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鱼腥草不同提取部位药理活性的比较研究



全 文 :收稿日期:2007-05-29; 修订日期:2007-10-20
基金项目:香港浸会大学基金(No.FRG/03-04/Ⅱ -39)
作者简介:孟 江(1976-),女(汉族),河南三门峡人 ,现任广东药学院中
药学院讲师 ,博士学位 ,主要从事中药及饮片质量标准化研究工作.
*通讯作者简介:董小萍(1957-), 女(汉族),四川成都人 , 现任成都中医
药大学药学院教授 ,学士学位 ,主要从事中医新药的开发研究工作.
鱼腥草不同提取部位药理活性的比较研究
孟 江 1 ,和殿峰 2 , 周毅生1 ,董小萍 3*
(1.广东药学院中药学院 ,广东 广州 510006;
2.河南省濮阳市油田总医院 ,河南 濮阳 457001;3.成都中医药大学药学院 ,四川 成都 610081)
摘要:目的 比较鱼腥草不同提取部位的药理活性。方法 通过二甲苯致小鼠耳炎症实验 , 观察鱼腥草不同提取部位的
抗炎作用;采用浓氨水诱导法引起的咳嗽实验 , 观察鱼腥草不同提取部位的止咳作用;采取醋酸引起的化学刺激致痛实
验 , 考察鱼腥草不同提取部位的镇痛作用。结果 鱼腥草氯仿提取物 、水提取物对二甲苯致小鼠耳炎症 ,浓氨水诱导法引
起的咳嗽 , 醋酸引起的化学刺激致痛具有显著的抗炎 、止咳和镇痛作用 , 正丁醇提取部位具有显著的抗炎和止咳作用。
结论 抗炎和止咳的有效部位为鱼腥草氯仿部位 、水部位和正丁醇提取部位 , 镇痛的活性部位为鱼腥草氯仿部位和水
部位。
关键词:鱼腥草; 不同部位; 药效活性
中图分类号:R285.5  文献标识码:A  文章编号:1008-0805(2008)05-1050-02
ComparisononthePharmacologicalEffectsofDiferentExtractPartsfrom Houttuynia
cordataThunb.
MENGJiang1 , HEDian-feng2 , ZHOUYi-sheng1 , DONGXiao-ping3*
(1.GuangdongPharmacologicalUniversity, Guangzhou510006, China;2.HenanPuyangOilfieldsGeneral
Hospital, Puyang457001, China;3.ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine, Chengdu610081,
China)
Abstract:ObjectiveTocomparethepharmacologicalefectofdifferentextractpartsfromHoutuyniacordataThunb..Methods
Experimentofinflammationcausedbydimethylbenzeneontheearofmicewascarriedouttoobservetheeffectofdiferentextracts
ofHoutuyniacordataoninflammation.Experimentofaceticacid-causedbodydistortioninmicewasobservedonanalgesic
effect.Experimentofcoughinducedbystrongaquawascariedouttoobservetheeffectofstoppingcough.ResultsChloroform
extractandwaterextracthadgoodanalgesic, stoppingcoughandantinflammatoryactions.N-butanolextracthadgoodpharma-
cologicalactionofanti-inflammationandstoppingcough.ConclusionTheactivepartsofanti-inflammationandstoppingcough
wereChloroformextract, waterextractandn-butanolextract.TheanalgesicpartswereChloroformextractandwaterextract.
Keywords:HoutuyniacordataThunb.; Differentextracts; Pharmacologicalactivity
  鱼腥草为三白草科 (Saururaceae)蕺菜属植物蕺菜 Hout-
tuyniacordataThunb.的干燥地上部分和新鲜全草 [ 1] 。现代研究
表明鱼腥草含有挥发油 、黄酮类 、酚类 、生物碱 、多糖等成分 [ 2 , 3] ,
药理研究表明本品具有清热解毒 、利尿通淋 、祛痰止咳 、镇痛等功
效 [ 1] 。本文对鱼腥草不同提取部位进行了抗炎 、止咳和镇痛活
性比较 , 以期为进一步对鱼腥草的化学成分及药理活性进行深入
研究提供实验依据。
1 器材
1.1 动物 昆明种健康小鼠 , 雌雄皆用 ,体重 18~ 22 g, 由四川省
实验动物专委会养殖场提供。
1.2 药物与试剂 鱼腥草经陈幼竹博士鉴定为三白草科蕺菜属
植物蕺菜 HoutuyniacordataThunb.。氯仿 、醋酸乙酯 、正丁醇 、石
油醚 、冰醋酸 ,二甲苯等均为分析纯由成都科龙化工试剂厂提供 ,
水为蒸馏水。阳性药 , 阿司匹林 ,西安博华制药有限责任公司 ,批
号 050204;地塞米松:成都第一制药有限公司 , 批号 0504004;枸
橼酸喷托维林片 , 天津药业焦作有限公司 , 批号 040302。用时研
细 , 用蒸馏水配成所需浓度。
1.3 仪器 CM-1超声雾化治疗仪 , 合力医疗器械厂 , 中国上
海;电子天平(BS210S, madebystartorius)。
2 方法及结果
2.1 供试样品的制备 精密称取适量鱼腥草 1.0 kg, 加水适量煎
煮两次 , 2h/次 , 过滤 ,合并两次滤液 , 浓缩至 1 000 ml, 依次用石
油醚 、氯仿 、醋酸乙酯 、正丁醇萃取 ,得各部位萃取物。将各部位
萃取物低温减压回收溶剂石油醚 、氯仿部位合并定容于 20ml, 醋
酸乙酯部位定容于 200 ml、正丁醇萃取定容于 100 ml, 水部位定
容于 500 ml。分别吸取 75 ml的氯仿部位和醋酸乙酯部位溶液
定容于 500 ml,吸取 37.5, 187.5ml的正丁醇和水部位的溶液分
别定容于 500 ml,即为高剂量药物浓度。稀释一倍为低剂量。
2.2  抗炎药理实验 [ 4] 取雄性小鼠 100只 , 随机分为 10组 , 每
组 10只 , 其中阳性对照组为地塞米松。 灌胃给药 1次 /d(0.2
ml/10g小鼠重量), 连续 6 d, 于末次给药 1h后 ,用鼠耳肿胀法观
察抗炎作用。分别于各组小鼠左耳前后涂二甲苯 0.05 ml/只 , 右
耳不涂作对照 , 1h后将小鼠颈部脱臼处死 , 剪下左右耳 ,用 9 mm
直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片 , 称重 , 左右耳重量之差
作为肿胀度。并计算耳肿抑制率。给药组与生理盐水组对照 , 结
果见表 1。
由表 1可知 , 与生理盐水组相比 , 鱼腥草氯仿提取物大剂量
组和水提取物大剂量组对二甲苯致小鼠耳炎症均具有极显著的
抑制作用(P<0.01);鱼腥草正丁醇提取物大小剂量组 、鱼腥草
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时珍国医国药 2008年第 19卷第 5期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.5 
水提取物小剂量组对二甲苯致小鼠耳炎症均具有显著的抑制作
用(P<0.05), 而鱼腥草氯仿提取物小剂量组 、鱼腥草醋酸乙酯
大小剂量组均对二甲苯致小鼠耳炎症没有抗炎作用。
抑制率(%)=(对照组平均肿胀值 -给药组平均肿胀值)/
对照组平均肿胀值 ×100%
表 1 鱼腥草不同提取物对小鼠耳肿胀抗炎作用观察( x±s)
组别   剂量C/g· kg-1
耳肿胀
m/mg
抑制率
(%)
生理盐水 - 12.77±2.77 -
阳性对照(地塞米松) 0.001 4.7±2.69 -
鱼腥草氯仿提取物小剂量 7.5 10.9± 0.56 14.64
鱼腥草氯仿提取物大剂量 15 7.82±0.89■■ 38.76
鱼腥草醋酸乙酯提取物小剂量 7.5 9.64±2.89 24.51
鱼腥草醋酸乙酯提取物大剂量 15 9.53±2.36 25.37
鱼腥草正丁醇提取物小剂量 7.5 8.32±1.59■ 34.85
鱼腥草正丁醇提取物大剂量 15 7.90±2.64■ 38.14
鱼腥草水提取物小剂量 7.5 8.66±2.19■ 32.18
鱼腥草水提取物大剂量 15 6.77±2.11■■ 46.99
  与生理盐水组比较■■P<0.01, ■P<0.05;n=10
2.3 镇咳药理实验 [ 5] 取小鼠 100只 ,雌 、雄各半 , 随机分为 10
组 , 每组 10只 ,其中阳性对照组为枸橼酸喷托维林片。灌胃给药
1次 /d(0.2ml/10 g小鼠重量), 连续 6 d, 于末次给药 1 h后 ,用
浓氨水诱导法观察镇咳作用。即将小鼠放入玻璃钟罩内 ,打开通
过橡皮管与之相连的超声雾化器 ,将浓氨水均匀地喷入玻璃钟罩
内 , 喷雾 10 s, 立即取出小鼠 ,以小鼠腹肌收缩并张大口为咳嗽动
作指标 , 分别观察各组小鼠 2 min中咳嗽次数。结果见表 2。
由表 2可知 , 与生理盐水组相比 ,鱼腥草氯仿提取物 、水提取
物 、正丁醇提取物均对浓氨水诱导法引起的咳嗽具有较好的止咳
效果 , 而鱼腥草醋酸乙酯部位则没有止咳作用。
表 2 鱼腥草不同提取物对小鼠的止咳作用观察( x±s)
组别 剂量C/g· kg-1 咳嗽次数
生理盐水 - 27.14±5.66
阳性对照(枸橼酸喷托维林) 0.033 3 5.5±0.57
鱼腥草氯仿提取物小剂量 7.5 14.10±1.41 ■■
鱼腥草氯仿提取物大剂量 15.0 12.09±0.81■■
鱼腥草醋酸乙酯提取物小剂量 7.5 26.25±9.75
鱼腥草醋酸乙酯提取物大剂量 15.0 23.45±7.65
鱼腥草正丁醇提取物小剂量 7.5 19.5±0.93 ■
鱼腥草正丁醇提取物大剂量 15.0 12.17±0.69 ■■
鱼腥草水提取物小剂量 7.5 13.75±2.75 ■■
鱼腥草水提取物大剂量 15.0 11.5±0.58 ■■
  与生理盐水组比较 , ■■P<0.01, ■P<0.05;n=10
2.4  镇痛药理实验 [ 6] 取雄性小鼠 100只 ,随机分为 10组 , 每
组 10只 , 其中阳性对照组为阿司匹林。灌胃给药 1次 /d(0.2
ml/10g小鼠重量), 连续 6 d,于末次给药 30min后 , 用冰醋酸扭
体法观察镇痛作用 , 分别给每只小鼠腹腔注射 0.6%的冰醋酸
0.2 ml, 记录 5 min内扭体次数 , 计算抑制率。结果见表 3。
抑制率(%)=(空白组扭体反应均数 -试药组扭体反应
数)/空白组扭体反应均数 ×100%
由表 3可知 , 与生理盐水组相比 , 鱼腥草氯仿提取物对由醋
酸引起的化学刺激致痛有极显著的镇痛作用(P<0.01), 鱼腥草
水提取物对由醋酸引起的化学刺激致痛有显著的镇痛作用(P<
0.05), 而鱼腥草的醋酸乙酯提取物对醋酸引起的化学刺激致痛
则没有镇痛作用。
表 3 鱼腥草不同提取物对小鼠的镇痛作用观察( x±s)
组别 剂量C/g· kg-1 扭体次数
抑制率
(%)
生理盐水 16.67±1.53
阳性对照组(阿司匹林) 0.015 2.5±1.17 85
鱼腥草氯仿提取物小剂量 7.5 9.75±2.90■■ 41.5
鱼腥草氯仿提取物大剂量 15 8.33±3.06■■ 50.0
鱼腥草醋酸乙酯提取物小剂量 7.5 14.6±6.34 12.42
鱼腥草醋酸乙酯提取物大剂量 15 14.23±3.65 14.6
鱼腥草正丁醇提取物小剂量 7.5 15.66±2.43 6.0
鱼腥草正丁醇提取物大剂量 15 14.32±6.39 14.1
鱼腥草水提取物小剂量 7.5 11.05±4.08■ 33.7
鱼腥草水提取物大剂量 15 10.75±0.57■ 35.5
  与生理盐水组比较 , ■■P<0.01, ■P<0.05;n=10
3 结论
鱼腥草氯仿提取物 、水提取物对二甲苯致小鼠耳炎症 , 浓氨
水诱导法引起的咳嗽 , 醋酸引起的化学刺激致痛具有显著的抗
炎 、止咳和镇痛作用 , 正丁醇提取部位对二甲苯致小鼠耳炎症 , 浓
氨水诱导法引起的咳嗽具有抗炎和止咳作用 ,其中鱼腥草氯仿提
取物和水提取物大剂量组抗炎作用最强 ,氯仿提取部位镇痛作用
最强 , 而醋酸乙酯部位药理作用不明显。这提示氯仿和水提取部
位为鱼腥草的主要有效部位 ,另外正丁醇部位为抗炎和止咳的有
效部位 。这为鱼腥草的活性成分的化学和药理研究提供理论
依据。
课题组对鱼腥草的氯仿部位和正丁醇部位采取柱层析化学
分离和结构鉴定 [ 7 , 8] ,从正丁醇部位分得金丝桃苷 、槲皮苷 、4-β
-D葡萄糖 -3-羟基苯甲酸 、绿原酸甲酯 、3, 4-二羟基苯甲酸 、
芸香苷异 、槲皮苷 、山柰酚 -3-O-β -芸香糖苷 、槲皮素 -3-O
-β -D-半乳糖 -7-O-β -D-葡萄糖苷 、槲皮素 -3 -O-a
-D-鼠李糖 -7-O-β -D-葡萄糖苷 、4-羟基 -4[ 3′-(β -
D-葡萄糖)亚丁基 ] -3, 5, 5-三甲基 -2-环己稀 -1-醇 、 2-
(3, 4二羟基)-苯乙基 -β -D-葡萄糖苷 、对羟基苯乙醇 -β -
D-葡萄糖苷 、硝酸钾等成分。从氯仿部位分得胡椒内酰胺 、马
兜玲内酰胺 B、金线吊乌龟二酮碱 B等成分。提示这些化学成分
为鱼腥草的活性成分 ,但其作用机理还有待进一步的研究。
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.5 时珍国医国药 2008年第 19卷第 5期