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玫瑰露抑菌效果研究



全 文 :玫瑰露抑菌效果研究
王军喜1, 赵文红2, 韩 珍2, 白卫东2
(1.广东王品调味食品有限公司, 广东 开平 529339; 2.仲恺农业工程学院轻工食品学院, 广东 广州 510225)
摘 要:研究了玫瑰露对 4 种细菌(沙门氏菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和苏云金杆菌)、3 种霉菌(木霉、青霉、黑曲霉)以及 2
种酵母菌(啤酒酵母、葡萄酒酵母)的抑菌活性和最低抑菌浓度(MIC),采用滤纸片法测定抑菌圈、液体培养法测定最低抑菌浓度。
结果表明,玫瑰露对供试细菌,不论是 G+菌还是 G-菌,都有较强的抑菌活性,而对霉菌、酵母菌的抑菌活性不明显;对细菌的抑菌
效果以沙门氏菌最强,MIC 为 0.98 mL/L。 说明玫瑰露既可以加入到食品中作为香料,同时可配合其他天然香料使用,组成复配防
腐剂。
关键词:玫瑰露; 抑菌; MIC
中图分类号:TS202.3 文献标识码:A 文章编号:1004-874X(2012)03-0079-02
Study on the antimicrobial activity of rose syrup
WANG Jun-xi1, ZHAO Wen-hong2, HAN Zhen2, BAI Wei-dong2
(1.Guangdong Wangpin Spice Co. Ltd., Kaipin 529339, China;
2.College of Light Industry and Food , Zhongkai University of Agricultural and Engineering, Guangzhou 510225, China)
Abstract: The antimicrobial activity and minimal inhibitory concentration (MIC) of rose syrup on 4 kinds of bacterial (Salmonella,
Escherichia coil, Bacillus subtilis, B. thuringiensis), 3 kinds of mold (Trichoderma, Penicillum, Aspergillus niger), 2 kinds of yeast
(Saccharomyces cerevisiae, S. raki) were studied in this paper. The inhibition zone diameters was tested by filter paper method and MIC
was determined by liquid culture method. The results showed that the antimicrobial activity of rose syrup on bacterial was high, whatever
gram-positive bacterium or gram-negeative bacterium, while low on mold and yeast. The bacteriostatic effect on Salmonella sp. was best
with MIC 0.98 mL/L. Therefore, rose syrup not only can be added into food as spicy, but also can be as preservatives mingled with other
kinds of natural spicy.
Key words: rose syrup; antimicrobial activity; MIC
据不完全统计,世界上约有 20%的粮油食品因霉变、
腐败而浪费和损失掉,同时还危及人们的健康 [1]。 延长食
品保藏期限,添加防腐剂是一种极为有效的手段。 用天然
提取物作防腐剂,一般具有广谱抗菌作用,其特有的风味
对调味料起到增香、增鲜的效果 [2],抑菌 pH 值范围较广,
其稳定性也比一般化学防腐剂好 [3]。 在实际应用时,由于
微生物种类等的多样性和防腐剂作用的特点, 目前人们
正致力于加强复配技术的开发和应用。
玫瑰香味宜人,具有美容护肤之功效,且可入药,《山
东中药》记述“治肝胃气痛、恶心呕吐,消化不良,泄泻,口
舌糜破,吐血、噤口痢”。 据 Sezai[4]报道,有 25 种玫瑰用于
火鸡制作。 玫瑰精油除了其香薰效果外,还具有镇痛、催
眠、抗痉挛、抗发炎等生化活性[5]。 玫瑰露是玫瑰精油蒸馏
时的副产品, 主要成分是香茅醇、橙花醇、丁香油酚等挥
发性物质 [6]。 我国自古就用蒸馏的方法把玫瑰制成玫瑰
露,气味芬芳,疗效显著,如作为复配防腐剂的原料有益于
身心。 目前,在玫瑰抑菌方面大多是关于玫瑰花、玫瑰精
油抑菌的报道 [7-8],关于玫瑰露的具体抑菌效果还未见报
道。 使用玫瑰露作为复配防腐剂组成原料比玫瑰精油可
以大大降低产品成本,为实现经济价值和发展前景,我们
对玫瑰露的具体抑菌效果进行了研究。
1 材料与方法
细菌:大肠杆菌(Escherichia coil)、沙门氏菌(Salmon-
ella sp.)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、苏云金杆菌(B.
thuringiensis);酵母菌:啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、
葡萄酒酵母(S. raki);霉菌:黑曲霉(Aspergillus niger)、青
霉(Penicillum)、木霉(Trichoderma),以上菌种均由仲恺农
业工程学院轻工食品学院微生物实验室提供。
玫瑰露:甘肃永登苦水玫瑰厂。培养基:营养肉汤琼脂
培养基,麦芽汁琼脂培养基,马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
主要仪器设备:电子天平 BS223S,北京赛多利斯仪器
系统有限公司;灭菌锅 YXQ.SG41.280B,上海医用粒子仪
器厂;电炉 YLF-2020,广州市中南电器五金厂;生化培养
箱 PYX-250G-B,广东韶关科力仪器有限公司;恒温水浴
锅 H.S.G-ⅡB-6,上海仪表(集团)供销公司;净化工作台
SW-CJ-1CU,苏州净化设备厂;冰箱 BCD-203W,华凌电
器有限公司。
1.2 试验方法
含菌平板的制作:对菌种进行活化、制备菌悬液、做成
平板,每个菌种 3个平板。
抑菌试验操作方法:采用二倍稀释法[9],将玫瑰露用无
菌水分别稀释成 1/8、1/16、1/32、1/64、1/128、1/256、1/512
收稿日期:2011-11-13
基金项目:广东省部产学研合作项目(2009B090300422)
作者简介:王军喜(1973-),男,助理工程师
通讯作者:赵文红(1966-),女,硕士,教授,E-mail: whitebai2002@
yahoo.com.cn
广东农业科学 2012 年第 3 期 79
DOI:10.16768/j.issn.1004-874x.2012.03.007
(下转第 90页)
图 1 玫瑰露对大肠杆菌
的抑菌效果
图 2 玫瑰露对枯草芽孢杆菌
的抑菌效果
图 3 玫瑰露对沙门氏菌
的抑菌效果
图 4 玫瑰露对苏云金杆菌
的抑菌效
图 5 经无菌水浸泡的 3个
滤纸片无抑菌圈
图 6 玫瑰露对青霉
的抑菌效果
图 7 玫瑰露对黑曲霉
的抑菌效果
图 8 玫瑰露对酵母菌
的抑菌效果
浓度梯度[10],将无菌圆滤纸片投入不同稀释度的玫瑰露中
浸 30 min左右,在无菌条件下将浸湿的圆滤纸片沥干,贴
在已备好的含菌平板中央,每皿 1片,每个处理 3次重复。
以无菌水作对照。 将贴好圆滤纸片的培养皿放入恒温培
养箱培养。 细菌于 37℃培养 1 d左右,酵母于 28℃培养 2
d左右,霉菌于 28℃培养 4 d 左右,用滤纸片法 [9]测量抑菌
圈的大小以及玫瑰露最低抑菌浓度 [9](玫瑰露为水溶状液
体,能与水混容均匀,无分层现象,因此可直接选用无菌
水作为玫瑰露稀释剂。 以肉眼看不到培养液浑浊的最低
稀释浓度为玫瑰露对该菌的最低抑菌浓度 MIC。进行 3次
平行试验,以 2次或 3次相同结果为准)。
2 结果与分析
2.1 玫瑰露抑菌活性测定
玫瑰露对大肠肝菌、枯草芽孢杆菌、沙门氏菌、苏云
金芽孢杆菌的抑菌效果分别见图 1~图 4,由图 1~图 4 可
见玫瑰露对这 4 种细菌均有抑制作用。以无菌水作对照,
经无菌水浸泡的 3 个滤纸片和经玫瑰露浸泡的滤纸片比
较见图 5,由图 5 可见,玫瑰露有抑制细菌生长的作用。
玫瑰露对青霉、黑曲霉、酵母菌的抑菌效果分别见图 6~
图 8, 由图 6~图 8 可见玫瑰露对霉菌和酵母菌的生长无
抑制作用。
玫瑰露对抑菌圈直径的测定结果见表 1,由表 1 可
见玫瑰露对细菌,不论是 G-菌还是 G+菌(如沙门氏菌、
大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和苏云金杆菌)均具有明显抑
制作用,而对霉菌和酵母菌抑菌效果并不明显。 从抑菌
圈直径来看,玫瑰露对大肠杆菌、沙门氏菌有更明显的
抑制效果。
2.2 玫瑰露MIC测定
针对产生抑菌圈的几种细菌进一步研究,测定玫瑰
露对其最低抑菌浓度。不同浓度玫瑰露的抑菌活性见表
2。 由表 2 可见, 在一定浓度范围内玫瑰露才有抑菌活
性,低于某浓度玫瑰露就没有抑菌活性。 玫瑰露对枯草
芽孢杆菌、苏云金杆菌的 MIC 为7.81 mL/L,对大肠杆菌
的 MIC 为 1.95 mL/L,对沙门氏菌的 MIC 最低 、为 0.98
mL/L。
3 结语
本试验通过滤纸片法测定抑菌圈,用液体培养法测定
最低抑菌浓度,对玫瑰露关于 4种细菌(沙门氏菌、大肠杆
菌、枯草芽孢杆菌和苏云金杆菌)、3 种霉菌(木霉、青霉、
黑曲霉)以及 2 种酵母菌(啤酒酵母、葡萄酒酵母)的抑菌
活性及最低抑菌浓度(MIC)进行研究,结果表明,玫瑰露对
表 1 玫瑰露抑菌效果测定结果
菌种
大肠杆菌
沙门氏菌
枯草芽孢杆菌
苏云金杆菌
啤酒酵母
葡萄酒酵母
黑曲霉
青霉
木霉
玫瑰露
28.0
28.7
24.7
25.7
-
-
-
-
-
CK
-
-
-
-
-
-
-
-
-
抑菌圈直径(mm)
注“-”表示无抑菌圈。
80
表 2 不同浓度玫瑰露的抑菌活性
注:“-”表示不长菌;“+”表示长菌。
菌种
大肠杆菌
沙门氏菌
枯草芽孢杆菌
苏云金杆菌
31.25mL/L
-
-
-
-
15.63mL/L
-
-
-
-
7.81mL/L
-
-
-
-
3.91mL/L
-
-
+
+
1.95mL/L
-
-
+
+
0.98mL/L
+
-
+
+
0.49mL/L
+
+
+
+
CK1
-
-
-
-
CK2
+
+
+
+
不同浓度玫瑰露的抑菌活性
细菌,不论是 G-菌还是 G+菌(如沙门氏菌、大肠杆菌、枯草
芽孢杆菌和苏云金杆菌)均具有明显抑制作用,而对霉菌
和酵母菌抑菌效果并不明显。 玫瑰露对 G-菌(大肠杆菌、
沙门氏菌)有更明显的抑制效果,对沙门氏菌的抑菌效果
最强、MIC为 0.98 mL/L。
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3 结语
根据试验数据及经验公式推导出碱性蛋白酶酶解可
溶性丝素蛋白的动力学模型分别为 r=(9.3529E0+0.3444S0)
exp[-0.2417(DH)]和 DH=4.1382ln[1-(0.2601 E0S0
+0.0832)
t],通过对理论值与实际值的对比发现,动力学模型在一
定程度上与试验结果吻合, 说明其具有较高的实际应用
价值。
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