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作 者 ：黄超;张丽丽;邓柳红;张春发;Organ-单位: 海南大学农学院;中国热带农业科学院热带生物技术研究所;海南省蛋白质工程药物重点实验室/海口市生命科学药物工程技术研究开发中心;

期 刊 ：热带生物学报 2016年 01期 页码：82-88

关键词：美洲商陆；抗病毒蛋白；载体构建；原核表达；海南五指山；

摘 要 ：提取春季海南五指山美洲商陆叶片总RNA,利用RT-PCR技术获得c DNA,再根据Genbank上公布的PAP-Ⅰ基因序列设计引物扩增PAP-Ⅰ基因,并连接到p~(ET)-30a载体上进行表达,表达的产物以不溶的包涵体形式存在,经过变性、镍柱亲和层析纯化,纯化后的重组蛋白经过Western Blot验证表明该基因得到了正确表达,利用柱上循环复性后的重组PAP-Ⅰ蛋白经麦胚提取物转录/翻译偶联系统验证具有抑制蛋白质合成的活性。

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