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不同激素配比对草石蚕不定芽诱导及生根的影响



全 文 : [收稿日期]  2010-06-13;2010-10-11修回
 [基金项目]  科技部 、财政部“富民强县专项”行动计划项目“务川紫皮大蒜 、野生草石蚕标准化种植示范及产业化开发”(205);国家科技支
撑计划项目(2008BADB5B03)
 [作者简介]  陈丹萍(1977-),女 ,在读硕士 ,研究方向:蔬菜栽培生理与生物技术。 E-mai l:danping122@163.com
 *通讯作者:耿广东(1975-),男 ,博士 ,教授 ,硕士生导师 ,从事蔬菜栽培生理与生物技术研究。 E-m ail:gengguangdong@sohu.com
[ 文章编号] 1001-3601(2010)11-0728-0044-02
不同激素配比对草石蚕不定芽诱导及生根的影响
陈丹萍 , 耿广东* , 胡小京 , 罗建彪 , 涂永高
(贵州大学 农学院 , 贵州 贵阳 550025)
  [摘 要] 为获得草石蚕高效再生繁殖技术体系 ,采用组织培养技术 ,研究了不同激素配比对草石蚕外
植体不定芽的诱导及生长素对其生根效果的影响 。结果表明:不定芽的诱导以添加 6-BA 7.0mg/L +NAA
0.5mg/L 的 MS培养基效果较好 ,不定芽诱导率最高 ,茎尖达 39.2%,茎段达 33.3%,每个外植体可产生
5 ~ 6个芽 ,芽长平均为 0.93 cm;生根效果以 MS+NAA 0.6mg/L 较好 ,平均生根数达 15条 ,长度约 10 cm ,
根系粗壮且密集 。[关键词] 激素;草石蚕;不定芽诱导;生根[中图分类号] S644.5 [文献标识码] A
Effects of Different Hormone Combination on Adventit ious
Bud Induction and Rooting of Stachys sieboldii
CHEN Dan-ping , GENG Guang-dong * , HU Xiao-jing , LUO Jian-biao , T U Yong-gao
(College of Agriculture , Guizhou Universit y , Guiyang , Guizhou 550025 , China)
  Abstract:The stem tips and sections of Stachy s sieboldi i were cultured on M S w ith di fferent ho rmone
combinations to study ef fects on adventit ious bud induction and rooting fo r establishing the highly ef ficient
regeneration propagation system of Stachy s sieboldi i .The resul ts show ed that opt imum medium fo r
adventitious bud induction w as MS+7.0mg/L 6-BA+0.5mg/ L NAA , the induction rate of adventitio us
buds o f stem tips and stem sections w as up to 39.2%and 33.3% respect ively , each explant could produce
5 ~ 6 buds and the ave rage bud leng th reached 0.93cm.The optimum medium fo r root ing w as M S +
0.6mg/L NAA , the ave rage roo t number w as up to 15 and the average ro ot leng th reached about 10 cm.
Key words:hormone;Stachy s sieboldii ;advent itious bud induct ion;root ing
  草石蚕(Stachy s sieboldi i M iq.)又名甘露子 、
宝塔菜 ,为唇形科水苏属多年生宿根草本 ,生活环境
属亚热带山地气候 ,喜温暖湿润环境。根状茎富含
水苏糖 、淀粉 、蛋白质 、B族维生素 、低脂肪 ,为食用
高级蔬菜。由于其具有营养丰富 ,香脆可口 、易贮
藏 、耐运输等特点 ,近几年倍受外地客商欢迎 ,销量
也逐年增加 ,产品供不应求 ,部分地方农民群众已有
规模发展 。据商家透露 ,草石蚕在国内外沿海大城
市需求量较大[ 1] 。应抓住调整种植结构的时机 ,加
大生产具有出口有优势的产品 。但在传统的种苗生
产中 ,由于连年用茎段营养繁殖 ,出苗率低 、苗期长 ,
易造成田间缺苗及难以大规模对优良种系进行繁殖
或筛选等 ,且其体内宿存大量病菌 ,产量下降 ,种性
退化 ,阻碍其产业的发展。对此 ,笔者采用组织培养
技术 ,对草石蚕不定芽的诱导及生根效果进行了初步
探讨 ,以期获得高效再生繁殖技术体系 ,改善目前传
统的种苗生产 ,加速其种质改良和优良品种的推广 。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 草石蚕 草石蚕茎尖 、茎段组织为外植体 ,
贵州省务川县主栽品种 。
1.1.2 培养基 MS 培养基:蔗糖 30 g/ L 、琼脂
7g/ L ,pH 值 6.2。
1.2 方法
1.2.1 茎尖 、茎段组织选取与处理 当草石蚕健
壮植株高达 10 ~ 20 cm 时 ,剪取幼嫩带腋芽的茎尖 、
茎段组织 ,长度均为 0.5 ~ 1.0cm ,自来水冲洗 2 ~
5min后 ,用体积分数 0.1%的升汞消毒 6 ~ 8min ,
无菌水冲洗 3 ~ 4次 ,分别接种于不定芽诱导增殖培
养基和生根培养基中培养。
1.2.2 试验设计
1)不定芽诱导培养。以 MS 为基本培养基 ,附
加不同浓度的 6-BA 和 NAA , 其中 , 6-BA 浓度为
1.0mg/ L 、3.0mg/L 、5.0mg/L 和 7.0mg/L , NAA
浓度为 0.5mg/L 、1.0mg/L 、2.0mg/ L 和 3.0mg/
L ,共 16个处理。每个处理 5瓶 ,每瓶接种2个外植
体 。培养条件为温度 25 ~ 28℃,光照 16 h/d ,光照
强度 2500 ~ 3 000 lx 。逐日观察 30d 统计不定芽诱
导率 ,只统计芽长≥0.5 cm 的不定芽 ,确定 6-BA 和
NAA 的最佳配比。
不定芽诱导率/ %=(产生不定芽外植体数/接
 贵州农业科学 2010 , 38(11):44~ 45 Guizhou Ag ricultural Science s
种外植体数)×100[ 2] 。
2)生根培养。MS+NAA 为培养基[ 3] ,其中 ,
NAA为 0.2mg/ L 、0.4mg/ L 、0.6mg/ L 、0.8mg/ L
和 1.0mg/L 5 种不同的浓度 ,以不添加 NAA 的
MS 培养基作为空白对照(CK),6个处理 ,每个处理
10瓶 , 每瓶接种 2 个外植体 ,培养条件相同。经
30 d培养后 , 分别统计生根数 , 经观察对比确定
NAA的最佳浓度 。
2 结果与分析
2.1 不同激素配比对草石蚕外植体不定芽芽团诱
导的影响
将草石蚕茎尖 、茎段接种在附加不同浓度的 6-
BA和 NAA培养基上 ,结果(表 1)表明:茎尖 、茎段组
织均能诱导不定芽 ,每个处理均有不定芽产生。从不
定芽形成的数量看 ,茎尖相对茎段具有更高的诱导
率。从不定芽增殖的情况看 ,通过茎段组织形成的不
定芽数量较多。其中 ,以添加 6-BA 7.0mg/L+AA
0.5mg/L 组合的培养基最好 ,不定芽诱导率最高 ,茎
尖达 39.2%,茎段达 33.3%,每个外植体可产生 5 ~ 6
个芽 ,芽长平均为 0.93 cm ,易于切割转接 。因此 ,可
以认为 MS+6-BA 7.0mg/L +NAA 0.5mg/L 最适
于草石蚕不定芽的诱导 ,经 40d即可长成 2 ~ 3 cm大
小的小植株 ,成苗率达72.5%。
2.2 不同浓度 NAA对草石蚕生根的影响
将草石蚕 1 ~ 2cm 长的小植株切下 ,转接到附
加 NAA 的培养基上 ,结果(表 2)表明:草石蚕较易
生根 ,即使在不添加 NAA 的 MS 培养基(CK)中也
能促进其根系发育 ,1 周左右即有根长出;30d 后在
添加 NAA的 MS 培养基上有多条根形成 ,不管是
茎尖还是茎段 ,均以附加浓度为 0.6mg/ L NAA 的
MS培养基对其根生长最好 , 平均生根数达到 15
条 ,长度约为 10 cm ,根系粗壮且密集。当 NAA 浓
度达到 0.8mg/ L 以上时 ,根数则逐渐减少 ,根长则
逐渐降低。表明 ,高浓度的 NAA 对草石蚕的生根
有抑制作用 。
表 1 不同激素配比对草石蚕外植体不定芽芽团形成的诱导
Table 1 Effect of diffe rent ho rmone combination on adventitio us bud induction of S tachy s sieboldii explants
激素浓度/(mg/ L)
Hormone
concentration
6-BA NAA
外植体接种数/个
No.o f inoculated
explants
平均每个外植体不定芽数/个
Mean number of adventitio us
buds per explant
茎尖 茎段
不定芽芽团形成率/ %
Formation r ate of
adventitious buds
茎尖 茎段
不定芽长度/cm
Leng th o f
Adventitious buds
茎尖 茎段
1.0 0.5 2 1 2 0 0 0.47 0.53
3.0 0.5 2 1 2 2.3 2.1 0.58 0.63
5.0 0.5 2 2 4 25.3 21.6 0.70 0.72
7.0 0.5 2 5 6 39.2 33.3 0.91 0.95
1.0 1.0 2 1 2 0 0 0.56 0.62
3.0 1.0 2 2 3 1.4 1.1 0.72 0.74
5.0 1.0 2 2 3 24.5 23.2 0.73 0.78
7.0 1.0 2 3 4 31.4 30.7 0.76 0.84
1.0 2.0 2 1 2 0 0 0.60 0.63
3.0 2.0 2 2 3 2.3 1.9 0.69 0.73
5.0 2.0 2 2 4 22.5 21.3 0.78 0.80
7.0 2.0 2 3 3 28.6 27.7 0.74 0.83
1.0 3.0 2 1 2 0 0 0.45 0.50
3.0 3.0 2 2 2 1.7 0 0.52 0.57
5.0 3.0 2 2 3 20.6 19.8 0.61 0.66
7.0 3.0 2 2 3 30.2 27.5 0.64 0.69
表 2 不同浓度 NAA 对草石蚕生根的诱导
Table 2 Effect of different NAA concentration on roo ting o f of S tachys sieboldii adventitious buds
激素浓度/(mg/ L)
H ormone concentration
NAA
外植体接种数/个
No.of ino culated
explants
生根数/条
Root number per adventitious bud
茎段 茎尖
根长/ cm
Roo t length
茎段 茎尖
0.2 2 11 14 6.70 6.20
0.4 2 9 12 7.60 8.10
0.6 2 14 17 9.80 10.30
0.8 2 8 9 1.03 1.05
1.0 2 5 6 0.73 1.00
0(CK) 2 10 7 6.50 5.80
3 小结与讨论
在植物组织培养过程中 , 6-BA 能促进茎尖 、茎
段较早转绿生长 ,显著提高成苗率 ,而且对茎尖形成
不定芽团的诱导有明显的促进作用 , NAA 对植株
主茎的伸长有明显作用 ,与 6-BA 配合 ,增加了正常
苗的比率 ,提高了成苗率。草石蚕茎尖 、茎段组织不
定芽的诱导在 6-BA 7.0mg/ L 和 NAA 0.5mg/L 组
合处理中 ,诱导率较高 ,每个外植体平均可获得6 ~ 5
个。可以看出 ,生根数 、根长 、根系粗度及密度随着生
长素NAA的浓度的适量增加而有所提高 , 但
(下转第 49 页)
·45· 第 11 期 陈丹萍 等 不同激素配比对草石蚕不定芽诱导及生根的影响
表 5 贵州不同类型旱稻的分布
Table 5 Distribution of differ ent upland rice types in Guizhou
第 I类
来源地 数量
第 II类
来源地 数量
第 III类
来源地 数量
兴义 1 兴仁 1 兴仁 1
望谟 5 锦屏 1 册亨 19
册亨 3 修文 4 紫云 2
遵义 1 贞丰 3 望谟 9
罗甸 1 盘县 2 罗甸 2
凯里 1 罗甸 8 晴隆 1
平坝 3 荔波 1 德江 2
睛隆 1 册亨 5 平塘 1
修文 4 平坝 1 盘县 1
德江 2 丹寨 1 丹寨 1惠水 1 睛隆 1 安龙 2
黄平 1 望谟 1 荔波 1- - - - 从江 3
合计 24 合计 29 合计 45
3 小结与讨论
1)通过对贵州境内 8个地区(市)的 98份旱稻
种质资源的 12个农艺性状进行相关分析和通径分
析 ,表明 ,有效穗数(r=0.5835**)、每穗粒数(r=
0.4194**)、每穗实粒数(r =0.5538**)、结实率
(r=0.3669**)与产量呈极显著正相关 ,其中有效
穗数和每穗实粒数与产量的相关系数最大 ,且它们
对产量的直接作用和间接作用都较大。旱稻的有效
穗数多 、穗粒数多 、结实率高和实粒数多 ,这些都是
旱稻高产育种的重要选择性状[ 1] 。结合本试验结
果 ,建议高产旱稻育种性状选择原则为有效穗数多 、
穗粒数多 、结实率高和剑叶较长的品种或单株 。
2)通过聚类分析将 98份贵州旱稻资源聚为 3
大类 。第 Ⅰ类是矮秆 、小穗多穗型 ,以册亨 、修文 、望
谟和平坝地区的旱稻为主;第 Ⅱ类是大穗粒重型 ,以
罗甸 、册亨 、修文和贞丰地区的旱稻为主;第 Ⅲ类是
晚熟 、高秆 、大穗多粒型 ,以册享 、望谟和从江地区的
旱稻为主 。其中册亨 、修文 、望谟的旱稻资源遗传差
异大 ,多样性丰富。
3)贵州绝大多数贫困地区干旱少雨 ,长期以来
粮食结构单一。旱稻的推广种植将改善干旱贫困地
区农民的生活 ,并在一定程度上增加农民的收入 。
可利旱稻作优良种质来选育耐旱水稻品种 ,提高水
分利用率 ,节约水资源。贵州旱稻资源虽然比较丰
富 ,但种植面积小 ,仅在少数地区有零星种植[ 5-11] ,
这主要是由于栽培种多属较原始的品种 ,农艺性状
和产量性状差 ,单产低 。为改良旱稻地方品种的性
状 ,可以引进国外优良的陆稻资源进行品种改良选
育 ,包括将国内外旱稻资源的矮源 、抗源 、丰产源基
因导入当地适应性强的品种中[ 12] ,创造和选育多种
优异种质和品种 ,为贵州旱稻育种和推广应用提供
优良种质基础 ,促进粮食生产持续稳定增长和农民
增收。
[ 参 考 文 献]
[ 1] 王 萍 , 黄 洁 ,李开绵 , 等.旱稻主要农艺性状与产
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(责任编辑:姜 萍)
(上接第 45 页)
NAA浓度过高(1.0mg/ L)时又明显抑制根的生
长 ,根的长度仅 0.73 ~ 1 cm ,且密度下降。0.6mg/
L NAA 的 MS 培养基对草石蚕外植体促根生长作
用最佳 ,较对照差异显著 ,且明显优于其余 5个处理
(0mg/L NAA 、0.2mg/ L NAA 、0.4mg/ L NAA 和
0.8mg/L NAA)。
[ 参 考 文 献]
[ 1 ] 王本辉.草石蚕的发展前景及栽培技术[ J] .甘肃农村
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(责任编辑:杨 林)
·49· 第 10 期 陈能刚 等 贵州旱稻主要农艺性状的相关通径及聚类分析