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秦巴山区华细辛遗传多样性与挥发油成分分析
胡苏莹，何 刚，陈 蓓，崔浪军* ，杨建雄
(药用植物资源与天然药物化学教育部重点实验室 /陕西师范大学生命科学学院，陕西 西安 710062)
摘要 目的:分析秦巴山区 7 个不同产地华细辛的挥发性成分与遗传多样性差异。方法:ISSR 法分析不同产
地华细辛的遗传多样性;顶空固相微萃取-气相色谱-质谱技术分析不同产地华细辛挥发性成分的相对含量，水蒸气
蒸馏-气相色谱法定量分析 3 种主要成分含量。结果:筛选出的 6 条 ISSR引物共扩增出 57 条带，其中 89. 47%呈多
态性，聚类分析将 7 个产地华细辛分为两个大类群。6 个不同产地野生华细辛挥发性成分组成及含量各有差异，除
含有一些相同组分外，不同产地的华细辛其根茎叶特定器官均含有一些独特成分。此外，一些成分只能在遗传距
离较近的华细辛特定器官中检测到。结论:秦巴山区华细辛遗传多样性与地理距离和气候关系不密切，一些挥发
油成分的积累与其遗传特性可能密切相关。
关键词 华细辛;ISSR;挥发油;顶空固相微萃取-气相色谱-质谱
中图分类号:R282. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2012)02-0188-07
Genetic Diversity and Volatile Components of Asarum sieboldii in Qin-ba Region
HU Su-ying，HE Gang，CHEN Bei，CUI Lang-jun，YANG Jian-xiong
(Key Laboratory of Ministry of Education for Medicinal Plant Resource and Natural Pharmaceutical Chemistry，College of Life Science，
Shaanxi Normal University，Xi＇an 710062，China)
Abstract Objective:To analyze the genetic diversity and the volatile components of Asarum sieboldii from seven habitats in Qin-
ba region. Methods:The genetic diversity of the herb was analyzed by ISSR (inter simple sequence repeat)markers;The relative con-
tent volatile components of the herb were dectected by head space solid-phase microextraction gas chromatogrphy-mass spectrometry
(HS-SPME-GC-MS). The contents of the 3 main components were analyzed by steam distillation gas chromatography-mass spectrome-
try (GC-MS). Results:57 bands were amplified from 7 populations by 6 reliable primers，51 of which were polymorphic (89. 47% of
the total). The cluster analysis presented that these resources were divided into two main groups. There were differences in the chemi-
cal components and the contents of Asarum sieboldii from the 6 wild habitats. Except for some same components，many unique compo-
nents were identified in them respectively. In addition，some components could be detected only in some populations which had smaller
genetic distance. Conclusion:Cluster analysis shows no direct correlation between genetic distance and geographic distance of Asarum
sieboldii in Qin-ba region. The accumulations of some volatile components of Asarum sieboldii are possibly related to genetic diversity.
Key words Asarum sieboldii Miq.;ISSR;Essential oils;HS-SPME-GC-MS
收稿日期:2011-07-13
作者简介:胡苏莹(1985-) ，男，硕士，研究方向:植物次生代谢。
* 通讯作者:崔浪军，Tel:02985310266，E-mail:ljcui@ snnu. edu. cn。
华细辛(Asarum sieboldii Miq. )又称白细辛、细
辛，为马兜铃科植物华细辛的全草，因具有祛风散
寒、通窍止痛、温肺化饮之功效，被广泛用于风寒感
冒、牙痛、痰饮咳喘等疾病的治疗，是我国传统的大
宗药材之一〔1〕。华细辛在我国主要分布于陕西、河
南、四川、湖北、湖南、安徽等省，其中陕西产华细辛
列为上品。当前华细辛家种面积稀少，野生资源破
坏严重，被列为国家三级濒危保护药用植物〔2〕。随
着近年来华细辛的价格上涨，供需矛盾日渐突出，华
细辛种质资源的评价与保护受到了高度关注。2005
版药典中把挥发油含量作为细辛质量控制指标〔3〕，
其中挥发油中的诸多有效成分如甲基丁香酚、黄樟
醚等的药理药效与毒性也引起了越来越多的关
注〔4-6〕。秦岭-大巴山地区被认为是华细辛的道地产
区之一〔2〕，秦岭南北坡气候差异较大，本实验调查
发现该地区华细辛生物学性状存在一定的差异，且
目前该地区的华细辛遗传多样性与挥发性成分差异
尚不清楚。本研究以秦岭-大巴山地区的 6 个不同
产地的野生华细辛和 1 个栽培华细辛为材料，在用
ISSR(Inter simple sequence repeat)分子标记技术探
讨其遗传多样性的基础上，进一步比较分析其所含
挥发性成分的异同，为更加科学合理地开发利用华
细辛提供理论依据。
1 材料与仪器
1. 1 材料 野生华细辛分别采自陕西华山北峰
(N34. 5，W110. 1，样品 A)、长安县丰裕口(N34. 0，
·881· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 2 期 2012 年 2 月
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2012.02.011
W108. 8，样品 E)、太白县咀头镇(N34. 0，W107. 3，
样品 C)、洛南县洛源镇(N34. 2，W109. 8，样品 D)、
宁陕县龙王镇(N33. 3，W108. 3，样品 F)和宁强县黄
坝驿乡(N32. 8，W106. 1，样品 B) ，栽培华细辛采自
课题组苗圃(N 34. 2，W108. 9，样品 G) ，每个种群
采样至少 20 个，将采集后的样品部分阴干用作挥发
油成分分析，其余部分经变色硅胶干燥后用作遗传
多样性分析。样品经陕西师范大学生命科学学院田
先华教授鉴定为马兜铃科华细辛属植物华细辛。
1. 2 试剂 正十九烷(Supelco公司) ;无水硫酸钠
(郑州派尼化学试剂厂) ;丙酮(天津科密欧化学试
剂有限公司) ;2 × Taq PCR MasterMix(西安润德生
物技术有限公司) ;DNA Ladder DL2000(北京索莱
宝科技有限公司) ;引物(上海生工生物技术有限公
司合成) ，引物名称:UBC807，UBC811，UBC834，
UBC835， UBC836， UBC846， UBC849， UBC850，
UBC866，UBC900。
1. 3 仪器 PCR 仪(美国 Applied Biosystems
AIB2720) ;凝胶成像系统(中国上海复日科技有限
公司 FR-200A) ;GC /MS (日本岛津 QP2010) ;RTX-
5MS(0. 25 mm ×30 m，0. 25μm)型弹性石英毛细管
色谱柱;手动固相微萃取(SPME)装置(美国 Supel-
co) ;100μm PDMS萃取纤维头(美国 sigma)。
2 实验方法
2. 1 华细辛遗传多样性的 ISSR 分析 采用改良
CTAB法提取总基因组 DNA〔7〕后，从哥伦比亚大学
提供的二核苷酸重复 ISSR 引物中初步筛选出多态
性丰富的 10 个引物，并经筛选发现其中 6 个引物最
佳(表 1) ，对 7 个华细辛样品进行 PCR 扩增，从中
筛选出带形清晰、多态性丰富的引物后进一步扩增。
20μL的 PCR反应体系包含:1μL 模板 DNA、0. 8μM
引物和 1 × Taq PCR MasterMix。扩增程序为:94 ℃
预变性 5 min，94 ℃变性 30 s，54 ℃退火 45s，72 ℃
延伸 90s，循环 40 次。PCR 产物用 1. 0%的琼脂糖
凝胶电泳检测，采用 NTSYSpc 软件中的 SIMQUAI
程序进行数据分析。
2. 2 华细辛挥发油成分分析
2. 2. 1 华细辛挥发油成分相对含量分析:取样前
先将固相微萃取头在气相色谱进样口250 ℃活化 2
h，进样口采用不分流模式，载气为 He，流量 1. 0
mL /min。称取阴干磨碎的华细辛根茎叶各 0. 05 g，
参照崔浪军等〔1〕的方法进行挥发性成分萃取与气
相色谱检测，采用面积归一化法计算各组分的相对
含量。
2. 2. 2 华细辛挥发油主要物质定量分析:挥发油
提取依照 2005 版中国药典〔3〕。分别称取华细辛根、
茎和叶各 40 g，磨碎后置入 500 mL 烧瓶中，再加入
400 mL蒸馏水，沸水蒸馏 3. 5 h，无水硫酸钠干燥，
保存备用。GC条件与上述一致，挥发油以 1∶ 500 溶
解于丙酮中，进样 0. 5 μL测定峰面积，进行精密度、
稳定性和重复性试验。对照品采用正十九烷烃(6
mg /mL) ，分别以 0、0. 1、0. 2、0. 3、0. 5 和 0. 7 μL 的
体积梯度进样，绘制标准曲线，采用内标法对挥发油
中的主要物质进行定量。
3 结果与分析
3. 1 华细辛遗传多样性的 ISSR分析 用 10 条引
物进行筛选中发现引物 UBC834、UBC836、UBC846、
UBC849、UBC850 和 UBC900 的扩增产物条带清晰、
多态性丰富、且试验的稳定性和重复性较好，因此，
选用该 6 条引物对 7 个供试华细辛材料的 DNA 进
行 ISSR扩增，重复试验(3 次)表明扩增结果稳定，6
条引物总共扩增出 57 条带(图 1) ，其中 89. 47%呈
多态性(表 1)。因此，以该 6 条引物的 PCR 扩增图
谱为依据进行聚类分析。
图 1 华细辛样品扩增结果
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表 1 7 个华细辛样品 ISSR扩增的
总条带数和多态性条带数
引物 总条带数 多态性条带数 多态性 /%
UBC834 8 7 87. 50
UBC836 7 6 85. 71
UBC846 11 9 81. 82
UBC849 11 11 100. 00
UBC850 14 13 92. 86
UBC900 6 5 83. 33
合计 57 51 89. 47
由图 2 可以看出，秦巴山区 7 个不同产地华细
辛样品的遗传相似系数为 0. 71 ～ 0. 86，说明该地区
华细辛个体差异较小，遗传相对稳定。聚类分析后，
可将这些华细辛种群分为两大分支:第一分支在相
似系数为 0. 73 时可分为两个亚组，第二分支在相似
系数为 0. 782 时同样可分为两个亚组。
图 2 华细辛样品的 ISSR聚类分析树形图
3. 2 华细辛挥发油成分分析
3. 2. 1 华细辛挥发油成分相对含量分析:精密度
试验:取正十九烷烃对照品溶液，重复进样 5 次，峰
面积的 RSD为 1. 5%，精密度良好。稳定性试验:精
密吸取供试品溶液 1μL，依次在制样后的 0、4、8、
16、24 h进样，其甲基丁香酚、黄樟醚和肉豆蔻醚含
量的 RSD 分别为 0. 3%、2. 0%和 3. 0%，稳定性良
好。重复性试验:将供试品溶液重复进样 5 次，其甲
基丁香酚、黄樟醚和肉豆蔻醚含量的 RSD 分别为
1. 0%、9. 0%和 3. 0%，重复性良好。
GC-MS检测结果表明，秦巴山区不同产地华细
辛所含的挥发油成分差异较大。华山华细辛根、茎
和叶中分别鉴定出 27、37 和 20 种化合物，分别占其
挥发油总含量的 98. 02%、96. 02%和 91. 18%;长安
县华细辛根、茎和叶中分别鉴定出 32、31 和 15 种化
合物，分别占其挥发油总含量的 99. 43%、99. 42%
和 95. 33%;太白县华细辛根、茎和叶中分别鉴定出
32、38 和 20 种化合物，分别占其挥发油总含量的
97. 28%、97. 97%和 97. 75%;洛南县华细辛根、茎
和叶中分别鉴定出 41、38 和 38 种化合物，分别占其
挥发油总含量的 97. 4%、98. 08%和 96. 09%;宁强
县华细辛根、茎和叶中分别鉴定出 36、34 和 13 种化
合物，分别占其挥发油总含量的 98. 61%、87. 29%
和 96. 69%;宁陕县华细辛根、茎和叶中分别鉴定出
33、27 和 20 种化合物，分别占其挥发油总含量的
98. 36%、98. 85%和 98. 65%(表 2 ～表 6)。
表 2 不同产地华细辛的相同挥发油成分(%)
部位 化学成分 分子量 A B C D E F
根 1，8-桉树脑 154 4. 09 19. 86 8. 42 4. 73 0. 12 0. 39
龙脑 154 0. 21 0. 75 0. 14 0. 14 0. 05 1. 48
4-萜烯醇 154 0. 71 1. 84 0. 46 0. 49 0. 06 0. 04
α-松油醇 154 0. 59 1. 21 0. 87 0. 56 0. 15 0. 05
黄樟醚 162 27. 49 8. 7 37. 01 40. 15 27. 13 29. 3
甲基丁香酚 178 2. 32 14. 89 0. 4 0. 51 23. 97 0. 09
r-芹子烯 204 3. 65 1. 53 3. 32 5. 47 0. 18 1. 17
环十五烷 210 29. 78 16. 87 18. 7 15. 09 7. 66 20. 45
茎 龙脑 154 0. 02 0. 71 0. 29 0. 22 0. 14 1. 22
α-松油醇 154 0. 01 1. 76 1. 27 0. 93 0. 18 0. 24
r-芹子烯 204 24. 72 1. 52 2. 24 0. 73 25. 45 2. 44
环十五烷 210 25. 41 18. 81 0. 09 22. 1 21. 94 14. 78
甲基丁香酚 178 0. 09 11. 73 0. 71 1. 22 0. 07 0. 28
十五烷 212 0. 16 1. 71 27. 41 0. 36 22. 69 18. 83
叶 黄樟醚 162 0. 14 0. 47 9. 83 11. 07 17. 45 8. 67
肉豆蔻醚 192 0. 13 1. 7 32. 73 25. 68 0. 78 46. 29
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表 3 不同产地华细辛的独特挥发油成分
部位 产地 化学成分 /分子量 /含量 /%
根 B 爱草脑 /148 /0. 32
C 二羟基苯乙酮 /152 /0. 02，1，3，5-三异丙基苯 /204 /1. 24，榄香脂素 /208 /0. 02
D 柠檬油精 /136 /0. 63，1-十五碳烯 /210 /0. 39
E 十六烷 /226 /0. 09，1-十五烷醇 /228 /0. 04，十九烷 /268 /0. 01
茎 B 己基间苯二酚 /194 /0. 22
D 1-十二醇 /186 /0. 38
A β-月桂烯 /136 /0. 28
叶 B 对-聚伞花素 /134 /0. 72，二戊烯 /136 /0. 36，环葑烯 /136 /1. 71，2，6-二甲氧基甲苯 /150 /1. 55，龙脑烯醛 /
150 /1. 17，蒲勒酮 /150 /2. 41，龙脑 /154 /0. 35，α-松油醇 /154 /0. 55，芳樟醇 /154 /0. 33，3，7 -二甲基-1-辛
醇 /154 /0. 18，丁香酚 /164 /2. 44，乙酸 2，6，6-三甲基双环［3. 1. 1］庚-2-烯-4-酯 /194 /0. 7，2 -叔丁基-1，4 -
二甲氧基苯 /194 /0. 42，十七烷 /204 /0. 48，榄香脂素 /208 /1. 00，广藿香醇 /222 /0. 53，脱氢皮质(甾)醇 /
360 /2. 8
D 石竹烯 /204 /0. 12，1-十五碳烯 /210 /0. 77
E 3，6-二甲基辛烷 /136 /0. 11，1-十二(烷)醇 /186 /0. 57
F 2-甲基戊醛 /100 /0. 07，1 -氯-2 -甲基-丁烷 /106 /0. 07，2，4 -二甲基-3 -己酮 /128 /0. 05，1，2-环己醇 /144 /
0. 1
表 4 不同产地华细辛根挥发油成分与相对含量
化学成分 相似度
含量 /%
A B C D E F
对-聚伞花素 96 0. 16 － 0. 69 0. 27 1. 29 0. 19
β-水芹烯 93 0. 18 － － － 1. 98 0. 12
β-蒎烯 93 － 0. 05 － － 0. 25 0. 67
β-月桂烯 92 － － － － 0. 65 3. 45
α-水芹烯 95 0. 23 － － 0. 87 1. 59 2. 87
异松油烯 92 0. 04 － 0. 11 － 0. 07 －
1-甲基-4-异丙基-1，4-环己二烯 95 － － 0. 22 0. 21 6. 46 －
1-甲基-3-异丙基-1，4-环己二烯 95 － － － － 0. 11 0. 81
β-顺式-罗勒烯 96 － － 0. 09 0. 11 － 0. 66
β-反式-罗勒烯 95 － － 0. 08 0. 1 1. 33 0. 51
4-(1-异丙基)-苯甲醛 86 1. 08 － 0. 44 0. 58 － 0. 31
3，5-二甲氧基甲苯 88 － 0. 46 0. 11 1. 38 － 0. 63
反-4-癸烯醛 91 － － 0. 11 0. 03 0. 13 0. 15
正十三烷 96 － 0. 21 1. 35 0. 54 － －
肉豆蔻醚 93 21. 09 18. 28 － － 0. 13 16. 5
十四烷 95 0. 59 19. 39 － － 0. 11 0. 34
α-愈创木烯 93 0. 64 0. 73 0. 55 0. 66 0. 06 －
α-绿叶烯 93 － － 0. 24 － 0. 54 －
δ-芹子烯 92 － 0. 08 0. 06 － 0. 05 －
香叶烯 86 － － 0. 09 0. 16 － 0. 42
δ-榄香烯 91 0. 6 0. 05 0. 07 0. 28 － 0. 21
石竹烯 88 － 0. 22 － 0. 74 － 0. 17
β-榄香烯 89 0. 29 － 0. 36 0. 38 0. 32 －
罗汉柏烯 88 0. 94 － － 0. 05 － 0. 17
十五烷 94 － － 21. 57 22. 2 0. 03 0. 42
广藿香醇 87 － 0. 04 － 0. 08 － 0. 02
顺-3-十六碳烯 92 － － 0. 08 － 27. 52 －
·191·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 2 期 2012 年 2 月
表 5 不同产地华细辛茎挥发油成分与相对含量
化学成分 相似度 A B C D E F
对-聚伞花素 96 － 0. 52 1. 61 － － 0. 09
β-水芹烯 93 0. 02 － 2. 41 0. 12 － 4. 41
β-蒎烯 93 0. 07 － 3. 36 0. 25 － 2. 49
β-月桂烯 92 0. 01 － 0. 61 0. 01 － 0. 94
α-水芹烯 95 0. 1 0. 39 5. 73 0. 01 － 0. 11
甲基-4-异丙基-1，4-环己二烯 95 － 8. 12 0. 87 － － 0. 64
侧柏酮 94 0. 17 － 0. 12 － 0. 03 －
β-顺式-罗勒烯 96 30. 06 0. 27 － － － 0. 32
β-反式-罗勒烯 95 0. 14 0. 81 0. 09 － － 0. 61
柠檬油精 91 0. 04 0. 02 0. 05 － －
对丙基茴香醚 96 0. 06 0. 43 0. 37 － － －
5-异丙基二甲苯 94 0. 11 0. 33 0. 16 － 0. 29 －
1，8-桉树脑 96 0. 67 0. 07 12. 22 1. 16 － 11. 41
4-萜烯醇 88 0. 01 0. 32 1. 54 － 0. 18 1. 33
反-4-癸烯醛 91 0. 01 0. 18 0. 11 － － 0. 23
丁香酚 92 0. 06 0. 81 0. 21 0. 03 0. 47 －
三甲氧基甲苯 96 － － 0. 79 － － 14. 47
十三烷 96 0. 14 0. 11 － 2. 65 0. 6 －
肉豆蔻醚 93 12. 31 － 14. 75 31. 22 22. 51 12. 34
十四烷 95 0. 15 0. 33 0. 78 － 0. 26 －
δ-芹子烯 92 0. 15 0. 1 － － 0. 18 －
白菖油萜 88 0. 02 0. 14 － － 1. 58 0. 15
α-愈创木烯 93 0. 08 0. 21 0. 09 － 0. 27 0. 04
β-愈创木烯 85 0. 13 － － 0. 44 0. 58 0. 54
石竹烯 88 0. 05 0. 39 0. 02 0. 1 0. 07 －
可巴烯 86 0. 03 0. 12 0. 55 0. 05 0. 74 －
β-榄香烯 89 0. 02 － 0. 11 0. 05 － 0. 09
δ-榄香烯 91 0. 05 － 0. 03 － 0. 08 0. 03
罗汉柏烯 88 － 0. 21 － 0. 06 0. 06 0. 21
衣兰烯 88 0. 63 － 0. 03 0. 09 － 0. 48
α-檀香脑 86 － 1. 94 － 0. 07 － －
表 6 不同产地华细辛叶挥发油成分与相对含量
化学成分 相似度 A B C D E F
β-蒎烯 93 0. 26 － 1. 21 － － 1. 04
侧柏烯 94 0. 25 － 0. 22 － － 0. 26
莰烯 92 － 0. 2 0. 61 － － 1. 01
1，8-桉树脑 96 0. 07 － 0. 32 0. 23 0. 35 0. 23
4 -环己基-2-丁酮 89 － － 0. 78 0. 38 3. 65 1. 09
甲基丁香酚 94 － 0. 35 1. 34 0. 17 0. 18 23. 55.
醋酸冰片酯 91 0. 11 － － 0. 92 － 33. 67
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续表 6
化学成分 相似度 A B C D E F
十四烷 95 0. 87 － 0. 69 0. 19 0. 15 －
花侧柏烯 95 43. 55 － － － － 0. 36
α-金合欢烯 91 － 0. 34 8. 47 － 6. 06 －
δ-芹子烯 93 － 42. 33 20，23 － 27. 52 0. 67
反式-β-金合欢烯 92 0. 19 － － － － 1. 46
香叶烯 92 0. 04 0. 21 0. 89 － 0. 24 2. 73
α-绿叶烯 86 － 0. 39 － － － 0. 52
十六烷 93 0. 21 － 0. 37 0. 42 0. 32 －
β-愈创木烯 91 0. 07 － － － － 0. 43
对叔丁基苯甲酸乙酯 86 － － 0. 08 － － 4. 43
β-榄香烯 88 15. 58 － 5. 74 － － 3. 74
r-芹子烯 89 － － 0. 05 0. 12 － 0. 33
十五烷 92 29. 43 － － － － 0. 22
α-没药醇 94 － － － 1. 57 3. 87 0. 31
T-杜松醇 88 － － 0. 31 43. 57 － －
Davana ether 93 － － 39. 6 0. 11 － －
十八烷 94 － － － 9. 73 0. 18 －
秦巴山区不同产地华细辛含有一些相同的组
分。除根中共有 4-萜烯醇和环十五烷外，不同产地
华细辛的根、茎中均检测到甲基丁香酚、黄樟醚、
1，8-桉树脑、龙脑、十五烷、α-松油醇和 r-芹子烯，而
叶中共有的成分是肉豆蔻醚和黄樟醚。产地不同，
华细辛相同器官中主要成分的含量也有一定差别，
如肉豆蔻醚在宁陕华细辛叶中的含量占其总挥发油
的 46. 29%，而在华山华细辛叶中的含量仅占
0. 13%(表 6)。
由表 3 可以看出，不同产地的华细辛，其根、茎、
叶等特定器官中均含有一些独特成分，且有些成分
仅存在于部分产地的华细辛中，与华细辛遗传多样
性的 ISSR 分析结果一致的是:ISSR 结果聚类分析
表明，不同产地的华细辛中，遗传距离较近的种群含
有一些相同的挥发性成分，而这些成分在遗传距离
较远的种群中未检测到，如根中的 4-(1-异丙基)-苯
甲醛、可巴烯、十四烷和十一烷，茎中的 β-水芹烯、β-
蒎烯、β-月桂烯、β-榄香烯衣兰烯、3-蒈烯和莰烯，叶
中的花侧柏烯、反式-β-金合欢烯、β-愈创木烯、十五
烷、α-甲基亚麻酸和生物烯丙菊酯等。
3. 2. 2 华细辛挥发油主要物质定量分析:黄樟醚、
甲基丁香酚和肉豆蔻醚是近年来受到高度关注的挥
表 7 不同产地华细辛 3 种主要成分的含量测定
部位 化学成分
含量 /(mg /mL)
A B C D E F
根 黄樟醚 59. 68 ± 1. 71 18. 87 ± 2. 21 80. 28 ± 2. 62 87. 09 ± 1. 62 58. 85 ± 2. 21 63. 56 ± 2. 00
甲基丁香酚 0. 21 ± 0. 09 1. 15 ± 0. 01 0. 03 ± 0. 02 0. 04 ± 0. 01 1. 84 ± 0. 03 0. 01 ± 0. 02
肉豆蔻醚 42. 99 ± 3. 11 33. 60 ± 5. 21 － － 37. 22 ± 3. 21 0. 27 ± 0. 11
茎 黄樟醚 0. 11 ± 0. 11 20. 63 ± 1. 76 39. 15 ± 3. 51 78. 59 ± 3. 82 0. 35 ± 0. 21 70. 56 ± 2. 56
甲基丁香酚 0. 01 ± 0. 01 0. 90 ± 0. 02 0. 06 ± 0. 01 0. 09 ± 0. 05 0. 01 ± 0. 03 0. 022 ± 0. 02
肉豆蔻醚 25. 09 ± 3. 11 25. 13 ± 3. 14 30. 03 ± 2. 65 63. 57 ± 3. 83 － 45. 832 ± 2. 43
叶 黄樟醚 0. 30 ± 0. 11 1. 02 ± 0. 51 21. 32 ± 3. 21 24. 01 ± 2. 29 37. 85 ± 3. 03 18. 806 ± 3. 67
甲基丁香酚 － 1. 81 ± 0. 41 0. 10 ± 0. 01 0. 01 ± 0. 21 0. 02 ± 0. 01 0. 14 ± 0. 02
肉豆蔻醚 0. 27 ± 0. 01 3. 46 ± 0. 23 66. 64 ± 2. 34 52. 29 ± 2. 87 1. 59 ± 0. 12 94. 250 ± 4. 02
·391·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 2 期 2012 年 2 月
发油成分。依照 2005 版中国药典提取不同产地华
细辛的挥发油后，对其中这 3 种主要成分进行定量
分析，结果显示不同产地华细辛挥发油中 3 种物质
的含量与面积归一法测定的含量基本一致(表 7)。
除太白和洛南产华细辛根部和长安产华细辛茎中没
有检测到肉豆蔻醚外，6 个产地野生华细辛根、茎、
叶中黄樟醚和肉豆蔻醚含量差异均较大，而甲基丁
香酚含量均较低，且在华山产华细辛根部未检测到。
4 讨论
据秦岭植物志记载，华细辛主要分布于秦岭南
北坡海拔 1000 ～ 2000 m 间的山坡林下〔8〕。而本研
究在秦巴山区调查发现，该地区目前野生华细辛种
群数量异常稀少，只在海拔 1600 ～ 2300 m有零星分
布，而且种群内个体数量十分有限。加之目前华细
辛种子繁殖困难较大，秦巴山区尚没有规模化栽培
华细辛，因此，华细辛资源的保护迫在眉睫。
挥发油作为细辛的次生代谢物，在 2005 年版药
典就作为细辛质量控制指标〔3〕。本研究结果表明，
大巴山地区、秦岭南坡和秦岭北坡的华细辛挥发油
成分差异较大，除共同含有一些相同的组分外，不同
产地的华细辛其根茎叶特定器官均含有一些独特成
分。此外，有些成分如 T-杜松醇在长安产华细辛的
叶中高达 43. 57%，在太白产华细辛的叶中仅为
0. 31%，而在其他产地的华细辛中却检测不到。华
细辛的诸多挥发油成分中，黄樟醚、甲基丁香酚和肉
豆蔻醚的药理学活性受到高度关注，同时其副作用
也有陆续的报道，如黄樟醚为广谱抗霉菌成分，但同
时有较大毒性和不良反应〔5〕，高剂量的甲基丁香酚
能引起肝癌〔6〕，肉豆蔻醚在抑制脂多糖引起的肝损
伤的同时亦能致幻等副作用〔9〕。本研究用水蒸汽
蒸馏法提取不同产地华细辛的挥发油后，定量分析
结果显示 6 个产地野生华细辛根茎叶中该 3 种成分
的含量差异较大，其中肉豆蔻醚和甲基丁香酚在部
分产地华细辛的一些器官中未检测到。结果提示中
医在华细辛入药时应有产地选择性，这样既能保证
药效，又可保证毒性成分的含量在允许范围内。
从气候类型来看，华山(南暖温带关中东部半
干旱气候区)、宁强县(北亚热带大巴山地过湿润气
候区)、长安县(南暖温带关中平原半湿润气候区)、
宁陕县和太白(南暖温带秦岭山地湿润气候区)、洛
南县(南暖温带商洛丹江河谷半湿润气候区)有一
定的差异，而 ISSR 结果聚类分析表明，秦巴山区的
华细辛遗传多样性与地理距离和气候关系不密切。
但秦巴山区的华细辛一些共有组分如黄樟醚，以及
只在遗传距离较近的华细辛根茎叶特定器官中(如
太白县和洛南县华细辛叶特有的 T-杜松醇)检测
到，而在遗传距离较远的华细辛中未检测到的成分
的积累可能主要与华细辛的遗传特性密切相关，这
些成分含量的高低可能主要与环境因素密切相关，
这就提示我们日后对华细辛进行遗传育种时可将这
些次生代谢物作为参照指标。
参 考 文 献
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·491· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 2 期 2012 年 2 月