｅｒｅ
ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔａｋｉｎｇ Ｐｏｎｋａｎ－ｐｉｔ ｐｏｗｄｅｒ ａｓ ｔｈｅ ｒａｗ ｍａｔｅｒｉａｌ，ｗｉｔｈ ｓｉｎｇｌｅ
ｆａｃｔｏｒ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ，ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ
ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｏｎ Ｌｉｍｏｎｏｉｄｓ ｉｎ Ｐｏｎｋａｎ－ｐｉｔ ｂｙ
ｈｙｄｒｏｔｒｏｐｉｃ ｓｏｌｖｅｎｔ ｍｅａｎｓ．Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｅｘｔｒａｃａｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｅｘ－
ｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｒａｔｉｏ ｏｆ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｅｘｔｒａｃｔａｎｔ ｗｅｒｅ
２．５ｍｏｌ／Ｌ ｓｏｄｉｕｍ ｓａｌｉｃｙｌａｔｅ，６ｈ，４０℃，１∶２０（ｍ∶Ｖ），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅ－
ｌｙ．Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｒａｔｅ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｎ Ｌｉｍｏｎｏｉｄｓ ｗａｓ ４．２１４％ｕｎｄｅｒ
ｔｈｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．Ｉｎ ｔｈｅ ｍｅａｎｔｉｍｅ，ｔｈｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｏｒｄｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｆａｃ－
ｔｏｒｓ ｗａｓ：ｒａｔｉｏ ｏｆ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｅｘｔｒａｃｔａｎｔ＞ｅｘｔｒａｃｔａｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ＞
ｔｉｍｅ＞ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｏｎｋａｎ；ｐｉｔ；ｌｉｍｏｎｏｉｄｓ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
柠檬苦素类物质是一类四环三萜类植物次生代谢物质，
主要存在于芸香科和楝科植物组织中［１］，以果核中含量较
高，果皮次之，果汁中含量最低。至今发现柑桔果实中较常
见且含量较高的柠檬苦素类物质主要有：柠檬苦素、诺米林、
奥巴叩酮、脱乙酰诺米林等［２］。柠檬苦素类物质有苷元和糖
苷两种存在形式，至今已从柑橘属植物中分离出了３７种类
柠檬苦素苷元和１７种类柠檬苦素糖苷［３］。类柠檬苦素苷元
的结构为Ｄ－环的Ｃ１７ 位上连一个呋喃环，而且具有高度氧化
的三萜醇类诱导体结构，而糖苷是由柠檬苦素类似物苷元分
子Ｄ环开环后在Ｃ１７ 位上和一分子葡萄糖以糖苷键的形式
结合而成的［４］。国外对柠檬苦素类物质的研究较为深入，据
报道［５］，早在２０世纪６０年代，Ａｒｉｇｏｎｉ和Ｂａｒｔｏｎ就用化学和
Ｘ－ｒａｙ的方法对柠檬苦素的结构进行了研究，指出柠檬苦素
的分子式为Ｃ２６Ｈ３０Ｏ８，分子量为４７０。同时由于柠檬苦素类
物质的苷元和糖苷两种结构决定了其具有一定的健康维护
功能，因此学者［６，７］对其进行了分离、鉴定和生物活性探讨。
Ｍｕｒｔｈｙ等［８］发现柑橘中柠檬苦素类物质和姜黄素能够抑制
结肠癌的发生。Ａｒｃｈａｎａ等［９］用石油醚对 Ｃｉｔｒｕｓ ｍｅｄｉｃａ
Ｌｉｎｎ．种子进行柠檬苦素类物质提取，并以大白鼠为受体，研
究表明，柠檬苦素类物质能明显降低大鼠体内血清胆固醇、
血清甘油三酯的含量，提高高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ）含
量，这有助于降低动脉粥样硬化的风险。另有研究［１０，１１］指出
柠檬苦素类物质还有降血糖、杀虫、抗病毒、抗肿瘤形成和抑
菌等作用。
目前，对于柠檬苦素类似物的提取、分离、纯化和鉴定已
有一定的研究，常用的提取方法主要有超声波辅助提取
法［１２］、溶剂提取法［１３］、超临界ＣＯ２ 提取法［１４］等。其常使用
乙醇或丙醇等有机物作为提取剂，但使用量大且对环境有一
定污染，特别是丙醇等毒性有机物。Ｄｅｅｐａｋ等［１５］曾采用水
溶助剂法对酸橘籽中具有生物活性的柠檬苦素进行了研究，
结果表明该方法可减少有机溶剂用量且提取率较好。本研
究在此基础上，选择水杨酸钠水溶助剂进行提取，拟对提取
工艺进行优化，旨在找到一种环境友好型且提取率高的方
法，为柑桔类水果的深加工提供理论依据和实践指导。
１ 材料与方法
１．１ 材料
椪柑核：于湖南长沙水果市场采购椪柑并取籽，洗净，
５０℃下烘干，用粉碎机粉碎后过４０目筛，保存于干燥环境
中备用；
２６１
柠檬苦素标样：纯度９８％，成都曼思特生物科技有限公司；
水杨酸钠、石油醚（６０～９０℃）、无水乙醇、浓硫酸、三氯
化铁、对二－甲氨基苯甲醛：分析纯，国药集团化学试剂有限
公司；
显色液（Ｅｈｒｌｉｃｈ试剂）：Ａ液：准确称取１２５ｍｇ对二－甲
氨基苯甲醛溶于１００ｍＬ的浓硫酸和乙醇混合液（浓硫酸
６５ｍＬ，乙醇３５ｍＬ）中；Ｂ液：准确称取氯化铁０．９ｇ，用蒸溜
水溶解并定容至１００ｍＬ，使用时 Ａ液中加入０．５ｍＬ的Ｂ
液，现配现用。
１．２ 仪器
可见分光光度计：ＷＦＪ７２００型，上海龙尼柯仪器有限公司；
高速中药粉碎机：ＺＮ－４００Ａ型，长沙市岳麓区中南制药
机械；
电热恒温水浴锅：ＤＺＫＷ－Ｓ－４型，北京市永光明医疗仪
器厂；
循环水式多用真空泵：ＳＨＢ－Ⅲ Ｔ型，郑州长城科工贸有
限公司；
电热鼓风干燥箱：１０１－２ＡＢ型，天津市泰斯特仪器有限
公司；
电子分析天平：ＡＵＹ２２０型，日本Ｓｈｍａｄｚｖ公司。
１．３ 试验方法
１．３．１ 椪柑核柠檬苦素的测定
（１）检测波长的确定：准确称取１０ｍｇ柠檬苦素标准样
品，用５０ｍＬ无水乙醇溶解、定容，配制成２００μｇ／ｍＬ的柠
檬苦素标准溶液。取１ｍＬ该标准溶液于１０ｍＬ试管中，加
无水乙醇 １ ｍＬ，再加显色液 ５ ｍＬ，摇匀，于暗处静置
３０ｍｉｎ，然后在不同波长下测定吸光度，并以波长为横坐标，
吸光度为纵坐标作图，观察到最大吸收峰波长在４９０ｎｍ处。
（２）柠檬苦素标准曲线的绘制：分别取０，０．２５，０．５０，
０．７５，１．００，１．２５，１．５０，１．７５，２．００ｍＬ标准溶液于１０ｍＬ试
管中，并分别用无水乙醇稀释至２ｍＬ，再分别加入５．０ｍＬ
显色液，摇均，暗处静置３０ｍｉｎ。用无水乙醇作为空白参比，
在４９０ｎｍ波长下测定吸光度。根据测得结果建立标准曲
线，柠檬苦素标液浓度为横坐标ｘ，吸光度为纵坐标ｙ。最
终得标准曲线回归方程为ｙ＝０．００４ １ｘ－０．０９７ ９，相关系数
Ｒ２ ＝０．９９３ １。 标准曲线见图１。
0.1
0 50 100 150 200
浓度
Concentration/（μg·mL-1）
吸
光
度
Ab
so
rb
an
ce
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.0
图１ 柠檬苦素标准曲线
Ｆｉｇｕｒｅ １ Ｔｈｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｕｒｖｅ ｏｆ Ｌｉｍｏｎｉｎ
（３）柠檬苦素提取得率的计算：将椪柑核柠檬苦素提取
液定容到５０ｍＬ，准确吸取０．１ｍＬ于１０ｍＬ试管中，准确
加入１．９ｍＬ无水乙醇稀释，再加入５ｍＬ显色液，于４９０ｎｍ
波长处检测样品液的吸光度，然后根据吸光值在标准曲线上
查得柠檬苦素类似物浓度，最后计算待测样品中柠檬苦素类
似物的含量，其计算公式见式（１）。
Ｒ ＝
ＶＣ
ＬＭ×１０６
×１００％ （１）
式中：
Ｒ——— 椪柑核中柠檬苦素类似物含量，％；
Ｖ——— 样品定容体积，ｍＬ；
Ｃ——— 测得的样品浓度，μｇ／ｍＬ；
Ｌ——— 加入的样品体积，ｍＬ；
Ｍ——— 样品质量，ｇ。
１．３．２ 提取椪柑核中柠檬苦素类似物的操作方法
（１）椪柑核脱脂：称取一定量椪柑核粉，按料液比
１∶４（ｍ∶Ｖ）倒入适量石油醚，密封好于室温下浸提２４ｈ。
而后抽滤自然干燥至无石油醚。
（２）水溶助剂提取柠檬苦素：称取脱脂椪柑核粉２ｇ（精
确至０．０００ １ｇ）于１００ｍＬ锥形瓶中，按料液比加入一定量
的水溶助剂水杨酸钠，于一定温度下浸提一定时间，然后抽
滤，用提取溶剂定容至５０ｍＬ，即得椪柑核柠檬苦素提取液。
１．３．３ 椪柑核柠檬苦素提取单因素试验
（１）提取时间筛选试验：称取２．０ｇ（精确至０．０００ １ｇ）
样品粉末５份，在浓度为２ｍｏｌ／Ｌ的水杨酸钠２０ｍＬ，温度
为４０℃下，分别浸提２，４，６，８，１０ｈ后，抽滤，定容至５０ｍＬ，
按１．３．１（２）法进行显色反应，在４９０ｎｍ处测定吸光度，通过
计算柠檬苦素类似物得率，观察浸提时间对柠檬苦素类似物
提取率的影响。
（２）提取剂浓度筛选试验：称取２．０ｇ（精确至０．０００ １ｇ）
样品粉末５份，在４０℃下提取６ｈ，用浓度分别为１．０，１．５，
２．０，２．５，３．０ｍｏｌ／Ｌ的水杨酸钠２０ｍＬ进行提取，待提取完
后，抽滤，定容至５０ｍＬ，按１．３．１（２）法进行显色反应，在
４９０ｎｍ处测定吸光度，并计算得率，观察提取剂浓度对柠檬
苦素类似物溶出的影响。
（３）提取温度筛选试验：称取２．０ｇ（精确至０．０００ １ｇ）
样品粉末５份，用２０ｍＬ浓度为２ｍｏｌ／Ｌ的水杨酸钠，分别
在２０，３０，４０，５０，６０℃下浸提６ｈ，过滤，加提取试剂定容至
５０ｍＬ，按１．３．１（２）法进行显色反应，在４９０ｎｍ处测定吸光
度，并计算得率，观察提取温度对柠檬苦素类似物提取率的
影响。
（４）料液比筛选试验：称取２．０ｇ（精确至０．０００ １ｇ）样
品粉末５份，按料液比１∶５，１∶１０，１∶１５，１∶２０，１∶２５
（ｍ∶Ｖ）加入浓度为２ｍｏｌ／Ｌ的水杨酸钠，在４０℃下浸提
６ｈ，过滤，定容至５０ｍＬ，按１．３．１（２）法进行显色反应，在
４９０ｎｍ处测定吸光度，并计算得率，观察料液比对柠檬苦素
类似物溶出的影响。
１．３．４ 椪柑核柠檬苦素提取正交试验 根据单因素试验结
３６１
提取与活性 ２０１３年第６期
果，选用提取时间、提取剂浓度、提取温度和料液比为试验因
素，进行四因素三水平正交试验，以柠檬苦素得率为指标，确
定最佳提取条件，并确定各因素的影响重要性次序。
２ 结果与分析
２．１ 提取时间对柠檬苦素类物质提取率的影响
由图２可知，随着提取时间由２ｈ延长到６ｈ，柠檬苦素
类物质的提取率逐渐增大，提取６ｈ后出现了缓慢下降的趋
势，这可能是由于浸提时间延长，溶剂中有效成分发生分解
氧化现象从而降低了得率。因此，提取时间选取６ｈ左右比
较适宜。
2 4 6 8 10
提取时间
Extraction time/min
提
取
率
Ex
tra
ct
io
n
yi
el
d/
%
1
2
3
4
5
6
0
图２ 提取时间对柠檬苦素类物质提取率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ ２ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｔｉｍｅ ｏｎ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｙｉｅｌｄ ｏｆ Ｌｉｍｏｎｉｎ
２．２ 提取剂浓度对柠檬苦素类物质提取率的影响
由图３可知，随着水杨酸钠浓度由１ｍｏｌ／Ｌ增加到
２ｍｏｌ／Ｌ，柠檬苦素类物质的提取率呈上升趋势，在２ｍｏｌ／Ｌ
时达到最高。但在２ｍｏｌ／Ｌ以后，随水杨酸钠浓度升高，柠
檬苦素类物质的提取率稍有降低，这可能是因为其在
２ｍｏｌ／Ｌ的水杨酸钠内已达到饱和，浓度过大反而影响柠檬
苦素类似物的提取率。同时也考虑到水溶助剂浓度升高，会
导致最终产品中非目标成分的增加，影响目标物纯度，因此，
提取溶剂浓度选取２ｍｏｌ／Ｌ左右比较适宜。
２．３ 提取温度对柠檬苦素类物质提取率的影响
一般情况下，物质在溶剂中的溶解度会因温度的提高而
1.0
浓度
Concentration/（μg·mL-1）
提
取
率
Ex
tra
ct
io
n
yi
el
d/
%
1
2
3
4
5
0
1.5 2.0 2.5 2.0
图３ 提取剂浓度对柠檬苦素类物质提取率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ ３ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔａｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
ｏｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｙｉｅｌｄ ｏｆ Ｌｉｍｏｎｉｎ
增加，但柠檬苦素类物质作为一种天然抗氧化物质，在高温
条件下被氧化的概率也相应增加，致使提取效率降低。由
图４可知，提取温度从２０℃提升到４０℃，柠檬苦素类物质
的提取率呈上升趋势，在４０℃时达到最高。而后提取率有
所下降，因此提取温度选取４０℃左右为宜。
20
温度
Temperature/℃
提
取
率
Ex
tra
ct
io
n
yi
el
d/
%
1
2
3
4
5
0
30 40 50 60
图４ 提取温度对柠檬苦素类物质提取率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ ４ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
ｏｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｙｉｅｌｄ ｏｆ Ｌｉｍｏｎｉｎ
２．４ 料液比对柠檬苦素类物质提取率的影响
溶剂用量的多少和柠檬苦素类物质在其中的溶解率有
一定的关系。由图５可知，柠檬苦素的提取率是随着料液比
的提高而增加的。但是料液比到达１∶１５（ｍ∶Ｖ）后，上升趋
势不明显，此时溶剂可能已经将待提取物全部提取出。从节
约经济成本角度出发，选择料液比１∶１５（ｍ∶Ｖ）左右为宜。
1∶5
料液比
Ration of material to extractant（m∶V）
提
取
率
Ex
tra
ct
io
n
yi
el
d/
%
1
2
3
4
5
0
1∶10 1∶15 1∶20 1∶25
图５ 料液比对柠檬苦素类物质提取率的影响
Ｆｉｇｕｒｅ ５ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｅｘｔｒａｃｔａｎｔ
ｏｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｙｉｅｌｄ ｏｆ Ｌｉｍｏｎｉｎ
２．５ 正交试验结果与分析
为了优化椪柑核中柠檬苦素类似物提取条件，以柠檬苦
素得率为指标，选用提取时间、提取剂浓度、提取温度和料液
比为试验因素进行正交试验，试验因素水平取值见表１，试验
设计及结果见表２，方差分析见表３。
由表２可知，用水杨酸钠提取椪柑核中柠檬苦素类物质
的最佳条件为Ａ２Ｂ２Ｃ２（Ｃ１）Ｄ３，即提取时间为６ｈ，提取溶剂
浓度为２ｍｏｌ／Ｌ，提取温度为４０ ℃（或３０ ℃），料液比为
１∶２０（ｍ∶Ｖ）。各因素对椪柑核中柠檬苦素类物质提取率
的影响依次为Ｄ＞Ｂ＞Ａ＞Ｃ，即料液比＞提取剂浓度＞提取
时间＞提取温度。
４６１
第２９卷第６期 唐韵熙等：椪柑核中柠檬苦素类似物提取条件优化
表１ 正交试验因素水平表
Ｔａｂｌｅ １ Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ ｆｏｒ
Ｌ９（３４）ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ
水
平
Ａ提取
时间／ｈ
Ｂ提取剂浓度／
（ｍｏｌ·Ｌ－１）
Ｃ提取
温度／℃
Ｄ料液比
（ｍ∶Ｖ）
１ ４ １．５ ３０ １∶１０
２ ６ ２．０ ４０ １∶１５
３ ８ ２．５ ５０ １∶２０
表２ Ｌ９（３４）正交试验结果表
Ｔａｂｌｅ ２ Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ Ｌ９（３４）ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ
水平 Ａ Ｂ Ｃ Ｄ 提取率／％
１ １ １ １ １ ３．０１
２ １ ２ ２ ２ ３．８４
３ １ ３ ３ ３ ４．１９
４ ２ １ ２ ３ ３．９２
５ ２ ２ ３ １ ３．３４
６ ２ ３ １ ２ ３．８６
７ ３ １ ３ ２ ３．１３
８ ３ ２ １ ３ ４．１１
９ ３ ３ ２ １ ３．２２
ｋ１ ３．６８０ ３．３５３ ３．６６０ ３．１９０
ｋ２ ３．７０７ ３．７６３ ３．６６０ ３．６１０
ｋ３ ３．４８７ ３．７５７ ３．５５３ ４．０７３
Ｒ ０．２２０ ０．４１０ ０．１０７ ０．８８３
表３ 方差分析表
Ｔａｂｌｅ ３ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｖａｒｉａｎｃｅ ｔａｂｌｅ
因素
偏差
平方和
自由
度
Ｆ 值
Ｆ 临界
值
显著
性
时间 ０．０８６ ２ ３．７３９ １９
浓度 ０．３２７ ２ １４．３９１ １９
温度 ０．０２３ ２ １ １９
料液比 １．１７１ ２ ５０．９１３ １９ ＊
误差 ０．０２ ２
由于温度偏差平方和较其它３个因素小，说明温度对该试验
影响最小，所以将该列作为误差。
由表３可知，不同料液比的试验结果有显著性影响。
依据正交试验结果，在两组最优条件（即１：Ａ２Ｂ２Ｃ２Ｄ３；
２：Ａ２Ｂ２Ｃ１Ｄ３）下进行水溶助剂法提取椪柑核柠檬苦素重复
实验３次，两组得到的柠檬苦素平均得率分别为４．２１％，
４．１９％。因此，根据实际条件，最终选择组１（Ａ２Ｂ２Ｃ２Ｄ３）为
最佳柠檬苦素提取条件。
３ 结论
以椪柑核为原料，用水溶助剂水杨酸钠为提取溶剂，研
究椪柑核中柠檬苦素提取的优化工艺条件。经优化后，水杨
酸钠提取椪柑核中柠檬苦素的最佳提取条件为提取时间
６ｈ、水杨酸钠浓度２．０ｍｏｌ／Ｌ、温度４０ ℃、料液比１∶２０
（ｍ∶Ｖ），在此条件下，椪柑核中柠檬苦素类物质的提取率
为４．２１％。该方法也证实了前人对于水溶助剂提取柠檬苦
素类似物可明显减少有机溶剂用量的论证，且对环境的污染
性小。但该方法只是采用椪柑核种子作为研究对象，在下一
步的研究中，应扩大柑橘品种的选取面，针对果皮、果肉等不
同部位进行进一步探讨。
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ｏｕｓ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｍｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ ｃｉｔｒｕｓ ｕｓｉｎｇ
ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｃｏｌｉｓｉｏｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒａ
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ｃｉｔｒｕｓ ｌｉｍｏｎｏｉｄ，ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｂｙ ｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇ ｌｉｐｉｄ
ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｓｔａｔｕｓ ａｇａｉｎｓｔ Ｎ－ｎｉｔｒｏｓｏｄｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ
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ｔｏｚｏｔｏｃｉｎ ｉｎｄｕｃｅｄ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍａｃｏｇｎｏｓｙ Ｊｏｕｒｎａｌ，２０１１，
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１５ Ｄｅｅｐａｋ Ｖ Ｄａｎｄｅｋａｒ，Ｇ Ｋ Ｊａｙａｐｒａｋａｓｈａ，Ｂｈｉｍａｎａｇｏｕｄａ Ｓ Ｐａｔｉｌ．
Ｈｙｄｒｏｔｒｏｐｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ｌｉｍｏｎｉｎ ｆｒｏｍ ｓｏｕｒ ｏｒａｎｇｅ
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提取与活性 ２０１３年第６期