全 文 ：剪刀股总酚酸提取条件的优化及对小鼠缺血心肌的
保护作用
＊
王 威1，许丽娟2*
(1．张家口市第三医院，河北 张家口 075000;2．张家口市第四医院，河北 张家口 075000)
［摘 要］目的:优化剪刀股总酚酸的提取方法，观察剪刀股总酚酸对小鼠缺血心肌的保护作用。方法:通过
正交试验优化剪刀股总酚酸的提取条件，并采用高效液相色谱法测定没食子酸、原儿茶酸、绿原酸的含量;选取
昆明种小鼠 60 只，随机分为正常对照组，模型对照组，阳性对照组，剪刀股总酚酸高、中、低剂量给药组共 6 组，
采用异丙肾上腺素法制备心肌缺血小鼠模型，测定血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶 MB(CK-MB)的活性及
心肌中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量，并通过 Nagar-Olsen染色观察小鼠心肌缺血损伤
程度。结果:剪刀股总酚酸最佳提取条件为提取温度为 70 ℃，液料比为 10 ∶ 1，醇浓度为 15%，提取 90 min
(30 min × 3);剪刀股总酚酸平均提取率为 4. 85%，ＲSD为 1. 988%;剪刀股中没食子酸、原儿茶酸和绿原酸分别
在 0. 60 ～ 9. 60、0. 90 ～ 14. 40、1. 00 ～ 16. 00 mg /L，与峰面积呈良好线性关系，平均回收率分别为 97. 27%、
98. 15%、97. 17%(n = 9);与模型组相比，阳性对照组和剪刀股总酚酸(高、中剂量)组心肌缺血小鼠血清中
LDH、CK-MB活性显著降低，心肌中 SOD的活性升高，心肌 MDA的含量降低(P ＜ 0. 05);Nagar-Olsen 染色显示，
高、中剂量的剪刀股总酚酸组及阳性对照组小鼠心肌缺血损伤红染面积明显减少。结论:剪刀股中总酚酸含量
较高，剪刀股总酚酸对心肌缺血小鼠的心肌有一定保护作用。
［关键词］心肌缺血;异丙肾上腺素;小鼠;剪刀股;总酚酸
［中图分类号］Ｒ285． 5 ［文献标识码］A ［文章编号］1000-2707(2016)11-1301-06
DOI:10． 19367 / j． cnki． 1000-2707． 2016． 11． 014
Optimization of Extraction of Total Phenolic Acid from Ixeris Debilis
A． Gray and Its Protective Effect on Myocardial Ischemia in Mice
WANG Wei1，XU Lijuan2
(1． The 3th Hospital of Zhangjiakou，Zhangjiakou 075000，Hebei，China;2． The 4th Hospital
of Zhangjiakou，Zhangjiakou 075000，Hebei，China)
［Abstract］Objective:To optimize the extraction of total phenolic acid from Ixeris debilis A． Gray and
to explore its protective effect on myocardial ischemia induced by isoproterenol in mice． Method:The
total phenolic acid extraction conditions from Ixeris debilis A． Gray were optimized by orthogonal test，
and HPLC method was adopted for the determination of gallic acid，protocatechuic acid，chlorogenic
acid content． 60 Kunming mice were divided into 6 groups:normal control group，model control
group，positive control group ，low dose group，middle dose group and high dose groups． A mouse
model of myocardial ischemia was prepared by the method of isoproterenol． The effect of total phenolic
acid in Ixeris debilis A． gray on myocardial ischemia model was studied by measuring the activities of
serum lactate dehydrogenase(LDH)，serum creatine kinase MB(CK-MB) ，the activities of the super-
oxide dismutase(SOD)and the content of malondialdehyde(MDA)in myocardium． The degree of my-
ocardial ischemic injury in mice was observed by Nagar-Olsen staining． Ｒesult:The best condition for
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第 41 卷 第 11 期
2016 年 11 月
贵 州 医 科 大 学 学 报
JOUＲNAL OF GUIZHOU MEDICAL UNIVEＲSITY
Vol． 41 No． 11
2016． 11
* * 通信作者 E-mail:xulijuansyy@ 163． com
网络出版时间:2016 － 11 － 15 网络出版地址:http:/ /www． cnki． net /kcms /detail /52． 1164． Ｒ． 20161115． 1757． 023． html
extracting the total phenolicacid from Ixeris debilis A． Gray was heating the Ixeris debilis A． Gray in 10
times(Volume /quality)alcohol(15%)at 70℃ for 90 (30 × 3)minutes． The average extraction yield
of the total phenolic acid in Ixeris debilis A． Gray was 4． 85% (ＲSD =1． 988%)． The contents of gal-
lic acid，protocatechuic acid and chlorogenic acid in Ixeris Debilis A． Gray showed good linear relation-
ships with the peak area in the ranges of 0． 60 ～ 9． 60，0． 90 ～ 14． 40 and 1． 00 ～ 16． 00 μg /mL，re-
spectively，and the average recoveries (n = 9)were 97． 27%，98． 15%，and 97． 17%，respectively．
Compared with the model group，the activities of LDH，CK-MB in serum and the content of myocardial
MDA of mice in the positive control group and the total phenolic acid groups(high，middle dose)were
decreased and the activities of myocardial SOD were increased． The results of Nagar-Olsen staining
showed that the area of cardiac muscles injured by ischemia in the positive control group and the total
phenolic acid groups(high，middle dose)were diminished significantly． Conclusion:The content of
total phenolic acid in Ixeris debilis A． Gray is at a relatively high level，which has a protective effect on
the myocardium of mice with myocardial ischemia．
［Key words］myocardial ischemic;isoproterenol;mice;Ixeris debilis A． Gray;total phenolic acid
剪刀股(Ixeris debilis A． Gray)是菊科苦荬菜属
植物剪刀股全草，可全草入药，鲜用或晒干，具有清
热凉血，利尿消肿的功效，内用于肺热咳嗽、喉痛、
口腔溃疡、急性结膜炎、阑尾炎、水肿和小便不利，
外用治乳腺炎、疮疖肿毒和皮肤瘙痒［1］。蒲明秋
等［2］报道剪刀股提取物可对抗烟碱引起的致癌作
用，马金萍等［3］报道其醇提物可显著提高脑缺血
再灌注损伤后小鼠心肌组织中超氧化物歧化酶
(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性。
对剪刀股活性成分的研究仅见剪刀股总黄酮的提
取及含量测定［4］，对剪刀股总酚酸提取工艺的研
究尚未见报道。本研究采用超声辅助法提取剪刀
股总酚酸，并采用异丙肾上腺素复制心肌缺血模型
小鼠，观察剪刀股总酚酸对心肌缺血模型小鼠血清
中肌酸激酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)及心肌
组织中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)，
为剪刀股的开发利用提供依据。
1 材料与方法
1． 1 仪器
UV2800 双光束紫外可见分光光度计(上海恒
平科学仪器有限公司)，KQ-500B 型超声波清洗器
(昆山市超声仪器有限公司)，FA1204B 电子分析
天平(上海精科天美贸易有限公司)，H-20Ｒ 高速
冷冻离心机(北京安必升科技发展有限公司)
1． 2 试剂与药品
剪刀股采自河北省张家口市赤城县，由河北北
方学院赵恒诚教授鉴定为正品。咖啡酸标准品购
于中国食品药品检定研究院(批号 110885 －
200102)，复方丹参片(芜湖张恒春药业有限公司，
批号 14081115)，盐酸异丙肾上腺素注射液(西南
药业股份有限公司，批号 20140812)，LDH、CK-
MB、SOD及 MDA测定试剂盒均由南京建成生物工
程研究所提供。其他试剂均为国产分析纯，实验用
水为三重蒸馏水。
1． 3 实验动物
健康的成年昆明种小鼠(雌雄各半)，体质量
22 ～ 30 g，购于河北北方学院实验动物中心，分笼
饲养，室温 18 ～ 25 ℃，自由摄食、饮水。
1． 4 剪刀股总酚酸的提取
1． 4． 1 咖啡酸标准曲线绘制 称取 60 ℃干燥至
恒重的咖啡酸对照品 1. 45 mg于 10 mL容量瓶，乙
醇溶解、定容，即得咖啡酸对照品溶液(0. 145 g /
L)。分别移取 0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5 mL于 25 mL
容量瓶中，加乙醇至 5 mL，依照文献方法显色，用
0. 1 mol /L盐酸溶液定容，避光放置 20 min。以相
应试剂为空白，于 736 nm 波长处测定吸光度［5］。
1. 4. 2 正交试验设计 在单因素试验的基础上，
选取提取温度、液料比、乙醇浓度、提取时间 4 个因
素，并各设置 3 个水平，以总酚酸提取率为测定指
标，采用 L9(3
4)正交试验设计，进行超声(40 kHz)
辅助提取，优化总酚酸提取工艺。试验因素和水平
见表 1。
1. 4. 3 稳定性试验 精密吸取相同供试品溶液 5
份，每份 1 mL，分别于室温放置 0、2、4、6、8 和 10 h
后，依“1. 4. 1”项下方法测定吸光度。
1. 4. 4 重现性试验 同一批样品 5 份，每份 1 g，
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贵 州 医 科 大 学 学 报 41 卷
精密称定，加 10 倍量浓度为 15%的乙醇，于 70 ℃
超声辅助提取 90 min(每次 30 min，共 3 次)，滤过
并合并滤液，加热除去有机溶剂，加水定容至
25 mL。精密吸取 0. 2 mL，依“1. 4. 1”项下方法测
定吸光度。
表 1 正交试验影响因素与水平
Tab． 1 Factors and levels of the orthogonal design
因素
水平
1 2 3
提取温度(℃ ) 60 70 80
液料比(mL/g) 10∶ 1 20∶ 1 30∶ 1
乙醇浓度(%) 15 25 35
提取时间(min) 90(30 × 3) 120(40 × 3) 150(50 × 3)
1. 4. 5 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液，
按“1. 4. 1”项下方法，连续 5 次测定吸光度。
1. 4. 6 加样回收试验 取重现性试验所用的同批
样品(已知含量 6. 14%)5 份，每份 1 g，精密称定，
加入适量的咖啡酸对照品，按供试溶液制备方法制
备溶液，依“1. 4. 1”项下方法测定吸光度。
1. 4. 7 含量测定 准确称取剪刀股药材 3 份，各
1. 0 g，按照选定的最优条件进行超声辅助提取，滤
过并合并滤液，加热除去有机溶剂，加水定容至
25 mL。取 2 mL于 25 mL容量瓶中，加水定容后，
按照“1. 4. 1”项下方法计算总酚酸浓度，并计算提
取率。
1. 5 剪刀股中没食子酸、原儿茶酸、绿原酸含量
1. 5. 1 溶液制备 精密称取没食子酸、原儿茶酸
和绿原酸对照品适量，分别加 10%甲醇配成各单
一对照品储备溶液。精密吸取各单一对照品储备
液适量于量瓶中，加 10%甲醇定容，得没食子酸、
原儿茶酸和绿原酸混合对照品溶液，浓度分别为
9. 60、14. 40、16. 00 mg /L。精密称定剪刀股药材粉
末 1. 000 g，按照“1. 4. 7 含量测定”项方法提取，滤
过，合并滤液，定容至 100. 00 mL，摇匀，0. 45 μm
微孔滤膜滤过，取续滤液，即得剪刀股总酚酸供试
品溶液。
1. 5. 2 色谱条件 色谱柱为 Thermo ODS-2 Hyper-
sil(250 mm × 4. 6 mm，5 μm)，检测波长 286 nm，流
速 1 mL /min，柱温 30 ℃，进样量 10 μL;流动相为
乙腈 －水(0. 1%乙酸水溶液)，梯度洗脱条件:0 ～
9 min，5%乙腈;9 ～ 16 min，5% ～ 19%乙腈;16 ～
24 min，25% 乙腈;24 ～ 30 min，40% 乙腈，维持
3 min。
1. 5. 3 专属性试验 在“1. 5. 2”项色谱条件下，
取没食子酸、原儿茶酸和绿原酸混合对照品溶液、
剪刀股总酚酸供试品溶液及没食子酸、原儿茶酸和
绿原酸阴性对照溶液 10 μL进样。
1. 5. 4 线性范围考察 将上述混合对照品溶液适
当稀释配制混合标准系列溶液，其中含没食子酸系
列质 量 浓 度 分 别 为 0. 60、1. 20、2. 40、4. 80、
9. 60 mg /L;原儿茶酸系列质量浓度分别为 0. 90、
1. 80、3. 60、7. 20、14. 40 mg /L;绿原酸系列质量浓
度分别为 1. 00、2. 00、4. 00、8. 00、16. 00 mg /L。在
上述色谱条件下分别进样进行测定。
1. 5. 5 精密度考察 精密吸取剪刀股总酚酸供试
品溶液 10 μL，按上述色谱条件连续进样 5 次，测
定没食子酸、原儿茶酸和绿原酸峰的面积。
1. 5. 6 稳定性考察 精密吸取供试品溶液在室温
下放置，分别在 0、2、4、8、10 h 进样 10 μL，测定没
食子酸、原儿茶酸和绿原酸峰面积。
1. 5. 7 重复性考察 精密称取样品粉末 5 份，每
份 1. 000 g，按“1. 5. 1”项下方法平行制备成供试
品溶液，分别进样 10 μL进行测定。
1. 5. 8 加样回收率考察 取已知没食子酸、原儿
茶酸和绿原酸含量的剪刀股样品 9 份，精密称定，
精密加入没食子酸、原儿茶酸和绿原酸适量，按
“1. 5. 1”项下方法操作，制备供试溶液，在上述色
谱条件下分别进样进行测定，计算回收率。
1. 5. 9 样品测定 取剪刀股供试品溶液，在上述
色谱条件下进样 10 μL，记录色谱图，代入回归方
程计算剪刀股供试品溶液中没食子酸、原儿茶酸和
绿原酸的含量。
1. 6 剪刀股总酚酸对心肌缺血小鼠血清 CK-MB、
LDH或心肌组织中 MDA、SOD的影响
1. 6. 1 剪刀股总酚酸供试液的制备 采用正交设
计确定的最佳提取条件，提取剪刀股总酚酸。取剪
刀股总酚酸适量，加水溶解，配制为浓度为 1 g /L
的溶液，即为剪刀股总酚酸供试液。复方丹参片供
试液(阳性对照)的制备 取复方丹参片若干片，加
蒸馏水适量，室温超声助溶，制备为 7 g /L(相当于
饮片)的混悬液。
1. 6. 2 分组与给药 昆明种小鼠 60 只，随机分为
正常对照组、模型对照组、阳性对照组、剪刀股总酚
酸高、中、低剂量给药组共 6 组，每组 10 只;3 个剪
刀股总酚酸组给药剂量分别为 20、10 以及 5 mg /
(kg·d)，阳性对照组腹腔注射复方丹参片混悬液
7 mg /(kg·d)，正常对照组和模型对照组给予生
理盐水 10 mL /(kg·d)腹腔注射，每日下午 4 时注
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11 期 王 威等 剪刀股总酚酸提取条件的优化及对小鼠缺血心肌的保护作用
射，每日 1 次，连续注射 11 d;注射第 7 天开始，模
型对照组、阳性对照组、剪刀股总酚酸高、中、低剂
量给药组小鼠腹腔注射异丙肾上腺素 0. 02 g /(kg
·d)，每日上午 10 时给药，每日 1 次，制备心肌缺
血模型［6］。
1. 6. 3 观察指标 取材参考文献［7 － 8］。末次
给药 15 min后，断头处死小鼠并取血，迅速取心脏
组织。每组 8 只小鼠心脏用生理盐水洗净，滤纸吸
干，按试剂盒说明，分别测定心肌中 SOD 活性和
MDA的含量。每组 2 只小鼠心脏置于 4%多聚甲
醛内固定，制心肌石蜡切片，Nagar-Olsen 染色观察
小鼠心肌缺血损伤程度。血液置于肝素化的塑料
离心管中，3 500 r /min 离心 15 min，分离血清，分
别测定血清中 LDH、CK-MB活性。
1. 7 统计学分析
实验数据采用 SPSS 16. 0 统计软件进行处理，
结果采用均数 ±标准差(x ± s)表示。组间比较采
用单因素方差分析(ANOVA)，以 P ＜ 0. 05 或 P ＜
0. 01 为差异具有统计学意义。
2 结果
2. 1 剪刀股总酚酸的提取
2. 1. 1 咖啡酸标准曲线绘制 以咖啡酸浓度为横
坐标、吸光度为纵坐标，得回归方程 A = 0. 689 6
C + 0. 045 1(r = 0. 999 6)。表明咖啡酸标准溶液
在 0. 58 ～ 2. 9 mg /L范围内与吸光度值呈良好的线
性关系。
2. 1. 2 总酚酸提取率及其影响因素 由表 2、表 3
可知，影响超声辅助提取剪刀股总酚酸得率的因素
的主次顺序为提取温度 ＞乙醇浓度 ＞液料比 ＞提
取时间，其中提取温度和乙醇浓度对提取率的影响
有显著性。最佳工艺条件为 A2B1C1D1，即提取温
度为 70 ℃，液料比为 10 ∶ 1，乙醇浓度 15%，提取
90 min。
2. 1. 3 稳定性 稳定性试验结果吸光度 ＲSD =
3. 23%(n = 5)，表明供试品溶液在 10 h内稳定。
2. 1. 4 重现性 重现性试验结果吸光度 ＲSD =
2. 64%(n = 5)，表明方法重现性好。
2. 1. 5 精密度 精密度试验结果吸光度 ＲSD =
0. 15%(n = 5)，表明仪器精密度良好。
2. 1. 6 加样回收率 平均加样回收率为 97. 5%，
ＲSD为 3. 97%，表明方法具有良好的加样回收率。
2. 1. 7 剪刀股总酚酸含量 测定结果见表 4。
表 2 总酚酸提取率(正交试验)
Tab． 2 Ｒesults of total phenolic acid extraction
rate (orthogonal design)
试验号 A B C D 提取率(%)
1 1 1 1 1 3. 33
2 1 2 2 2 2. 12
3 1 3 3 3 3. 27
4 2 1 2 3 4. 02
5 2 2 3 1 4. 74
6 2 3 1 2 4. 82
7 3 1 3 2 3. 04
8 3 2 1 3 2. 99
9 3 3 2 1 3. 23
K1 2. 907 3. 463 3. 713 3. 433
K2 4. 527 3. 283 2. 790 3. 327
K3 2. 753 3. 440 3. 683 3. 427
Ｒa 1. 774 0. 180 0. 923 0. 106
注:A为提取温度，B为液料比，C为乙醇浓度，D为提取时间
表 3 各因素对总酚酸提取率的影响
Tab． 3 The effect of various factors on the
extraction rate of total phenolic acid
因素 偏差平方和 自由度 F比 F临界值
提取温度 5. 793 2 275. 857 19. 000
料液比 0. 057 2 2. 714 19. 000
乙醇浓度 1. 651 2 78. 619 19. 000
提取时间 0. 021 2 1. 000 19. 000
误差 0. 02 2
表 4 剪刀股总酚酸含量
Tab． 4 Determination of content of total phenolic
acid from Ixeris debilis A． Gray
试验号 总酚酸提取率(%)平均提取率(%) ＲSD(%)
1 4． 74
2 4． 89 4． 85 1． 988
3 4． 92
2. 2 剪刀股中没食子酸、原儿茶酸、绿原酸的含量
2. 2. 1 专属性试验 在“1. 5. 2”项色谱条件下，
没食子酸、原儿茶酸和绿原酸混合对照品溶液及剪
刀股总酚酸供试品溶液中 3 种酚酸成分达到基线
分离。没食子酸、原儿茶酸和绿原酸混合对照品、
剪刀股总酚酸供试品及没食子酸、原儿茶酸和绿原
酸阴性高效液相色谱法(HPLC)色谱图见图 1。
2. 2. 2 线性范围 没食子酸、原儿茶酸和绿原酸
在 0. 60 ～ 9. 60、0. 90 ～ 14. 40、1. 00 ～ 16. 00 mg /L
浓度范围内，线性关系良好，回归方程分别为:没食
子酸 Y = 40. 21 X + 3. 121，r = 0. 999 6;原儿茶酸 Y
=30. 09 X + 12. 663，r = 0. 999 8;绿原酸 Y = 22. 16
X + 8. 344，r = 0. 999 2。
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贵 州 医 科 大 学 学 报 41 卷
注:1 为没食子酸，2 为原儿茶酸，3 为绿原酸;A为混合对照品溶液，B为剪刀股总酚酸供试品溶液，
C ～ E为阴性对照品 (C缺没食子酸，D缺原儿茶酸，E缺绿原酸)
图 1 没食子酸、原儿茶酸和绿原酸混合对照品以及剪刀股总酚酸供试品的 HPLC结果
Fig． 1 The HPLC results of mixed reference substance solution
2. 2. 3 精密度 没食子酸、原儿茶酸和绿原酸峰
面积的相对标准偏差(ＲSD)分别为 2. 3%、2. 5%、
2. 8%，结果表明精密度良好。
2. 2. 4 稳定性 没食子酸、原儿茶酸和绿原酸峰
面积的 ＲSD 分别为 1. 9%、2. 1%、2. 3%，表明供
试品溶液中上述成分室温放置 10 h 内稳定性良
好。
2. 2. 5 重复性 没食子酸、原儿茶酸和绿原酸含
量 ＲSD分别为 2. 1%、2. 4%、2. 5%，结果表明重复
性良好。
2. 2. 6 加样回收率 加样回收试验结果没食子
酸、原儿茶酸和绿原酸平均回收率(n = 9)分别为
96. 01%、97. 82%、95. 33%，ＲSD 分别为 2. 1%、
2. 5%、2. 4%。
2. 2. 7 样品含量 剪刀股供试品溶液中没食子
酸、原儿茶酸和绿原酸的含量分别为 1. 140 ±
0. 015、0. 922 ± 0. 012 和 0. 467 ± 0. 005 mg /g。
2. 3 剪刀股总酚酸对心肌缺血小鼠血清 CK-MB、
LDH或心肌组织 MDA、SOD的影响
与正常对照组相比，模型组小鼠血清中 CK-
MB及 LDH水平显著升高，心肌中 MDA 含量显著
升高，SOD活性明显降低，差异具有统计学意义(P
＜0. 01)。与模型对照组相比，阳性对照组及剪刀
股总酚酸高、中剂量组血清中 CK-MB及 LDH 水平
降低，心肌中 MDA含量降低，SOD 活性升高，差异
具有统计学意义(P ＜ 0. 05)，其中剪刀股总酚酸高
剂量组及阳性对照组 MDA 含量降低明显(P ＜
0. 01)。见表 5。
表 5 剪刀股总酚酸对小鼠血清中 CK-MB、LDH及心肌中 MDA 和 SOD的影响(x ± s，n = 8)
Tab． 5 Effects of total phenolic acids on serum CK-MB，LDH and myocardial MDA，SOD
分组
血清
CK-MB(U/L) LDH(U/L)
心肌
SOD(kU /g) MDA(mol /g)
正常对照组 200 ± 66 352 ± 64 7. 52 ± 0. 37 1. 34 ± 0. 22
模型对照组 1 100 ± 101(3) 1 180 ± 76(3) 4. 51 ± 0. 14(3) 5. 95 ± 0. 27(3)
阳性对照组 590 ± 89(1) 890 ± 56(1) 7. 52 ± 0. 42(1) 2. 76 ± 0. 34(2)
剪刀股总酚酸
高剂量组 550 ± 76(1) 593 ± 65(1) 6. 10 ± 0. 44(1) 2. 89 ± 0. 32(2)
中剂量组 600 ± 94(1) 710 ± 71(1) 6. 00 ± 0. 35(1) 3. 33 ± 0. 36(1)
低剂量组 950 ± 79(1) 900 ± 82(1) 5. 92 ± 0. 33(1) 4. 10 ± 0. 21(1)
与模型对照组比较，(1)P ＜ 0. 05，(2)P ＜ 0. 01;(3)与正常对照组比较，P ＜ 0. 05
2. 4 小鼠心肌缺血损伤程度
光学显微镜下观察心肌石蜡切片可见，正常对
照组心肌组织呈黄染，模型组缺血心肌呈红染。与
模型组比较，剪刀股总酚酸高、中剂量组及阳性对
照组心肌红染面积明显减少，黄染面积增多，剪刀
股总酚酸低剂量组心肌组织大片红染，仅见小部分
组织黄染。见图 2。
3 讨论
CK-MB、LDH大量存在于心肌细胞的胞浆或
线粒体中，是心肌酶学中的标志酶之一;脂质过氧
化作用是众多心脑血管疾病的发病机制之一，当体
内自由基过多时，能对细胞及组织产生伤害，心肌
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11 期 王 威等 剪刀股总酚酸提取条件的优化及对小鼠缺血心肌的保护作用
注:A为正常对照，B为模型对照，C为阳性对照组，D为总酚酸低剂量组，E为总酚酸中剂量组，F为总酚酸高剂量组
图 2 各组小鼠心肌组织(Nagar-Olsen，)
Fig． 2 Nagar-Olsen staining of the mice cardiac muscles
细胞破裂或细胞膜通透性增加，使 CK-MB，LDH等
酶渗出，从而导致心肌缺血小鼠血清中酶活性升
高，血清酶的升高，可作为心肌受损的酶学标志
物［9］。在急性心肌缺血时，除了组织学上发生心
肌坏死的病理学变化外，也伴随着心肌酶的漏出等
生理生化方面的变化。
酚酸是一类含有酚环结构的有机酸，具有较强
的生物抗氧化作用。因此，酚类物质可能是中药对
心肌保护作用的物质基础之一［10 － 11］。酚酸的化学
性质活泼，在提取过程中可能氧化分解，因此，在剪
刀股总酚酸的提取过程中，提取温度过高，提取时
间过长，均能够导致酚酸类物质的降解，从而减低
酚酸类成分的提取率。本实验结果显示，提取温度
和乙酸浓度对总酚酸提取率的影响较大，根据优化
的工艺条件总酚酸得率较高。本研究结果还显示，
剪刀股中酚酸含量较高，其酚酸能显著降低异丙肾
上腺素致心肌缺血模型小鼠血清中 LDH、CK-MB
活性，提高心肌 SOD 的活性，并降低心肌 MAD 的
含量，可显著减少缺血心肌的 Nagar-Olsen 红染面
积。表明剪刀股总酚酸对异丙肾上腺素致心肌缺
血小鼠的心肌具有明显的保护作用。
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(2016－07－03 收稿，2016－10－21 修回)
中文编辑:文箐颍;英文编辑:刘 华
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贵 州 医 科 大 学 学 报 41 卷