全 文 ：柿叶总黄酮对糖尿病小鼠
降血糖降血脂作用及其机制研究＊
高永峰 , 高允生 ,辛晓明
(泰山医学院药学院 ,山东 泰安 271000)
摘要:目的 研究柿叶总黄酮对四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠的降糖降脂作用及其机制。方法 采用四氧嘧啶诱
导制作糖尿病小鼠模型 。给予柿叶总黄酮 50、100、200 mg/kg灌胃治疗 , 连续 2周 , 取血清 ,测定空腹血糖 、总胆固
醇 、甘油三酯 、SOD、MDA含量。灌胃期间 ,第 7、14天分别称其体重。结果 与模型组相比 ,中 、高剂量的柿叶总黄
酮能够显著降低糖尿病小鼠血糖 ,提高血清中 SOD活性 , 降低 TG、TC、MDA的含量。结论 柿叶总黄酮对四氧嘧
啶所致糖尿病小鼠具有降血糖和血脂的作用及提高机体抗氧化能力。
关键词:柿叶总黄酮;糖尿病;血糖;血脂 ;氧化应激
中图分类号:R285 文献标识码:A 文章编号:1004-7115(2009)04-0245-03
HypoglycemicandhypocholesterolaemiaefectofTotalflavonoids
frompersimmonleafinaloxan-induceddiabeticmiceanditsmechanism
GAOYong-feng, GAOYun-sheng, XINXiao-ming
(SchoolofPharmacy, TaishanMedicalColege, Taian 271016, China)
Abstract:Objective:Toinvestigatethehypoglycemicandhypocholesterolaemiaefectoftotalflavonoidsfrompersim-
monleaf(PTF)onaloxan-induceddiabeticmiceanditsmechanism.Methods:Thediabeticmicewereestablishedby
injectionofaloxan.DiabeticratsweregivenPTF(50, 100, 200 mg/kgrespectively)intragastricadministration, for14
days, andthedailydietofmice, waterquantityandweightwereobservedeachgroupin7thdayand14thdayinexperi-
ment.In14thday, miceglucosevalueandbloodserumTG, TC, SOD, MDAcontentweredetected.Results:Compared
withthediabetemodelgroup, themiddlePTFdoseandthehighPTFdoselowereddiabetemicesglucoselevelobviously,
enhancedbloodtheSODactivenessandreducedTG, TCandtheMDAcontent.Conclusion:Theprofectionoftotalfla-
vonoidsfrompersimmonleafpossessessignificanthypoglycemicantivities.
Keywords:totalflavonoidsfrompersimmonleaf(PTF);diabet;bloodglucose;bloodlipid;oxidative-stress
糖尿病是一种多病因的代谢疾病 ,特点是慢性
高血糖伴随因胰岛素分泌及作用缺陷引起的糖 、脂
肪和蛋白质代谢紊乱 。其长期的高血糖 、高血脂是
造成机体脏器损伤的重要原因 [ 1] 。近年来大量研
究证明 ,许多黄酮类化合物在治疗糖尿病及其并发
症方面疗效显著 [ 2] 。柿叶为柿树属植物柿的新鲜
或干燥叶。其味苦 、性寒 ,具有抗菌消炎 ,生津止渴 、
活血止血等功效 ,主治咳喘 、消渴及各种内出血 。现
代研究表明 ,柿叶的主要有效成分之一是黄酮类化
合物 ,具有良好的软化血管 ,降脂降压 、抗氧化 、止血
等药理作用[ 3] 。本研究探讨柿叶总黄酮(PTF)对四
氧嘧啶糖尿病小鼠血清中血糖 、血脂 、超氧化物歧化
酶(SOD)和丙二醛(MDA)的影响。
1 材料与方法
1.1 材料
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＊作者简介:高永峰(1978—),男 ,河南洛阳人 ,助教 ,硕士 ,主要从事中药药理学研究工作
1.1.1 柿叶总黄酮制备 柿叶采自泰山山麓 ,经过
烘干粉碎 、提取纯化 、冷冻干燥得总黄酮提取物 。以
芦丁为标准测定黄酮含量为 33.37%。四氧嘧啶
(Aloxan, ALX):Fluka公司;血糖 (Glucose, GLU)、
甘油三酯(Triglyceride, TG)、总胆固醇(TotalTCles-
terol, TC)试剂盒:中生北控生物科技股份有限公司;
消渴丸(XKP):广州中一药业有限公司 。
1.1.2 动物 昆明种小鼠由泰山医学院实验动物
中心提供 ,体重 21.3 ±2.2(g)。普通饮食 ,自由饮
水 。
1.1.3 仪器 BT815A型半自动生化分析仪(上海
三科仪器有限公司), UV-2550型紫外可见光分光光
度计(上海棱光技术有限公司)。
1.2 方法
1.2.1 小鼠糖尿病模型的制备[ 4] 100只小鼠适
应实验环境 1周后 ,随机抽取 15只小鼠作为正常对
照组(NormolControl, NC),其余小鼠禁食 12h,自由
饮水。
每只小鼠按 60 mg/kg,尾静脉一次性注射 ALX
制作糖尿病小鼠模型 。注射后 72小时 ,测空腹血
糖 ,空腹血糖大于 11mmol/L者纳入糖尿病模型。
1.2.2 动物分组及处理 将糖尿病模型小鼠随机
分为模型组(ModelControl, MC组),消渴丸组(Xiao
KePil, XKP组),柿叶总黄酮低(Lowdose, LD组)、
中(Middeldose, MD组)、高(HighDose, HD组)剂
量组 ,每组 15只 。给药组每天灌胃给药一次 ,模型
组和正常组每天灌胃生理盐水一次 ,连续 2周 。灌
胃期间 ,于第 7和 14天称重 。末次给药 30分钟后 ,
摘眼球取血 ,常规分离血清 。按试剂盒说明书测定 。
1.2.3 统计学处理 数据用 x±s表示 ,所有数据
用 SPSS13.0统计软件处理 , P<0.05有统计学意
义。
2 结 果
2.1 柿叶总黄酮对糖尿病小鼠体重的影响
治疗前 ,与 NC组小鼠比 ,造模成功的实验小鼠
体重明显减轻(P<0.05)。治疗后第 7、14天末 ,与
NC组小鼠比 , MC组小鼠体重未有明显恢复 (P<
0.05)。与 MC组比较 ,消渴丸组和柿叶总黄酮各剂
量组体重虽有增加 ,但无统计学意义。 (图 1)
图 1 PTF对糖尿病小鼠体重的影响
＊:P<0.05 vsNCgroup
2.2 柿叶总黄酮对糖尿病小鼠血糖 、血脂的影响
与模型组相比:消渴丸组 、PTF2.5 g· kg-1组 、
5.0 g·kg-1组小鼠血糖降低明显(P<0.05)。表明
PTF对糖尿病小鼠有较好的降糖效果 。柿叶总黄酮
的中 、高两个剂量组对血清中 TG、TC有明显影响。
与模型组相比 ,高剂量组的 TG、 TC降低显著(P<
0.05),中剂量组的血清 TG浓度有明显下降(P<
0.05),对 TC有一定影响 , 但无统计学意义 (见表
1)。 2.3 柿叶总黄酮对糖尿病小鼠血清 SOD、
MDA的影响
表 1 PTF对糖尿病小鼠血糖 、血脂的影响( x±s)
组别 剂量(g· kg-1) 血糖(mmol·L-1)GLU
血脂(mmol· L-1)
TG TC
NC组 5.51±1.92﹡ 0.82±0.31﹡ 1.72±0.22﹡
MC组 22.89±3.55 1.93±0.53 3.34±0.38
XKP组 2.5 17.21±4.12﹡ 0.87±0.38﹡ 1.94±0.43﹡
LD组 0.5 20.03±4.17 1.46±0.41 2.77±0.35
MD组 2.5 19.89±4.36﹡ 1.21±0.33﹡ 2.42±0.24
HD组 5.0 17.64±2.77﹡ 0.98±0.49﹡ 2.17±0.37﹡
与 MC组比较 , ﹡ P<0.05。
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结果表明:与正常组相比 , MC组小鼠血清中 SOD降
低 , MDA升高(P<0.05),表明高血糖模型小鼠的
抗氧化能力明显低于正常小鼠。给药物后 , XKP组
和 MD、HD组的 PTF可明显提高小鼠血清中的 SOD
含量 ,降低 MDA含量 ,差异有显著性(P<0.05)。
表明柿叶总黄酮能有效促进糖尿病小鼠抗氧化能力
的恢复(见表 2)。
表 2 PTF对糖尿病小鼠血清中 SOD、MDA的影响( x±s)
组别 剂量(g· kg-1) SOD(U· ml-1) MDA(nmol· L-1)
NC组 138.40±15.63﹡ 14.36±1.61﹡
MC组 98.33±32.05 21.04±2.05
XKP组 2.5 129.83±21.04﹡ 15.96±3.12﹡
LD组 0.5 105.21±19.78 19.72±0.83
MD组 2.5 120.37±19.71﹡ 18.43±1.21﹡
HD组 5.0 131.05±16.79﹡ 17.30±0.92﹡
与 MC组比较 , ﹡ P<0.05。
3 讨 论
体重减轻是糖尿病的一个临床观察诊断指标 。
本实验中 ,糖尿病模型小鼠的体重显著低于正常组 。
以消渴丸和柿叶总黄酮各剂量组治疗后体重虽有恢
复 ,但与模型组小鼠相比 ,体重未出现明显增加 。说
明柿叶总黄酮不能完全纠正糖尿病小鼠的物质代谢
紊乱。
四氧嘧啶在体内能选择性地被胰腺 β细胞迅
速吸收 ,其产生的超氧阴离子等自由基可直接破坏
β细胞的膜结构 ,损伤 β细胞的 DNA。大量的 β细
胞损伤与坏死导致胰岛素原合成障碍 ,引起糖尿
病 [ 5] 。本实验结果表明 ,柿叶总黄酮对四氧嘧啶糖
尿病小鼠具有明显的降糖作用 ,与模型对照组相比
差异具有明显的防治作用 。说明柿叶总黄酮可能减
弱四氧嘧啶对胰岛 β细胞的损伤或改善受损伤的
细胞的功能 ,有益于缓解糖尿病小鼠的症状。
心血管疾病并发症是糖尿病患者的主要死因 ,
近 80%的糖尿病患者死于心血管疾病。糖尿病患
者在疾病的亚临床期就常存在血脂异常 ,机体血脂
水平异常改变可诱发机体产生高脂血症 ,血脂异常
直接损害动脉内皮功能及促进动脉粥样硬化斑块的
形成和发展 ,所以血脂异常的控制是减少大血管疾
病并发症至关重要的因素[ 6] 。本实验中 ,柿叶总黄
酮可显著降低糖尿病模型小鼠血清中 TG、TC的水
平。表明柿叶总黄酮能促进机体血脂水平趋于正
常 ,防止糖尿病导致的脂类代谢紊乱 ,对糖尿病的并
发症有防治作用。
糖尿病及其并发症的发病机制至今尚未完全阐
明。近年来 ,许多研究发现糖尿病及其并发症的发
生与机体的氧化应激水平有关 [ 7, 8] 。氧化应激可以
产生如下结果:1)阻断胰岛素作用通路 ,导致胰岛
素抵抗;2)降低胰岛素基因表达水平;3)抑制胰岛
素分泌;4)促进 β细胞凋亡等 [ 9] 。在四氧嘧啶诱导
的糖尿病大鼠模型中 ,大鼠血清 SOD降低 ,外周组
织脂膜蛋白代谢末端产物———TBARs升高 , MDA/
SOD比值增加 ,表明糖尿病大鼠抗氧化防御体系受
抑制 ,自由基产生率超过清除率 ,氧化应激增加[ 10] 。
本研究表明 ,柿叶总黄酮可降低糖尿病小鼠脂质过
氧化物(MDA)的生成 ,提高其抗氧化酶系统(SOD)
的活力 ,有助于糖尿病小鼠抗氧化能力的提高 ,提示
这可能是其降糖作用的机制之一 。
参考文献:
[ 1] 沈稚舟 ,吴松华 ,邵福源.糖尿病慢性并发症 [ M].上海:上海
医科大学出出版社.1999.321.
[ 2] YangHJ, LiuLC, HuangHL.Researchdevelopmentonanti-
diabetesbyactivecomponentsofChinesetraditionalherbs[ J] .中
国中医药信息杂志 , 2005, 12(2):92.
[ 3] 林娇芬 ,林河通 ,谢联辉.柿叶的化学成分 、药理作用 、临床应
用及开发利用 [ J] .食品与发酵工业 , 2005, 31(7):90-96.
[ 4] 徐淑云 ,卞如濂 ,陈修.药理实验方法学 [ M] .第 3版.北京:人
民卫生出版社 , 2002.1516-1517.
[ 5] 刘京 ,申竹芳 ,刘海帆.一种用于降糖及降血脂药物的动物模
型 [ J] .药学学报 , 1994, 29(3):387-389.
[ 6] 赵水平 ,陈雅琴.他汀类药物在糖尿病心血管疾病防治中的作
用 [ J] .内科理论与实践 , 2008, 3(5), 303-306.
[ 7] 刘影 ,田浩明.氧化应激与糖尿病 [ J] .华西医学 , 2007, 22(1):
194-196.
[ 8] JemingsPE.Therelationshipofoxidativestresstothromboticin
typeIdiebeticpatientswithdiabeticretinopathy[ J] .Diabetic
Med, 1992, 87:860-865.
[ 9] 王方 , 孟雁.氧化应激与 2型糖尿病 [ J] .基础医学与临床.
2008, 28(8):886-889.
[ 10] 叶于薇 ,仲伟鉴 ,董妙珠.氧化应激在糖代谢紊乱中的作用
[ J] .中国食品卫生杂志 , 2000, 12(1):57-9.
(收稿日期 2009-03-13)
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