全 文 ：第 32 卷 第 2 期
2 0 1 4 年 2 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE AＲCHIVES OF TＲADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol． 32 No． 2
Feb． 2 0 1 4
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DOI:10． 13193 / j． issn． 1673-7717． 2014． 02． 067
茉莉根醇浸膏对大鼠镇痛作用及机制研究
毛磊1，张玲1，刘奇1，丁艺雪1，张如松1，赵维良2
(1．浙江中医药大学药学院，浙江 杭州 310053;2．浙江省食品药品检验所，浙江 杭州 310004)
摘 要:目的:探讨茉莉根醇浸膏对大鼠福尔马林致痛实验的镇痛作用及其可能机制。方法:采用 70%乙醇
室温浸泡制备茉莉根醇浸膏;采用福尔马林实验观察大鼠Ⅰ相与Ⅱ相的疼痛反应;用紫外分光光度法测定福尔马
林实验大鼠血清中 PGE2含量;Elisa法测定皮层、丘脑和海马中 5 －羟色胺(5 － HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素
(NE)含量来研究药物的可能镇痛机制。结果:茉莉根醇浸膏能明显减轻福尔马林致痛大鼠Ⅰ相与Ⅱ相的疼痛反
应;茉莉根醇浸膏不能降低福尔马林实验大鼠血清中 PGE2的含量，但能明显升高大鼠皮层和丘脑中 5 － HT 含
量，也能明显升高皮层、丘脑和海马中 DA和 NE的含量;结论:茉莉根醇浸膏对大鼠福尔马林致痛实验具有镇痛
作用，其镇痛机制与外周炎性致痛因子 PGE2无关，与升高皮层和丘脑中 5 － HT含量，以及升高皮层、丘脑与海马
中 DA和 NE含量有关。
关键词:茉莉根醇浸膏;镇痛作用;作用机制
中图分类号:Ｒ284． 3 文献标识码:A 文章编号:1673 － 7717(2014)02-0415-04
Analgesic Effect and Mechanisms of Alcohol Extract of Ｒoot of
Jasminum sambac(L．)Ait on mice
MAO Lei1，DING Yixue1，LIU Qi1，ZHANG Ling1，ZHAN Ｒusong1，ZHAO Weiliang2
(1． College of Pharmacy，Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou 310053，Zhejiang，China;
2． Food and Drug Inspection Office of Zhejiang Province，Hangzhou 310004，Zhejiang，China)
Abstract:Objective:To investigate the analgesic effect and its possible mechanisms of alcohol extract of the root of
Jasminum sambac(L．)Ait on mice induced by formalin． Method:70% ethanol was used for preparing alcohol extract of
the root of Jasminum sambac(L．)Ait at room temperature and tests of formalin was used to observe the pain response on
phaseⅠand Ⅱ． UV spectrophotometry was used to test the contents of PGE2 in serum from formalin test in rats． ELISA
method was used to test the contents of 5 － HT，DA and NE in cortex，thalamus and hippocampus for studying the analge-
sic mechanisms． Ｒesult:Alcohol extract of the root of Jasminum sambac(L．)Ait remarkably inhibited the pain of mice in
phaseⅠand Ⅱin formalin test，and the drug cannot reduce PGE2 levels in serum on formalin test in rats significantly． It
can increase the contents of 5 － HT in cortex and thalamus，and the contents of DA and NE were also increased signifi-
cantly in cortex，thalamus and hippocampus． Conclusion:Alcohol extract of the root of Jasminum sambac(L．)Ait has
good analgesic effect on mice induced by formalin and the analgesic effects of the drugs are not caused by PGE2 ． The
mechanism of analgesic effects on drug is increasing the contents of 5 － HT in cortex and thalamus and increasing the con-
tents of DA and NE in cortex，thalamus and hippocampus tissues．
Key words:alcohol extract of the root of Jasminum sambac(L．)Ait;analgesic effect;mechanisms
收稿日期:2013 － 09 － 03
作者简介:毛磊(1989 －) ，男，江苏扬州人，硕士研究生，研究方向:
天然药物有效成分的研究与新药开发。
通讯作者:赵维良(1959 －) ，男，浙江杭州人，主任中药师，硕士。
茉莉根为木犀科植物茉莉(Jasminum sambac(L．)Ait)
的根，苦、温，有毒，具有麻醉、安眠、止痛之功，用于跌损筋
骨、龋齿、头痛、失眠等症［1 － 3］。《本草会编》中记载，“以酒
磨一寸服，则昏迷一日乃醒，二寸二日，三寸三日”。本实
验主要探讨茉莉根醇浸膏对大鼠福尔马林致痛的镇痛作
用，并探讨其可能的镇痛机制。
1 材 料
1． 1 药材 茉莉根
产自金华，经浙江中医药大学张如松教授鉴定为木犀
科植物茉莉(Jasminum sambac(L．)Ait)的根。
1． 2 动物
健康 SD大鼠，清洁级，体重 180 ～ 220 g，雌雄各半。浙
江省医学科学院动物中心提供，动物合格证号:SCXK(浙)
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2008 － 0033。
1． 3 试剂
甲醛(衢州巨化试剂有限公司，批号:20080601) ;氢氧
化钾(杭州化学试剂有限公司，批号:080716) ;甲醇(分析
纯) (天津市富宇精细化工有限公司，批号:080423) ;大鼠
去甲肾上腺素 Elisa 测定试剂盒(批号 20111207)、大鼠多
巴胺 Elisa 测定试剂盒(批号 20111010)、大鼠 5 －羟色胺
Elisa测定试剂盒(批号 20110908) ，均购于上海卓康生物有
限公司。
1． 4 仪器
大鼠灌胃器;5 mL注射器;微量注射器;烧杯;量筒;秒
表;AB104 － N 型电子天平(瑞士 METTLEＲ TOLEDO 公
司) ;M680 酶标仪(BIO － ＲAD 公司) ;Ultrospec 3300pro
紫外可见分光光度计(Amersham 公司) ;ANALYTECH －
738PLU 半自动生化仪(上海安泰分析仪器有限公司) ;
TD5A － WS台式低速离心机(长沙湘仪离心机仪器有限
公司) ;HH － 2 型数显恒温水浴锅(常州国华电器有限
公司)。
2 方 法
2． 1 醇浸膏的制备
茉莉根以 10 倍量 70%乙醇室温浸泡，提取 3 次，每次
24h，过滤，滤液浓缩至无醇味，得醇浸膏，取适量于实验前
用生理盐水稀释至所需浓度。
2． 2 大鼠福尔马林致痛实验［4］
取健康 SD大鼠 30 只，雌雄各半，随机分成 3 组，每组
10 只。即茉莉根醇浸膏高、低剂量组(相当于生药量 4 g /
kg、2 g /kg计算) ，模型对照组(给予等体积的生理盐水)。
给药体积为 1 mL /100 g，连续灌胃给药 7 d，末次给药后 1 h
于大鼠右后肢足趾部皮下注射 5%的福尔马林溶液 100
μL，立即将动物置于 5000 mL 无色透明的烧杯中，分别记
录注射福尔马林溶液第Ⅰ时相(0 ～ 5 min)及第Ⅱ时相(30
～ 60 min)疼痛反应的累积时间。参考 Mestre 的评分标准
记录大鼠被注射足的反应:3 分:舔、咬或抖足;2 分:提足，
完全不能与地面接触;1 分:跛行、轻触底面但不负重;0 分:
正常负重，行走自如。分别记录两个时相内每分钟出现上
述各级反应的秒数并乘以相应反应分值，以乘积之和为疼
痛反应指标。
并于观察结束后，于大鼠眼眶取血，3000 r /min离心 10
min，取血清，－ 20 ℃冰箱保存待测;然后断头取脑，于冰上
快速分离取得皮层、海马、丘脑，生理盐水冲洗，除去血迹，
滤纸吸干，分别称重，于 － 70 ℃冰箱中保存，用于 Elisa 法
测定 NA、DA、5 － HT的含量。
2． 3 紫外分光光度法测定大鼠血清 PGE2
取实验 2． 2 的福尔马林疼痛模型大鼠血清 0． 15 mL，
加 0． 5 mol /L的氢氧化钾 －甲醇溶液 2 mL，在 50 ℃水浴箱
中异构化 20 min。再用甲醇液稀释到 5 mL 离心 2500rp ×
10 min，取上清液于紫外分光光度计 278 nm处测定其吸光
度值，以吸光度值表示 PGE2含量。另设 10 只正常组大鼠
为阴性对照组，眼眶取血，3000 rpm离心 10 min，取血清，按
同法操作测定 PGE2含量
［5 － 6］。
2． 4 Elisa法测定大鼠脑组织中皮层、海马、丘脑 5 － HT、
DA、NE的含量［5 － 6］
2． 4 ． 1 中枢 5 －羟色胺(5 － HT)的测定 按照测定试
剂盒说明书进行，取实验 2． 2 的福尔马林疼痛模型大鼠
脑组织皮层、海马、丘脑，分别置于玻璃匀浆管中，加入
适量冰生理盐水，在冰浴上匀浆，充分研磨，使脑组织匀
浆化，制成 10%的组织匀浆，将匀浆液于 3500r /min，离
心 10min，取上清待测。另设 10 只正常组大鼠为阴性对
照组，取脑组织，按同法制备 10%脑组织匀浆液。按照
试剂盒说明书加检测液及足量底物，通过比较待测样本
与 5 － HT 标准品的吸光度，可准确测得样本中的 5 － HT
含量。
2． 4． 2 中枢多巴胺(DA)的测定同 5 －羟色胺(5 － HT)的
测定 去甲肾上腺素(NE)的测定同 5 －羟色胺(5 － HT)
的测定。
2． 5 数据处理及统计方法
采用 EXCEL软件统计系统进行统计处理，各组计量资
料以均值 ±标准差(珋x ± s)表示，组间差异采用 t 检验方法，
以 P ＜ 0． 05 为差异显著的标准;计数资料采用 χ2检验，以 P
＜ 0． 05 为差异显著的标准。
3 结 果
3． 1 大鼠福尔马林致痛实验
与模型组比较，茉莉根醇浸膏高、低剂量组均能明显减
轻福尔马林致痛大鼠的Ⅰ相和Ⅱ相疼痛反应(P ＜ 0． 05，P
＜0． 01)。表明茉莉根醇浸膏具有镇痛作用且镇痛部位在
中枢，但不能排除外周的参与。见表 1、图 1。
表 1 茉莉根醇浸膏对福尔马林致痛
大鼠疼痛反应的影响(n = 10，珋x ± s)
组别
剂量
(g /kg)
Ⅰ时相
(s)
Ⅱ时相
(s)
醇浸膏高剂量组 4 240． 80 ± 54． 346＊＊ 755． 10 ± 140． 334*
醇浸膏低剂量组 2 190． 60 ± 60． 438＊＊ 595． 70 ± 209． 527＊＊
模型对照组 － 333． 11 ± 57． 325 912． 00 ± 159． 521
注:与模型对照组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01。
图 1 茉莉根醇浸膏对福尔马林
致痛大鼠疼痛反应的影响
3． 2 大鼠血清 PGE2的测定结果
与阴性对照组比较，模型组大鼠血清 PGE2含量明显升
高(P ＜ 0． 01) ;与模型组比较，茉莉根醇浸膏高、低剂量组
均不能降低大鼠血清 PGE2的含量。表明其镇痛机制与
PGE2的合成与释放无关。见表 2、图 2。
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表 2 茉莉根醇浸膏对大鼠血清 PGE2的影响(n =10，珋x ± s)
组别 剂量(g /kg) OD值
醇浸膏高剂量组 4 0． 97 ± 0． 203
醇浸膏低剂量组 2 0． 93 ± 0． 128
模型组 － 0． 99 ± 0． 084＊＊
阴性对照组 － 0． 85 ± 0． 079
注:与阴性对照组比较，＊＊P ＜ 0． 01。
图 2 茉莉根醇浸膏对大鼠血清 PGE2的影响
3． 3 5 － HT、DA、NE的测定结果
3． 3． 1 5 － HT 含量测定结果 5 － HT 的标准曲线:Y =
5． 8326 － 4． 1369X Ｒ2 = 0． 97622 与阴性对照比较，模型组
大鼠大脑皮层、丘脑的 5 － HT含量明显低于阴性对照组(P
＜0． 05，P ＜ 0． 01) ，海马的 5 － HT 含量明显高于阴性对照
组(P ＜ 0． 05) ;与模型组比较，醇浸膏高、低剂量组均能明
显升高福尔马林致痛大鼠皮层、丘脑的 5 － HT 含量(P ＜
0. 05，P ＜ 0． 01) ，对海马的 5 － HT 含量无明显影响。表明
茉莉根醇浸膏的镇痛作用可能与升高皮层、丘脑的 5 － HT
含量有关。见表 3、图 3。
表 3 福尔马林致痛大鼠脑组织 5 － HT
含量的测定(ng /mL，n = 10，珋x ± s)结果
组别
剂量
(g /kg)
皮层 丘脑 海马
醇浸膏高剂量组 4 17． 59 ± 2． 607▲ 16． 23 ± 3． 576▲▲ 72． 71 ± 9． 147
醇浸膏低剂量组 2 18． 36 ± 1． 896▲▲20． 57 ± 1． 897▲▲ 68． 93 ± 5． 381
模型组 － 12． 59 ± 2． 099＊＊10． 13 ± 1． 991＊＊ 69． 55 ± 8． 346*
阴性对照组 － 16． 80 ± 0． 904 18． 73 ± 2． 023 55． 55 ± 8． 468
注:与阴性对照组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;与模型组比
较，▲P ＜ 0． 05，▲▲P ＜ 0． 01。
皮层 丘脑 海马
图 3 福尔马林致痛大鼠脑组织 5 － HT含量的测定结果
3． 3． 2 DA含量测定结果 DA 的标准曲线:Y = 8． 0295 －
2． 9205X Ｒ2 = 0． 95378。
与阴性对照比较，模型组大鼠大脑皮层、丘脑、海马的
DA含量明显低于阴性对照组(P ＜ 0． 01) ;与模型组比较，
醇浸膏高、低剂量组均能明显升高福尔马林致痛大鼠皮层、
丘脑、海马的 DA含量(P ＜ 0． 05，P ＜ 0． 01)。表明茉莉根
醇浸膏的镇痛作用可能与升高皮层、丘脑、海马的 DA 含量
有关。见表 4、图 4。
表 4 福尔马林致痛大鼠脑组织
DA含量的测定结果(pg /mL，n = 10，珋x ± s)
组别
剂量
(g /kg)
皮层 丘脑 海马
醇浸膏高剂量组 4 120． 72 ± 13． 114▲▲ 107． 11 ± 24． 336▲ 109． 81 ± 17． 641▲▲
醇浸膏低剂量组 2 126． 27 ± 11． 849▲▲ 111． 71 ± 36． 683▲ 112． 12 ± 25． 084▲▲
模型组 － 74． 65 ± 14． 583＊＊ 72． 70 ± 12． 575＊＊ 70． 55 ± 11． 982＊＊
阴性对照组 － 112． 80 ± 22． 560 115． 86 ± 20． 202 102． 92 ± 19． 957
注:与阴性对照组比较，＊＊P ＜ 0． 01;与模型组比较，▲P ＜
0． 05，▲▲P ＜ 0． 01。
皮层 丘脑 海马
图 4 福尔马林致痛大鼠脑组织 DA含量的测定结果
3． 3． 3 NE含量测定结果 NE的标准曲线:Y = 9． 1572 －
3． 5381X Ｒ2 = 0． 99598。
与阴性对照比较，模型组大鼠大脑皮层、丘脑、海马的
NE含量明显低于阴性对照组(P ＜ 0． 05，P ＜ 0． 01) ;与模型
组比较，醇浸膏高、低剂量组能明显升高福尔马林致痛大鼠
皮层、丘脑及海马的 NE含量(P ＜ 0． 05)。表明茉莉根醇浸
膏的镇痛作用可能与升高皮层、丘脑及海马的 NE 含量有
关。见表 5、图 5。
表 5 福尔马林致痛大鼠脑组织 NE含量的
测定结果(pg /mL，n = 10，珋x ± s)
组别
剂量
(g /kg)
皮层 丘脑 海马
醇浸膏高剂量组 4 161． 18 ± 9． 288▲ 49． 74 ± 6． 821▲ 74． 83 ± 7． 258▲
醇浸膏低剂量组 2 164． 27 ± 10． 577▲ 56． 20 ± 15． 818▲ 72． 32 ± 8． 187▲
模型组 － 135． 95 ± 23． 830＊＊ 37． 73 ± 7． 638＊＊ 49． 14 ± 20． 077＊＊
阴性对照组 － 184． 24 ± 21． 918 69． 64 ± 9． 198 73． 90 ± 12． 724
注:与阴性对照组比较，＊＊P ＜0．01;与模型组比较，▲P ＜0． 05。
皮层 丘脑 海马
图 5 福尔马林致痛大鼠脑组织 NE含量的测定结果
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4 分析与讨论
①福尔马林致痛模型是目前公认的一种较好的研究药
物镇痛作用的慢性疼痛模型，因其更贴近疼痛的临床实际
表现和良好的重复性，已成为研究痛觉调制机制和镇痛药
物筛选的方法而被广泛应用。实验表明，茉莉根各剂量组
均能减轻福尔马林致痛大鼠Ⅰ相与Ⅱ相的疼痛反应，可能
同时具有外周及中枢镇痛作用。
②PGE2的外周致痛作用已经明确，近年来对 PGE2的
研究主要涉及中枢机制。Maslinberg［7］等利用鞘内透析法
证实福尔马林双相反应与透析液中 PGE2含量呈正相关。
鞘内注射消炎痛可以抑制福尔马林Ⅱ相反应，这些研究均
提示了 PGE2参与了中枢疼痛的调控。本实验结果显示，茉
莉根醇浸膏高、低剂量组均不能降低大鼠血清 PGE2的含
量。表明其镇痛机制与 PGE2的合成与释放无关。
③茉莉根醇浸膏能提高皮层和丘脑的 5 － TH 含量，在
神经传导到来时，储存在囊泡中的 5 － TH大量来到突触间
隙，作用在突触后膜的 5 － TH 受体，从而有利于 5 － TH 发
挥作用。其机理可能在于茉莉根醇浸膏使 5 － TH 的升高
导致内啡肽神经元向痛传入神经上的阿片受体，释放脑啡
肽增加，从而形成突触前抑制，阻断 P 物质的兴奋性传导，
降低疼痛冲动，说明了茉莉根醇浸膏可能是通过激活内源
性抗痛系统达到镇痛作用的。
④DA在中枢神经系统为独立的介质，主要集中在椎
体外系的纹状体，黑质等部位，是椎体外系的重要介质。而
本实验结果显示，茉莉根醇浸膏组的皮层、丘脑及海马的
DA含量明显高于模型组，说明其作用可能与提高皮层、丘
脑、海马的 DA含量有关。
⑤在脑内单胺类递质当中，NE与镇痛关系是最早受到
注意的问题之一，本实验中，茉莉根醇浸膏能明显升高皮
层，丘脑及海马的 NE含量，表明药物的镇痛作用与提高皮
层、丘脑及海马的 NE含量有关。中枢系统中 NE受体与外
周相似，NE存在 α，β受体，α又分为 α1，α2 受体，Dennis［8］
等证明了 NE能神经系统可以通过 α，β受体参与痛觉的调
制。而茉莉根醇浸膏是通过上述何种 NE能受体发挥作用
仍需进一步考察。
通过本实验研究发现，茉莉根醇浸膏对大鼠的福尔马
林致痛实验有镇痛作用，其镇痛机制作用可能与外周炎性
致痛因子 PGE2无关、与升高皮层与丘脑的 5 － HT 含量，以
及升高皮层、丘脑与海马中 DA和 NE含量有关。
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1247．
医学三要而脉尤重
切脉辨症立方，为医家三要，而脉尤重，盖脉既切明，自
能辨症，而投药不难也。今医者苦于脉理难凭，乃竟尽弃不
究，惟学写医案，作门面语，论症则以活脱为能，用药唯以和
平为贵，自谓胜于偏执好奇、孟浪自喜者。不知用药如用
兵，贵乎神速，若迟疑不进，使邪势蔓延，必致救援不及，致
危殆而后已。夫偏执好奇，诚为医家所忌，然或因其立法乖
异，在病家尚不轻信，若和平之剂，人即知其未必效，亦取其
无害而救之，岂知因循两字，误人不浅，在寻常之症，弗药亦
愈，若生死关头，岂可须臾耽待乎!
余初读《灵》、《素》诸书，觉其经义渊深，脉理错杂，每
若望洋意沮，继复并心一志，遍览其贤注释，有所疑，则镇日
默坐，苦思而力索之，乃渐通五运六气、阴阳应象之理，每调
气度脉，决人生死，亦时或有验。
忆昔避兵乡里，对巷有吴某，晨起方洒扫，忽仆地不语，
移时始醒，延余诊视，仍能起坐接谈，及按脉则势急而锐，真
有发如夺索者，盖肾气败也，危期当不越宿，遽辞以出。人
咸不之信，讵日未是而气绝矣。
又布商周某，偶感微疾，就余诊视，余曰:“今所患勿药
可愈，惟按心脉独坚，湿痰阻气，气有余即是火，火郁不散，
当发痈毒。”时周脑后生细疮累累若贯珠，余曰:“君以此无
所苦，一旦勃发，为害非浅，亟宜慎之。”彼终不为意，及明
春果以脑后毒发而死。据此则凭脉决症，似乎如响斯应矣，
岂知脉理微茫，义有不可臆断者。
余有戚某过余斋，形色困惫，询知患咳经月，行动气喘，
故来求治，诊其脉，至而不定，如火薪然，窃讶其心精已夺，
草枯当死。戚固寒士，余以不便明言，特赠二金，惟令安养，
时已秋半，及霜寒木落，往探之而病已痊。细思其故，得毋
来诊时，日已西沉，行急而咳亦甚，因之气塞脉乱，乃有此象
欤?然惟于此，而愈不敢自信矣。
———清·毛祥麟《对山医话》