全 文 ：中 国 临 床 药 理 学 杂 志
第 28 卷 第 7 期 2012 年 7 月(总第 153 期)
基础研究
Fundamental Study蝙蝠葛酚性碱对心肌缺血及缺血再灌注损伤的
保护作用
Protective effects of phenolic alkaloids of Menispermum Dauricum on ischemia and
ischemia － reperfusion injury
收稿日期:2011 － 06 － 27
修回日期:2012 － 04 － 20
作者简介:黎培员(1976 － ) ，男，博士，主治医
师，主要从事消化内科技术和临床研
究
通信作者:杨晓燕，讲师
Tel:(027)83691785
E － mail:tjyangxy@ mail. hust. edu. cn
黎培员1a，李英茜1b，杨晓燕1b，
龚培力1b
(1．华中科技大学 同济医学院，a. 附属同济医
院 消化内科;b. 药理系，武汉 430030)
LI Pei － yuan1a，LI Ying － qian1b，
YANG Xiao － yan1b，GONG Pei － li1b
(1 . a. Department of Gastroenterology，
Tongji Hospita;b. Department of Phar-
macology，Tongji Medical College of
Huazhong University of Science and
Technology，Wuhan 430030，China)
摘要:目的 研究蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对心肌缺血及缺血再灌注损伤的作用。
方法 用大鼠皮下注射异丙肾上腺素 85 mg·kg －1造成心肌缺血模型，于造模
前 30 min灌胃给予生理盐水、PAMD(7. 5，15 或 30 mg·kg －1)、地尔硫 10 mg
·kg －1或地奥心血康 150 mg·kg －1，测定心肌缺血后乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸
激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量及病理学改变。离体
大鼠心脏缺血 30 min 再灌注 40 min，分别给予 PAMD(1，10 或 100 mg·L －1)或
地奥心血康 100 mg·kg －1，测定心肌缺血再灌注后左室收缩压(LVSP)、左室舒
张末压(LVEDP)和左室压最大变化速率(± dp /dtmax)、冠脉流量，测定心肌 SOD
活性和 MDA含量。结果 PAMD显著降低缺血所致的 LDH、CK 和 MDA 升高，
提高 SOD活性，减轻心肌病理损伤。PAMD促进缺血再灌注末 LVSP、LVEDP和
± dp /dtmax等恢复，增加冠脉流量和 SOD 活性并降低 MDA 含量。结论 PAMD
对心肌缺血及缺血再灌注损伤有保护作用，其机制可能与其抗氧化及改善心肌
代谢有关。
关键词:蝙蝠葛酚性碱;心肌缺血;异丙肾上腺素;缺血再灌注;氧自由基
中图分类号:R285. 5;R972. 9 文献标识码:A
文章编号:1001 － 6821(2012)07 － 0518 － 04
Abstract:Objective To investigate the effects of phenolic alkaloids of
Menispermum Dauricum (PAMD)on myocardial ischemia and ischemia
－ repurfusion in rats. Methods Myocardial ischemia in SD rats were
induced by isoprenaline injection (isoprenaline，85 mg·kg －1)． Saline，
PAMD(7. 5，15 or 30 mg·kg －1) ，diltiazem 10 mg·kg －1 or Diaoxinxue-
kang (DAXXK)150 mg·kg －1 were administrated intragastriclly at 30
min before isoprenaline injection. The level of lactate dehydrogenase
(LDH) ，creatine kinase(CK) ，super oxide dismutase(SOD) ，and ma-
londialdehyde (MDA)were measured and myocardial pathological grade
were evaluated. The langendorff perfused rat hearts were subjected to 30
min of global ischemia following by 40 min reperfusion. PAMD(1，10 or
100 mg·L －1)or DAXXK 100 mg·L －1 were added into the modified
KH solution. The changes of left ventricular systolic pressure (LVSP) ，
left ventricular end dilated pressure (LVEDP) ，maximum rising and fail-
ing rate of left ventricular pressure (± dp /dtmax) ，the flow of coronary
artery，SOD and MDA were measured. Results In myocardial ischemia
rats，PAMD obviously decreased the level of LDH，CK and MDA in ser-
um，increased the activity of SOD and improved the pathological grade of
myocardial lesion. After subjected to ischemia － reperfusion，PAMD
815
DOI:10.13699/j.cnki.1001-6821.2012.07.002
Chin J Clin Pharmacol
Vol. 28 No. 7 July 2012(Serial No. 153)
improved the recovery of the index of contraction and stretch，such as LVSP，LVEDP and ± dp /dtmax. It also increased
the flow of coronary artery and the activity of SOD，as well as decreased the content of MDA in myocardium. Conclu-
sion PAMD can attenuate ischemia and ischemia － reperfusion injury in rat hearts.
Key words:phenolic alkaloids of Menispermum Dauricum;myocardial ischemia;isoprenaline;ischemia － reperfusion;
oxygen free radical
蝙蝠葛酚性碱(phenolic alkaloids of Menispermum
Dauricum，PAMD)是从中药蝙蝠葛根茎中提取的多种
脂溶性生物碱的混合物。研究表明［1 － 3］，AMD对犬冠
脉结扎所致的心肌梗死具有保护作用，并可改善心肌
缺血时血流动力学紊乱，对缺血再灌注时心肌顿抑也
有保护作用。蝙蝠葛生药中 PAMD含量较高，提取工
艺较简单。为此本实验观察 PAMD 心肌缺血再灌注
的保护作用并探讨其可能机制。
材料和方法
1 材料
药品和试剂 PAMD 粉剂，本室提取，纯度 ＞
95%。地尔硫 ，天津田边制药有限公司提供;地奥
心血康原料药，成都地奥公司提供;异丙肾上腺素
(ISO) ，购自 Sigma公司。乳酸脱氢酶、肌酸激酶试剂
盒，北京中生生物工程部技术公司生产;超氧化物歧
化酶及丙二醛试剂盒均，南京聚力生物医学工程研究
所生产。
动物 健康 SD大鼠 130 只，体重 250 ～ 300 g，华
中科技大学同济医学院实验动物中心提供。
仪器 8000 全自动生化分析仪，日本岛津产品。
2 模型制备与观察指标
2. 1 异丙肾上腺素诱发心肌缺血模型与观察指标
参照文献方法［4］，皮下注射 ISO 85 mg·kg －1建
立心肌损伤模型。
健康 SD大鼠 70 只，雌雄各半，体重(266 ± 12)g，
随机分为 7组，注射 ISO前，灌胃给药。①ISO组:给予
等量生理盐水。②③④PAMD保护组(7. 5，15，30 mg·
kg －1)。⑤地尔硫 保护组(10 mg·kg －1)。⑥地奥心
血康保护组(150 mg·kg －1)。⑦NS 组(等量生理盐
水)。
于皮下注射 ISO 后 24 h 取血清，测定 LDH、CK、
SOD活性及 MDA 含量。左室前壁取材行 HE 染色，
参照文献［5］评定病理损伤程度。
2. 2 离体大鼠心脏缺血再灌注模型与观察指标
制备 Langendorff 灌流心脏，以平衡改良 KH 液，
恒温恒压灌流，稳定 15 min 记录缺血前各指标后，缺
血 30 min再灌注 40 min。
健康雄性 SD大鼠 60只，体重(300 ±10)g，随机分
成 6组。①缺血再灌注模型(IR)组:缺血 30 min 后再
灌注 40 min。②正常对照组:改良 KH 液灌注 70 min。
③④⑤PAMD 保护组:改良 KH 液内分别加 PAMD 1，
10，100 mg·L －1，余同①组。⑥地奥心血康保护组:改
良 KH液内，加 DAXXK 100 mg·L －1，余同①组。
记录预灌末及再灌注 30 min 时的左室收缩压
(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)及左室压最大变化
速率(± dp /dtmax)。收集缺血前 5 min 及再灌注 1，3，
5，10，15，20，30 min 冠脉流出液，以测定冠脉流量。
心脏灌注末，剪取心尖组织约 0. 2 g，制成 10%匀浆，
测定 SOD活性和 MDA含量。
3 数据处理
用 SPSS12. 0 进行统计分析，以 mean ± SD 表示，
用单因素方差分析进行组间比较，两两间比较以 SNK
法进行 q检验;P ＜ 0. 05 表示差异有统计学意义。
结 果
1 PAMD对异丙肾上腺素诱发心肌缺血的作用
PAMD 对血清 LDH、CK 的影响 ISO 组血清
LDH、CK活性明显升高。PAMD、地尔硫 和地奥心
血康均能显著降低 LDH、CK 活性，且 PAMD30 mg·
kg －1的作用更强，其作用优于 PAMD 7. 5 mg·kg －1和
地奥心血康组，如图 1A、B。
对心肌病理学分级的影响 ISO组的病理损伤较
重，包括心肌细胞灶性或融合成片的变性坏死，间质
充血水肿，炎症细胞浸润。PAMD 显著减轻心肌病变
程度，其作用与地尔硫 、地奥心血康相当。
PAMD对血清 SOD 活性、MDA 含量的影响
ISO组血清 SOD活性明显降低，MDA 含量明显升高。
PAMD(15，30 mg·kg －1)、地尔硫 、地奥心血康均能
显著提高 SOD活性，降低 MDA含量;PAMD的作用与
地尔硫 及地奥心血康相当，如图 1C、D。
2 PAMD对离体大鼠心脏缺血再灌注损伤的作用
LVSP、LVEDP 及 ± dp /dtmax变化 缺血前各组
间 LVSP、LVEDP及 ± dp /dtmax无明显差异。再灌注 30
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min后，IR 组 LVSP 及 ± dp /dtmax明显降低，LVEDP 明
显升高。PAMD 和地奥心血康均能促进 LVSP、LV-
EDP及 ± dp /dtmax恢复。如图 2A、B、C。
冠脉流量变化 再灌注 1 min 时，各组冠脉流量
明显减小。PAMD 10，100 mg·L －1组及地奥心血康
100 mg· L －1组能明显增加冠脉流量。在 3 min，
PAMD作用较地奥心血康强，如图 2D所示。
心肌 SOD、MDA 含量变化 IR 组心肌 SOD 活
性降低，MDA 含量增高。给予 PAMD(10，100 mg·
L －1)或地奥心血康 100 mg·L －1，均可增强心肌 SOD
活性，降低 MDA含量，如图 3 所示。
讨 论
本实验结果显示，PAMD 明显减轻 ISO 所致的心
肌病理损伤程度，表明 PAMD对心肌缺血损伤有保护
作用。PAMD促进缺血再灌注后，LVSP、LVEDP 及 ±
dp /dtmax等心脏舒缩功能指标恢复，同时增加冠脉流
量，表明 PAMD 促进心肌舒缩功能恢复，与其改善心
肌血流灌注有关。心肌缺血和 /或再灌注时，均可促
进氧自由基生成而引起和加重心肌损伤。生理条件
下，氧自由基可被 SOD 等清除;但当其生成超过清除
时，可引起膜磷脂和蛋白质氧化及 DNA 损伤，脂质过
氧化产物 MDA，可使细胞膜流动性和通透性进一步发
生变化，最终导致心肌细胞死亡［5］。PAMD 在改善心
肌缺血时血清酶学指标变化的同时，还可降低 MDA
含量，提高 SOD活性;在离体大鼠心肌缺血再灌注模
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型中，PAMD 也有类似作用，表明 PAMD 可减轻细
胞膜损伤程度，提高机体清除氧自由基的能力，增
强机体抗脂质过氧化能力从而保护缺血心肌。表
明 PAMD 对心肌缺血及缺血再灌注损伤均有显著
保护作用，可能与其改善心肌代谢及抑制氧自由基
损伤有关。
参考文献:
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·基础研究·
(上接第 517 页)
可延迟氯化钡诱发大鼠心律失常;但可被 M3受
体阻滞剂(4 － DAMP)逆转，说明匹鲁卡品可以激动
M3受体而产生抗心律失常作用，见表 2。
表 2 比较匹罗卡品(0. 2 mg·kg －1)、维拉帕米(5 mg·kg －1)
与 4 － DAMP(0. 12 μg·kg －1)对氯化钡(0. 4 mg·kg －1)诱发
大鼠心律失常的保护作用
Tabie 2 Comparison the prospective effects of pilocarpine (0. 2
mg·kg －1) ，verapamil (5 mg·kg －1)and 4 － DAMP(0. 12 μg·
kg －1)on the arrhythmias rats induced by BaCl2(0. 4 mg·kg
－1)
Group
Time of occurrence
(s)
Time of duration
(min)
BaCI2 4 ± 1 35 ± 8
Pilocarpine 4 ± 3＊＊ 23 ± 8＊＊
4 － DAMP 4 ± 3## 33 ± 6##
Verapamil 12 ± 4＊＊ 27 ± 12＊＊
n = 8，means ± SD;Compared with the BaCI2，＊＊ P ＜ 0. 01;Compared
with the pilocarpine，##P ＜ 0. 01
讨 论
本实验结果表明，匹罗卡品可明显推迟室性心
律失常的发生、缩短室性心律失常的持续时间，并
延长动物存活时间。匹罗卡品对抗心律失常的作
用，可被 4 － DAMP 完全拮抗。这说明匹罗卡品通
过激活 Wistar 大鼠心肌 M3受体而产生抗心律失常
作用。
参考文献:
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