全 文 ：收稿日期:2011-05-20; 修订日期:2011-08-30
基金项目:国家自然科学基金(No． 10771217) ;
中国博士后科学基金特别资助(No． 200902481)
作者简介:任 宏(1960-)，男(汉族)，吉林人，现任广东省博罗先锋药业集
团有限公司副总工程师，学士学位，主要从事药物制剂生产性研究工作．
鱼腥草注射液定量指纹图谱的建立
任 宏1，宋琛超2，易伦朝2，梁逸曾2，易海洋2
(1．广东省博罗先锋药业集团有限公司，广东 博罗 516100;
2．中南大学化学化工学院，湖南 长沙 410083)
摘要:目的 建立鱼腥草注射液的定量指纹图谱分析方法，用于鱼腥草注射液的质量评价。方法 采用气相色谱程序升温
的方法进行色谱分离，使用“2009 版中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行数据处理，对不同批次的鱼腥草注射液指纹
图谱的相似度进行比较分析，并对指标物质进行含量测定。结果 不同批次鱼腥草注射液相似度较好，但特征峰的含量
差别较明显。结论 采用 GC方法控制注射液的指纹图谱，方法重现性好，用于鱼腥草注射液的质量评价切实可行。不同
批次鱼腥草注射液化学组成相似，其相对比例较稳定。
关键词:鱼腥草; GC; 指纹图谱
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 01． 051
中图分类号:R286 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2012)01-0120-02
Establishment of Quantitative Chromatographic Fingerprint of Houttuynia Cordata Injec-
tion
REN Hong1，SONG Chen-chao2，YI Lun-zhao2，LIANG Yi-zeng2，YI Hai-yang2
(1． Guangdong Boluo Pioneer Medicinal Group Co．，Ltd．，Boluo，516100，China;2． College of Chemistry and
Chemical Engineering，Central South University，Changsha，410083，China)
Abstract:Objective To establish quantitative chromatographic fingerprint of houttuynia cordata injection by GC for quality con-
trol of houttuynia cordata injection． Methods A temperature programming gas chromatography (GC)was applied in chromato-
graphic separation，and data were analysed by“Computer Aided Similarity Evaluation”software to evaluate the quality of houttuyn-
ia cordata injection samples from different batches． Results Samples from different batches were of high similarity．
Conclusion The GC fingerprint method is repeatable，feasible in analysis of houttuynia cordata injection and can be used in quali-
ty assessment of houttuynia cordata injection ． Chemical components in houttuynia cordata injection samples from various batches
are similar，and their ratios between each other are stable．
Key words:Houttuynia cordata injection; GC; Chromatographic fingerprint
鱼腥草注射液是鱼腥草以水蒸气蒸馏法制备的中草药注射
剂，主要有抗菌、消炎、解热的作用，广泛地运用于临床，疗效确
切［1 ～ 3］。本研究旨在建立用于质量稳定性与均一性控制的指纹
图谱，以保证鱼腥草注射液药理药效作用，并尽可能地合理利用
资源。
近年来，指纹图谱技术被用于中药的质量控制，其优点在于
可全面反映中药复杂的化学成分及其相对比例，在大多数中药有
效成分尚未阐明的现状下，仍可有效地表征中药质量［4 ～ 10］。本
文采用气相色谱法，建立鱼腥草注射液的指纹图谱，并通过实验
条件摸索，尽量使得最终所得的色谱指纹图谱的干扰因素少、实
验耗时尽可能少、重复性好、稳定可靠、可操作性强、图谱评价客
观可行，并能够适合不同操作人员对不同时间的鱼腥草注射剂进
行测定、评价。
1 仪器与药品
岛津 2010 型气相色谱仪;对照品:(－)－ 4 －萜品醇标准样
(terpinen － 4 － ol，CAS No． 20126 － 76 － 5，纯度:97． 0%) ，α －松
油醇标准样(α － Terpineol，CAS No． 98 － 55 － 5，纯度:97． 0%) ，甲
基正壬酮标准样(2 － Undecanone，CAS No． 112 － 12 － 9，纯度:
99． 0%)都从百灵威化学技术有限公司购得。样品:广东省博罗
先锋药业集团有限公司提供;试剂:均为分析纯。
2 方法
2． 1 挥发性成分的提取 取本品 200 ml，置 500 ml烧瓶中，连接
挥发油测定器，自测定器上端加水使充满刻度部分，并溢流入烧
瓶为止，再加入正己烷 1 ml，加热回流 40 min，将挥发油测定器中
的有机相移入 2ml的容量瓶中，定容，作为供试品溶液。
2． 2 气相色谱条件与系统适用性实验 气相色谱条件:色谱柱:
OV －1 毛细管色谱柱(30 m × 0． 25 mm，涂膜厚:0． 25 μm) ;柱温:
起始温度为 60℃ ，保持 5 min，然后以 4℃ /min 的升温速率升至
200 ℃，再保持 5 min;进样口及检测器温度:分别为 250℃及
280℃;载气为氮气，流速:0． 7 ml /min;进样量:1 μl;分流比 10∶
1。系统适用性试验:理论板数以甲基正壬酮峰计不低于10 000。
2． 3 数据处理软件 参照气相色谱法《中国药典》2010 版Ⅰ部附
录 VI E) ，结合指纹图谱的要求进行测定。对照指纹图谱和相似
度结果由“2009 版中药色谱指纹图谱相似度评价系统”计算获
得。
3 结果
从提取方法、提取用量(成品注射剂用量和萃取溶剂用量)、
提取温度、提取时间等方面对鱼腥草成品注射液提取的影响因素
进行了深入细致的探讨，并对鱼腥草注射液进行系统适用性实验
研究。
3． 1 空白实验 以分析纯正己烷作空白实验，作溶剂截断后所得
色谱指纹图谱中没有组分流出，而且基线非常平稳。按鱼腥草注
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 1 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL． 23 NO． 1
射液处方制得不含鱼腥草成分的阴性样品，用上述方法进行 3 次
实验，考察非鱼腥草成分的干扰。在水蒸气蒸馏萃取法中，空白
样品(非鱼腥草成分)对图谱的色谱组成的影响很小。
3． 2 标准曲线与线性范围 通过测试和分析，分别得到里哪醇，1
－壬醇，(－)－ 4 －萜品醇，α －松油醇，甲基正壬酮，甲基正癸酮
的标准曲线。结果表明里哪醇，1 －壬醇，(－)－ 4 －萜品醇，α －
松油醇，甲基正壬酮和甲基正癸酮分别在 0． 06 ～ 3． 58mg /ml，
0． 16 ～ 7． 95mg /ml，0． 11 ～ 17． 27mg /ml，0． 074 ～ 8． 86 mg /ml，
0． 054 ～ 6． 01mg /ml，0． 073 ～ 8． 75 mg /ml范围内线性关系良好。
3． 3 稳定性实验 取同一份鱼腥草注射液，按拟定方法提取，分
别在 0，1，4，8 h和 12 h 不同时间进行测定。用相似度计算在同
一台仪器测得的色谱指纹图谱与其共有模式图谱的相似度分别
为 0． 999 5，0． 999 6，0． 998 1，0． 997 9，0． 997 1。结果表明测定样
品在此时间内是稳定的。
3． 4 重复性实验 取同一批号的鱼腥草注射液 5 份，按照拟定的
方法进行挥发性成分供试品的制备和检测。测得的鱼腥草挥发
性成分的色谱指纹图谱与其共有模式图谱的相似度分别为
0． 998 5，0． 996 6，0． 999 4，0． 999 2，0． 999 2。测得(－)－ 4 －萜
品醇，α －松油醇和甲基正壬酮这三个指标物质色谱峰面积的
RSD分别为 6． 04%，6． 43%，4． 19%(n = 5)。
3． 5 仪器精密度实验 同一供试品溶液，连续进样 5 次，考察仪
器精密度和指纹图谱色谱组分保留时间的一致性。计算各指纹
图谱与其共有模式图谱的相似系数(均值)为 0． 995 0，0． 997 3，
0． 998 1，0． 999 1，0． 994 3，0． 998 0。测得(－)－ 4 －萜品醇，α －
松油醇和甲基正壬酮这三个指标物质色谱峰面积的 RSD 分别为
3． 99%，2． 48%，1． 39%(n = 5)。结果表明该方法具有较好的仪
器精密度。
3． 6 回收率实验 取本品 100 ml，精密加入 100 ml含有(－)－ 4
－萜品醇(0． 94 μg /ml) ，α －松油醇(3． 10 μg /ml)和甲基正壬酮
(10． 9 μg /ml)的对照品溶液，提取，测定，计算，结果见表 1。
表 1 回收率实验
化合物 编号
样品量
m /mg
加入量
m /mg
测得量
m /mg
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
(－)－4 －萜品醇 1 0． 12 0． 094 0． 22 104． 8 98． 10 6． 51
2 0． 20 95． 24
3 0． 19 90． 48
4 0． 22 104． 8
5 0． 20 95． 24
α －松油醇 1 0． 37 0． 31 0． 71 104． 6 99． 51 3． 43
2 0． 68 100． 6
3 0． 65 95． 78
4 0． 66 97． 16
5 0． 68 99． 43
甲基正壬酮 1 1． 03 1． 09 2． 19 103． 6 103． 6 2． 54
2 2． 26 106． 6
3 2． 11 99． 7
4 2． 18 102． 8
5 2． 23 105． 3
3． 7 鱼腥草注射液 GC指纹图谱中的特征峰 根据 10 批不同供
试品指纹图谱的检测结果，总结出供试品中指纹图谱中的典型色
谱峰共 10 个。其中，烯烃类物质 4 个，含量占 3． 59%;醇类物质
3 个，含量占 33． 16%;酮类物质 1 个，含量占 45． 18%;酯类物质
2个，含量占 11． 28%，见图 1。由于鱼腥草注射液中主要为醇类
和酮类物质，因此我们选取含量较高的三个物质(占 69． 35%) :
(－)－ 4 －萜品醇、α －松油醇和甲基正壬酮，按照上面建立的方
法进行准确的含量测定，结果见表 2。
4 讨论
由广东省博罗先锋药业集团有限公司提供的 10 批鱼腥草注
射液的指纹图谱分析结果可看出，不同批次的鱼腥草注射液指纹
图谱的相似度都大于 0． 9，说明其化学组成一致性较好，但特征
峰的含量差别较明显。
1:β －月桂烯(β － Myrcene) ;2:柠檬烯(Limonene) ;3:里哪醇(Linalool) ;
4:(－)－ 4 －萜品醇(terpinen － 4 － ol) ;5:α －松油醇(α － Terpineol) ;
6:氧化柠檬烯(Limonene oxide) ;7:乙酸龙脑酯(Bornyl acetate) ;
8:甲基正壬酮(2 － Undecanone) ;9:香茅醇乙酸酯(Geraniol acetate)
10:石竹烯 a(Caryophyllene)
图 1 鱼腥草注射液气相色谱指纹图谱
表 2 样品含量测定结果
编号 批号
含量 C /μg·ml － 1
(－)－4 －萜品醇 α －松油醇 甲基正壬酮
1 000141 1． 38 3． 90 6． 40
2 000142 0． 83 2． 32 4． 64
3 000143 0． 99 2． 33 3． 86
4 000144 1． 66 5． 34 6． 77
5 000145 1． 33 4． 01 8． 64
6 000146 0． 55 1． 30 1． 68
7 000147 1． 85 5． 70 6． 99
8 000148 2． 20 8． 21 10． 37
9 000149 1． 14 3． 83 10． 29
10 000150 1． 23 3． 47 6． 11
本文采用药典委员会推荐的“2009 版中药色谱指纹图谱相
似度评价系统”，在当前在中药的复杂成分不可能全部清晰的情
况下，指纹图谱从色谱的指纹图谱的整体特征来综合地鉴别真
伪，加上量化的参数，可以从宏观的、非线性的角度评价中药产品
质量的稳定性和一致性。
本法反映了鱼腥草注射液的化学组成及其相对比例，既可用
于定性鉴别，也可用于定量分析，可对鱼腥草的栽培、生产加工、
贮藏运输、临床使用等各个环节进行全面可靠的质量监控，为中
药鱼腥草全面深入的研究奠定了基础。
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