全 文 ：第 21 卷第 3期(第 1页)
2004年 　　 　　 湖北民族学院学报·医学版Journal of Hubei Institute for Nationalities·Medical Edition　　　 　　Vol.21 No.3 P.12004
作者简介　刘家兰(1952-), 男 ,湖北恩施人 , 高级实验师 ,主要研究方向:实验药理学。
·民族医药·
竹节人参提取物对异丙肾上腺素致大鼠
急性心肌缺血损伤的保护作用
刘家兰 ,李德清 ,段先宇
湖北民族学院医学院实验中心(湖北 恩施 445000)
【摘要】目的　研究竹节人参提取物对异丙肾上腺素(ISO)致大鼠急性心肌缺血的保护作用及机制。方法　采用大
剂量 ISO 皮下注射(SC)诱导产生大鼠急性心肌缺血模型(ISO 30 mg/ kg , 每日一次 ,连续 2 d), 实验大鼠随机分为正
常组 、ISO 模型组 、阳性对照组 、竹节人参提取物(0.15 , 0.3 g/ kg)给药组 , 测定心脏系数和血清中乳酸脱氢酶(LDH)、
磷酸肌酸激酶(CK)和丙二醛(MDA)含量 , 观察心肌组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、Na+-K+-ATP 酶和
Ca2+-Mg2+-ATP 酶活性。结果　竹节人参提取物能显著降低血清中 CK 和 LDH 的释放;也能显著降低血清和心
脏匀浆中MDA 水平 ,心脏系数显示对心肌水肿有明显的抑制作用;保护心肌 GSH-Px ;Na+-K+-ATP酶和 Ca2+
-Mg2+-ATP 酶活性。结论　竹节人参提取物对 ISO所致大鼠急性心肌缺血有显著的保护作用。其机制与抗自
由基 、抑制脂质过氧化反应有关。
【关键词】竹节人参;异丙肾上腺素;心肌缺血;保护作用
【中图分类号】R285.5　　【文献标识码】A　　【文章编号】1008-8164(2004)03-0013-03
Protective Effect of Panax Japonicus C.A.Meyer on Isoproterenol-induced
Myocardial Injury in Rats
LIU Jia-lan , LI De-qing , DUAN Xian-yu
(Experimental Center ,Medical College of Hubei Institute for Nationalities ,Enshi 445000 , China)
【Abstract】Objective To study the protective effect of Panax japonicus C.A.Meyer on myocardial is-
chemia induced by isoproterenol(ISO).Methods Myocardial ischemia was induced dy subcutaneous
injection of ISO(30 mg/kg for two days ,once a day).The experimental animals were randomly di-
vided into the normal group , ISO group , positive control group and two Panax japonicus C.A.Meyer
groups(0.15 , 0.3 g/kg).Cardiac indexes were examined.The level of LDH , CK , MDA in serum
were measured.The activity of MDA , GSH-Px and the ATPase positive of heart tissue were as-
sayed by colorimetric analysis.Results Compared with the model group ,Panax japonicus C.A.Meyer
can significantly reduce the cardiac indexes ,obviously decrease the level of MDA , LDH and CK in the
serum.Panax japonicus C.A.Meyer can significantly increase the activities of Na+-K+-ATPase;
Ca
2+-Mg2+-ATPase;GSH-Px.Conclusion Panax japonicus C.A.Meyer Could alleviate the acute
myocardial ischemia induced by isoproterenol-induced in rats.
【Key words】Panax japonicus C.A.Meyer;isoproterenol(ISO)ISO;myocardial ischemia;proteetive
effcct
　　竹节人参(Panax japonicus C.A.Meyer)系五加
科人参属植物 ,为常用中药 。有研究表明竹节人参
具有镇静 、解痉[ 1] ,扩张冠脉 、降低心肌氧耗[ 2]等作
用 。实验证明竹节人参提取物对大鼠和小鼠脑缺血
再灌注损伤具有保护作用[ 3] , 但对异丙肾上腺素
(ISO)诱导的大鼠心肌缺血损伤的作用未见报道。
我们以大剂量 ISO诱导的大鼠心肌缺血损伤为模
型 ,以血清 LDH、CK 、MDA ,心脏匀浆MDA含量 、GSH
-Px 、Na+-K+-ATP 酶和 Ca2+-Mg2+-ATP 酶活
性为指标检测心肌损害程度及氧自由基的产生和体
内抗氧化系统的变化;观察竹节人参提取物对大鼠
心肌缺血损伤的保护作用 。并对其作用机理作初步
探讨 。
1　材料与方法
1.1　药品及试剂　竹节人参提取物:竹节人参由湖
北省中药材研究所提供。先将竹节人参粉加水蒸
馏 ,收集馏液(1∶1);继用 95%乙醇回流提取三次得
醇提物(1∶1)。两液合并 ,垂熔漏斗过滤 ,使成 1∶1
浓度。调 pH 至中性 , 冷藏备用。异丙肾上腺素
(isoproterenol , ISO)为 Sigma 公司出品 。考马斯亮蓝
G-250为 Fluka出品 。Tris为 B.M进口分装。复方
丹参注射液(021006)武汉中联制药厂产品 。ATPase
测定试剂盒 、MDA试剂盒由南京建成生物工程研究
所提供。
1.2　仪器　分析天平 ,上海天平仪器厂;751-GW
分光光度计 ,惠普上海分析仪器有限公司;XW80-A
旋涡混合器 ,GL-16G高速冷冻离心机 ,上海安亭科
学仪器厂 。
1.3　动物　Spraque-Dawley 大鼠 50只 ,雌雄各半 ,
体重 220 ～ 250 g ,由湖北省医学科学院动物饲养中
心提供。
1.4　方法　参照 Rona等的方法制备 ISO 诱导心肌
缺血模型及给药 。大鼠随机分为 5组 ,给药组分别
以竹节人参提取物 0.15 , 0.3 g/kg 静脉注射 ,
1次/d ,连续 3 d ,对照组静脉注射等量生理盐水 ,阳
性对照组给予复方丹参注射液 5 g/kg ,静脉注射 2
次/d ,连续 3 d。除对照组以外 ,其余各组均皮下注
射 ISO(每次 30mg/kg ,每日1次 ,连续注射2 d)。全
部动物在末次皮下注射 ISO后 24 h ,摘眼球取血 ,分
离血清 , -20℃保存待测 LDH 、CK 、MDA 含量 。脱颈
椎处死动物 ,迅速取出心脏 ,以冰生理盐水洗去残留
血液 ,除去大血管 、结缔组织 ,滤纸吸干后称重 ,计算
心脏系数(心脏重/体重)。将心脏剪碎 ,以 10倍量
Tris-HCI(pH7.4)缓冲液在冰浴下制成 10%的心脏
匀浆 ,于 4℃,1 000 r/min离心 10 min ,弃沉淀 ,取上
清检测心肌组织 GSH -Px 、Na+-K+-ATP 酶和
Ca2+-Mg2+-ATP 酶活性。考马斯亮蓝法测定蛋
白含量 ,以牛血清白蛋白为标准 。
1.5　统计方法　统计资料数据均以 x ±s表示 ,组
间显著性差异用 t 检验 。
2　结果
2.1　竹节人参提取物对缺血大鼠心脏系数的影响
与正常组比较 ,模型组心脏系数升高了 36.21%(P
<0.01);复方丹参组心脏系数比模型组下降
14.92%(P<0.05);竹节人参提取物 0.15 ,0.3 g/kg
给药心脏系数分别比模型组下降 14.52%, 16.56%
(P<0.05)。
2.2　竹节人参提取物对大鼠血清中MDA 、LDH、CK
的影响　与正常组比较 ,模型组血清 LDH 、CK 、MDA
明显升高;复方丹参组与模型组比较 ,LDH 、CK 、MDA
明显降低。竹节人参提取物 0.15 ,0.3 g/kg 给药组 ,
各项指标与模型组比较 , 均明显降低(P <0.01)。
结果见表1
表 1　竹节人参提取物对缺血大鼠心肌血浆中MDA 、LDH 、CK水平及对大鼠心脏系数的影响(x±s , n=10)
组　　别 剂量/(g·kg-1) MDA/(nmol·ml-1) LDH/(U·L-1) CK/(U·L-1) 心脏系数
正　　常 - 5.89±0.56 33.28±6.27 81.65±16.22 3.59±1.56
模　　型 - 8.93±1.26## 43.24±2.65## 136.23±26.45## 4.89±0.18##
竹节人参 0.15 6.86±0.23＊＊ 37.22±3.21＊＊ 92.23±18.28＊＊ 4.18±1.06＊＊
0.3 6.40±0.31＊＊ 36.24±25.6＊＊ 89.38±19.62＊＊ 4.08±0.82＊＊
丹　　参 5 6.32±0.48＊＊ 36.49±4.21＊＊ 90.15±18.12＊＊ 4.16±0.32＊＊
　　与正常组比较:##P<0.01;与模型组比较:＊＊P<0.01
2.3　竹节人参提取物对缺血大鼠心肌匀浆 MDA 、
GSH-Px、Na+-K+-ATPase和 Ca2+Mg2+-ATPase
的影响　与正常组比较 ,模型组心脏组织 MDA含量
明显升高(P <0.01 );而GSH-Px 以及 Na+-K+
-ATPase和 Ca2+-Mg2+-ATPase的活性则明显下
降(P <0.01 );竹节人参提取物 0.15 , 0.3 g/kg 给
药组对 ISO导致的心肌组织 MDA 含量升高及GSH
-Px;Na+-K+-ATPase 和 Ca2+-Mg2+-ATPase
活性下降均有明显的保护作用(P <0.01),见表 2。
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表 2　竹节人参提取物对 ISO所致心肌缺血大鼠心肌匀浆中MDA含量及
GSH-Px;Na+-K+-ATPase 和Ca2+-Mg2+-ATPase 活性的影响(x ±s , n=10)
组　　别 剂量/(g·kg-1) MDA/(nmol·ml-1) Na+-K+-ATPase/(U·mg-1) Ca
2+-Mg2+-ATPase/(U·mg-1)
GSH-Px/(U·mg-1)
正　　常 - 3.26±0.26 1.58±0.19 1.58±0.23 24.18±3.32
模　　型 - 4.72±0.22## 0.61±0.42## 0.65±0.32## 11.45±2.21##
竹节人参 0.15 3.56±0.24＊＊ 1.12±0.18＊＊ 1.12±0.31＊＊ 19.82±2.63＊＊
0.3 3.44±0.32＊＊ 1.11±0.26＊＊ 1.13±0.26＊＊ 19.86±1.89＊＊
丹　　参 5 3.46±0.28＊＊ 1.09±0.28＊＊ 1.09±0.29＊＊ 19.12±3.62＊＊
　　与正常组比较:##P<0.01;与模型组比较:＊＊P<0.01
3　讨论
研究表明 ,儿茶酚胺的大量产生与释放引起的
心肌损伤是心肌缺血 、心衰等病理过程的重要发病
因素之一。 ISO为 β 受体激动剂 ,大剂量连续应用
导致的清醒大鼠心肌损伤能模拟人类心肌缺血性损
伤[ 4] 。其心肌代谢改变及组织病理学变化均与动脉
粥样硬化大鼠和人类自然发生的急性心肌梗死十分
相似。其损伤机制多认为是自由基损伤。研究表
明 ,炎症 、组织缺血损伤等均与活性氧引发的脂质过
氧化密切相关[ 5] 。在心肌缺血时 ,儿茶酚胺在缺血
区大量蓄积 ,其代谢过程中可产生大量的氧自由基;
另外 ISO可自动氧化并在氧化过程中产生大量的超
氧阴离子和过氧化氢 。这些活性氧导致心肌细胞膜
发生脂质过氧化而引起损伤[ 6] 。
活性氧自由基对机体产生一系列有害作用 ,如
攻击不饱和脂肪酸可引起脂质过氧化 ,导致生物膜
结构和功能的改变;损伤蛋白质的巯基和氨基使蛋
白质变性 、交联 ,使酶的活性丧失;损伤 DNA可导致
细胞突变。我们已有实验证明 ,竹节人参提取物具
有抗自由基 、抑制脂质过氧化反应的作用。在本实
验中我们观察到模型组血清 LDH 、CK 活性 ,心肌
MDA含量和心脏系数等明显升高 ,与正常组比较具
有显著性差异 ,说明 ISO导致的心肌缺血样损伤而
产生的氧自由基使心肌细胞膜脂质过氧化增加。同
时观察到心肌中 GSH -Px;Na+-K+-ATPase 和
Ca2+-Mg2+-ATPase活性降低 ,这说明 ISO导致的
心肌损伤使得心肌抗氧化系统清除自由基的能力下
降 ,心肌能量代谢发生障碍。而竹节人参提取物明
显降低血清中 LDH 、CK 、MDA含量;同时提高Na+-
K+-ATPase 和 Ca2+-Mg2+-ATPase 的活性 ,提示
竹节人参提取物通过减少脂质过氧化而维持细胞膜
的完整性。同时竹节人参提取物提高心肌组织中
GSH-Px 的活性 ,从而提高心肌细胞抗氧化损伤的
能力 。通过本实验 ,我们观察到竹节人参提取物通
过抗自由基 、抑制脂质过氧化 、稳定细胞膜 、提高心
肌组织中GSH-Px的活性等多种途径对 ISO导致的
心肌损伤起到良好的保护作用。
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[收稿日期 2004-06-10]
15第 3期　　　　　　　　　　　　　　湖北民族学院学报·医学版