全 文 :南方山荷叶野生资源匮乏 。据 《湖北中药资源
名录》记载 ,神农架林区有分布。但截止目前 ,与神
农架林区毗邻的房县尚未采到中草药标本 。竹溪的
泉溪 、丰溪 、桃源 、双桥仅有少量分布 〔6〕。八角莲与
六角莲虽已被列为国家 Ⅲ类保护品种 ,但野生资源
仍急骤减少 ,资源保护工作亟待加强 。
参 考 文 献
[ 1] 郑宏钧 ,詹亚华 .现代中药材鉴别手册 .北京:中国医
药科技出版社 , 2001:191.
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(2007-10-22收稿)
小构叶的生药学研究
王红霞 ,陈随清
(河南中医学院药学院 ,河南郑州 450008)
摘要 目的:通过对小构叶的生药学研究 , 为小构叶的开发利用 、质量标准的制定及生药学方面的研究提供依
据。方法:依据形态学特征对小构叶进行原植物形态 、性状特征 、显微特征鉴别 , 运用薄层色谱 、紫外光谱法对小构
叶进行理化特征鉴定。结果:构属植物小构叶的药材性状 、显微特征 、理化特征(薄层色谱 、紫外吸收光谱)与同属
植物构叶鉴别特点有明显不同。结论:对小构叶的开发利用 、质量标准的制定及生药学方面的研究具有重要意义。
关键词 小构叶;显微鉴别;生药学研究
中图分类号:R282.5 文献标志码:A 文章编号:1001-4454(2008)03-0361-04
基金项目:国家中医药管理局 2004中医科技研究专项(04-05ZP43)作者简介:王红霞(1955-),女,河南濮阳人 ,副教授 ,主要从事中药品种整理与质量标准研究;Tel:0371-66364376, E-mail:wanghongxia5510@yahoo.com.cn。
小构叶原植物 BroussonetiaKazindkiSieb.et
Zucc.隶属于桑科 Moraceae桑亚科 Moroideae构树
属 BrousonetiaLHert.exVent.的构树组 。该组包
括 3种即构树 、小构树 、藤构 〔1〕。这 3种在我国分布
较为广泛 ,主要分布于黄河流域以南地区 。尤其以
构树 、小构树分布最为广泛 。近年来 ,随着对构树属
研究开发和临床应用的进一步加强 ,构树属各种植
物具有广泛的经济价值及药用价值 ,越来越受到重
视 。树皮是优质造纸及纺织原料 ,树皮浆汁与果可
药用 ,构树叶蛋白质含量丰富可高达 24.0%,且安
全无毒 ,属优质蛋白质饲料 ,亦可作为保健品添加
剂 〔2〕。小构树的茎皮为优质造纸及人造棉原料 ,
根 、叶入药 ,清凉解毒 ,可治跌打损伤等。现国内外
对构树属的研究主要集中在对构树的果实 、树皮 、根
皮等部位的化学研究 ,对叶 、尤其是对小构树叶的研
究较少 ,尚未见到有关小构树叶生药学方面的系统
研究。本文就小构树叶的植物形态 、性状特征 、显微
特征 、理化鉴别(薄层色谱 、紫外吸收光谱)等生药
学内容进行了系统研究 ,旨在为小构叶质量标准的
制定及进一步开发应用提供科学依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器与试药 XS-200生物显微镜 ,南京江南
光电股份有限公司;BS110S型电子天平 ,北京赛多
利斯天平公司;SHZ-95B型循环式多用真空泵 ,河南
巩义市英峪予华仪器厂;RE-52A型旋转蒸发器 ,上
海亚荣生化仪器厂;WD-9403C型紫外分析仪 ,北京
市六一仪器厂;FW-80高速微型粉碎机 ,河北省黄骅
市中兴仪器有限公司;UV-2201型紫外分光光度计 ,
日本 SHMADZU公司;DGB/20-002A台式干燥箱 ,
重庆试验设备厂;KQ-100型超声波提取器 ,昆山市
超声仪器有限公司 。HG-2354-95硅胶 G(化学纯),
青岛海洋化工有限公司;羧甲基纤维素钠 (化学
纯),天津市凯通化学试剂有限公司;甲醇 、乙酸乙
酯 、乙醚 、石油醚 、乙醇 、丙酮 ,甘油等 (以上均为分
析纯),天津市化学试剂三厂;水合氯醛 (分析纯),
上海三浦化工有限公司 。芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖
·361·中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 3期 2008年 3月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2008.03.022
醛酸苷对照品 , 由本实验室从构叶中提取 ,经 1H-
NMR、13C-NMR鉴定结构 , HPLC面积归一化法测定
含量 ,纯度 98.3%。
1.2 样品及来源 小构叶样品(采自河南桐柏)、
构叶样品(采自河南邓州),经河南中医学院生药教
研室陈随清老师鉴定分别为桑科植物小枸树 Brous-
sonetiaKazindkiSieb.etZucc.的干燥叶及桑科植物
构树 Broussonetiapapyrifera(L.)Vent.的干燥叶 。
2 实验方法与结果
2.1 植物形态 为落叶灌木 ,枝条细长 ,蔓生或攀
援 ,有乳汁。单叶互生 、对生或轮生 ,叶卵状椭圆或
卵状披针形 ,长 6 ~ 12cm,宽 3 ~ 5cm,长尖 ,基部偏
斜 ,稍不对称 ,圆形或稍心脏形 ,边缘有锯齿 ,表面粗
糙 ,上面暗绿色 ,有糙伏毛 ,下面黄绿色 ,有细毛 ,叶
片不分裂或 2 ~ 3裂;叶柄长 7 ~ 12 mm,具柔毛 。托
叶膜质 ,早落 。花先叶开放 ,花单性 ,雌雄同株;雄花
为筒状下垂的葇荑花序 ,淡紫色 ,花被 4,雄蕊 4;雌
花序头状 ,橙红色 ,径约 5 ~ 6 mm;苞片长脚碟状;花
柱侧生 ,丝状 ,有刺。聚花果肉质 ,球形 ,径约 5 ~ 6
mm,成熟时红色。花期 4 ~ 5月 ,果期 5 ~ 6月 。见
图 1。
图 1 小构叶植物图
2.2 性状鉴别 药材多皱缩 ,有时破碎 。单叶互
生 ,有时对生或三叶轮生 ,叶片多向内卷曲 ,完整叶
片展平后 ,呈卵状椭圆或卵状披针形 ,长 6 ~ 12cm,
宽 2 ~ 6 cm,叶从全缘 、一对浅裂到不对称浅裂 。边
缘具浅三角形锯齿 ,上面有糙毛 ,下有细毛 。叶基浅
心形 、心形或近心形 ,两侧不对称。先端渐尖至尾
尖。三出脉明显 、背面特突出 。叶上面深绿色 ,下面
浅绿色 ,均密被细小柔毛。叶柄长 7 ~ 12 mm,具短
柔毛;托叶膜质 ,早落。叶草质 、薄 ,质脆 ,向内弯曲。
气微香 ,味甘 、微苦 、微具刺舌及凉感。
2.3 显微鉴别
2.3.1 叶横切面:(1)上下表皮均为 1列细胞 ,均
被单细胞非腺毛与腺毛 。上表皮细胞多角形或类圆
形 ,外被较厚角质层 ,气孔排列稀疏;下表皮细胞较
小 ,细胞垂周壁波状弯曲 ,有多数单细胞非腺毛 ,气
孔排列紧密。腺毛头部由 4 ~ 6 ~ 8个分泌细胞组
成 ,内含红棕色分泌物。 (2)栅栏组织为 1至 2列
细胞 ,近圆柱形 ,海绵组织数列 ,排列疏松 。 (3)主
脉维管束为外韧型 ,呈凹槽状 ,近表皮处有厚壁细胞
排列成环状。 (4)主脉及叶肉薄壁细胞中散有草酸
钙簇晶 ,亦可见小方晶散在。见图 2。
图 2 小构叶横切面组织特征(×140)
1.上表皮 2.栅栏组织 3.海绵组织 4.非腺毛 5.草
酸钙簇晶 6.韧皮部 7.木质部 8.下表皮 9.厚壁细
胞 10.腺毛
2.3.2 叶柄横切面:(1)表皮细胞 1列 ,多角形或
类圆形 ,表皮密布单细胞非腺毛 ,大小悬殊 ,亦可见
腺毛 。(2)皮层较宽 ,近表皮处有 8 ~ 12列类圆形
或类多角形厚壁细胞排列成环状 。 (3)中柱内有 4
~ 6个外韧型维管束环列 ,维管束间偶见有乳汁管
散在 。(4)形成层外有大量草酸钙簇晶散在。 (5)
韧皮部束半圆形。 (6)木质部导管 1 ~ 5个径向排
列。 (7)髓部发达 ,细胞较大。 (8)薄壁细胞中有较
多草酸钙簇晶散在 ,亦有小方晶散在。见图 3。
2.3.3 粉末:呈绿色或草绿色。 (1)无节乳汁管
呈细长条形 ,充满黄棕色物质 ,有大小不等的圆形黄
色颗粒状物。 (2)草酸钙簇晶以叶脉处最多 ,常 1 ~
4行纵向排列 ,直径 5 ~ 26μm,棱角较钝;草酸钙方
晶较小 , 直径 8 ~ 16μm。(3)腺毛头部由 4 ~ 8
·362· 中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 3期 2008年 3月
图 3 小构叶叶柄横切面组织特征(×75)
1.腺毛 2.非腺毛 3.表皮 4.皮层 5.厚壁细胞
6.韧皮部 7.形成层 8.木质部 9.草酸钙簇晶 10.髓
图 4 小构叶粉末特征(×400)
1.下表皮 2.上表皮 3.非腺毛 4.钟乳体 5.钟乳体
底面观 6.细小非腺毛 7.无节乳汁管 8.草酸钙簇晶
9.方晶 10.腺毛 11.导管
个分泌细胞组成 ,直径 20 ~ 32μm,内含红棕色分泌
物;柄部由 1 ~ 3个细胞组成 ,直径 8 ~ 18 μm。 (4)
非腺毛为单细胞 ,有两种:一种细长呈长圆锥形 ,细
尖 ,平直或先端呈钩状 ,基部直径 5 ~ 37μm;另一种
粗短 ,长 61 ~ 85μm,基部特别膨大 ,突起 ,直径 40 ~
53 μm,壁光滑。 (5)钟乳体存在于粗短非腺毛的基
部 ,长 40 ~ 52μm,宽 35 ~ 45μm,椭圆形 ,可见极细
层纹 。基部横切面观呈类圆形 ,直径 40 ~ 58 μm,周
围薄壁细胞呈放射状排列 ,底面观似莲花状 ,侧面观
类长圆形似螺状 ,有同心细层纹 。 (6)表皮细胞具
有角质纹理 ,上表皮细胞多角形 ,气孔为不定式或平
轴式 ,副卫细胞 4 ~ 6个 ,排列稀疏;下表皮细胞较
小 ,不规则圆柱形 ,细胞垂周壁波状弯曲 ,气孔为不
定式 ,副卫细胞 4 ~ 6个 ,排列紧密 。 (7)导管为梯
纹 、网纹及螺纹 ,直径 13 ~ 40μm,木化。见图 4。
2.4 薄层色谱鉴别
2.4.1 供试品溶液的制备:取小构叶和构叶粗粉
各 2 g,分别加 70%甲醇回流提取 90 min,滤过 ,滤
液蒸干 ,残渣用甲醇溶解 ,并定容至 10ml,作为供试
品溶液。
2.4.2 对照品溶液的制备:取芹菜素 -7-O-β -D-葡
萄糖醛酸苷 ,加 70%甲醇溶解并定容成 1 mg/ml的
溶液 ,作为对照品溶液。
2.4.3 薄层色谱鉴别试验结果:照薄层色谱法(中
国药典 2005版一部附录 VIB)试验 ,分别吸取上述 2
种溶液各 5μl,点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合
剂的硅胶 G薄层板上 ,以醋酸乙酯:乙醇:水(2.7∶1
∶1)为展开剂展开 ,取出 ,晾干。喷以 2%三氯化铝
乙醇溶液显色 ,置紫外光灯(365 nm)下检视。供试
品色谱中 ,与对照品在相同位置显示相同颜色荧光
斑点 。见图 5。
图 5 小构叶 70%甲醇部位:365nm荧光
A.芹菜素 -7-O-β-D葡萄糖醛酸苷 B.小构叶 C.构叶
2.5 紫外 -可见光谱鉴别
2.5.1 供试品溶液的制备:称取构叶和小构叶粗
粉各 3份 ,每份 2 g,分别加乙醚 、乙酸乙酯 100 ml,
回流提取 1 h;加 70%甲醇 150 ml, 回流提取 90
min,过滤 ,滤液浓缩至 10 ml,作为供试品溶液 。
·363·中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 3期 2008年 3月
2.5.2 对照品溶液的制备:分别以制备供试品溶
液溶剂做空白对照。
2.5.3 紫外 -可见光谱鉴别实验结果:参照文献
〔3〕紫外-可见光分光度法实验 ,在紫外-可见光分光
度计上进行吸收扫描 。乙醚部位 ,构叶 、小构叶样品
均在 408.9、666.6 nm处有明显吸收;乙酸乙酯部
位 ,构叶 、小构叶样品均在 664.6nm处有明显吸收 ,
另处 ,构叶样品在 410.6 nm处有明显吸收 ,小构叶
样品在 427.3、450nm处均有吸收;甲醇提取部位 ,
构叶 、小构叶样品均在 268.7、330.2 nm处有明显吸
收 。见图 6、图 7、图 8。
图 6 乙酸乙酯部位紫外光谱图
B.构叶 C.小构叶
图 7 乙醚部位紫外光谱图
B.构叶 C.小构叶
图 8 70%甲醇部位紫外光谱图
B.构叶 C.小构叶
3 小结与讨论
3.1 本文根据实验结果描述了小构叶原植物形
态 、性状特征 、显微特征等 ,可作为生药鉴别的依据。
小构叶性状主要鉴别特征:小构叶多呈卵状椭
圆形 ,先端渐尖至尾状 ,叶基多浅心形两侧不对称 ,
边缘有浅三角形锯齿 ,叶从全缘 、一对浅裂到不对称
深裂 ,表面柔毛较短 ,叶片草质 、薄 ,质脆 。
小构叶显微主要鉴别特征:草酸钙簇晶常 1 ~ 4
行纵向排列 ,棱角较钝。腺毛头部分泌物质多为棕
红色 。细长非腺毛基部直径 5 ~ 37μm,粗短非腺毛
长 61 ~ 85μm,直径 40 ~ 53 μm。钟乳体长 40 ~ 52
μm,宽 35 ~ 45 μm,基部横切面直径 40 ~ 58 μm。
气孔为平轴式或不定式 。叶柄横切面中厚壁细胞 8
~ 12列 。中柱内有外韧型维管束 4 ~ 6个。
3.2 实验分别对小构叶和构叶的乙醚提取部位 、
醋酸乙酯提取部位 、正丁醇提取部位和 70%甲醇提
取部位进行了薄层色谱定性分析 ,以芹菜素 -7-O-β -
D-葡萄糖醛酸苷为对照品 ,并分别筛选了薄层色谱
条件 。结果 ,只有 70%甲醇提取部位 ,斑点清晰 ,实
验结果稳定。薄层色谱表明小构叶和构叶 70%甲
醇提取部位主要成分类似 ,并且都含有芹菜素 -7-O-
β-D-葡萄糖醛酸苷。
3.3 紫外 -可见光谱证明 ,小构叶和构叶的乙醚部
位 、乙酸乙酯部位 、甲醇提取部位都有基本相似的吸
收峰 ,说明小构叶和构树叶含有类似的化学成分。
这为小构叶和构叶的资源开发提供了科学依据。
参 考 文 献
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[ 3] 国家药典委员会 .中华人民共和国药典 .一部 .北京:
化学工业出版社 , 2005:附录 28.
(2007-11-12收稿)
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