免费文献传递   相关文献

葱兰和韭莲鳞片离体培养研究



全 文 :五旅军绝妙云讯
J 目协印 . p加 , t Re S · C Om m叭 · 2 1 ( 2 )
: 4 2~ 4 6
,
19 92
葱兰和韭莲鳞片离体培养研究
陈扬春
(福建省农科院 , 福州 3 5 0 0 1 3 )
摘 要 本 文研究 了不同激素对葱兰 、 韭莲小鲜茎诱导效果的影响 , 并进
行 了讨论 。
关键词 葱兰 , 韭 莲 , 离体培养 , 小铸茎
葱兰 ( Z eP 人夕r a n `h e s c a n d`d a ) 和韭莲 ( 2 . g r a n d`f王o r a ) 属石蒜科葱兰属植 物 , 花
期很长 , 从 6 ~ 8 月开始至 n 月初 , 园林中常用它作花坛 、 花径栽植材料 , 也可 以把数
个鳞茎丛植于盆钵中 , 作盆花观赏 。
材 料 与 方 法
葱兰和韭莲的鳞茎直径为 2 . 5 ~ 3c m 。 试验时将鳞茎皮膜剥除 , 并切除鳞茎盘 处 的
根 , 用75 肠酒精擦洗后 , 放入 0 . 1肠升汞溶液内15 分钟 , 再用无菌水 漂 洗 3 一 4 次 。 剥
去最外一层鳞片 , 然后切成培养用的外植体 , 即每个外植体带有鳞茎盘 2 一 5 个鳞片 ,
高约 o . 7c m 。 外围的鳞片较宽 , 约 0 . c7 m ,鳞片数较少 , 约 2 一 3 片 ; 里面的鳞片 较窄 ,
约 0 . 3~ 0 . 5。 m , 鳞片数较多 , 约 4 ~ 5 片 。 同时 , 切取不带鳞茎盘能鳞片作为对照 。 将
切好的各种鳞片按极性插入 己制备好的培养基上 。
基本培养基为M S培养基 , 蔗糖浓度为 3 肠 , 分别添加各种不 同激 素 。 p H 值 调 至
6

o
, 在 1。 。 s k g / c m Z压力下灭菌 20 分钟 。 接种后将材料置于 25 士 2℃培养室 内 , 每 天光
照 9 小时 。
试 验 结 果
一 、 不同激素对葱兰小鳞茎的诱导作用
带有和不带有鳞茎盘的葱兰鳞片 , 在培养初期 , 其切面全部变为褐色 。 在 4 种培养
基上均观察到有部分带鳞茎盘跳鳞片张开 , 有的在张开的两鳞片底盘处长出小鳞茎 , 接
着长出叶片 (图 1 ) ; 有的却在未张开的外植体上伸出绿色叶片 , 尔后 , 在外植体基部
均长出粗根 ; 而未带鳞茎盘的鳞片则全未形成小鳞茎 。
表 l 不同激素讨葱兰小鲜茎的诱导作用
激 素 浓 度
( m g / l)
小 麟 茎 的 诱 导 情 况 根的诱导情况外植体数
(个 ) 每
个外植体产生 诱导频率
小缉 茎 平 均 数 ( % )
小麟茎径宽
( e m )
每个外植体
生根数 (条 )
诱导拼率
( % )
B A O

1 + N A A 1 5 1
.
5 0 1 0 0

0 0

3~ 0
.
4 多 1 0 0 。 0
B A o

i + N A A o
.
5 5 1
. 的 1 0 0 . 0 0 . 3 多 1 0 0 . 0
B A o
.
1 + I A A 1 1 2 1
.
3 5 2 0 0

0 0
.
2~ o

3 3 ~ 5 1 0 0
.
0
B A O
.
i + I B A 1 1 2 1

2 5 9 1
.
6 0

3~ 0
.
5 3 一 7 1 0 0 . 0
注 : 培养 3 0天后观察 。
从表 1 看出 , 在前三种培养基上 , 每个外植体均能产生 1 个以上的小鳞茎 , 诱导频
率达 1 0 帕 , 而在第四种培养基上 , 有个别外植体不产生小鳞茎 , 其诱 导频率为 9 1 . 6呱 。
但对根的诱发作用则不同 : 。 . l m g 1/ B A 与 1 m g l/ N A A 的组合 , 其根长得特别多 ; 当
N A A浓度降为 0 . s m g 1/ 时 , 根仍然那么多 ; 为 了避免生根太多而消耗培养基养分 , 改用
I A A或 r B A 代替 N A A时 , 生根数明显减少 , 仅产生数条根。
二 、 不同激素和不同组合对韭莲小鳍茎的诱导作用
带有和未带有鳞茎盘的韭莲鳞片在分离培 养时 , 其切面也全部变褐 。 7 ~ 10 天后 ,
未见有鳞片之间张开 , 而是先从其中伸出鳞 叶 , 接着小鳞茎长大 。 有的激素组合在鳞茎
盘底部也形成根。 不过未带有鳞茎盘的鳞片 (对照 ) 接种在各种培养基上时均未能形成
小鳞茎 。
表 2 韭莲鳞茎片外植体对不同激素组合的反应
小 鳞 茎 的 诱 导 情 况 根的诱导情况激 素 组 合
( m g / l )
外植体数
(个 )
每个外植体 诱导频率
产生小鳞茎平均数 (个 ) ( % )
小鳞茎径宽
( e m )
每个外植体 诱导频率
生根数 (条 ) ( % )
B A O

1
B A O

1
B A O

1
B A O

1
B A I

0
B A I

0
B A I

0
B A O
.
5
B A Z

0
N A A I

O
N A A O
.
5
I A A I

O
I B A I

0
N A A O

1
I A A O

l
I B A O

1
1

3 3 6 0

0
4

0
5

0
5 0

0
8 5

7
8 8

1 00
N A A O

2 2 0 10 0

0
0

3~ 0

5
0

l e o

4
0

Zwt o

4
0

l e o

6
0

2~ 0

3
0

Zor o

3
0

2~ 0

4
0

3
0

2~ 0

3
许多
0 ~ 1
0 or Z
1
0
11.8570.68
1 00

0
10 0

0
,
.丹n尸厂4U盯02Z 5c`22
5207761
注 : 培养 3 0天后观察 。
从表 2 看出 ,带有鳞茎盘的韭莲鳞片在离体培养时 ,诱导形成小鳞茎的诱导率很高 ,
一般都在 70 帕左右 , 尤其是每个外植体所诱导出的小鳞茎 , 平均数多 达 1 . 3 ~ 5 . 0个 ,
这是其他鳞茎类花卉 [ ’ 一魂1所无法比拟的。 但生根的情况却不同 : 在生长素浓度较高的组
合中 , 没有生根 (图 3 ) ; 而在细胞分裂素浓度较高的组合中, 却部分生根 , 只有N A A
的组合 , 生根频率较高 。 以上是培养一个月后的观察结果 。 但在两个月后再作观察时 ,
在 0 . l m g l/ B A + l m g / L I B A 的组合中 1 0 肠生根 , 且又粗又长 , 一 般 有 3 ~ 6 条。 将
那些未生根的刁磷茎逐个剥出 , 移入M S + 0 . 4 m g /卜I石A + 1 . 5肠蔗糖的培养基上 , 生根
率达 9 0帕 (图 4 ) 。
三 、 相 几同倍养基对葱兰和韭莲诱导效果的比较
葱兰和韭莲对同样培养基的反应是不同的 : 葱兰反应较快 , 培养第 3 天便可见到鳞
叶伸出鳞片外 ; 韭莲则较慢 ,第 7 天至第 10 天才见到鳞叶伸出。 两者的小鳞茎诱导频率 ,
葱兰 高于韭莲 , 而每个外植体所形成小鳞茎数却相反 , 以韭莲为高 。 小鳞茎的形成部位
也不一样 , 葱兰多从内部鳞片之间形成 , 韭莲却以外部鳞片之间形成较多 。 前者内部比
外部高1 . 2倍 , 后者外部比内部高 1 . 1倍。
葱兰外植体在各种培养基上生根率均达 1 0 肠 , 仅在根的数量上有所差别 ; 韭莲外植
体在初期几乎没有生根。 但培养两个月后 , 发现在附加 1 m g l/ I B A 的 组 合 里 , 1 0 呱
形成了根 。 由此可见 , 韭莲根的形成所需时间较长 。 韭莲对生长素的初期反应与葱兰一
样 , 均 以N A A 为好 , 但浓度要低得多 , 到了后期 , 却以 rB A为好。
四 、 试管苗的移植
葱兰外植体未经转移 , 已经形成具有根 、 鳞茎 、 叶的完整植株 。 当移植时 , 连同外
植体的鳞片一起 , 均可成活 (图 2 ) ; 韭莲则有两种情况 : 其一 , 连 同外植体的鳞片一
起移植 , 都能成活 , 甚至在受污染试管里的小苗 , 经洗净后移植 , 也能成活 ; 其二 , 有
部分未生根的小鳞茎植株 , 剥去外围鳞片 , 逐个移植于生根培养基上 , 在小鳞茎底下直
接长出根系 , 移植时更为方使 , 容易成活 (图 5 ) 。 盆钵中土壤可用一般菜园土拌火烧
土 。 移后 10 天内先置 阴凉处 , 成活后便可直接在露天栽培 。
讨 论
一 、 鳞片与鳞茎盘的关系
我们进行的葱兰 、 韭莲的离体鳞片培养 , 所有的鳞片都必须要有鳞茎盘参与 , 才能
形成小鳞茎 , 否则外植体不能产生小鳞茎 。 业 已证实 , 百合等的鳞片离体培养 , 无需鳞
茎盘参与 , 也能形成不定芽 I`协 而另一类如洋葱 1 4 3 、 水仙等与葱兰 、 韭莲类 似 , 要有
鳞茎盘参与 , 才能形成小鳞茎 , 不带鳞茎盘的 , 即使形成小鳞茎 , 也仅是个别而己 2[] 。
据观察 , 在洋葱两鳞片间带有鳞茎盘的表层具有大核细胞团 。 藤枝国光认为有腋芽原基
存在 汇` ] 。 李招文等从水仙双鳞片培养的石蜡切片上 , 也观察到类似结果 131 。 在小鳞 茎
形成的位置上 , 我们还观察到 , 葱兰内层鳞片的小鳞茎形成率比外层的高 1 . 2倍 , 而 韭
莲则相反 , 外层鳞片的小鳞片形成率比内层的高 1 . 1倍 。 在水仙成球的双鳞片比率 的 统
计中 , 外 、 中层鳞片远 比内层鳞片的高 3[] , 这与韭莲情况较相似 。 因此 , 我 们 认 为 ,
带有鳞茎盘的不 同部位鳞片之所以有不同的小鳞茎诱导率 , 可能是由于种性不同 , 其内

敏感性 。 它在 以生长素为主 , 配合低浓度细胞分裂素 , 或 以细胞分裂素为主 , 配合低浓
度生长素 , 或单独使用细胞分裂素的培养基中 , 都具有较高的小鳞茎诱导率 。而百 合 汇’ 】、
水仙 [ 2】却以不同浓度的单一生长素取得较好的效果 , 在洋葱的两鳞片培养 中 , 所 用 的
K T浓度高达 8 ~ 12 m : 1/ 。 这些情况 , 与葱兰 、 韭莲均不相同 。 由此可见 , 各种鳞茎类
植物对激素的反应各不相 同。
但对根的诱导方面 , 葱兰较为正常 ,也就是在 以生长素为主 , 细胞分裂素为辅的组合
中都能生根 ; 而韭莲却表现出反常情况 , 即在以生长素为主 , 细胞分裂素为辅的组合中
没有发现生根现象 , 却在 以细胞分裂素为主 , 生长素为辅的组合中生了根 , 甚至单独使
用细胞分裂素也能生根 。 其反常现象出现在初期 , 但到了后期 ( 2 个月后 ) , 以 1 m g 1/
BI A + 0
.
l m g l/, B A的组合 , 生根率却很高。 这种反常现象的机理及对生长素为 主要激
素反应较慢问题 , 都有待进一步探明。
参 考 文 献
〔 1 〕 孙安慈等 . 百合组织培养育苗 . 植物杂志 , 1 9 8 2 ( 4 ) : n
仁 2 〕 李招文等 . 水仙组织培养的研究 . 园艺学报 , 1 9 8 2 , 9 ( 4 ) : 65 ~ 68
〔 3 ] 李招文等 . 水仙双磷片繁殖的培养方法和条件研究 . 园艺学报 , 19 8 3 , 10 ( 1 ) : 5 1~ 56
〔 4 〕 藤枝 国光等 (赵庆华译 ) 。 洋葱的组织培养繁殖法。 国外作物组织培养 , 1 9 8。 ( ? ) : 17
~ 2 5
S u b t r o P
.
P l a n t R e s
.
C o m m u n

2 1 ( 2 ) : 4 2一 4 6 , 1 9 9
S C A L E C U L T U R E O F Z e Ph , r a n , h e s e a o d` e a A N 2 . g r a ” d sf l o r a IN V I T RO
C h e n Y a n g e h u n
( F u j i a n A e a d e m y
o f A g r i e u l t u r a l S e i e n e e s
,
F u z h o u 3 5 0 0 1 3 )
A b s t r a c t T h e e f f e e t s o f p l a n t g r o w t h s u b s t a n e e
, o n b u l b l e t i n d u e t i o n
i n Z e Ph忿r a n t h e s e a ” d i d a a n d 2 . g r a n d` f l o , a w e r e i n v e , t i g a t e d . T h e r e s u l t w a ,
a l: 0 d i s e u s s e d

Ke y w o r d s Z e Ph , r a n t h e s e a n d fd a
, 2
.
g r a n d`f l o , a , C u l t u r e ` n v i t阳 , B u l b l e t
·
4 6
.