全 文 ：（总 ） 广西中医药 2013年 8月第 36卷第 4期
对叶百部为百部科植物对叶
百部Stemona tuberosa Lour.的干燥
块根，其性微温，味甘、苦，归肺经，
具有润肺下气止咳、杀虫灭虱的功
效，可用于新久咳嗽、肺痨咳嗽、百
日咳；外用于头虱、体虱、蛲虫病、
阴痒，为《中华人民共和国药典》
（2005、2010年版）所收载百部药材
的3个来源品种之一［1-2］。广西为对
叶百部的主要产地［3-4］。在现行的
药典中，百部项下仅有性状、鉴别、
浸出物等项目，尚不能有效控制百
部药材和相关制剂的质量。生物碱
是百部脂溶性部位的主要成分，同
时也是百部提取物的主要活性成
分，其具有良好的杀虫、抗菌、镇咳
祛痰等作用［5］。经查阅文献，尚未
见有关广西产对叶百部生物碱含
量的报道。因此，本研究以广西不
同产地对叶百部药材为对象，参照
文献［6］方法，以对叶百部碱为对
照品，采用酸性染料比色法测定其
总生物碱含量，现报道如下。
1 实验材料
1.1 仪器 Agilent8453紫外-可见
分光光度计（美国安捷伦科技公
司）；Millipore Simplicity -185超纯
水仪（美国Millipore公司）；BP211D
电子分析天平（德国Sartorius公
司）。
1.2 试剂 0.04%溴甲酚绿缓冲
液（自制，取0.2 mol/L的邻苯二甲
酸氢钾100 ml，用0.2 mol/L氢氧化
钠调节pH值至4.5，即得pH4.5缓冲
液；取溴甲酚绿0.04 g，加pH4.5缓
冲液100 ml溶解，滤过，即得溴甲
酚绿缓冲液）。对叶百部碱对照品
（成都曼思特生物科技有限公司，
入国际中草药市场的基本保证。而
凉粉草作为中草药和制作凉粉冻
的原料在我国乃至东南亚地区已
有悠久的历史，已成为我国一些地
方出口创汇的重要农产品，所以对
其重金属的含量测定是必要的。
3.2 目前，中药材有害元素含量
限度主要是参考现行《药用植物及
制剂进出口绿色行业标准》，其限度
为：Cu≤20.0 mg/kg，As≤2.0 mg/kg，
Cd≤0.3 mg/kg，Pb≤5.0 mg/kg，这4
个限度值与《中华人民共和国药
典》2010 年版收载的多种药材的
有害元素限度值一致。从表4中可
以看出绿茶标准物质中7种元素的
测定值基本在参考值范围内，分析
表 6的结果，广西灵山凉粉草
（201203）中除了Cr外其余元素含
量均高于其他产地，其中Cu，As，
Cd，Pb都在限度范围内。而广西灵
山凉粉草（201103）中Cr的含量明
显偏高。
3.3 基体效应会对待测元素产生
抑制作用，故本实验采用内标法对
基体效应进行补偿，选用Ge、In、
Bi、Sc四种元素作为内标，浓度为
10 ng/ml，根据信号响应值与内标
响应值的比值计算数值，从而提高
测定结果的准确性。
3.4 ICP-MS质谱分析过程中受到
的主要干扰有同质异位素干扰、氧
化物离子干扰、双电荷离子干扰以
及由载气和水溶液基体中的其他
原子构成的复合离子的干扰，可通
过使用干扰方程等手段进行校正。
本文所选的Pb，Cd，As，Cu，Ni，Cr，
Mn的质量数分别为208，111，75，65，
60，52和55，采用这7种质量数的元
素同位素可有效避免同质异位素
的干扰。
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（2013－06－03 收稿/编辑陈明伟）
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（总 ）广西中医药 2013年 8月第 36卷第 4期
基金项目：广西自然科学基金项目（2011GXNSFA018179）；广西教育厅科研项目（200911MS130）；桂林市科学研究与技术开发计划
项目（20090509）；广西中医药大学普通课题（P2008083）
*通讯作者
广西不同产地对叶百部总生物碱的含量测定
李耀华 广西中医药大学 530001 南宁市明秀东路179号
陈广钜 广西药用植物园 530023
王孝勋 * 黄 敏 陈仪新 广西中医药大学 530001
摘 要 目的：测定广西不同产地对叶百部中总生物碱的含量，为完善其质量标准提供依据。方法：以对叶
百部碱为对照品，采用酸性染料比色法测定其总生物碱含量。结果：建立了总生物碱的含量测定方法，广西不同
产地对叶百部药材总生物碱含量为6.56~20.93 mg/g。结论：该法重复性和稳定性良好，具有简便、快速、灵敏的特
点，可以作为其含量测定方法。
关键词 对叶百部；总生物碱；广西；不同产地；含量测定
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1003-0719（2013）04-0078-03
≥98%）；其余所用试剂均为分析
纯。
1.3 药材 对叶百部样品采自广
西东兴、上思、大新、天等、靖西、隆
林、凤山、天峨、平乐、恭城等10个
产地，经广西中医药大学壮医药学
院韦松基教授鉴定均为百部科百
部 属 植 物 对 叶 百 部 Stemona
tuberosa Lour.的块根。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备 精密称
取对叶百部碱7.5 mg置50 ml量瓶
中，用氯仿稀释至刻度，摇匀，制成
0.15 mg/ml的对照品溶液，备用。
2.2 供试品溶液的制备 取样品
粉末约1 g，精密称定，加50 ml甲醇
超声提取30 min，过滤，滤液加甲
醇，定容于50 ml量瓶中。取0.5 ml
样品液加10 ml氯仿及0.04%溴甲
酚绿缓冲液2 ml，剧烈振摇1 min，
静置30 min，取下层氯仿液，即得。
2.3 测定波长的选择 取对照品
溶液，在波长200~800 nm扫描，测
得最大吸收波长为416 nm。结果见
图1。
2.4 线性关系考察 精密量取
0.15 mg/ml对照品溶液5 ml，精密加
入10 ml氯仿和0.04%溴甲酚绿2 ml，
剧烈振摇1 min，静置30 min，取下
层氯仿液，定容至10 ml量瓶中。精
密量取1，2，4，6，8，10 ml，分别以
氯仿液定容至10 ml容量瓶中，以
相应的试剂为空白对照，在416 nm
处测吸光度，以对照品溶液浓度为
横坐标（X），吸光度为纵坐标（Y），
绘制标准曲线，得回归方程为：Y=
18.28X-0.0014，r=0.9994。结果表
明对叶百部碱在0.0075~0.075 mg/ml
范围呈线性关系。
2.5 精密度试验 取对照品溶
液，按2.4项下操作，以相应的试剂
为空白，重复测定其吸光度5次，
RSD为0.26%（n=5），结果表明仪器
精密度良好。
图 1 对叶百部碱对照品溶液吸收光谱图
nm
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（总 ） 广西中医药 2013年 8月第 36卷第 4期
2.6 重复性试验 取6份样品粉
末（广西平乐），每份约1 g，精密称
定，按2.2项下方法平行制备，以相
应的试剂为空白，同法测定，计算
样品中总生物碱的含量，平均含量
为16.46 mg/g，RSD为1.5%（n=6），
结果表明本法重复性较好。
2.7 稳定性试验 取供试品（广
西平乐），按2.2项下方法制备供试
品溶液，以相应的试剂为空白，每
隔30 min测定1次样品吸光度，连
续测定5次，RSD为0.44%（n=5），结
果表明本实验在120 min内稳定性
良好。
2.8 加样回收率试验 取6份已
知含量的样品粉末（广西平乐），每
份约0.5 g，精密称定，分别加入适
量对照品，按2.2项下方法制备供
试品溶液，以相应的试剂为空白，
同法测定，计算回收率。结果回收
率平均值为99.63%，RSD为 2.2%
（n=6），表明本法回收率良好，结果
见表1。
2.9 含量测定 分别取10批药材
样品粉末各3份，每份约1 g，精密
称定，按2.2项下方法制备供试品溶
液，以相应的试剂为空白，在416 nm
处分别测定吸光度，按标准曲线法
计算含量，结果见表2。
3 讨 论
3.1 本研究测得的广西10个不同
产地对叶百部药材样品总生物碱
的含量范围为6.56~20.93 mg/g，与
丛晓东等［6］用酸性染料比色方法
测定中国百部属植物块根中总生
物碱的对叶百部含量为5.3~31 mg/g
结果相一致。10批样品中广西上思
（20.93 mg/g）、广西凤山（19.40 mg/g）、
广西恭城（17.97 mg/g）含量较高。
现行药典中尚无百部总生物碱的
含量测定，因此，笔者认为有必要
增加总生物碱含量测定，以便更好
地控制其药材质量。
3.2 供试品溶液的制备中，以甲醇
提取后，加入氯仿溴甲酚绿缓冲液
振摇，文献［6］报道静置时间为1 h，
但笔者在实验操作中发现，30 min
后溶液分层良好。为节约时间，本
实验选择静置时间为30 min。
3.3 本研究采用酸性染料比色法
测定广西10个不同产地对叶百部
药材的总生物碱含量，方法简便、
快速、灵敏，可作为定量测定方法。
参考文献
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报，1992，27（7）：556-560.
（2013－06－17 收稿/编辑陈明伟）
表 1 加样回收率试验结果 （n=6）
编号
称样量
（g）
原有量
（mg）
加入量
（mg）
测得量
（mg）
回收率
（%）
平均回收率
（%）
RSD
（%）
1 0.5012 8.25 9.00 17.46 102.34
99.63 2.2
2 0.5026 8.27 9.00 16.92 96.08
3 0.5008 8.24 9.00 17.13 98.74
4 0.5028 8.28 9.00 17.28 100.04
5 0.5015 8.26 9.00 17.32 100.73
6 0.5082 8.36 9.00 17.35 99.83
表 2 对叶百部中总生物碱的测定结果 （n=3）
产 地 含量（mg/g） RSD（%）
广西东兴 17.23 1.6
广西上思 20.93 1.8
广西大新 6.56 2.2
广西天等 10.81 1.9
广西靖西 8.03 1.5
广西隆林 14.71 2.0
广西凤山 19.40 1.3
广西天峨 17.43 1.6
广西平乐 16.05 1.6
广西恭城 17.97 1.8
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