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蓝靛果组培快繁技术研究



全 文 :湖 北 农 业 科 学 2013 年
收稿日期:2012-04-17
基金项目:国家林业局 948 支撑项目(2008-4-15);国家大学生创新项目(101020122)
作者简介:杨振国(1961-),男,吉林吉林人,副教授,从事园林植物遗传育种工作,(电话)18604498187(电子信箱)675228561@qq.com。
第 52卷第 3期
2013年 2月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol. 52 No.3
Feb.,2013
蓝靛果(Lonicera caerulea L. var. edulis Jurcz et
Herd)为忍冬科忍冬属多年生落叶小灌木,其果实
为蓝黑色,椭圆形或长圆形 [1,2],是珍贵的野生浆果,
有“果中之王”的美称,营养价值极高[3-6]。 蓝靛果果
实可生食,也可以加工成果酱、果干、蜜饯等。 其果
肉多汁,出汁率高,耐腐坏,是酿造果酒饮料的好原
料。 此外蓝靛果果汁色深,呈艳丽的深红色,是难得
的天然色素品,可以用来调配其他果酒和饮料以提
高其品质 [7-10]。 该果实还可入药,具有清热解毒、败
火、化湿热、软化血管、降低血压、补血等功能,能强
身健骨、消除疲劳、祛风邪、增加食欲,长期食用对
预防小儿厌食症、肝腹水、糖尿病、癌症、贫血症和
不眠症有良好功效[10,11]。 蓝靛果植株自然状态下主
要通过种子繁殖,本研究以蓝靛果带芽茎段为外植
体,采用组织培养的方式对其进行快速繁殖,以期
为蓝靛果的深入开发利用奠定基础。
1 材料和方法
1.1 材料
蓝靛果材料于 2010 年 7 月取自吉林省松江河
林业局,采集当年生健壮无病虫害幼嫩蓝靛果枝条
用于实验。
1.2 方法
1.2.1 材料消毒 将采集的蓝靛果枝条浸入清水
中浸泡,同时用软刷轻轻除去附着在枝条表面的尘
土,然后用流水冲洗数次。 清洗过的枝条首先用体
积分数 75%的乙醇消毒 30 s, 然后用 1 g / L 氯化汞
溶液(加入 3~5 滴吐温 80)消毒 8 min,最后用无菌
水彻底漂洗 5次,洗净残留的升汞。
1.2.2 蓝靛果的组织培养 在无菌室超净工作台
上按照无菌操作的要求将消毒后的蓝靛果枝条切
割成长 1~2 cm 的带芽茎段接种在培养基上,每瓶接
蓝靛果组培快繁技术研究
杨振国,张启昌,孙广仁
(北华大学林学院,吉林 吉林 132013)
摘要:以蓝靛果(Lonicera caerulea L. var. edulis Jurcz et Herd)带芽茎段为外植体进行组培快繁,考察
了激素种类和浓度对外植体增殖及不定芽生根的影响。结果表明,适合外植体增殖的培养基为 MS+2.0 mg / L
6-BA+0.2 mg / L IBA,增殖系数达 3.3,适合不定芽生根的培养基为 1 / 2MS+0.5 mg / L NAA+0.5 mg / L IBA,
生根率达 72%。
关键词:蓝靛果(Lonicera caerulea var. edulis);组织培养;激素
中图分类号:S339.4+1 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2013)03-0706-02
Study on Rapid Propagation Techniques of Tissue Culture of
Lonicera caerulea var. edulis
YANG Zhen-guo,ZHANG Qi-chang,SUN Guang-ren
(Forestry College, Beihua University, Jilin 132013, Jilin, China)
Abstract: Tissue rapid propagation of Lonicera caerulea L. var. edulis Jurcz et Herd was conducted using the stem segments
with buds as explants. The effects of sorts and concentration of hormone on explants proliferation and rooting of adventitious
buds were investigated. The results showed that the optimum culture medium for explants proliferation was MS+2.0 mg / L 6-
BA+0.2 mg / L IBA with proliferation coefficient of 3.3; suitable culture medium for rooting of adventitious buds was 1 / 2MS+
0.5 mg / L NAA+0.5 mg / L IBA with rooting ratio of 72%.
Key words: Lonicera caerulea L. var. edulis; tissue culture; hormone
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2013.03.062
第 3 期
种 1 个外植体。 启动和增殖培养以 MS 为基本培养
基, 同时附加不同浓度的细胞分裂素(0.5、1.0、2.0、
5.0 mg / L 6-BA)和生长素(0.2 mg / L NAA 或 0.2 mg / L
IBA),pH 5.0,具体培养基配方见表 1。 观察和记录
各处理不定芽的萌发和增殖情况。增殖培养 60 d后
选取壮苗进行生根培养, 生根培养基为 1 / 2MS+0.5
mg / L NAA+0.5 mg / L IBA 和 1 / 2MS+1.0 mg / L IBA。
启动和增殖培养、 生根培养条件均为培养温度 22~
25 ℃、光照时间 12 h / d,光照度 2 000~3 000 lx。
2 结果与分析
2.1 生长素种类和细胞分裂素浓度对蓝靛果不定
芽增殖的影响
植物细胞中内源激素和外源激素共同对细胞
的分化生长起着控制作用,且每种植物细胞中的内
源激素含量不同,导致不同材料适宜的外源激素也
不同。 蓝靛果外植体接种到启动和增殖培养基上培
养,10 d 后少数茎段腋芽开始萌动生长, 极少数有
不定芽增殖,30 d 时不定芽数目明显增加。 不同生
长素对蓝靛果不定芽增殖的作用不同。 在其他条件
均相同的条件下, 添加 NAA 的 1~4 号培养基中不
定芽萌发率为 32%~40%,增殖系数为 1.7~2.5。添加
IBA的 5~8号培养基中不定芽萌发率为 38%~42%,
增殖系数为 2.2~3.5(表 2)。 可见在蓝靛果不定芽的
萌发和增殖过程中,IBA 对不定芽增殖的促进效果
要好于 NAA。
培养基中添加的 6-BA 浓度也对不定芽的萌发
和增殖有一定的影响。 添加 NAA 或 IBA 生长素的
处理中, 不定芽的增殖系数均随 6-BA 浓度的升高
呈先增大后减小的趋势,6-BA 浓度为 2.0 mg / L 时
不定芽增殖系数最大。 可见,6-BA浓度过高或过低
均不利于不定芽的萌发和增殖。 8 种培养基中 MS+
2.0 mg / L 6-BA+0.2 mg / L IBA 的增殖系数最高,达
3.3,适合不定芽的增殖培养。
2.2 不同生长素浓度组合对蓝靛果不定芽生根的
影响
增殖培养 60 d 后选取壮苗进行生根培养,分别
采用 1 / 2MS+0.5 mg / L NAA+0.5 mg / L IBA 和 1 / 2
MS+1.0 mg / L IBA 作为生根培养基,30 d 后多数试
管苗长出不定根,1 / 2MS+0.5 mg / L NAA+0.5 mg / L
IBA 的生根率达 72%,远高于 1 / 2MS+1.0 mg / L IBA
培养基(58%),可见在实验条件下 NAA 和 IBA 配合
使用的生根效果好于单独使用 IBA。
3 小结与讨论
用蓝靛果带芽茎段作为外植体,接种在适宜的
增殖培养基上进行快速繁殖, 其消毒方法简单方
便,可减少母株本身的剪枝量,而且能保持种质资
源的永续利用, 这对于规模化生产繁殖十分有利。
在蓝靛果的组培快繁中,不定芽增殖以 MS+2.0 mg / L
6-BA+0.2 mg / L IBA 最为适宜, 增殖系数达到 3.3,
而诱导生根时 , 最适培养基为 1 / 2 MS+0.5 mg / L
NAA+0.5 mg / L IBA,生根率达 72%。
参考文献:
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(责任编辑 向 闱)
表 1 启动及增殖培养基
编号
1
2
3
4
5
6
7
8
培养基
MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA
MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA
MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA
MS+5.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA
MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA
MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA
MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA
MS+5.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA
表 2 不同培养基中蓝靛果不定芽的萌发和增殖情况
培养基
1
2
3
4
5
6
7
8
接种数
50
50
50
50
50
50
50
50
污染率
%
20
16
24
12
10
12
16
22
死亡率
%
4
0
2
6
0
0
4
2
不定芽萌发率
%
32
38
36
40
39
42
40
38
增殖
芽数
55
71
92
65
87
105
133
88
增殖
系数
1.7
1.9
2.5
1.6
2.2
2.5
3.3
2.3
杨振国等:蓝靛果组培快繁技术研究 707