全 文 :从表 3可见 ,用药组能够明显促进小鼠 T 淋巴细胞
增殖 ,与对照组比较有显著性差异(P <0.05)。
1.4.4 对小鼠脾脏 NK活性的影响 由表 3可见 ,
高剂量组的 NK 活性(66.2%±15.6%)比对照组
(31.9%±3.0%)高了两倍多 。用药组能够明显促
进小鼠 NK细胞活性 ,与对照组比较 ,有显著性差异
(P<0.05)。
表 3 大豆异黄酮片对小鼠 T淋巴细胞转化和 NK细胞活性的影响
(x±s , n=10)
Table 3 Effects of SIT on the T lymphocyte proliferation and NK cell
activity(x±s , n=10)
Groups
Dose/
g·kg -1
A570 of lymphocyte
proliferation
NK cell activity/
%
Control - 0.216±0.016 31.9±3.0
Low dose 0.5 0.249±0.025* 53.2±12.2*
High dose 1.5 0.278±0.042* 66.2±15.6*
Compared wi th control group:*P <0.05
2 讨论
试验表明 ,大豆异黄酮片对试验小鼠的体重增
长和非特异性免疫功能的提高有促进效果 ,但无统
计学意义;对小鼠 T 淋巴细胞的增殖表现为正向调
节 ,与文献[ 4]的结果一致。NK细胞一经识别病毒感
染细胞后 ,即对其施加杀伤作用 ,是一种固有免疫。
未见资料报道酪蛋白和大豆异黄酮在 NK细胞活性
方面的作用。文中大豆异黄酮片能显著提高NK细
胞的杀伤活性。
参考文献:
[ 1] 毛峻琴 ,宓鹤鸣.大豆异黄酮的研究进展[ J] .中草药 , 2000 , 31
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bovine β-casine[ J] .Immunol Cell Biol , 1996 , 74:323-327.
收稿日期:2005-03
作者简介:王毓杰(1980-),男 ,甘肃武威 ,正攻读中药化学专业的硕士学位。
*通讯作者(Correspondent author),E-mai l:9006zmy@cdutcm.edu.cn
民族药青刺尖抗炎活性成分的初步研究
王毓杰 ,张 艺* ,杜 娟 ,杨莉娟 ,张 琦 ,孙倩倩 ,樊 媛
(成都中医药大学药学院 , 四川 成都 611731)
摘要:目的 结合抗炎药效学的筛选实验 ,研究青刺尖抗炎活性部位中的化学成分。方法 95%乙醇提取 , 系统溶剂法及硅
胶柱色谱分离 ,用化学和1HNMR、13CNMR等光谱学方法鉴定化合物。结果 分离并鉴定了正三十四烷醇(Ⅰ)和熊果酸(Ⅱ)两
个化合物。结论 化合物Ⅰ和Ⅱ为首次从青刺尖中分得。
关键词:民族药;青刺尖;抗炎;化学成分;熊果酸
中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1006-0103(2006)02-0152-03
Study on the anti-inflammatory active constituents of Prinsepia utilis
WANG Yu-jie , ZHANG Yi* ,DU Juan ,YANG Li-juan ,ZHANG Qi ,SUN Qian-qian ,FAN Yuan
(College of Traditional Chinese Pharmacy , Chengdu University of TCM , Chengdu 611731 , China)
Abstract:OBJECTIVE To study the chemical constituents of Prinsepia utilis Roy le.METHODS Chemical constituents were isolated by
silica gel column chromatography and their structures were identified by the spectral analysis.RESULTS Two compounds , tetratriacontanol
(Ⅰ)and Ursolic acid(Ⅱ)were obtained.CONCLUSION These two compounds were isolated from Prinsepia utilis Royle for the first time.
Key words:Ethnomedicine;Prinsepia utilis;Diminish inflammation;Chemical constituents;Ursolic acid
CLC number:R284.2 Document code:A Article ID:1006-0103(2006)02-0152-03
青刺尖为蔷薇科植物青刺 Prinsepia utilis Royle
的干燥茎叶 ,主要分布在云南省和四川省。青刺尖
始载于《滇南本草》 :“性微寒 ,味苦 。攻一切疮毒痈
疽” [ 1] ;主治痈疽毒疮 、风火牙痛 、枪伤 、骨折 、蛇咬
伤;根主治虚咳 、久咳 、积食 、风湿性关节炎;果主治
目翳多泪 、消化不良[ 2] 。西南地区的许多少数民族 ,
如彝族 、苗族 、傈僳族 、纳西族 、普米族以及居住于泸
沽湖畔的摩梭族均有使用青刺的历史和习惯。
除文献[ 3]报道的生药学研究外 ,对青刺尖的其
他研究报道较少 。为此 ,特对攀西药物青刺进行初
华西药学杂志
W C J · P S 2006 , 21(2):152~ 154
DOI :10.13375/j.cnki.wcjps.2006.02.015
步抗炎活性筛选 , 并对青刺尖乙醇提取物的乙酸乙
酯部位进行了化学分离研究。
1 实验部分
1.1 仪器与材料
XRC-1型显微熔点测定仪(四川大学科仪厂 ,
温度未校正);VG7070E 型质谱仪 、Bruker AVANCE
600 超导核磁共振仪(TMS 为内标);Sartorius BP121S
电子天平(北京赛多利斯科学仪器有限公司);薄层
用硅胶 G及柱色谱硅胶(200 ~ 300目 ,青岛海洋化
工厂)。青刺尖药材经成都中医药大学民族医药研
究所张艺研究员鉴定为 Prinsepia utilis。
1.2 青刺尖抗炎活性部位的筛选
1.2.1 样品的制备 取青刺尖干叶 10 kg ,加 95%
乙醇 ,温浸 1.5 h ,滤过 ,减压回收乙醇 ,得浸膏。浸
膏用热水分散后 ,分别用石油醚 、乙酸乙酯萃取 ,萃
取后回收溶剂 ,得到石油醚 、乙酸乙酯和水 3个溶剂
部位。由于青刺尖在民间采用水煎煮的方式使用 ,
因此 ,特对民间传统用药方式进行药理学验证 。取
青刺尖干叶直接用水提取 ,浓缩后得水提物。
1.2.2 抗炎部位的药效学筛选 采用二甲苯所致
小鼠耳肿胀炎症模型和蛋清所致的大鼠足肿胀模
型 ,每组 10只 。通过外用给药方式 ,分别以小鼠耳
廓肿胀度以及大鼠致炎后不同时间的足肿胀度为指
标 ,对青刺尖乙醇提取物的石油醚部位 、乙酸乙酯部
位 、水部位以及青刺尖水提物的体外抗炎效果进行
评价 ,筛选结果见表 1 、2。筛选结果显示:石油醚部
位大剂量组 、乙酸乙酯部位大 、小剂量组均能明显降
低二甲苯所致小鼠耳廓肿胀度(P <0.05);水部位
大 、小剂量组 、乙酸乙酯部位大剂量组(P <0.05)和
水提物大剂量组(P <0.01)均能够明显降低蛋清所
致大鼠足肿胀度 。由此可推断 ,抗炎成分可能存在
于不同的提取溶剂部位。其中 ,青刺尖水提物大剂
量组 、乙醇提取物的乙酸乙酯部位大剂量组为抗炎
的最佳有效部位 。为此 ,特对青刺尖乙醇提取物的
乙酸乙酯部位进行了研究。
表 1 青刺尖提取物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响(n=10)
Table 1 Effects of Prinsepia utilis extracts on auricular swelling caused
by dimethylbenzene in mice(n=10)
Groups
Dose/
g·kg -1
Ear swelling/
mg
Rate of inhibition/
%
Control - 10.79±3.24 -
Desamethasone 0.001 5.71±3.35** 47.43
Petroleum ether part 0.085 7.83±2.79* 27.43
0.043 9.71±3.14 10.01
Ethyl acetate part 0.034 7.93±3.82* 22.11
0.017 7.24±3.42* 32.90
Water part 0.680 8.78±3.95 18.63
0.340 8.42±2.41 21.96
Water extracts 0.136 8.54±3.41 20.85
0.068 10.14±1.95 6.02
Compared with cont rol group:*P<0.05 , **P<0.01
表 2 青刺尖提取物对蛋清所致大鼠足肿胀的影响(n=10)
Table 2 Effects of Prinsepia utilis extracts on foot swelling caused by egg albumin in rats(n=10)
Groups
Dose/
g·kg-1
Volume of normal
foot/ml
Foot swelling/ml
0.5 h 1 h 2 h 3 h 4 h
Control - 1.67 0.89±0.21 0.89±0.17 0.88±0.21 0.89±0.17 0.87±0.17
Desamethasone 0.001 1.67 0.43±0.29** 0.72±0.19** 0.62±0.32** 0.72±0.19** 0.44±0.21**
Petroleum ether part 0.085 1.96 0.85±0.37 0.85±0.34 0.88±0.33 0.84±0.34 0.87±0.13
0.043 2.07 0.89±0.26 0.84±0.28 0.89±0.13 0.93±0.28 0.88±0.28
Ethyl acetate part 0.034 1.87 0.66±0.39** 0.63±0.32** 0.65±0.38** 0.61±0.32** 0.58±0.24**
0.017 1.93 0.76±0.32* 0.72±0.45* 0.69±0.49* 0.69±0.44* 0.70±0.14*
Water part 0.680 1.60 0.77±0.31 0.78±0.33 0.69±0.28 0.78±0.33 0.77±0.11
0.340 1.36 0.82±0.36 0.84±0.31 0.79±0.23 0.81±0.31 0.84±0.20
Water extracts 0.136 1.38 0.51±0.39** 0.53±0.19** 0.49±0.23** 0.51±0.19** 0.51±0.15**
0.068 2.14 0.62±0.34** 0.66±0.40** 0.59±0.23** 0.55±0.41** 0.63±0.37**
Compared wi th control group:*P <0.05, **P<0.01
1.3 抗炎活性部位中化学成分的分离和精制
取乙酸乙酯部位浸膏 100 g ,用硅胶柱分离 ,以
石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱 ,每份 500 ml ,结合薄层
色谱法检测 ,合并相同流份 ,分成 L1 、L2……L10 ,共
10份。L4和 L5两个部分再经硅胶反复柱色谱 ,得
到化合物 Ⅰ 、Ⅱ 。
1.4 结构鉴定
1.4.1 化合物 Ⅰ 白色粉末(氯仿), mp 71℃~
72℃,能溶于氯仿 、石油醚。 1HNMR(600 Hz ,CDCl3)
δ:3.64(2H , t , J =6.7 Hz , -CH2-OH ,), 1.26 ~ 1.35
(64H ,m),0.88(3H , t , J =6.9 Hz)。1HNMR数据与
正三十四烷醇一致[ 4] 。EI -MS(m/z):492 , 477 ,
449 ,421 , 393 ,365 ,167。故鉴定为正三十四烷醇。
1.4.2 化合物 Ⅱ 白色粉末(甲醇),mp 277℃~
278℃,Liebermann-Burchard 反应为阳性 ,能溶于氯
仿 、甲醇 。 1HNMR(600 MHz , MeOD)δ:5.23(1H , s ,
H-12),3.44(1H ,m ,H-3),2.05(1H ,m ,H-18),1.02
(3H , s ,H -26), 0.97(6H , s , H -27 , H -29), 0.91
153第 2期 王毓杰 ,等。民族药青刺尖抗炎活性成分的初步研究
(3H , s ,H-30),0.84(3H , s ,H-24),0.78(3H , s ,H-
25), 3.15(1H , dd , H -3), 5.22(1H , s , H -12)。
13CNMR(600 MHz ,MeOD)δ:38.4(C-1), 26.5(C -
2),78.3(C -3), 38.6(C -4), 55.3(C -5), 18.1
(C-6),32.9(C-7),41.9(C-8), 48.2(C-9),38.6
(C-10),23.9(C -11), 125.5(C-12), 138.2(C -
13),41.9(C-14),27.4(C-15),23.9(C-16), 48.0
(C-17), 52.9(C-18), 39.0(C-19),39.4(C-20),
30.3(C-21),38.4(C-22),27.8(C-23),14.9(C-
24),14.6(C-25),16.2(C-26),22.9(C-27),180.2
(C-28),16.4(C-29),20.2(C-30)。1HNMR中烯
氢质子信号δ5.22 以及13CNMR中双键碳信号 δ
138.2(C-13)和 125.5(C-12),示为■12(13)乌索烷
型三萜 。化合物 Ⅱ的13CNMR数据与文献[ 5] 报道的
熊果酸的13CNMR数据一致 ,将化合物Ⅱ与对照品熊
果酸进行 TLC 检查 ,Rf值相同 ,故鉴定为熊果酸 。
2 讨论
从蔷薇科植物中分离得到的三萜类化合物主要
是乌索烷型和齐墩果烷型[ 6] ,均具有多种生物活性。
青刺属于蔷薇科扁核木属的植物 ,其叶在民间多用
来治疗咽喉肿痛 、疮疡 、骨折 、枪伤等疾病 。但其抗
炎药效物质基础尚不明确 ,在现有的文献中尚无青
刺尖药材的质量标准研究。因此 ,结合药效学探寻
青刺尖的抗炎活性成分 ,可为青刺尖的品质评价以
及进一步综合开发利用奠定基础 。
参考文献:
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收稿日期:2005-07
基金项目:四川省中医药管理局重点课题(课题编号:2003A12)
作者简介:徐世军(1975-),男 ,甘肃静宁 ,正攻读中药药理学专业的博士学位。
*通讯作者(Correspondent author),E-mai l:docxu@126.com
蚁附蠲痹颗粒对佐剂性关节炎大鼠 T细胞亚群的影响
徐世军1 ,彭玉华1* ,欧晓燃1 ,解宇环1 ,尹靖先2 ,王幸栓1
(1.成都中医药大学 ,四川 成都 610075;2.四川省药品检验所 ,四川 成都 610036)
摘要:目的 观察蚁附蠲痹颗粒对佐剂性关节炎大鼠外周 T细胞亚群的影响。方法 采用流式细胞仪检测佐剂性关节炎大
鼠外周血中 CD3 +、CD4+和 CD8+T细胞的变化。结果 佐剂性关节炎大鼠外周 CD3+和 CD4+T 细胞无明显变化 , 而 CD8 +T 细
胞显著减少 , CD4 +/CD8+的相对比显著升高 ,蚁附蠲痹颗粒对外周异常的 T细胞亚群有显著的调节作用。结论 蚁附蠲痹颗
粒对佐剂性关节炎大鼠外周血 T细胞亚群紊乱的调节作用 , 可能是其治疗类风湿性关节炎的主要机理之一。
关键词:蚁附蠲痹颗粒;佐剂性关节炎;T细胞亚群;类风湿关节炎
中图分类号:R965 文献标识码:A 文章编号:1006-0103(2006)02-0154-03
Effects of Yifu Juanbi granules on the T cell semi-group of adjuvant arthritis rats
XU Shi-jun1 ,PENG Yu-hua1* ,OU Xiao-ran1 ,XIE Yu-huan1 ,YIN Jing-xian2 ,WANG Xing-shuan1
(1.Chengdu University of TCM , Chengdu 610075 , China;2.Sichuan Provincial Institute for Drug Control , Chengdu 610036 , China)
Abstract:OBJECTIVE To study the effect of Yifu Juanbi granules on the T cell semi-group of adjuvant arthritis rat.METHODS The
CD3
+ , CD4+and CD8+T cell in peripheral blood of adjuvant arthritis rat were detected by flow cytometer .RESULTS The CD3+and CD4+
T cell in periphery of adjuvant arthritis rat were changed very little , while the ratio of CD4 +/CD8+increased evidently.Yifu Juanbi granules
could regulate the periphery abnormal T cell semi-group evidently.CONCLUSION Yifu Juanbi granules can regulate the turbulence of pe-
riphery abnormal T cell semi-group of adjuvant arthritis rats ,which may be one of its mechanism of treatment of rheumatoid arthritis.
Key words:Yifu Juanbi granule;Adjuvant arthritis;T cell semi-group;Rheumatoid arthritis
CLC number:R965 Document code:A Article ID:1006-0103(2006)02-0154-03
华西药学杂志
W C J · P S 2006 , 21(2):154~ 156