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泡桐花总黄酮抗BALB/c小鼠哮喘气道炎症的实验研究



全 文 :合口瘘的发生起到了重要作用。 ④术后早期应用中药胃管注
入 , 一般于术后 12 ~ 24h应用 , 如四磨汤 、大承气汤加减等 , 通
里功下 、促进胃肠蠕动 ,避免肠内容物在吻合口的积聚 , 以达到
上要空 、下要通的效果。 ⑤梗阻性结直肠癌手术止血彻底 , 冲
洗腹腔 、引流通畅极为重要 , 引流即可起到预防术后某些并发
症(化脓性感染)等的作用 , 也能起到一些并发症(出血 、化脓
性感染 、吻合口瘘)的报警及治疗作用。
一期手术有一定优越性 ,但并非所有结直肠癌并发急性肠
梗阻的病人都适合一期手术 , 一定要严格掌握适应证 ,术中肠
道彻底灌洗是预防吻合口瘘的关键。当然手术技巧 、围手术期
处理如合理有效应用抗生素 , 调节水 、电解质 、酸碱平衡等措施
也是影响手术成败的重要因素。
参考文献
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临床分析).中国胃肠外科杂志 , 1999, 2(2):79 ~ 81.
(收稿日期:2006-07-20)
(本文编辑:傅利霞)
泡桐花总黄酮抗 BALB/c小鼠哮喘气道炎症的实验研究
李寅超 1 赵宜红 1 李寅丽 2 李军柯 1
(1.郑州大学药学院 ,郑州 450052;2.河南省中医院)
基金项目:河南省教育厅自然科学基础研究项目(2006360010)
【摘要】 目的 探讨泡桐花总黄酮抗实验性 BALB/c小鼠哮喘气道炎症的作用。方法 以卵蛋白(OVA)致敏和引喘
BALB/c小鼠为模型 ,结合图像分析技术 , 观察泡桐花总黄酮大 、小剂量对小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量 、炎
细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOS)%以及支气管粘膜 EOS计数的影响。结果 泡桐花总黄酮可使 BALF中白细胞总数明
显下降 , 抑制支气管粘膜 EOS的浸润聚集 , 抑制气道炎症时毛细血管通透性的增加 , 减少炎性蛋白的渗出。结论 泡桐
花总黄酮对哮喘气道炎症有一定的防治效果。
【关键词】 泡桐花总黄酮;小鼠;支气管哮喘;气道炎症
  支气管哮喘是由嗜酸性粒细胞(EOS)活化和在肺内募集
所导致的慢性气道变应性炎症(airwayallergicinflammation,
AAI)[ 1] , 目前对哮喘的治疗无特效药物。 最近有人报道泡桐
花浸膏对过敏性哮喘有明显的保护作用 [ 2] 。泡桐花主要成分
为总黄酮 、挥发油 、熊果酸等 , 其中总黄酮含量较丰富
(3.08%)[ 3] 。近期我们结合图像分析技术 , 对泡桐花总黄酮抗
实验性哮喘气道炎症的作用进行了研究。
1 材料与方法
1.1 实验材料:
1.1.1 实验动物:健康 BALB/c小鼠(清洁级)50只 , 体重
(20±2)g, 雌雄各半 ,由河南省实验动物中心提供。
1.1.2 主要药品与试剂:OVA(卵白蛋白)(GradeⅢ)、福氏佐
剂 , 均为 Sigma公司产品;氢氧化铝 ,分析纯 , 广东西陇化工厂;
醋酸地塞米松片 , 浙江仙琚制药股份有限公司。泡桐花总黄
酮:郑州大学药学院天然药物化学实验室提取。
1.1.3 主要仪器:富林 F980型超声雾化器 , 镇江富林医疗设
备有限公司;Mias-2000型图像分析仪 , 四川大学图像图形研
究所。 721分光光度计 ,上海第二分析仪器厂。
1.2 实验方法:
1.2.1 分组:将 BALB/c小鼠观察适应 3d后 ,按体重分层随机
分为五组:正常组 , 模型组 , 阳性组 , 总黄酮大剂量组和总黄酮
小剂量组。 10只 /组。
1.2.2 造模与给药:参照文献方法造模 [ 4] 。正常组于第 1、 14、
28天分 3次以生理盐水代替抗原致敏;其余各组动物于第 1、
14、28天分 3次腹腔注射含 OVA20mg与福氏佐剂 10μl的生
理盐水溶液 0.1ml致敏。于末次致敏 24h后 ,正常组以生理盐
水代替抗原进行雾化激发 ,其余各造模组以含 1%OVA生理盐
水雾化激发。 1次 /d, 每次 30min, 持续 14d。以小鼠出现明显
的呼吸急促 、腹肌收缩及口唇紫绀等 , 作为哮喘模型建立的指
标。激发至第 7天开始灌胃 , 1次 /d, 共 7d。给药剂量见表 1。
1.2.3 标本采集与检测:
1.2.3.1 支气管肺泡灌洗液(BALF)的采集与检测:解剖暴露
气管及肺脏 , 钳夹右肺肺门处 , 随即以一小导管行气管插管灌
洗左肺 , 用 4℃生理盐水 1ml(抽吸 2次)×2次 , 每次灌注后立
即回吸 , 回收率达 80%以上。合并 2次 BALF, 留取 1 ml做白
细胞总数与分类计数 ,余经 4000r/min×10min离心后 ,取上清
液 0.2ml用 721分光光度计比色测定其吸光度(A),所得值乘
以 0.025g/L即蛋白含量 [ 5] 。
1.2.3.2 病理取材与细支气管粘膜 EOS计数:每只豚鼠经肺
泡灌洗后 , 摘取右肺中叶 , 10%中性甲醛固定 48h, 常规切片 ,
HE染色。用 Mias-2000型图像分析仪采集显微镜下图像 ,中
倍视野下 , 选择结构较完整 、粘膜及腔内 EOS浸润明显 、数量多
的细支气管 , 然后计数 5个高倍视野(hot视野)下的 EOS数 ,
取平均值 , 表示 EOS浸润程度。
1.2.4 统计学处理:使用 SPSS11.0统计软件进行分析 , 所有
数据以 x±s表示。P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 对模型小鼠 BALF蛋白含量 、白细胞总数与 EOS%的影
响:结果表明 ,泡桐花总黄酮大剂量和阳性药对 BALF中蛋白
含量 、白细胞总数有显著抑制作用 , 表现在与模型组比较 , 阳性
组 、总黄酮大剂量组(P<0.05或 <0.01);嗜酸性粒细胞也较
模型组有减少趋势 , 但差异无统计学意义(P均 >0.05)。总黄
·16· 中原医刊 2006年 10月第 33卷第 19期 CentralPlainsMedicalJournalOct.2006, Vol33, No.19
酮大剂量降低蛋白含量 、白细胞总数作用 , 与阳性药比较 , 差异
无统计学意义(P均 >0.05)。见表 1。
表 1 各组模型小鼠 BALF中蛋白含量 、白细胞总数与
EOS%的比较( x±s)
组别 鼠数(只) 剂 量
蛋白含量
(×109g/L)
白细胞总数
(×109 /L)
酸性粒细胞
(%)
大剂量 10 0.20g/(kg· d) 0.31±0.06* 0.12±0.20* 3.17±1.33
小剂量 10 0.10g/(kg· d) 0.42±0.08*# 0.17±0.16 4.83±1.47#
阳性 10 3mg/(kg· d) 0.25 ±0.04** 0.12±0.07* 3.67±0.82
模型 10 等体积生理盐水 0.58±0.15 0.19±0.03 4.17±1.47
正常 10 等体积生理盐水 0.13 ±0.03** 0.08 ±0.02** 0.33±0.52**
 注:与模型组比较 , *P<0.05, **P<0.01;与阳性组比较 , #P<0.05
2.2 对模型小鼠细支气管粘膜 EOS计数的影响:结果显示 , 模
型组小鼠细支气管粘膜处, 固有膜内可见明显的炎细胞浸润 , 以
EOS浸润为主 , 伴有多少不等的淋巴细胞浸润 , EOS圆形或卵圆
形 ,核呈 2 ~ 3叶分叶状 ,胞浆内充满粗大较均匀的嗜酸性颗粒。
正常组未见 EOS浸润;与模型组比较 ,阳性组和总黄酮大剂量组
EOS计数显著降低(P均 <0.01),总黄酮小剂量组 EOS计数下
降趋势不明显 , 差异无统计学意义(P>0.05)。见表 2。
表 2 对模型小鼠细支气管粘膜 EOS计数的影响( x±s)
组别 鼠数(只) 剂 量 EOS(个 /视野)
大剂量 10 0.20g/(kg· d) 8.0±1.9*
小剂量 10 0.10g/(kg· d) 11.6±1.3
阳性 10 3mg/(kg· d) 4.6±1.8**
模型 10 等体积生理盐水 12.0±2.2
正常 10 等体积生理盐水 0±0
 注:与模型组比较*P<0.05, **P<0.01
3 讨论
近年来 , 气道的炎症反应尤其是迟发型变态反应在支气管
哮喘的病理生理过程中的作用越来越受到重视。 浸润到气道
的 EOS介导了气道迟发型过敏性炎症过程。常用的豚鼠哮喘
模型 , 多是以肥大细胞为始动细胞引发的以早期相反应为主的
动物模型。 BALB/c小鼠是制作哮喘迟发相模型的常用品系之
一 [ 5] 。本实验以具有很强的免疫原性的 OVA复制过敏性哮喘
气道炎症动物模型。图像分析结果显示 , 光镜下可见细支气管
粘膜上皮 、固有层以及血管周围有较多的 EOS为主的炎性细胞
浸润 , 肺间质及肺泡腔内也可见 EOS浸润。其病理改变符合哮
喘晚期相的判断标准 ,说明该模型是一典型的以迟发相反应为
特点的哮喘动物模型 ,可运用于过敏性哮喘的迟发相反应的实
验研究。
实验观察了泡桐花总黄酮对以迟发相反应为特征的 BALB/
c小鼠哮喘模型的影响。结果显示 , 泡桐花总黄酮可使 BALF中
白细胞总数明显下降 ,抑制支气管粘膜 EOS的浸润聚集 ,抑制气
道炎症时毛细血管通透性的增加 ,减少炎性蛋白的渗出。泡桐
花总黄酮大剂量作用强 ,与小剂量呈剂量依赖型量效关系。
综上所述 , 泡桐花总黄酮具有对抗卵蛋白所致 BALB/c小
鼠哮喘的作用 , 其作用机制我们将做进一步的深入研究。
参考文献
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(收稿日期:2006-04-02)
(本文编辑:韩明明)
6例肝内胆管粘液性囊腺瘤的外科诊疗
朱泽卫
(首都医科大学大兴医院普外科 ,北京 102600)
【摘要】 目的 观察肝内胆管囊腺瘤的临床 、影像 、病理及外科治疗特点 , 探讨该病的诊疗方法。方法 回顾性分析我
院 2003年 4月 ~ 2005年 12月收治的 6例肝内胆管囊腺瘤病例的临床表现 、影像特点及外科手术治疗效果。结果 6例
病人均为女性 , 平均年龄 57.5岁;临床表现为右上腹肿物 ,上腹部胀满不适 ,上腹痛 , 黄疸 , 发热等;B超 、CT表现为肝内
囊性或囊实性占位。镜下囊壁内衬粘液柱状上皮 ,其中 3例上皮下伴有卵巢样间质。肿瘤均全部切除 , 术后随访至 2006
年 5月 , 病人全部存活 ,肝内肿块无复发。结论 肝内胆管囊腺瘤多见于女性 ,上腹部不适是其主要临床表现 , 术前明确
诊断较为困难。手术完整切除肿瘤是最佳治疗方案 ,可有效防止其复发。
【关键词】 肝肿瘤;胆管肿瘤;囊腺瘤
  肝内胆管囊腺瘤是一种罕见的肝脏良性肿瘤 ,其发病率不
足肝脏良性肿瘤的 5%。尽管随着目前影像学的进展 , 该类病
种的发现较前有所增多 , 但由于本病无特异性诊断手段 , 术前
误诊率很高。现总结本院 2003年 4月 ~ 2005年 12月连续收
治的 6例该类病人的临床资料 , 旨在为该病的临床诊治提供参
考 , 提高对本病的认识。
1 资料与方法
1.1 一般资料:收集 2003年 4月 ~ 2005年 12月我院收治的 6
例肝内胆管囊腺瘤病例 , 均为女性 , 年龄 42 ~ 85岁 , 平均年龄
57.5岁。就诊时症状:右上腹肿块 1例 ,右上腹胀满不适 3例 ,
上腹痛伴黄疸 1例 , 右上腹痛伴黄疸 、发热 1例;B超显示囊性
占位 3例 , 囊实性占位 2例 , 实性占位 1例 , CT显示分别为 2
例 、3例和 1例。肿块大小 3cm×4cm×5cm~ 15cm×12cm×
18cm;肿瘤位于肝左外叶 1例 , 左内叶 3例 , 肝右叶 1例 , 尾状
叶 1 例。 术前甲肮蛋白 (AFP)、癌胚抗原 (CEA)、 CA125、
CA19-9检查结果均为阴性。术前诊断为肝囊肿 2例 , 肝脓肿
·17·中原医刊 2006年 10月第 33卷第 19期 CentralPlainsMedicalJournalOct.2006, Vol33, No.19